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雷公藤红素阻断LP-1人多发性骨髓瘤细胞周期及抑制血管生成的实验研究 被引量:8
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作者 倪海雯 孔祥图 孙雪梅 《安徽医药》 CAS 2012年第12期1754-1756,共3页
目的研究雷公藤红素对于多发性骨髓瘤细胞株LP-1细胞周期及血管生成的影响。方法采用台盼蓝染色法考察雷公藤红素对细胞生长曲线的影响;划痕法检测雷公藤红素对血管内皮细胞体外血管生成能力的影响;采用碘化吡啶(PI)染色法检测雷公藤红... 目的研究雷公藤红素对于多发性骨髓瘤细胞株LP-1细胞周期及血管生成的影响。方法采用台盼蓝染色法考察雷公藤红素对细胞生长曲线的影响;划痕法检测雷公藤红素对血管内皮细胞体外血管生成能力的影响;采用碘化吡啶(PI)染色法检测雷公藤红素对LP-1多发性骨髓瘤细胞周期的调控作用。结果雷公藤红素作用浓度为2μM时即可引起细胞生长停滞,雷公藤红素对人多发性骨髓瘤LP-1细胞的生长曲线具有明显的抑制作用,这种效应具有明显的剂量-效应关系。雷公藤红素能剂量依赖性地抑制人血管内皮细胞对划痕损伤的修复能力,雷公藤红素1μM作用24 h即可引起划痕修复停滞,并引起部分血管内皮细胞死亡,在作用48 h后对人脐静脉内皮细胞表现出明显的杀伤活性。雷公藤红素以不同浓度作用24 h后随着雷公藤红素浓度增加,人多发性骨髓瘤细胞进入G1期比例明显增多,S期细胞明显减少。结论雷公藤红素能抑制骨髓瘤细胞株的生长,并抑制人脐静脉血管内皮细胞体外血管生成能力;雷公藤红素可将人多发性骨髓瘤LP-1细胞周期阻断于G1期,从而抑制其后续的DNA合成及有丝分裂。 展开更多
关键词 雷公藤红素 多发性骨髓瘤 细胞周期 血管生成
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Triptolide-induced Apoptosis by Inactivating Nuclear Factor-kappa B Apoptotic Pathway in Multiple Myeloma in vitro 被引量:5
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作者 曾蓉 曾令兰 +4 位作者 陈燕 赵菲 李睿 文璐 张纯 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2011年第4期446-451,共6页
The effect of triptolide on proliferation and apoptosis of human multiple myeloma RPMI-8226 cells in vitro,as well as the roles of nuclear factor-kappa B(NF-κB) and IκBα was investigated.The effect of tritptolide... The effect of triptolide on proliferation and apoptosis of human multiple myeloma RPMI-8226 cells in vitro,as well as the roles of nuclear factor-kappa B(NF-κB) and IκBα was investigated.The effect of tritptolide on the growth of RPMI-8226 cells was studied by MTT assay.Apoptosis was detected by Hoechest 33258 staining and Annexin V/PI double staining assay.The expression of NF-κB and IκBα was observed by Western blot and confocal microscopy.The results showed that triptolide inactivated NF-κB apoptotic pathway in human multiple myeloma RPMI-8226 cells.Triptolide at nM range induced proliferation inhibition in a dose-and time-dependent manner and apoptosis in a dose-dependent fashion in RPMI-8226 cells.Besides,we observed the inhibition of NF-κB /p65 in the nuclear fraction was correlated with the increase in the protein expression of IκBα in the cytosol.These results suggested that triptolide might exhibit its strong anti-tumor effects via inactivation of NF-κB/p65 and IκBα. 展开更多
关键词 TRIPTOLIDE human multiple myeloma APOPTOSIS NF-ΚB/P65 IΚBΑ
