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苯并(a)芘代谢物反式二羟环氧苯并芘诱发人支气管上皮细胞恶性转化 被引量:62
1
作者 蒋义国 陈家堃 陈学敏 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期129-131,共3页
以不同浓度的苯并 (a)芘代谢物反式二羟环氧苯并芘 (BPDE)多次处理人支气管上皮细胞 16HBE ,并观察转化细胞的恶性特征。发现BPDE可诱导 16HBE细胞恶性转化 ,形成转化灶。转化灶细胞失去接触抑制 ,排列紊乱 ,无方向性 ,交叉重叠生长。... 以不同浓度的苯并 (a)芘代谢物反式二羟环氧苯并芘 (BPDE)多次处理人支气管上皮细胞 16HBE ,并观察转化细胞的恶性特征。发现BPDE可诱导 16HBE细胞恶性转化 ,形成转化灶。转化灶细胞失去接触抑制 ,排列紊乱 ,无方向性 ,交叉重叠生长。转化的细胞可在软琼脂上生长 ,各浓度处理组细胞集落形成率均显著高于对照组 ,有良好的剂量—反应关系。经BPDE处理的细胞在裸鼠体内成瘤 ,病理学诊断为鳞状细胞癌。本实验以反式BPDE成功地诱发了人支气管上皮细胞恶性转化 ,为后期进一步研究其致癌的分子机制、寻找致癌相关基因提供了理想的生物学材料。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 二羟环氧苯并芘 人支气管上皮细胞 恶性转化 致癌性 支气管癌
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大气PM2.5致人支气管上皮细胞DNA损伤的研究 被引量:19
2
作者 覃辉艳 彭晓武 +5 位作者 蒙智娟 黄炯丽 李琴 杨晓波 韦小敏 邹云锋 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期391-393,共3页
目的研究大气PM2.5对人支气管上皮细胞(16-HBE)DNA的损伤效应。方法将人支气管上皮细胞(16-HBE)分别暴露于8、16、32、64、128μg/ml的广州大气PM2.5 24、48、72 h,采用MTT法测定细胞存活率,彗星试验检测细胞DNA损伤水平。结果染毒24、4... 目的研究大气PM2.5对人支气管上皮细胞(16-HBE)DNA的损伤效应。方法将人支气管上皮细胞(16-HBE)分别暴露于8、16、32、64、128μg/ml的广州大气PM2.5 24、48、72 h,采用MTT法测定细胞存活率,彗星试验检测细胞DNA损伤水平。结果染毒24、48、72 h后,64、128μg/ml组细胞存活率均明显低于对照组(P<0.05),各染毒组细胞Olive尾矩均明显高于对照组(P<0.05);72 h各剂量组细胞存活率均低于24 h相应处理组(P<0.05),48、72 h各剂量组细胞Olive尾矩与24 h相比均明显增加(P<0.05);经多重线性回归分析,Olive尾矩(y)与染毒剂量(d)和染毒时间(t)的回归方程为y=-6.481+0.162 d+0.210t(R^2=0.842,P<0.05)。结论大气PM2.5可导致人支气管上皮细胞(16-HBE)DNA损伤,且损伤程度与染毒剂量、时间有一定关联。 展开更多
关键词 空气污染 PM2.5 人支气管上皮细胞 DNA损伤
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下调miR-92a对非小细胞肺癌细胞增殖及血管生成因子表达的影响 被引量:12
3
作者 汤建华 冯平 +1 位作者 张志华 王布 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期38-42,共5页
目的探讨miR-92a下调对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖及血管生成的影响。方法将NSCLC中A549细胞分为三组培养:A549组(未转染A549细胞)、sc-siRNA组(转染sc-siRNA的A549细胞)、miR-92a-siRNA组(转染miR-92a-si... 目的探讨miR-92a下调对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖及血管生成的影响。方法将NSCLC中A549细胞分为三组培养:A549组(未转染A549细胞)、sc-siRNA组(转染sc-siRNA的A549细胞)、miR-92a-siRNA组(转染miR-92a-siRNA的A549细胞)。分别采用RT-PCR和Western blot检测A549细胞和正常人支气管上皮(human bronchial epithelial,HBE)细胞中miR-92a相对表达量、PTEN、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白相对表达水平。采用活细胞计数法和结晶紫染色实验检测各组A549细胞的增殖能力。结果 miR-92a在A549组细胞中的相对表达量高于HBE细胞(P <0. 05); A549组细胞中PTEN蛋白表达水平低于HBE细胞(P <0. 05),VEGF蛋白表达水平高于HBE细胞(P <0. 05); miR-92a-siRNA组细胞中miR-92a相对表达量降低(P <0. 05),PTEN蛋白表达水平升高(P <0. 05),VEGF蛋白表达水平降低(P <0. 05); miR-92a-siRNA组细胞中PI3K和Akt蛋白表达水平均下降(P <0. 05); miR-92a-siRNA组细胞数目减少,细胞增殖能力减弱。结论 NSCLC中A549细胞的miR-92a表达明显上调,miR-92a基因沉默能明显抑制细胞增殖、血管生成,PTEN和VEGF相关PI3K/Akt信号通路可能在此过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 A549细胞 人支气管上皮细胞 miR-92a 细胞增殖 血管生成
