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紫杉醇脂质体的体内外抗肿瘤作用研究 被引量：17
1
作者 杨爱珍 李军 +1 位作者 徐海军 陈惠英 《中国肿瘤》 CAS 2006年第12期862-864,共3页
[目的]研究注射用紫杉醇脂质体的体外细胞毒作用和体内抗瘤作用及药物毒性。[方法]用MTT法检测紫杉醇脂质体对人肺腺癌细胞株SPC-A1的体外杀伤作用;建立小鼠实体型S180肿瘤模型,共50只,随机分为5组:5%葡萄糖溶液组(空白对照组)、紫杉醇... [目的]研究注射用紫杉醇脂质体的体外细胞毒作用和体内抗瘤作用及药物毒性。[方法]用MTT法检测紫杉醇脂质体对人肺腺癌细胞株SPC-A1的体外杀伤作用;建立小鼠实体型S180肿瘤模型,共50只,随机分为5组:5%葡萄糖溶液组(空白对照组)、紫杉醇注射液10mg/kg组和15mg/kg组,紫杉醇脂质体10mg/kg组和15mg/kg组,观察各组抑瘤作用和小鼠一般状态的变化,并检测肝功能和骨髓像改变。[结果]紫杉醇脂质体对体外培养的人肺腺癌细胞株SPC-A1在浓度为2.5ng/ml、5.0ng/ml和10.0ng/ml时,其抑制率分别为39.1%、51.9%和55.8%。体内给予紫杉醇脂质体10mg/(kg·d),15mg/(kg·d)3d,对小鼠S180实体型的抑瘤率分别为31.12%和45.29%,与同样剂量紫杉醇注射液组比较无显著性差异;给药后动物行为和小鼠体重变化率较紫杉醇注射液组接近对照组;骨髓抑制程度亦低于同剂量紫杉醇注射液组。[结论]相同给药剂量下,紫杉醇脂质体的体内外抗肿瘤活性与紫杉醇注射液相接近,但药物毒副反应明显降低。 展开更多
关键词 紫杉醇 脂质休 人肺腺癌细胞株 小鼠移植性肿瘤 抗肿瘤作用
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金复康口服液对裸鼠人肺腺癌细胞凋亡相关基因表达的影响 被引量：17
2
作者 孙建立 刘嘉湘 《上海中医药杂志》 北大核心 2007年第10期69-71,共3页
目的探讨金复康口服液诱导裸鼠人肺腺癌LAX-83移植瘤细胞凋亡的作用及其分子机制。方法以LAX-83人肺腺癌瘤株在裸鼠皮下移植传代,将造模的裸鼠随机分为荷瘤对照组、金复康治疗组、顺氨氯铂(DDP)对照组。药物干预21d后,观察各组裸鼠瘤重... 目的探讨金复康口服液诱导裸鼠人肺腺癌LAX-83移植瘤细胞凋亡的作用及其分子机制。方法以LAX-83人肺腺癌瘤株在裸鼠皮下移植传代,将造模的裸鼠随机分为荷瘤对照组、金复康治疗组、顺氨氯铂(DDP)对照组。药物干预21d后,观察各组裸鼠瘤重及抑瘤率,并检测肿瘤组织中细胞凋亡情况及凋亡相关基因的蛋白表达。结果金复康治疗组抑瘤率为49.64%,平均瘤重与荷瘤对照组比较有显著差异(P<0.05),与DDP对照组比较无显著性差异(P>0.05);电镜下可见典型的早期凋亡细胞和凋亡小体。FCM检测细胞凋亡率为(17.51±3.56)%,TUNEL法观察凋亡细胞数为7.07±1.53,与荷瘤对照组及DDP对照组比较均有显著差异(P<0.01);免疫组化结果表明,金复康治疗组和DDP对照组均能降低Bcl-2基因蛋白表达,增加Bax和Fas基因蛋白表达,与荷瘤对照组比较P<0.01,两组对P53基因蛋白表达与荷瘤对照组比较,P>0.05。结论金复康口服液有诱导肿瘤细胞凋亡的作用,可降低Bcl-2基因蛋白表达,增加Bax和Fas基因蛋白表达。 展开更多
关键词 金复康口服液 人肺腺癌 细胞凋亡 裸鼠
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人肺腺癌紫杉醇耐药细胞株的建立及其生物学特性研究 被引量：8
3
作者 杨爱珍 钱军 +4 位作者 秦叔逵 陈惠英 乐美兆 徐海军 刘文虎 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2006年第9期657-661,共5页
目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌细胞株模型SPC-A1/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法应用浓度递增和短时作用法,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中诱导分离出对紫杉醇耐药的细胞亚株(SPC-A1/Taxol)。采用MTT法检测耐药细胞的耐药指数及对抗癌药... 目的建立耐紫杉醇的人肺腺癌细胞株模型SPC-A1/Taxol,并初步研究其生物学特性。方法应用浓度递增和短时作用法,从人肺腺癌细胞株SPC-A1中诱导分离出对紫杉醇耐药的细胞亚株(SPC-A1/Taxol)。采用MTT法检测耐药细胞的耐药指数及对抗癌药物的敏感性;光镜和透射电镜观察细胞形态;以流式细胞术检测该耐药细胞的细胞周期分布;以免疫细胞化学染色检测多药耐药基因(mdr1)的表达产物P-糖蛋白(P-gp)。结果经MTT法检测,SPC-A1/Taxol细胞的紫杉醇半数抑制浓度(IC50)是亲代SPC-A1细胞的759.46倍,对Taxotere、NVB、ADM呈高度耐药状态,对VP-16和HCPT有轻度的耐药,而对DDP、GEM以及中药榄香烯乳无交叉耐药现象。耐药细胞的群体倍增时间是亲代细胞的1.32倍;细胞形态未见明显改变;G0+G1细胞比例减少,S期细胞增多。SPC-A1细胞无P-gp表达,SPC-A1/Taxol则高表达P-gp。结论SPC-A1/Taxol肺腺癌细胞株是一个明确的多药耐药模型,具有耐药细胞的基本生物学特性,推测其多药耐药性与P-gp的高表达相关。 展开更多
关键词 肺腺癌细胞 多药耐药 紫杉醇 细胞株