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M2型巨噬细胞来源外泌体调控HGF/c-Met通路参与多发性骨髓瘤细胞转移的作用研究
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作者 木克热木·艾克帕尔 维尼拉·吐尔洪 +1 位作者 巴哈古丽·玉素甫 艾克拜尔·阿布都热衣木 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第6期537-543,共7页
目的探究M2型巨噬细胞来源的外泌体对人多发性骨髓瘤细胞转移的影响及机制。方法在体外将THP-1细胞诱导分化成M0型和M2型巨噬细胞,实时荧光定量聚合酶反应(RT-qPCR)检测诱导后M2型巨噬细胞标志物血红蛋白清道夫受体(CD163)、白细胞介素-... 目的探究M2型巨噬细胞来源的外泌体对人多发性骨髓瘤细胞转移的影响及机制。方法在体外将THP-1细胞诱导分化成M0型和M2型巨噬细胞,实时荧光定量聚合酶反应(RT-qPCR)检测诱导后M2型巨噬细胞标志物血红蛋白清道夫受体(CD163)、白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸酶-1(Arg-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平,分离M2型巨噬细胞来源的外泌体;将RPMI-8226细胞分为对照组、M0-Exos组、M2-Exos组,Transwell小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目,蛋白质印迹检测细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)及转录因子Snail的表达水平,并检测肝细胞生长因子(HGF)/c-Met相关蛋白的表达水平;接着将RPMI-8226细胞分为对照组、M2-Exos组、SU11274组、SU11274+M2-Exos组,Transwell小室法检测细胞迁移数目与侵袭数目,蛋白质印迹检测细胞中N-cadherin、Vimentin、E-cadherin及Snail表达水平。结果与M0型巨噬细胞比较,M2型巨噬细胞中CD163、IL-10、Arg-1、TGF-β1的mRNA表达水平均显著上调(P<0.05);从M2型巨噬细胞中分离的颗粒物中有CD9、CD63、TSG101、ALIX蛋白表达,由此判定该颗粒物为外泌体。与对照组比较,M2-Exos组细胞迁移与侵袭数目均显著增加(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达显著增加(P<0.05),E-cadherin蛋白表达显著减少(P<0.05),HGF蛋白表达及p-c-Met/c-Met比值也显著增加(P<0.05)。与M2-Exos组比较,SU11274+M2-Exos组细胞迁移与侵袭数目显著减少(P<0.05),N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达显著减少(P<0.05),且E-cadherin蛋白表达显著增加(P<0.05)。结论M2型巨噬细胞来源的外泌体能够促进人多发性骨髓瘤细胞迁移、侵袭及EMT,加剧肿瘤细胞转移,该作用与调控HGF/c-Met通路有关。 展开更多
关键词 人多发性骨髓瘤 肿瘤相关巨噬细胞 外泌体 HGF/c-Met通路
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水仙提取物对人类多发性骨髓瘤细胞系ARH-77增殖和凋亡的作用 被引量:2
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作者 刘静 胡维新 何莉芳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1824-1827,共4页
目的研究水仙提取物对人类多发性骨髓瘤细胞系ARH-77的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测水仙提取物(1.25、2.5、5、10、20μg/mL)作用ARH-77细胞3d后细胞存活率的变化;采用荧光染色法观察水仙提取物(10μg/mL)作用3d对ARH-77细胞凋... 目的研究水仙提取物对人类多发性骨髓瘤细胞系ARH-77的增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法检测水仙提取物(1.25、2.5、5、10、20μg/mL)作用ARH-77细胞3d后细胞存活率的变化;采用荧光染色法观察水仙提取物(10μg/mL)作用3d对ARH-77细胞凋亡的影响;流式细胞仪分析细胞周期时相变化和检测细胞凋亡率;核仁组织区(NOR)相关嗜银蛋白(AgNOR)染色法检测细胞NOR的改变;透射电镜观察细胞亚微结构变化。结果水仙提取物能明显抑制ARH-77细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01),其IC50为4.8μg/mL;促进肿瘤细胞凋亡(P<0.05),阻滞细胞周期于G2/M期(P<0.01);降低AgNOR的数目(P<0.001)和促进AgNOR的融合(P<0.01);引起细胞亚微结构改变。结论水仙提取物能抑制ARH-77细胞增殖,诱导ARH-77细胞凋亡。 展开更多
关键词 水仙提取物 人类多发性骨髓瘤 细胞增殖 细胞凋亡