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五倍子含药血清对呼吸合胞病毒感染人支气管上皮细胞损伤及NF-κB核转位和表达的影响 被引量:11
4
作者 李玲 吴东升 +7 位作者 刘璐 张彧 卢芳国 彭旭秀 张波 戴冰 高强 魏科 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期790-793,共4页
目的:探讨五倍子含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮细胞损伤及细胞核因子-κB(NF-κB)核转位和表达的影响。方法:实验分为正常组、病毒处理组、含药血清组,给予相应处理后,进行指标检测。结果:病毒处理组在细胞内病毒核酸... 目的:探讨五倍子含药血清对呼吸道合胞病毒(RSV)感染人支气管上皮细胞损伤及细胞核因子-κB(NF-κB)核转位和表达的影响。方法:实验分为正常组、病毒处理组、含药血清组,给予相应处理后,进行指标检测。结果:病毒处理组在细胞内病毒核酸的相对表达量和对细胞增殖的抑制率随着浓度的增加而增加,且出现明显的晚期凋亡现象,含药血清能明显抑制上述现象;免疫荧光和Western blot结果显示,RSV感染后NF-κB发生了核转位,而含药血清能明显抑制NF-κB的核转位。结论:五倍子含药血清能抑制RSV病毒的复制,同时通过抑制NF-κB发生核转位,抑制RSV诱导的人支气管上皮细胞的凋亡,进而降低细胞增殖的抑制率。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 人支气管上皮细胞 核转录因子-κB 五倍子 含药血清 核转位
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反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘诱导恶变细胞中miR-494和miR-22的功能及PTEN的表达 被引量:10
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作者 刘林华 蒋义国 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期379-382,共4页
目的分析反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(anti-BPDE)诱导转化人支气管上皮细胞第30代(16HBE-T30)及其前期第15代细胞(16HBE-T15)miR-494及miR-22的表达水平,探讨其在化学致癌过程中的作用及对靶基因PTEN抑癌基因的调控。方法以16HBE-T30... 目的分析反式-7,8-二羟-9,10-环氧苯并芘(anti-BPDE)诱导转化人支气管上皮细胞第30代(16HBE-T30)及其前期第15代细胞(16HBE-T15)miR-494及miR-22的表达水平,探讨其在化学致癌过程中的作用及对靶基因PTEN抑癌基因的调控。方法以16HBE-T30和16HBE-T15细胞为实验组,溶剂处理组分别为其相应的对照组细胞(16HBE-N30和16HBE-N15),用茎环结构逆转录引物定量RT-PCR检测四组细胞miR-494及miR-22成熟体表达水平。运用定量RT-PCR和Western blotting分别检测四组细胞PTEN mRNA和蛋白表达水平。运用miRNA前体及抑制剂对miNRA表达进行调控后,再检测PTEN的表达改变,并进行报告基因信号改变、细胞凋亡、软琼脂集落形成率等分析。结果 16HBE-T30中miR-494和miR-22表达水平分别是16HBE-N30的12.6和2.3倍,而16HBE-T15中miR-494、miR-22表达水平较16HBE-N15下降。16HBE-T30中PTEN蛋白表达量低于16HBE-N30。与前体阴性对照组相比,上调的miR-494和miR-22分别将PTEN蛋白的表达量降低至0.8和0.5倍,而降低的miR-494和miR-22分别将PTEN蛋白的表达量上调至1.3和1.5倍。在16HBE-T30细胞中,miR-494和miR-22表达下调均增强caspase-3/7活力,miR-494和miR-22表达上调则减弱其活力。miR-494和miR-22下调能够降低转化细胞的恶性程度。结论 anti-BPDE恶性转化细胞中miR-494和miR-22在转录后水平反向调控靶基因PTEN的表达,这两种miRNA在anti-BPDE致癌过程中发挥类癌基因作用。 展开更多
关键词 反式-7 8-二羟-9 10-环氧苯并芘 microRNA PTEN基因 人支气管上皮细胞
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TRPC1在TGF-β1诱导支气管上皮细胞间充质转化中的作用 被引量:9
6
作者 岳喜磊 成莹 +3 位作者 许继德 钟长江 杨春涛 汪鹏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期492-498,共7页