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姜黄素对A549细胞亚群SP和NON-SP的NF-κB、VEGF及Notch通路的影响 被引量：7
4
作者 李小江 贾英杰 +2 位作者 张文治 张莹 许文婷 《天津中医药》 CAS 2016年第3期164-168,共5页
[目的]通过动物实验了解姜黄提取物-姜黄素抗肿瘤血管生成的具体作用机制。[方法]将40只BALB/C雄性裸小鼠分为4组,每组10只。分别为A组(SP亚群细胞姜黄素组)、B组(SP亚群细胞荷瘤对照组)、C组(NONSP亚群细胞姜黄素组)、D组(NON-SP亚群... [目的]通过动物实验了解姜黄提取物-姜黄素抗肿瘤血管生成的具体作用机制。[方法]将40只BALB/C雄性裸小鼠分为4组,每组10只。分别为A组(SP亚群细胞姜黄素组)、B组(SP亚群细胞荷瘤对照组)、C组(NONSP亚群细胞姜黄素组)、D组(NON-SP亚群细胞荷瘤对照组)。A、B两组于实验前建立肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型,C、D两组建立肺腺癌A549 NON-SP细胞亚群荷瘤模型,建立模型后观察16 d,于A组、C组小鼠腹腔注射姜黄素,隔天1次,B、D两组注射生理盐水。16 d后将小鼠称重后处死,剥离瘤块组织,比较各组瘤质量;免疫组化法检测肿瘤组织中血管生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch1 m RNA含量。[结果]肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠瘤体与NON-SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠相比体积较大;SP亚群细胞姜黄素组抑瘤作用及抗肿瘤血管生成优于NON-SP亚群细胞姜黄素组,两组相比差异具有统计学意义。[结论]姜黄素可以抑制肿瘤生长,考虑可能与其抑制NF-k B的表达,下调Notch1 m RNA含量,阻断Notch信号通路,抑制肿瘤组织中VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 姜黄素 血管生长因子 核因子-κB 人肺腺癌A549 NON-SP细胞 SP细胞
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雷帕霉素对顺铂作用下人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞增殖、侵袭、黏附及自噬凋亡的影响 被引量：7
5
作者 金柱 高宝安 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2120-2127,共8页
目的:研究雷帕霉素(Rap)对顺铂(DDP)作用下人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞增殖、迁移、黏附及其自噬凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞株,利用MTT方法分别检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞增殖... 目的:研究雷帕霉素(Rap)对顺铂(DDP)作用下人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞增殖、迁移、黏附及其自噬凋亡的影响。方法:培养人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞株,利用MTT方法分别检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞增殖抑制率的影响;Transwell方法检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞体外侵袭能力的影响;黏附实验检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞体外侵袭能力的影响;流式细胞术检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞凋亡的影响;Western blotting检测Rap和DDP单独与联合作用对A549及耐药A549/DDP细胞自噬标志蛋白beclin-1和LC3表达的影响。结果:与Rap或DDP单独作用组相比,Rap和DDP联合作用能够同时显著抑制人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞增殖、体外侵袭能力及细胞黏附能力,并能够促进细胞凋亡和自噬标志蛋白beclin-1和LC3的表达(均P<0.05)。结论:Rap能够通过促进细胞自噬而增强DDP的作用,进而抑制人肺腺癌A549及耐药A549/DDP细胞的增殖、侵袭、黏附并促进细胞凋亡作用,具有协同作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 顺铂 人肺腺癌细胞 细胞凋亡 细胞侵袭 自噬
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槲寄生碱抑制肺癌细胞增殖作用初步观察 被引量：6
6
作者 孙莉 姚俊涛 +2 位作者 王一羽 李军 原荣 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期1653-1656,共4页