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雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的诱导作用及分子机制研究
5
作者 何晓其 《新中医》 CAS 2023年第20期1-5,共5页
目的:观察雷公藤红素诱导人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的效果,并分析诱导凋亡的分子机制。方法:取培养48 h后处于平台期的H929细胞,按照1.0×10^(9)/L细胞密度接种于6孔细胞培养板中,分为对照组、雷公藤红素组(0.5 mg/L、1.0 mg/L和5... 目的:观察雷公藤红素诱导人多发性骨髓瘤H929细胞凋亡的效果,并分析诱导凋亡的分子机制。方法:取培养48 h后处于平台期的H929细胞,按照1.0×10^(9)/L细胞密度接种于6孔细胞培养板中,分为对照组、雷公藤红素组(0.5 mg/L、1.0 mg/L和5.0 mg/L),各浓度雷公藤红素组分别加入对应浓度的雷公藤红素,对照组加入等体积二甲亚砜(DMSO)溶液。比较不同浓度雷公藤红素组H929细胞活力抑制率,比较各组H929细胞凋亡率及H929细胞培养物中P53、剪切型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)、剪切型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(cleaved PARP-1)、bax、bcl-2表达水平。结果:H929细胞活力抑制率随着雷公藤红素处理浓度升高而升高,不同浓度雷公藤红素组H929细胞活力抑制率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,不同浓度雷公藤红素组H929细胞凋亡率均较高(P<0.05)。H929细胞凋亡率随着雷公藤红素处理浓度增加而增加,不同浓度雷公藤红素组H929细胞凋亡率两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,不同浓度雷公藤红素组H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax表达水平均较高(P<0.05),bcl-2表达水平均较低(P<0.05)。H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax表达水平随着雷公藤红素处理浓度升高而升高,bcl-2表达水平随着雷公藤红素处理浓度升高而降低,不同浓度雷公藤红素组H929细胞培养物中P53、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1、bax、bcl-2表达水平两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:雷公藤红素对人多发性骨髓瘤H929细胞具有活力抑制和凋亡诱导作用,且有一定的剂量效应,这一作用可能与线粒体凋亡途径有关。 展开更多
关键词 人多发性骨髓瘤 H929细胞 雷公藤红素 细胞凋亡 分子机制
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多发性骨髓瘤细胞株ARH-77L1逆转录酶基因的克隆及体外表达研究
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作者 江元山 石奕武 +3 位作者 罗赛群 汤立军 田菁燕 胡维新 《生命科学研究》 CAS CSCD 2005年第2期118-123,共6页
通过菌落原位分子杂交,从多发性骨髓瘤细胞株ARH-77cDNA文库获得L1逆转录酶基因5'端序列.随后使用3'RACE技术,获得L1逆转录酶基因3'端序列及poly(A)尾.生物信息学分析表明:该L1逆转录酶DNA序列有一长552bp开放性阅读框,编码... 通过菌落原位分子杂交,从多发性骨髓瘤细胞株ARH-77cDNA文库获得L1逆转录酶基因5'端序列.随后使用3'RACE技术,获得L1逆转录酶基因3'端序列及poly(A)尾.生物信息学分析表明:该L1逆转录酶DNA序列有一长552bp开放性阅读框,编码184个氨基酸残基的多肽链,其相对分子质量约为21kDa.同时将编码L1逆转录酶保守区的开放性阅读框DNA片段与原核表达载体pQE30连接,得到重组原核表达质粒,利用大肠杆菌表达并获得L1逆转录酶融合蛋白. 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 ARH-77 L1逆转录酶 基因克隆 体外表达
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TIP30基因表达对人多发性骨髓瘤细胞生物学功能的影响
7
作者 吴必嘉 龚峻梅 +2 位作者 陈娟娟 黄斯勇 高飞 《肿瘤药学》 CAS 2017年第1期7-11,共5页