目的:探究经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)间充质转化(EMT)中的作用。方法:以16HBE细胞株为研究对象,免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测16HBE细胞EMT过程中TRPC1 mRNA和蛋白... 目的:探究经典瞬时受体电位通道1(TRPC1)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人支气管上皮细胞(16HBE)间充质转化(EMT)中的作用。方法:以16HBE细胞株为研究对象,免疫荧光、RT-PCR和Western blotting检测16HBE细胞EMT过程中TRPC1 mRNA和蛋白的表达;Western blotting检测TRPC1阻断剂和siRNA干扰对16HBE细胞EMT的影响。结果:(1)TGF-β1刺激后细胞形态明显改变,E-钙黏蛋白表达减少(P<0.01),而α-SMA蛋白表达增加(P<0.05)。(2)TRPC1广泛存在于16HBE细胞,且TGF-β1刺激后TRPC1 mRNA和蛋白的表达增加(P<0.05)。(3)与TGF-β1组相比,阻断剂和TGF-β1共同作用组或siRNA和TGF-β1共同作用组细胞形态改变受抑制,E-钙黏蛋白和α-SMA蛋白表达受抑制(P<0.05)。结论:TGF-β1诱导16HBE细胞发生EMT,其机制可能与其上调16HBE细胞TRPC1有关。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 人支气管上皮细胞 瞬时受体电位通道1 上皮细胞间充质转化
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呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿中TREM-1/DAP12通路关键信号节点的表达 被引量:9
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作者 彭程 黎金雨 +1 位作者 赵云 余莉 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期433-439,共7页
目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿中TREM-1/DAP12蛋白的表达及该通路与炎症反应的潜在关联。方法选取2017年1月—2019年1月四川省广安市人民医院RSV毛细支气管炎患儿作为病例组(分为轻症组和重症组),选取同期体检的健康儿... 目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎患儿中TREM-1/DAP12蛋白的表达及该通路与炎症反应的潜在关联。方法选取2017年1月—2019年1月四川省广安市人民医院RSV毛细支气管炎患儿作为病例组(分为轻症组和重症组),选取同期体检的健康儿童作为对照组,对血清中炎症因子含量及外周血单个核细胞(PBMCs)中TREM-1、DAP12表达进行检测。构建RSV感染人支气管上皮(NHBE)细胞的体外细胞模型,将人支气管上皮细胞(NHBE)分为对照组、RSV感染组、RSV+siRNA-Control组和RSV+siRNA-TREM-1组,并对细胞中TREM-1、DAP12的表达及上清液中炎症因子含量进行检测。结果轻症组、重症组儿童血清中白细胞介素-1β(IL-1β)等炎症因子含量、PBMCs中TREM-1、DAP12表达量均高于对照组,且重症组高于轻症组(均P<0.05)。RSV感染组、RSV+siRNA-Control组TREM-1、DAP12表达量均高于对照组、RSV+siRNA-TREM-1组(均P<0.05)。RSV+siRNA-TREM-1组上清液中炎症因子含量均低于RSV感染组、RSV+siRNA-Control组(均P<0.05)。结论TREM-1/DAP12信号通路在RSV毛细支气管炎患儿中高表达。RSV诱导NHBE细胞高表达TREM-1,沉默TREM-1可以下调DAP12表达,抑制炎症因子分泌。 展开更多
关键词 髓系细胞触发受体-1 DNAX活化蛋白12 呼吸道合胞病毒 毛细支气管炎 人支气管上皮细胞
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生长因子对人支气管上皮细胞和肺癌细胞生长的影响 被引量:5
8
作者 靳芳 程书钧 +3 位作者 牟巨伟 张汝刚 徐丽华 郭素萍 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1992年第5期7-10,共4页
MCDB151加多种生长因子的无血清培养基已成功用于培养成人和胎儿支气管上皮细胞及肺癌细胞(腺癌和鳞癌)。用该无血清培养基进行集落形成试验的结果表明,牛垂体提取物、胰岛素和氢化可的松可以促进人支气管上皮细胞及肺癌细胞的增殖,表... MCDB151加多种生长因子的无血清培养基已成功用于培养成人和胎儿支气管上皮细胞及肺癌细胞(腺癌和鳞癌)。用该无血清培养基进行集落形成试验的结果表明,牛垂体提取物、胰岛素和氢化可的松可以促进人支气管上皮细胞及肺癌细胞的增殖,表皮生长因子和转铁蛋白却只刺激正常支气管上皮细胞的生长,而对本实验所检测的肺癌细胞无生长刺激作用。本研究所培养的大部分肺癌标本,在MCDB151完全培养基中加2%胎牛血清时,比不加血清时生长更快、更好。在MCDB151无血清培养基中,低浓度的钙有利于人支气管上皮细胞和肺癌细胞的生长。 展开更多