目的:研究槲寄生碱对人肺腺癌细胞株SPC-A1及肺鳞癌细胞株SK-MES-1的抑制作用。方法:采用四甲基噻唑氮蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测不同浓度槲寄生碱作用24和48h对细胞增殖的影响,以含不同浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)细... 目的:研究槲寄生碱对人肺腺癌细胞株SPC-A1及肺鳞癌细胞株SK-MES-1的抑制作用。方法:采用四甲基噻唑氮蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测不同浓度槲寄生碱作用24和48h对细胞增殖的影响,以含不同浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)细胞组为阳性对照,不含药物的细胞组为阴性对照,计算半数抑制浓度(IC50)。流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测高、中和低3组浓度的槲寄生碱作用24h后的细胞的凋亡率。结果:不同浓度槲寄生碱作用24h,对SPC-A1细胞的IC50为(14.43±0.53)μg/mL,对SK-MES-1细胞的IC50为(8.09±0.40)μg/mL。其作用48h,对SPC-A1细胞的IC50为(12.11±0.25)μg/mL,对SK-MES-1细胞的IC50为(6.43±0.33)μg/mL。并且抑制作用随碱浓度的升高和作用时间的延长而增加,P<0.05。阳性对照组5-FU作用24h,对SPC-A1细胞的IC50为(4.79±0.45)μg/mL,对SK-MES-1细胞的IC50为(5.15±0.23)μg/mL。作用48h,对SPC-A1细胞的IC50为(4.35±0.41)μg/mL,对SK-MES-1细胞的IC50为(4.11±0.38)μg/mL。FCM检测SPC-A1细胞未加入药物的对照组凋亡率为(0.43±0.01)%,高剂量组药物浓度28.86μg/mL,凋亡率为(31.09±0.05)%,中剂量组药物浓度14.43μg/mL,凋亡率为(18.19±0.02)%,低剂量组药物浓度7.22μg/mL,凋亡率为(7.99±0.01)%。SK-MES-1细胞未加入药物的对照组凋亡率为(0.57±0.02)%,高剂量组药物浓度16.18μg/mL,凋亡率为(38.24±0.03)%,中剂量组药物浓度为8.09μg/mL,凋亡率为(21.81±0.01)%,低剂量组药物浓度4.05μg/mL,凋亡率为(9.11±0.01)%,与没有加入槲寄生碱的细胞相比,加入槲寄生碱后SPC-A1细胞与SK-MES-1细胞凋亡率均明显增加,P<0.05,并且凋亡率随槲寄生碱剂量的增加而升高,P<0.05。结论:槲寄生碱能够抑制人肺腺癌细胞株SPC-A1及肺鳞癌细胞株SK-MES-1的增殖,并能促进细胞的凋亡,为槲寄生碱应用于肺癌的临床治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 槲寄生碱 人肺腺癌细胞 人肺鳞癌细胞 细胞增殖 细胞凋亡
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蛇床子素诱导人肺腺癌细胞进入G2/M阻滞并引起凋亡性死亡研究 被引量：5
7
作者 吕金敏 《浙江中西医结合杂志》 2015年第2期115-117,共3页
目的探讨蛇床子素(osthole)对人肺癌细胞A549的杀伤作用及其机制。方法将人肺癌细胞A549用不同浓度的蛇床子素治疗后,采用MTT法检测蛇床子素对A549细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术检测A549细胞内DNA的含量测定蛇床子素对A549细胞周... 目的探讨蛇床子素(osthole)对人肺癌细胞A549的杀伤作用及其机制。方法将人肺癌细胞A549用不同浓度的蛇床子素治疗后,采用MTT法检测蛇床子素对A549细胞增殖的抑制作用;通过流式细胞术检测A549细胞内DNA的含量测定蛇床子素对A549细胞周期的影响、蛇床子素处理后A549细胞凋亡情况;Western blot检测蛇床子素处理后A549细胞周期相关蛋白p-Cdc2和Cyclin B1及凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果蛇床子素对A549细胞增殖的抑制效应呈剂量依赖性,50μM、100μM、150μM的蛇床子素组增殖抑制率分别为(25.4±3.2)%、(40.2±3.7)%、(63.7±4.5)%。蛇床子素对A549细胞的凋亡诱导效应也呈剂量依赖性,50μM、100μM、150μM的蛇床子素组凋亡率分别为(9.4±1.4)%、(17.3±2.5)%、(22.9±3.3)%。蛇床子素处理后A549细胞周期相关蛋白p-Cdc2、Cyclin B1及抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著下降,Bax表达显著增高。结论蛇床子素可诱导人肺腺癌细胞进入G2/M阻滞,并引起肿瘤细胞凋亡性死亡。 展开更多
关键词 人肺腺癌细胞 A549 凋亡 细胞周期 蛇床子素
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清热消积方对人肺腺癌细胞诱导的人脐静脉内皮细胞迁移、趋化和成管能力的影响 被引量：3
8
作者 陈培丰 潘磊 金莹祺 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期497-501,共5页