目的研究TIP30基因表达对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡等生物学功能的影响,以期为多发性骨髓瘤临床防治及药物研制提供新的靶点。方法人多发性骨髓瘤U266细胞中TIP30基因过表达采用腺病毒转染法,使用实时定量PCR和Western blottin... 目的研究TIP30基因表达对人多发性骨髓瘤U266细胞增殖、凋亡等生物学功能的影响,以期为多发性骨髓瘤临床防治及药物研制提供新的靶点。方法人多发性骨髓瘤U266细胞中TIP30基因过表达采用腺病毒转染法,使用实时定量PCR和Western blotting验证TIP30过表达的效果,分别采用MTT法、划痕试验检测细胞增殖、迁移情况,流式细胞术分析细胞凋亡,Western blotting分析p53、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 TIP30过表达腺病毒转染后,过表达组中U266细胞TIP30基因m RNA和蛋白表达水平均显著上升。与对照组比较,TIP30过表达后,细胞增殖、体外迁移能力均显著减弱(P<0.05);TIP30过表达后U266细胞凋亡率较对照组显著增大,TIP30过表达促进U266细胞凋亡与上调p53、Bax蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达水平相关。结论 TIP30基因过表达可抑制人多发性骨髓瘤U266细胞增殖活性与体外迁移能力,并促进多发性骨髓瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 人多发性骨髓瘤细胞 TIP30基因 细胞增殖 凋亡 迁移
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苯甲酰新乌头原碱对骨髓瘤细胞RPMI8226增殖及凋亡的影响 被引量:2
8
作者 马凤鸣 于天启 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期481-487,共7页
目的:探究苯甲酰新乌头原碱(BMA)对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响.方法:将对数期生长RPMI8226细胞随机分为空白对照组、BMA(0. 1、0. 5、1、10、100μmo L)组,24 h后用CCK8测定各组光密度(A),根据A值计算出半数抑制质... 目的:探究苯甲酰新乌头原碱(BMA)对骨髓瘤细胞RPMI8226(RPMI8226)增殖及凋亡的影响.方法:将对数期生长RPMI8226细胞随机分为空白对照组、BMA(0. 1、0. 5、1、10、100μmo L)组,24 h后用CCK8测定各组光密度(A),根据A值计算出半数抑制质量浓度(IC50);根据所测IC50将对数期生长RPMI8226细胞分为空白对照组、阴性对照组、BMA(4、6、8μmo L)各组,作用12~48 h,用CCK8测定不同作用时间下各组RPMI8226细胞A值,计算出各组增殖抑制率;根据BMA对RMPI8226增殖抑制率的影响规律再设空白对照组、BMA(4、8μmo L)组,作用24、48 h,用Annexin V/PI双染色流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果:作用24 h后,各组BMA换算成质量浓度,在13~13 000 ng/m L(即1~10μmo L)质量浓度,各组A值随药物质量浓度的增加而减少,P <0. 05,其IC50质量浓度为1 040 ng/m L;作用12~48 h,各组细胞增殖抑制率随加入的BMA的增加、作用时间的增加而增加,各组P <0. 05;作用24、48 h后各组细胞凋亡率随加入BMA的增加、作用的增加而增大,各组P <0. 05.结论:BMA能抑制RPMI8226增殖并使其凋亡. 展开更多
关键词 苯甲酰新乌头原碱 骨髓瘤细胞8226 增殖 凋亡
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可溶性syndecan-1对人多发性骨髓瘤细胞体外的生物学作用 被引量:1
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作者 李新燕 陆肇阳 +1 位作者 Klein B 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期633-637,共5页
目的 :研究可溶性syndecan 1(CD138)分子对人多发性骨髓瘤 (MM)细胞生长行为的影响及其机制。方法 :用亲和层析法分离可溶性syndecan 1;借助3H TdR掺入、间接免疫荧光、ANNEXIN V及PI标记分析MM细胞增殖、凋亡及周期变化。结果 :①从XG ... 目的 :研究可溶性syndecan 1(CD138)分子对人多发性骨髓瘤 (MM)细胞生长行为的影响及其机制。方法 :用亲和层析法分离可溶性syndecan 1;借助3H TdR掺入、间接免疫荧光、ANNEXIN V及PI标记分析MM细胞增殖、凋亡及周期变化。结果 :①从XG 2细胞培养上清中分离纯化得到分子量为 6 0kD左右的可溶性syndecan 1分子 ;②可溶性syndecan 1分子在体外能抑制XG 1增殖 ,阻滞细胞增殖停留在G2 /M期 ,并介导其凋亡 ;FGF、5 %小牛血清、肝素酶III可逆转一定浓度可溶性syn decan 1的作用 ,HGF、VEGF和IGF 1可部分逆转可溶性syndecan 1分子对细胞的生长抑制作用 ;③IL 6及激发型抗IL 6R130(gp130 )单抗对可溶性syndecan 1作用无影响。结论 :可溶性syndecan 1分子通过不同于IL 6及其受体的信号传导途径 。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 可溶性syndecan-1 细胞凋亡
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蛇床子素诱导人多发性骨髓瘤RPMI-8226细胞凋亡及其机制研究 被引量:1