关键词 癌细胞 生长因子 肺肿瘤 上皮细胞
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大气细颗粒物对人支气管上皮细胞氧化损伤作用的研究 被引量:8
9
作者 覃辉艳 彭晓武 +5 位作者 李琴 黄炯丽 梁桂强 杨晓波 韦小敏 邹云锋 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1017-1019,共3页
目的研究大气细颗粒物(PM2.5)对人支气管上皮细胞(16-HBE)氧化损伤的作用。方法将16-HBE分别暴露于8、16、32、64、128μg/ml的于广州灰霾天气采集的大气PM2.5中24、48、72 h,采用ELISA法检测细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,并与本课... 目的研究大气细颗粒物(PM2.5)对人支气管上皮细胞(16-HBE)氧化损伤的作用。方法将16-HBE分别暴露于8、16、32、64、128μg/ml的于广州灰霾天气采集的大气PM2.5中24、48、72 h,采用ELISA法检测细胞8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,并与本课题组前期检测的细胞凋亡和DNA损伤数据进行相关性分析。结果染毒24、48、72 h后,与对照组相比,64、128μg/ml染毒组8-OHdG含量均明显增加(P<0.05);与染毒24 h相比,128μg/ml染毒72 h组8-OHdG含量明显增加(P<0.05)。氧化损伤与细胞DNA损伤和凋亡之间存在正相关(P<0.05),细胞DNA损伤与凋亡之间存在正相关(P<0.05)。结论大气PM2.5可导致16-HBE氧化损伤,氧化损伤可能是PM2.5引起呼吸道损伤的重要作用机制之一。 展开更多
关键词 空气污染 细颗粒物 灰霾 人支气管上皮细胞 8-羟基脱氧鸟苷
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茶多酚对脂多糖诱导的支气管上皮细胞损伤的保护作用及其机制 被引量:8
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作者 刘翠翠 赵龙 +2 位作者 石晓岚 王宁 马彩玲 《中国儿童保健杂志》 CAS 2017年第10期1015-1018,共4页
目的探讨茶多酚在脂多糖诱导的人支气管上皮细胞损伤中的保护作用及其机制。方法培养人支气管上皮细胞16HBE,给予不同浓度的脂多糖(1,25,50,100μg/ml)和茶多酚(100,200,400,800g/ml)作用。MTT检测细胞的生长,流式细胞术检测细胞凋亡,we... 目的探讨茶多酚在脂多糖诱导的人支气管上皮细胞损伤中的保护作用及其机制。方法培养人支气管上皮细胞16HBE,给予不同浓度的脂多糖(1,25,50,100μg/ml)和茶多酚(100,200,400,800g/ml)作用。MTT检测细胞的生长,流式细胞术检测细胞凋亡,western blot检测细胞核内和总NFκB的蛋白表达,ELISA检测IL-6,IL-13和TNF-α的含量,试剂盒检测MDA,SOD和LDH的水平。结果与对照组相比,LPS组的细胞生长显著降低;细胞凋亡显著升高;IL-6,IL-13和TNF-α的含量升高;核内和NFκB总蛋白上升;MDA和LDH含量增加,SOD的活性降低,而茶多酚处理抑制以上LPS诱导的16HBE损伤。结论茶多酚可以通过抑制氧化应激缓解脂多糖诱导的人支气管上皮细胞损伤。 展开更多
关键词 茶多酚 人支气管上皮细胞 脂多糖 氧化应激
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大承气汤含药血清对内毒素刺激的人支气管上皮细胞表达CAV-1、eNOS及NF-κB的影响 被引量:8
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作者 杨胜兰 金阳 +5 位作者 沈霖 刘建国 樊琼 薛卡明 黄璐 吴嫣然 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1088-1094,共7页
目的观察大承气汤含药血清对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)表达小凹蛋白-1(caveolin-1、CAV-1),内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及核转... 目的观察大承气汤含药血清对内毒素(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,HBECs)表达小凹蛋白-1(caveolin-1、CAV-1),内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)及核转录因子κB(nuclear transcription factor-kappa B,NF-κB)的影响。方法制备大承气汤及大承气汤含药血清。将体外培养的HBECs分为7组进行处理(正常血清组,单纯LPS干预组,低剂量大承气汤含药血清组,中剂量大承气汤含药血清组,高剂量大承气汤含药血清组,西药对照组,空白血清对照组),采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法、Real-timePCR、免疫细胞化学及Westernblot法检测不同剂量的大承气汤含药血清对内毒素刺激HBECs表达CAV-1、eNOS及NF-κBmRNA水平及蛋白的影响。结果正常血清组HBECs有基础量的CAV-1、eNOS及NF-κBmRNA及蛋白的表达,经LPS刺激后,单纯干预组CAV-1、eNOS及NF-κBmRNA及蛋白表达较正常血清组显著增加(P<0.01),而不同剂量大承气汤含药血清均可抑制CAV-1、eNOS及NF-κBmRNA及蛋白表达。结论大承气汤含药血清能抑制LPS刺激的HBECs中CAV-1、eNOS及NF-κB的表达。 展开更多