目的研究清热消积方对人肺腺癌细胞(SPC-A-1)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)迁移、趋化和成管能力的影响。方法设终浓度分别为2.5、5.0、10.0、20.0mg/mL的清热消积方给药组和对照组,运用划痕、... 目的研究清热消积方对人肺腺癌细胞(SPC-A-1)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)迁移、趋化和成管能力的影响。方法设终浓度分别为2.5、5.0、10.0、20.0mg/mL的清热消积方给药组和对照组,运用划痕、Transwell小室、Matrigel胶小管形成等实验方法观察细胞迁移趋化效应及成管能力。结果 2.5、5.0、10.0mg/mL的清热消积方药液对由SPC-A-1细胞上清培养的HUVEC细胞的迁移运动均有不同程度的抑制作用(P<0.05),且迁移率随着药物浓度的增加而下降;HU-VEC细胞的趋化细胞数明显少于阳性对照组(P<0.01),趋化抑制率随着药物浓度的增加而上升,且HU-VEC细胞趋化数目与药物浓度呈负相关(r=-0.830,P<0.01);HUVEC细胞小管形成面积明显低于阳性对照组(P<0.01),小管形成抑制率随着药物浓度的增加而上升,且HUVEC细胞生成小管的面积与药物浓度呈负相关(r=-0.937,P<0.01)。结论清热消积方抗肿瘤血管生成作用可能与其抑制肿瘤血管内皮细胞的迁移、趋化及成管能力等相关。 展开更多
关键词 清热消积方 人肺腺癌细胞株 人脐静脉内皮细胞 抗肿瘤血管生成
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益气养阴除结方联合顺铂对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响 被引量：3
9
作者 刘畅 钱彦方 +5 位作者 胡京红 朱宇婷 魏震 张秀霞 赵珈艺 孙红梅 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期823-828,I0010,I0011,共8页
目的探讨益气养阴除结方联合顺铂对肺腺癌细胞（A549细胞）凋亡的影响及其机制。方法选用A549细胞培养,实验分为4组,分别为空白对照组、益气养阴除结方组（简称中药组）、顺铂组、联合组。空白对照组不加药物处理;中药组浓度梯度设定分... 目的探讨益气养阴除结方联合顺铂对肺腺癌细胞（A549细胞）凋亡的影响及其机制。方法选用A549细胞培养,实验分为4组,分别为空白对照组、益气养阴除结方组（简称中药组）、顺铂组、联合组。空白对照组不加药物处理;中药组浓度梯度设定分别为1 000、500、200、100、50、20 mg/L;顺铂组浓度梯度设定分别为4 mg/L和8 mg/L;联合组浓度梯度分别为以上2组之间的组合。应用MTT法检测药物对其增殖的抑制作用;TUNNEL法检测细胞凋亡情况;免疫细胞化学法检测肿瘤细胞Bcl-2及Caspase-3蛋白的表达。结果与空白对照组比较,中药组、顺铂组及联合组的细胞抑制率均有明显增加（P〈0.05~P〈0.001）,其中联合组（中药200 mg/L＋顺铂4mg/L）抑制率最高;各用药组凋亡细胞数量均有明显增加（P〈0.01,P〈0.001）,其中联合组（中药200 mg/L＋顺铂4 mg/L）凋亡细胞数量最多;各用药组bcl-2的表达均降低,其中顺铂组（4 mg/L）、联合组（中药200 mg/L＋顺铂4 mg/L）Bcl-2的表达明显降低（P〈0.01）;各用药组Caspase-3表达的表达均升高,其中中药组（200 mg/L）、联合组（中药200 mg/L＋顺铂4 mg/L）有显著性差异（P〈0.05,P〈0.01）。结论该中药复方能促进A549细胞凋亡抑制肿瘤细胞生长,联合一定浓度顺铂后其效果更明显,其机制可能与抑制Bcl-2和增加Caspase-3的表达有关。 展开更多
关键词 益气养阴除结方 顺铂 人肺腺癌细胞株 细胞凋亡
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清热消积方对人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2表达的影响 被引量：3
10
作者 叶菁 陈培丰 《中华中医药学刊》 CAS 2014年第9期2229-2231,共3页
目的:研究清热消积方对体外培养的人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2表达的影响。方法:将不同浓度清热消积方与人肺腺癌细胞A549作用,用Elisa法检测清热消积方对VEGF及MMP-2蛋白表达水平的影响;PCR法检测清热消积方对VEGF和MMP-2的mRNA水平... 目的:研究清热消积方对体外培养的人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2表达的影响。方法:将不同浓度清热消积方与人肺腺癌细胞A549作用,用Elisa法检测清热消积方对VEGF及MMP-2蛋白表达水平的影响;PCR法检测清热消积方对VEGF和MMP-2的mRNA水平的影响。结果:高、中浓度组清热消积方及清热消积方-5-FU联用组能够明显抑制VEGF及MMP-2蛋白表达,且对VEGF和MMP-2的mRNA水平有抑制作用,呈现一定的剂量依赖性。结论:清热消积方可抑制人肺腺癌细胞A549 VEGF及MMP-2生成,可能是其抗肿瘤血管形成效应的机制之一。 展开更多
关键词 清热消积方 人肺腺癌细胞 VEGF MMP-2
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GANT61阻断Hedgehog信号通道调控肺腺癌A549/DDP细胞耐药的机制研究 被引量：3
11
作者 郑涛 李华 +1 位作者 张黎 张献全 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期927-933,共7页