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作者 章明杰 张岩 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第23期3710-3712,共3页
目的:研究蛇床子素(Osthole)的抗骨髓瘤作用,并探讨其抗骨髓瘤的作用机制。方法:处于对数增殖期人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226随机分为空白对照组及10、20、40、80、120、160和200μmol/L Osthole组,用MTT法检测细胞增殖率,采用Western b... 目的:研究蛇床子素(Osthole)的抗骨髓瘤作用,并探讨其抗骨髓瘤的作用机制。方法:处于对数增殖期人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226随机分为空白对照组及10、20、40、80、120、160和200μmol/L Osthole组,用MTT法检测细胞增殖率,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白表达量。结果:细胞培养24、48和72h后,不同浓度Osthole组细胞增殖数显著低于空白对照组,且作用呈剂量依赖性。不同浓度Osthole组细胞凋亡相关蛋白PARP被切割明显高于对照组,p53蛋白的表达量明显高于对照组,抗凋亡蛋白Mcl-1表达明显下降。结论:Osthole能明显抑制人多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞增殖,分子机制可能是诱导其细胞凋亡,其诱导凋亡的机制有待于进一步深入研究。 展开更多
关键词 人多发性骨髓瘤细胞 RPMI-8226 凋亡 蛇床子素
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红细胞生成素治疗多发性骨髓瘤贫血的疗效观察 被引量:4
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作者 上海市血液学会多发性骨髓瘤协作组 梁晓华 林果为 《临床血液学杂志》 2000年第5期210-211,共2页
目的 :评价重组人红细胞生成素 (Epo)治疗多发性骨髓瘤 (MM)贫血的效果。方法 :采用配对研究方法观察 Epo治疗 MM贫血患者 9例的治疗效果 ,使用剂量 Epo为 2 5~ 15 0 u/kg,每周 3次皮下注射或静脉推注 ,连续治疗 8周。结果 :Epo治疗组... 目的 :评价重组人红细胞生成素 (Epo)治疗多发性骨髓瘤 (MM)贫血的效果。方法 :采用配对研究方法观察 Epo治疗 MM贫血患者 9例的治疗效果 ,使用剂量 Epo为 2 5~ 15 0 u/kg,每周 3次皮下注射或静脉推注 ,连续治疗 8周。结果 :Epo治疗组血红蛋白上升明显高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :Epo治疗 MM贫血有效。 展开更多
关键词 红细胞生成素 多发性骨髓瘤 贫血 治疗
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重组人促红细胞生成素治疗多发性骨髓瘤小鼠的疗效与机制的研究 被引量:2
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作者 周美玉 刘瑜 +1 位作者 孟文彤 徐才刚 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期797-802,共6页
目的探讨重组人促红细胞生成素(r HuEPO)治疗多发性骨髓瘤小鼠的疗效及其可能作用机制。方法 420只BALB/c小鼠,荷瘤组410只和正常对照组10只。荷瘤组小鼠均皮下接种1×104个MPC-11骨髓瘤细胞,荷瘤后第5 d随机抽取50只作为荷瘤对照组... 目的探讨重组人促红细胞生成素(r HuEPO)治疗多发性骨髓瘤小鼠的疗效及其可能作用机制。方法 420只BALB/c小鼠,荷瘤组410只和正常对照组10只。荷瘤组小鼠均皮下接种1×104个MPC-11骨髓瘤细胞,荷瘤后第5 d随机抽取50只作为荷瘤对照组,余小鼠随机分为3个不同剂量的r HuEPO(10 I U、20 I U、30 I U)治疗组,120只/组。r HuEPO皮下注射,每天1次,连续注射2周后减为1周3次。荷瘤对照组小鼠接受生理盐水皮下注射。荷瘤后动态监测血清M蛋白的出现时间,检测小鼠血红蛋白(Hb)水平,并取皮下结节进行病理检查。测定血清IL-6、TNF-α、TNF-γ、IgG、κ轻链浓度,全血CD4+、CD8+细胞计数(流式细胞分析方法),肿瘤组织的微血管密度(MVD)以及肿瘤细胞凋亡(TUNEL法)。结果荷瘤后22 d检测到荷瘤小鼠血清中出现M蛋白;r HuEPO治疗后,各治疗组的Hb水平及生存时间均高于荷瘤对照组(P<0.05),各治疗组间差异无统计学意义(P>0.05);r HuEPO应用2月后,各治疗组血清IL-6、IgG及κ轻链的浓度均低于荷瘤对照组(P<0.05);荷瘤小鼠的总体生存时间与Hb水平呈正相关(P=0.000)、与血清IL-6水平呈负相关(P=0.009)。结论 r HuEPO明显提高荷瘤小鼠的Hb水平并延长其生存时间,同时降低其血清IL-6水平和M蛋白水平。 展开更多
关键词 重组人促红细胞生成素 多发性骨髓瘤 MPC-11骨髓瘤细胞株 BALB/C小鼠 动物模型
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