关键词 大承气汤 内毒素 人支气管上皮细胞 小凹蛋白-1 内皮型一氧化氮合酶 核因子-KB
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结晶型硫化镍对人支气管上皮细胞PTEN基因和miR-22表达的影响 被引量:7
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作者 刘林华 蒋义国 +1 位作者 纪卫东 杨巧媛 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期393-395,共3页
目的分析结晶型硫化镍(NiS)诱导转化人支气管上皮细胞第35代(16HBE-T35)及其前期第18代细胞(16HBE-T18)PTEN基因及miR-22的表达水平,探讨PTEN基因与miR-22在化学致癌过程中的相互关系。方法以16HBE-T35和16HBE-T18细胞为实验组,蒸馏水... 目的分析结晶型硫化镍(NiS)诱导转化人支气管上皮细胞第35代(16HBE-T35)及其前期第18代细胞(16HBE-T18)PTEN基因及miR-22的表达水平,探讨PTEN基因与miR-22在化学致癌过程中的相互关系。方法以16HBE-T35和16HBE-T18细胞为实验组,蒸馏水处理组分别为其相应的对照细胞(16HBE-N35和16HBE-N18),用茎环结构逆转录引物实时定量RT-PCR检测4种细胞miR-22成熟体表达量。运用实时定量RT-PCR和蛋白质印迹法分别检测四种细胞PTEN mRNA和蛋白表达量。结果 16HBE-T18细胞和16HBE-T35细胞中miR-22的表达水平分别是16HBE-N18细胞的(0.27±0.09)倍和(3.50±0.31)倍。16HBE-T35细胞的PTEN蛋白表达水平是16HBE-N35细胞的(0.48±0.26)倍,但16HBE-T18细胞和16HBE-N18细胞之间PTEN蛋白表达水平无明显差异。结论在NiS诱导的恶性转化细胞16HBE-T35中,PTEN蛋白表达水平下降,而miR-22表达水平增高。恶性细胞中,miR-22可能在转录后影响PTEN蛋白的表达。 展开更多
关键词 硫化镍 MICRORNA PTEN基因 人支气管上皮细胞
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苯并(a)芘染毒致人支气管上皮细胞的周期改变及BPDE-DNA加合物形成 被引量:6
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作者 杨瑾 陈文涛 +1 位作者 范燕峰 张慧涛 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2015年第2期86-90,共5页
目的:通过观察苯并(a)芘(BaP)染毒致人支气管上皮细胞16HBE细胞周期改变及BPDE—DNA加合物形成的情况,探讨DNA损伤与细胞周期阻滞之间的关系。方法:用不同浓度BaP(0、1、2、4、8、16、32μmol/L)染毒16HBE细胞24h,用16μmol... 目的:通过观察苯并(a)芘(BaP)染毒致人支气管上皮细胞16HBE细胞周期改变及BPDE—DNA加合物形成的情况,探讨DNA损伤与细胞周期阻滞之间的关系。方法:用不同浓度BaP(0、1、2、4、8、16、32μmol/L)染毒16HBE细胞24h,用16μmol/LBaP染毒16HBE细胞不同时间(0、1、2、4、8、12、24h)以检测BaP染毒16HBE细胞的剂量和时间效应。再根据上述结果选择16μmol/LBaP染毒16HBE细胞4h后,恢复不同时间(0、1、2、4、8、12、24h),处理结束后采用流式细胞术检测细胞周期分布情况,酶联免疫法和荧光免疫组化法检测BPDE—DNA加合物表达。结果:与正常对照组相比,随着BaP染毒浓度和染毒时间的增加,s期细胞所占比例均增加(P〈0.05或P〈0.01)。16μmol/LBaP染毒16HBE细胞4h后,恢复早期(4~12h)S期细胞所占比例与恢复0h相比明显增加(P〈0.05),恢复24h时S期细胞所占比例(24.52%)与恢复0h相比明显降低(P〈0.01),而与正常对照组(26.41%)相比差异无统计学意义(P〉0.05)。随着染毒浓度增加和染毒时间延长,16HBE细胞内BPDE—DNA加合物含量逐渐增加,与正常对照组相比差异均有统计学意义(P〈0.01),染毒后恢复1h时BPDE—DNA加合物含量与恢复0h组相比显著增加(P〈0.01),而后随恢复时间延长逐渐下降。回归分析显示BaP染毒后细胞S期所占比例与BPDE—DNA加合物含量符合Cubic方程(R2=0.386,P=0.01)。结论:BaP染毒所致BPDE—DNA加合物的形成与S期阻滞密切相关。 展开更多