目的:探讨GANT61阻断Hedgehog信号通道调控肺腺癌A549/DDP细胞增殖、细胞周期及耐药的机制研究。方法:应用CCK8法检测顺铂(DDP)对肺腺癌细胞株A549和A549/DDP的半数抑制浓度(IC50),从而计算A549/DDP细胞的耐药指数;同时采用Western blo... 目的:探讨GANT61阻断Hedgehog信号通道调控肺腺癌A549/DDP细胞增殖、细胞周期及耐药的机制研究。方法:应用CCK8法检测顺铂(DDP)对肺腺癌细胞株A549和A549/DDP的半数抑制浓度(IC50),从而计算A549/DDP细胞的耐药指数;同时采用Western blot检测A549、A549/DDP细胞中Gli1、Ptch1、Shh、XRCC1蛋白的表达水平。用不同浓度的GANT61干预A549/DDP细胞后,CCK8法检测增殖活力。流式细胞术检测GANT61对A549/DDP细胞凋亡率和细胞周期的影响。Western blot检测GANT61对A549/DDP细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响。采用20μmol/L GANT61联合不同浓度的顺铂干预A549/DDP细胞,CCK8法检测各组细胞增殖抑制率变化及Western blot检测各组细胞中XRCC1蛋白的表达水平。结果:A549/DDP细胞的耐药指数为5. 34。A549/DDP细胞与A549细胞相比,Gli1、Ptch1、Shh、XRCC1在蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P <0. 01或P <0. 05)。使用GANT61处理A549/DDP细胞,当其浓度分别≥20μmol/L、≥10μmol/L时,分别培养24 h和72 h,与对照组相比肿瘤细胞增殖活性下降(P<0. 01),且呈现剂量依赖性。GANT61可通过下调c-myc、cyclin D1表达(P<0. 01),阻滞细胞周期于G1期(P<0. 01)。GANT61能够明显诱导A549/DDP细胞发生凋亡(P<0. 05),其分子机制可能与促进caspase-3的剪切活化相关(P<0. 05)。GANT61联合顺铂用药后使A549/DDP细胞抑制率显著增加,呈协同效应,且伴随XRCC1蛋白表达下降(P<0. 01)。结论:Gli1在人肺腺癌耐药细胞A549/DDP中的表达明显高于顺铂敏感株A549,提示Gli1可能与肺腺癌顺铂耐药相关,且XRCC1蛋白在A549/DDP细胞高表达。故采用Gli1抑制剂GANT61能够明显抑制A549/DDP细胞增殖,阻滞细胞周期,并诱导细胞凋亡。体外试验中,GANT61与顺铂联合用药可以协同抑制增殖作用,其机制可能与下调XRCC1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 GANT61 GLI1 人肺腺癌细胞 顺铂耐药
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人参皂苷白蛋白纳米微球对人肺腺癌A549细胞生长抑制作用研究 被引量：2
12
作者 程海鹰 郑定容 《黑龙江医学》 2014年第10期1138-1140,共3页
目的探讨载20(s)-人参皂苷白蛋白纳米微球(SPG-Rg3-HAS-NP)对人肺腺癌A549细胞体外增殖抑制作用。方法以人肺腺癌A549细胞为研究对象,分为A、B、C、D 4个给药组。A组为生理盐水对照组,B组为空白白蛋白纳米微球组,C组为20(s)-人参皂苷Rg3... 目的探讨载20(s)-人参皂苷白蛋白纳米微球(SPG-Rg3-HAS-NP)对人肺腺癌A549细胞体外增殖抑制作用。方法以人肺腺癌A549细胞为研究对象,分为A、B、C、D 4个给药组。A组为生理盐水对照组,B组为空白白蛋白纳米微球组,C组为20(s)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)组,D组为载SPG-Rg3-HAS-NP组。采用MTT法观察给予不同浓度药物后24 h、48 h、72 h和96 h 4个时间点人肺腺癌A549细胞生长抑制率。结果 A组与B组对人肺腺癌A549细胞无细胞毒作用。C组与D组对人肺腺癌A549细胞均具有显著的细胞生长抑制作用,且给药浓度和时间呈一定的浓度依赖性和时间依赖性。C组在80μg/mL浓度以后进入平台期的趋势,而D组的细胞生长曲线仍继续呈上升的趋势,72 h后于20μg/mL浓度处抑制率已超过C组(P<0.05)。结论 SPG-Rg3-HAS-NP具有的缓释作用,对人肺腺癌细胞增殖具有显著的体外细胞生长抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。 展开更多
关键词 20(S)-人参皂苷RG3 白蛋白纳米微球 人肺腺癌 A549细胞 细胞生长抑制
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腺病毒介导ING4或/和P53基因表达对人肺腺癌细胞的生长抑制作用 被引量：2
13
作者 何峰 李帅 +3 位作者 朱霞霞 杨吉成 盛伟华 缪竞诚 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期953-960,共8页