关键词 苯并(A)芘 细胞周期 BPDE—DNA加合物 人支气管上皮细胞
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灰霾天气细颗粒物对人支气管上皮细胞凋亡的影响 被引量:6
14
作者 覃辉艳 彭晓武 +4 位作者 蒙智娟 黄炯丽 李琴 韦小敏 邹云锋 《环境与职业医学》 CAS 北大核心 2012年第2期86-88,共3页
[目的]探讨灰霾天气细颗粒物(PM2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,16-HBE)凋亡的影响。[方法]分别以8、16、32、64、128μg/mL浓度的PM2.5作用于16-HBE 24、48、72h,检测PM2.5对16-HBE细胞存活率及凋亡率的影响... [目的]探讨灰霾天气细颗粒物(PM2.5)对人支气管上皮细胞(human bronchial epithelial cells,16-HBE)凋亡的影响。[方法]分别以8、16、32、64、128μg/mL浓度的PM2.5作用于16-HBE 24、48、72h,检测PM2.5对16-HBE细胞存活率及凋亡率的影响。[结果]染毒24、48、72h后,64、128μg/mL组细胞存活率均明显低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.05);72h各浓度组细胞存活率均低于24h相应处理组(P<0.05),当染毒浓度大于8μg/mL时,72h各浓度组细胞总凋亡率与24h相比均明显增加(P<0.05)。[结论]灰霾天气细颗粒物PM2.5对16-HBE具有细胞毒性,能诱导其凋亡,且具有剂量和时间反应关系。 展开更多
关键词 灰霾天气 细颗粒物 人支气管上皮细胞 细胞凋亡
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分次低剂量辐射诱导HBE细胞衰老中mRNA差异表达分析
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作者 张灵钰 黄伟旭 +6 位作者 蔡雅诗 李慧娴 张敏 闻昌勇 杨萍 邹剑明 陈慧峰 《中国辐射卫生》 2024年第2期116-122,共7页
目的利用高通量mRNA测序和生物信息学技术探讨分次低剂量电离辐射(low dose ionizing radiation,LDIR)诱导人支气管上皮(human bonchial epithelial,HBE)细胞衰老中差异表达mRNA及相关生物学过程与通路。方法分别采用0、50、100、200 mG... 目的利用高通量mRNA测序和生物信息学技术探讨分次低剂量电离辐射(low dose ionizing radiation,LDIR)诱导人支气管上皮(human bonchial epithelial,HBE)细胞衰老中差异表达mRNA及相关生物学过程与通路。方法分别采用0、50、100、200 mGy剂量辐照HBE细胞7次结束后24和48 h收集细胞,检测衰老相关β-半乳糖苷酶活性和衰老相关分泌表型基因mRNA和蛋白表达水平,采用高通量测序筛选差异表达基因进行基因本体学(GO)和京都基因与基因组大百科全书(KEGG)分析。结果分次低剂量辐照HBE细胞衰老阳性面积呈剂量依赖性增加(P<0.05)。与对照组相比,辐照结束后24和48 h,100 mGy×7和200 mGy×7组转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)与基质金属蛋白酶9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)基因mRNA水平与蛋白表达均增加。高通量测序显示,与对照组相比各剂量组差异表达mRNA分别有882个、475个和1205个。GO分析表明,各剂量组差异表达mRNA主要富集在细胞周期调节、氮化合物代谢过程的调控、对刺激反应的调节和细胞分裂等生物过程。KEGG分析显示,差异表达mRNA主要富集在细胞周期、细胞衰老、铁死亡等通路。结论分次LDIR可诱导HBE细胞衰老,衰老细胞中差异表达mRNA相关生物学过程和通路与细胞周期、细胞衰老等有关。 展开更多
关键词 低剂量电离辐射 HBE细胞 衰老
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α-粒子诱发人BEP2D恶性转化细胞的亚克隆及DNA链断裂修复研究 被引量:5
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作者 隋建丽 刘秀林 +4 位作者 胡迎春 程昕 金璀珍 周平坤 吴德昌 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 2002年第1期5-9,共5页
目的 :建立α 粒子诱发人支气管上皮细胞 (BEP2D)恶性转化细胞的克隆细胞系 ,研究其核型和DNA链断裂修复能力。方法 :1.5Gyα 粒子照射的BEP2D细胞传 35代后接种裸鼠成瘤 ,取出瘤细胞进行亚克隆 ,挑出单个克隆扩大培养 ,G带显示分析细... 目的 :建立α 粒子诱发人支气管上皮细胞 (BEP2D)恶性转化细胞的克隆细胞系 ,研究其核型和DNA链断裂修复能力。方法 :1.5Gyα 粒子照射的BEP2D细胞传 35代后接种裸鼠成瘤 ,取出瘤细胞进行亚克隆 ,挑出单个克隆扩大培养 ,G带显示分析细胞核型 ,脉冲电场凝胶电泳法检测DNA双链断裂。结果 :亚克隆了 5个恶性转化细胞系 (RP35T 1, 2 , 4 , 5 , 6 ) ,核型基本与BEP2D细胞相近 ,但有着不同的染色体缺失 ,其中 2株细胞 (RP35T 2和RP35T 4 )多倍体高达 40 %,明显高于BEP2D细胞。恶性转化细胞RP35T 1和RP35T 4的DNA双链断裂重接修复缺陷。结论 :建立了α 粒子诱发人BEP2D恶性转化细胞的克隆细胞系 ,DNA链断裂修复缺陷可能是α 粒子致癌的一个重要特点。 展开更多