目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用Q... 目的在本室已构建Ad.RGD空载体和Ad.RGD-ING4腺病毒基础上,再构建Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53单双基因重组腺病毒,研究其对人肺腺癌细胞的生长抑制作用。方法 PCR克隆P53基因,构建pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,用QBI-293A细胞进行包装扩增和检测效价。将Ad.RGD、Ad.RGD-ING4、Ad.RGD-P53、Ad.RGD-ING4-P53分别感染A549细胞后,流式细胞仪检测各组重组腺病毒对A549细胞的感染效率。Western blotting检测A549和PC-9细胞中ING4或/和P53蛋白的表达。MTT法检测A549细胞生长,流式细胞仪检测各组A549和PC-9细胞的凋亡率。real-time PCR检测A549细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX及BCL-2 mRNA的表达水平。结果 PCR和酶切鉴定结果表明：成功构建了pAd.RGD-P53和pAd.RGD-ING4-P53同源重组腺病毒质粒,包装扩增后经效价检测可达1×109~1×1010pfu/m L;各组重组腺病毒感染A549细胞后,感染效率可达90%~95%。Western blotting检测结果表明ING4或/和P53蛋白可在A549和PC-9细胞中成功表达。MTT法检测发现ING4或/和P53单双基因重组腺病毒均能明显抑制A549细胞生长,流式细胞仪检测表明ING4或/和P53基因表达均可诱导A549和PC-9细胞凋亡,且Ad.RGD-ING4-P53双基因重组腺病毒组较Ad.RGD-ING4和Ad.RGD-P53单基因组更为明显（P〈0.05）。real-time PCR检测表明腺病毒介导的ING4或/和P53基因表达能够上调A549细胞内Caspase-3、BAX mRNA表达,下调BCL-2 mRNA的表达,且双基因组较单基因组更为明显（P〈0.05）。结论成功构建了Ad.RGD-P53和Ad.RGD-ING4-P53重组腺病毒。各重组腺病毒目的基因表达均能明显抑制人肺腺癌细胞的生长,诱导细胞凋亡,且双基因组较单基因组效果更优,其分子机制可能与细胞内凋亡相关基因Caspase-3、BAX表达上调及BCL-2表达下调有关。 展开更多
关键词 RGD腺病毒 ING4基因 P53基因 人肺腺癌细胞
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流式细胞仪分选侧群细胞条件的探索与优化 被引量：1
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作者 叶惠慧 贾浩源 +6 位作者 张蕾蕾 薛建国 祝源 蒋留留 李里明 许文荣 钱晖 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期30-33,共4页
目的探讨不同浓度的荧光染料(Hoechst 33342)和抑制剂维拉帕米(verapamil)对流式细胞仪分选侧群(SP)细胞的影响。方法实验分为Hoechst 33342组(Hoechst 33342浓度分别为2.5、5.0和7.5μg/mL)和抑制组(Hoechst 33342+verapamil,verapami... 目的探讨不同浓度的荧光染料(Hoechst 33342)和抑制剂维拉帕米(verapamil)对流式细胞仪分选侧群(SP)细胞的影响。方法实验分为Hoechst 33342组(Hoechst 33342浓度分别为2.5、5.0和7.5μg/mL)和抑制组(Hoechst 33342+verapamil,verapamil浓度分别为50、100和150μmol/L),用流式细胞仪分选人肺腺癌细胞系A549中SP细胞,摸索Hoechst 33342和verapamil的最佳浓度,并用本实验室构建的一株肿瘤细胞系K1进行验证。结果在verapamil和Hoechst 33342浓度分别为150μmol/L和7.5μg/mL时,A549细胞染色充分,SP细胞亚群与非SP(non-SP)细胞亚群分群明显,SP细胞约为2.2%。K1细胞在verapamil为50μmol/L和Hoechst 33342为5μg/mL时,SP细胞亚群与non-SP细胞亚群分群明显,SP细胞亚群可被verapamil抑制,其比例约为1.3%。分选后的SP细胞和non-SP细胞可进一步扩增培养。结论 Hoechst 33342和verapamil可影响肿瘤细胞中SP细胞分选效率。 展开更多
关键词 侧群细胞 流式细胞术 肿瘤干细胞 人肺腺癌细胞
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转染白喉毒素基因对人肺腺癌细胞的影响 被引量：1
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作者 李玉光 赵立军 +1 位作者 高东田 张庆芝 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第22期86-88,共3页
目的　探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞 (A5 4 9)的影响。方法　对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA) ,转空载体的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA-)野生型A5 4 9细胞 ,采用MTT法测定四环素作用 72h后的细胞存活率。动物实验 :1... 目的　探讨白喉毒素A基因对人肺腺癌细胞 (A5 4 9)的影响。方法　对转染白喉毒素A基因的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA) ,转空载体的人肺腺癌细胞 (A5 4 9/DTA-)野生型A5 4 9细胞 ,采用MTT法测定四环素作用 72h后的细胞存活率。动物实验 :12只裸鼠随机分为转基因组、空载体组和对照组 ,每组 4只 ,将 1.2× 10 7A5 4 9/DTA细胞 ,A5 4 9/DTA-细胞及野生型A5 4 9细胞分别接种于相应的裸鼠皮下 ,给裸鼠饮含四环素(1μg/ml)的水 ,成瘤后 ,每周 2次测量瘤体大小 ,计算瘤体重量。 结果　A5 4 9/DTA细胞存活率较A5 4 9/DTA-细胞 ,A5 4 9细胞存活率明显下降 (P <0 .0 1) ,而A5 4 9/DTA-细胞与A5 4 9细胞存活率无差别 (P >0 .0 5 )。空载体组与对照组的裸鼠全部长出肿瘤 ,且肿瘤生长迅速 ,而转基因组有 1只裸鼠未长出肿瘤 ,肿瘤生长缓慢 ,前者瘤体的重量是后者的 3倍。结论　体外转染白喉毒素A基因可杀伤人肺腺癌细胞并降低人肺腺癌细胞的致瘤性。 展开更多
关键词 四环素 转染 白喉毒素A基因 人肺腺癌细胞 致瘤性
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腺病毒介导野生型p53基因对人肺腺癌细胞的抑制效应 被引量：1
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作者 牟巨伟 林晨 +2 位作者 邢嵘 王秀琴 吴旻 《内蒙古医学杂志》 2002年第4期291-294,F003,共5页
目的 :p5 3基因突变是人类肿瘤中常见的遗传学改变。将野生型 p5 3基因导入一些肿瘤细胞中被证明能抑制其细胞增殖 ,因此做为肺癌基因治疗主要目的基因而备受关注。本研究旨在观察野生型 p5 3基因对人肺腺癌细胞和裸鼠移植瘤的抑制效应 ... 目的 :p5 3基因突变是人类肿瘤中常见的遗传学改变。将野生型 p5 3基因导入一些肿瘤细胞中被证明能抑制其细胞增殖 ,因此做为肺癌基因治疗主要目的基因而备受关注。本研究旨在观察野生型 p5 3基因对人肺腺癌细胞和裸鼠移植瘤的抑制效应 ,并对其抑癌机制进行分析 ,为今后肺癌基因治疗的临床试验提供科学依据。方法 :采用重组体腺病毒Ad - p5 3基因转染人肺腺癌细胞系GLC - 82 ;以裸鼠皮下移植瘤治疗试验观察Ad - p5 3基因的抑瘤效应 ;用流式细胞计数 ,DNA片断化及TUNEL分析探讨Ad -p5 3基因的抑癌机制。结果 :导入Ad - p5 3基因后人肺腺癌GLC - 82细胞生长能力显著下降 ,克隆形成能力受到明显抑制 ;并显著抑制裸鼠皮下移植瘤的生长 ;肺癌细胞发生凋亡 ,并出现明显的G1期阻滞现象。结论 :腺病毒介导野生型 p5 3基因 (Ad - p5 3)对人肺腺癌细胞和裸鼠皮下移植瘤均有明显抑制效应 ,主要通过诱导癌细胞凋亡和参与细胞周期调控实现 ,进而提示Ad - p5 展开更多
关键词 肺腺癌 腺病毒载体 P53基因 人肺腺癌细胞 基因治疗
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双丁酰环腺苷酸对肺腺癌细胞的诱导分化作用及对其表达的凝集素受体影响
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作者 邱雪杉 王恩华 +1 位作者 赫明昌 宋继谒 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期8-11,共4页
目的：研究双丁酰环腺苷酸（ＤＢｃＡＭＰ）对人肺腺癌细胞的诱导分化作用，及其与癌细胞表达凝集素受体的关系。方法：用双丁酰ｃＡＭＰ作用人肺腺癌细胞ＡＧＺＹ－８３ａ，观察细胞的生长、形态、超微结构的变化；用凝集素组化方法检... 目的：研究双丁酰环腺苷酸（ＤＢｃＡＭＰ）对人肺腺癌细胞的诱导分化作用，及其与癌细胞表达凝集素受体的关系。方法：用双丁酰ｃＡＭＰ作用人肺腺癌细胞ＡＧＺＹ－８３ａ，观察细胞的生长、形态、超微结构的变化；用凝集素组化方法检测双丁酰ｃＡＭＰ对细胞表达凝集素受体的影响。结果：０．３ｍｍｏｌ／Ｌ双丁酰ｃＡＭＰ对癌细胞的生长有明显抑制作用，使细胞间接抑制有所恢复，形态结构向成熟分化；同时使细胞表达的凝集素（ＤＢＡ、ＵＥＡ－１、ｃｏｎＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ）受体降低。结论：双丁酰ｃＡＭＰ对人肺腺癌细胞有诱导分化作用；双丁酰ｃＡＭＰ对癌细胞表达凝集素受体的影响可能在其抑制细胞，恢复细胞识别功能，诱导细胞分化过程中有重要意义。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌细胞 诱导 分化 双丁酰环腺苷酸
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反义T-STAR基因转染降低肺腺癌A549细胞端粒酶活性
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作者 张玲 郭莲 +1 位作者 彭勇 陈兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1127-1129,共3页