关键词 α-粒子 支气管上皮细胞 癌变 核型 DNA修复 BEP2D细胞 细胞转化 肺癌 致癌因子
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活性氧簇/沉默信息调节因子1在高氧致支气管上皮细胞损伤中的作用
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作者 杨坤 吴越 +3 位作者 章容 雷小平 康兰 董文斌 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期852-860,共9页
目的探讨活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高氧致BEAS-2B细胞线粒体损伤的影响。方法实验分为三部分:(1)细胞分为高氧0 h(H0)组、H6组、H12组、H24组、H48组。(2)细... 目的探讨活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)/沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对高氧致BEAS-2B细胞线粒体损伤的影响。方法实验分为三部分:(1)细胞分为高氧0 h(H0)组、H6组、H12组、H24组、H48组。(2)细胞分为对照组、H48组、高氧48 h+SIRT1抑制剂(H48+EX 527)组和高氧48 h+SIRT1激动剂(H48+SRT1720)组。(3)细胞分为对照组、高氧48 h+乙酰半胱氨酸(H48+NAC)组和H48组。采用活性氧试剂盒检测ROS水平,Western blot法检测SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平,免疫荧光染色法检测线粒体相关蛋白表达,透射电镜检测线粒体形态。结果(1)与H0组相比,H6组、H12组、H24组和H48组ROS荧光强度增加(P<0.05),H48组SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平降低(P<0.05),H24组和H48组线粒体相关蛋白荧光强度降低(P<0.05)。(2)与H48组相比,H48+SRT1720组线粒体相关蛋白表达水平升高,线粒体平均长宽比增加(P<0.05);H48+EX 527组线粒体平均面积减少(P<0.05)。(3)与H48组相比,H48+NAC组ROS荧光强度降低,SIRT1和线粒体相关蛋白表达水平升高,线粒体平均面积和平均长宽比增加(P<0.05)。结论ROS/SIRT1轴参与了高氧诱导的BEAS-2B细胞线粒体损伤。 展开更多
关键词 线粒体损伤 高氧 活性氧簇 沉默信息调节因子1 人支气管上皮细胞
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次氯酸钠消毒剂对人支气管上皮细胞的毒性效应
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作者 李佳威 刘江正 +4 位作者 郭晓洁 涂永梅 师敏婕 李文丽 卢金锁 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期822-827,833,共7页
[背景]在不同的环境空气中存在着多种微生物,一旦易感人群与环境中的致病微生物接触,很容易被感染。为避免致病菌的传播,采取消毒的方式将环境中的致病菌杀死以阻断致病菌与人类接触,是目前最简单有效的办法。次氯酸钠(NaClO)是目前应... [背景]在不同的环境空气中存在着多种微生物,一旦易感人群与环境中的致病微生物接触,很容易被感染。为避免致病菌的传播,采取消毒的方式将环境中的致病菌杀死以阻断致病菌与人类接触,是目前最简单有效的办法。次氯酸钠(NaClO)是目前应用最广泛的消毒剂,然而NaClO应用于环境空气消毒的安全性尚不明确。[目的]建立NaClO诱导支气管上皮细胞(BEAS-2B)损伤模型,探讨NaClO消毒剂对BEAS-2B细胞的毒性作用机制。[方法]将100 mmol·L^(-1)NaClO标准溶液用0.9%NaCl溶液梯度稀释至0、25、50、100、200、400μmol·L^(-1)处理细胞,分别在15、30 min后细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞活性,选择0、25、50μmol·L^(-1)NaClO处理的细胞在倒置显微镜下观察细胞形态,流式细胞术Annexin V FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况,确定最终实验浓度。透射电镜观察线粒体等细胞器的形态,JC-1染色检测细胞线粒体膜电位,Fluo-4 AM荧光探针法检测细胞内Ca^(2+)浓度,2′,7′-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞总活性氧(ROS),二氢乙锭(DHE)荧光探针检测细胞线粒体ROS,试剂盒检测脂质过氧化中间产物丙二醛(MDA)。