目的　通过反义技术抑制肺腺癌A5 49细胞T STAR (testes signaltransductionandactivatorofRNA)基因内源性表达,观察对细胞端粒酶活性的影响。方法　用阳性脂质体法将T STAR反义基因转染入A5 49细胞,用RT PCR及Westernblot方法检测转染... 目的　通过反义技术抑制肺腺癌A5 49细胞T STAR (testes signaltransductionandactivatorofRNA)基因内源性表达,观察对细胞端粒酶活性的影响。方法　用阳性脂质体法将T STAR反义基因转染入A5 49细胞,用RT PCR及Westernblot方法检测转染细胞内源性T STAR基因mRNA和蛋白表达水平,并用PCR ELISA法检测细胞端粒酶活性改变。结果　反义基因可在mRNA及蛋白水平有效抑制肺腺癌A5 49T STAR基因的表达,同时明显降低细胞端粒酶活性。结论　肺腺癌A5 49细胞T STAR基因表达的抑制可能下调端粒酶活性。 展开更多
关键词 细胞端粒酶活性 肺腺癌A549细胞 activator ELISA法检测 T-STAR基因 Western 反义基因转染 RT-PCR 蛋白表达水平 基因mRNA 反义技术 脂质体法 转染细胞 blot 活性改变 蛋白水平 基因表达 内源性 抑制 and
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双丁酰cAMP对人体肺腺癌细胞表面凝集素受体及其侵袭能力的影响
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作者 邱雪杉 王恩华 宋继竭 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期95-98,共4页
着重观察双丁酰ｃＡＭＰ对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响，并将体外经双丁酰ｃＡＭＰ处理的癌细胞接种于裸鼠皮下，观察移植瘤自发性生长状况。结果表明，经双丁酰ｃＡＭＰ处理的人肺腺癌细胞表面ＲＣＡ、ＷＧＡ、Ｕ... 着重观察双丁酰ｃＡＭＰ对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响，并将体外经双丁酰ｃＡＭＰ处理的癌细胞接种于裸鼠皮下，观察移植瘤自发性生长状况。结果表明，经双丁酰ｃＡＭＰ处理的人肺腺癌细胞表面ＲＣＡ、ＷＧＡ、ＵＥＡ－１、ＤＢＡ、ＣｏｎＡ凝集素受体表达降低，同时伴有移植瘤成瘤潜伏期延长，侵袭能力下降。结果提示双丁酰ｃＡＭＰ导致的癌细胞表面数种凝集素受体的表达下降，可能是恢复癌细胞间粘附识别能力。 展开更多
关键词 双丁酰cAMP 人肺腺癌细胞 凝集素受体 诱导分化
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S型与R型人参皂苷Rh_2对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响 被引量：34
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作者 张春晶 于海涛 侯金才 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1670-1674,共5页
目的:探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,以阐述人参活性成分抗肿瘤活性的构效关系及可能机制。方法:采用MTT实验测定细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数,观察人参皂苷Rh... 目的:探讨人参皂苷Rh2(S型与R型)对人肺腺癌A549细胞增殖和凋亡的影响,以阐述人参活性成分抗肿瘤活性的构效关系及可能机制。方法:采用MTT实验测定细胞增殖;碘化丙啶(PI)单染流式细胞仪分析细胞周期中各时期的细胞百分数,观察人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞增殖周期的影响。AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫荧光实验对作为细胞凋亡标志的Caspase-3活性进行测定。结果:人参皂苷Rh2对人肺腺癌A549细胞毒活性明显存在构效关系,其中25 mg.L-1的20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用48 h对肿瘤细胞株A549的增殖抑制率分别为28.5%,33.6%,IC50值分别为33.4,28.5 mg.L-1。20 mg·L-1的20(S)-人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后G0/G1期细胞比例显著高于对照组(P<0.01),S期细胞比例显著低于对照组(P<0.01),G2/M期细胞比例与对照组比较无显著性差异,说明20(S)-人参皂苷Rh2能阻滞细胞周期于G1期。30 mg.L-1的S型和R型人参皂苷Rh2作用A549细胞24 h后,无论是早期还是晚期凋亡率均明显高于正常组细胞(P<0.05),并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,表现出明显的构效效应(P<0.05)。20(R)-人参皂苷Rh2和20(S)-人参皂苷Rh2作用6 h的A549细胞中标记Caspase-3活性的荧光亮度明显增强,说明Caspase-3的激活参与了人参皂苷Rh2诱导的A549细胞凋亡。结论:S型和R型人参皂苷Rh2均可剂量依赖性地抑制A549细胞增殖,并且20(S)-人参皂苷Rh2的抗肿瘤活性明显强于20(R)-人参皂苷Rh2,阻滞细胞周期于G1期,具有构效效应;S型和R型人参皂苷Rh2均具有促进A549细胞凋亡作用,并且20(S)-人参皂苷Rh2组早期凋亡率明显高于20(R)-人参皂苷Rh2组,具有构效效应。 展开更多
关键词 人参皂苷RH2 人肺腺癌A549细胞 细胞周期 凋亡
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