[结果]与0μmol·L^(-1)NaClO处理组细胞相比,25μmol·L^(-1)NaClO处理30 min后细胞形态变化不大,50μmol·L^(-1)NaClO处理30 min后细胞活力下降至正常细胞活力的70%(P<0.01),细胞形态开始皱缩变圆,最终选择50μmol·L^(-1)NaClO处理30 min作为后期实验浓度。实验结果发现,与0μmol·L^(-1)NaClO处理组细胞相比,NaClO处理组凋亡细胞数量增加(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.01),细胞内Ca^(2+)浓度升高(P<0.05),细胞ROS水平升高(P<0.05),线粒体ROS水平升高(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01)。[结论]本研究成功建立了NaClO诱导BEAS-2B细胞损伤模型,并发现NaClO可通过诱导BEAS-2B细胞凋亡和氧化应激导致细胞损伤。根据结果推测可能的原因有2种,一是NaClO溶� 展开更多
关键词 消毒 次氯酸钠 人支气管上皮细胞 凋亡 氧化应激
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PM2.5对支气管上皮细胞DNA损伤作用研究 被引量:6
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作者 王冰玉 郑凯 +3 位作者 徐新云 谢红卫 于军晖 龙鼎新 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第6期469-473,497,共6页
目的:探讨大气细颗粒物(PM2.5)染毒对人支气管上皮细胞(HBE)DNA损伤的作用。方法:分别用8、20、50μg/mL的PM2.5水溶液染毒HBE细胞24 h后,单细胞凝胶电泳实验(SCGE)检测DNA损伤情况。10和50μg/L的PM2.5水溶液染毒HBE细胞,以未染毒细胞... 目的:探讨大气细颗粒物(PM2.5)染毒对人支气管上皮细胞(HBE)DNA损伤的作用。方法:分别用8、20、50μg/mL的PM2.5水溶液染毒HBE细胞24 h后,单细胞凝胶电泳实验(SCGE)检测DNA损伤情况。10和50μg/L的PM2.5水溶液染毒HBE细胞,以未染毒细胞作为阴性对照组,10μmol/L的Cr6+水溶液为阳性对照组,实时荧光定量PCR(qPCR)检测DNA损伤修复基因hOGG1、hMTH1的mRNA表达水平的变化,Western blot检测hOGG1、hMTH1蛋白表达变化。结果:单细胞凝胶电泳检测8、20和50μg/mL PM2.5水溶液染毒组HBE细胞的尾部DNA含量、尾长、尾距较阴性对照组明显增加(P<0.05或P<0.01)。qPCR结果显示,与阴性对照组比较,HBE细胞hOGG1 mRNA表达水平在10和50μg/mL PM2.5水溶液染毒以及阳性对照Cr6+水溶液染毒后分别升高75.0%、132.0%、214.0%;hMTH1 mRNA分别升高61.0%、144.0%、75.0%。Western blot结果显示,与阴性对照组比较,H BE细胞hOGG1蛋白表达水平在10和50μg/mL PM2.5水溶液染毒以及Cr6+水溶液染毒后分别升高47.6%、64.0%、47.0%;hMTH1蛋白分别升高20.5%、49.8%、20.9%。结论:PM2.5水溶液染毒对HBE细胞DNA具有明显的损伤作用,并引起HBE细胞DNA损伤修复基因hOGG1、hMTH1表达水平升高。 展开更多
关键词 大气细颗粒物 人支气管上皮细胞 DNA损伤 单细胞凝胶电泳实验
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甲基丙烯酸环氧丙酯对人支气管上皮细胞周期及凋亡影响的研究 被引量:5
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作者 杨敏 王全凯 +2 位作者 王雅文 李瑛 许建宁 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期404-406,413,共4页
目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞(16HBE)经1-16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数(MI)。结果经... 目的探讨甲基丙烯酸环氧丙酯(GMA)对人支气管上皮细胞周期及凋亡的影响。方法人支气管上皮细胞(16HBE)经1-16μg/ml剂量的GMA染毒不同次数后,应用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期及凋亡率的改变,同时测定细胞分裂指数(MI)。结果经1次染毒处理后,随着染毒剂量的增加,G0/G1期细胞显著减少(P〈0.01),S期和G2/M期细胞显著增加,凋亡细胞数增多,细胞分裂指数下降;随着染毒次数的增加,各剂量组细胞周期均明显阻滞于G0/G1期,但高剂量组细胞仍表现出S期和G2/M期增多现象;经3次染毒后,高剂量组细胞出现凋亡率下降、分裂指数升高现象。结论经GMA染毒处理后,16HBE细胞周期由G0/G1期向S期和G2/M期移动而呈现增殖性改变。 展开更多
关键词 甲基丙烯酸环氧丙酯 细胞周期 细胞凋亡 支气管 上皮细胞
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