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化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠血管内皮生长因子表达的影响 被引量：10
1
作者 田军彪 赵层闪 +5 位作者 高晶晶 牟萍 万溪 蔡月花 刘学飞 徐丽娟 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期3341-3343,共3页
目的:观察化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠模型血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用改良的线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。采用PCR法检测缺血侧脑组织VEGF表达。结果:模型组VEGF表达含量高于假手术组(P<0.0... 目的:观察化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠模型血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用改良的线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。采用PCR法检测缺血侧脑组织VEGF表达。结果:模型组VEGF表达含量高于假手术组(P<0.05);中药中、高剂量组VEGF表达含量均高于模型组(P<0.05);且中药高剂量组效果优于中药中剂量组(P<0.05);中药低剂量组VEGF表达含量与模型组相比无明显差异。结论:化浊解毒活血通络方可以明显促进脑缺血再灌注损伤大鼠模型VEGF的表达,存在一定的剂量相关性。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 化浊解毒活血通络方 血管内皮生长因子
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基于16S rRNA测序的肠道菌群探讨化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑-肠轴的影响 被引量：10
2
作者 霍瑞卿 赵敏菡 +3 位作者 李芳钊 韩宇帆 孙阔 田军彪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期121-130,共10页
目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群的影响,探讨中药调控肠道微生物群进而恢复脑-肠轴平衡的机制。方法:将50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,化浊解毒活血通络方高(25.0 g·kg^(-1)),中(12.5 g&... 目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠肠道菌群的影响,探讨中药调控肠道微生物群进而恢复脑-肠轴平衡的机制。方法:将50只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,化浊解毒活血通络方高(25.0 g·kg^(-1)),中(12.5 g·kg^(-1)),低(6.25 g·kg^(-1))剂量组,每组10只。参照Longa法并结合既往研究经验制备大脑中动脉梗塞大鼠模型,缺血2 h后再灌注。于脑缺血再灌注损伤72 h检测大鼠神经功能缺损情况、脑梗死范围百分比;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠结肠闭锁小带蛋白-1(ZO-1),闭锁蛋白(Occludin)mRNA表达;苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肠道组织、脑组织损坏程度;每组收集6只大鼠粪便进行16S rRNA测序;免疫组化、酶联免疫吸附测定试验(ELISA)检测肠道组织、外周血、脑组织调节性T细胞(Treg),辅助性T细胞17(Th17)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损症状加重(P<0.05),脑梗死面积增加(P<0.05);与模型组比较,化浊解毒活血通络方高、中剂量组大鼠神经功能缺损症状明显减轻(P<0.05),脑梗死面积减少(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠结肠黏膜结构破坏,上皮细胞、杯状细胞结构不完整;与模型比较,化浊解毒活血通络方高、中剂量组大鼠结肠黏膜破坏较少,上皮细胞、杯状细胞结构完整。与假手术组比较,模型组大鼠Occludin,ZO-1 mRNA表达降低(P<0.05),与模型组比较,化浊解毒活血通络方高剂量组Occludin,ZO-1 mRNA水平均有所增加(P<0.05)。模型组与假手术组肠道菌群微生态结构存在差异,化浊解毒活血通络方高剂量组与假手术组组群落结果更相近。与假手术组比较,模型组大鼠肠道组织、外周血、脑组织Treg细胞表达下降,Th17细胞表达升高(P<0.05);与模型比较,化浊解毒活血通络方高、中剂量组大鼠肠道组织、外周血、脑组织Treg细胞表� 展开更多
关键词 化浊解毒活血通络方 脑缺血再灌注损伤 肠道菌群 16S rRNA 肠道屏障
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化浊解毒活血通络方对大鼠脑缺血再灌注损伤后Caspase-3表达的影响 被引量：8
3
作者 田军彪 高晶晶 +5 位作者 牟萍 万溪 许斐 赵层闪 刘学飞 杨丽静 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期2305-2308,共4页
目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能评分及Caspase-3表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法:采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。运用Longa法进行神经病学评分,用光镜观察脑组织形态学改变,用PCR... 目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能评分及Caspase-3表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法:采用改良线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。运用Longa法进行神经病学评分,用光镜观察脑组织形态学改变,用PCR法检测Caspase-3的表达。结果:模型组及各用药组均出现不同程度的神经功能缺损,模型组Caspase-3表达明显多于假手术组(P<0.05);与模型组相比,中药各组及阿司匹林组组织变性坏死程度轻、Caspase-3阳性细胞减少(P<0.05),中药高剂量组及阿司匹林组神经功能缺损评分显著降低(P<0.05);中药中、高剂量组和阿司匹林组效果优于中药低剂量组(P<0.05)。结论:化浊解毒活血通络方可以通过抑制Caspase-3的阳性表达来抑制细胞凋亡,从而发挥其神经保护作用。 展开更多
关键词 化浊解毒活血通络方 脑缺血再灌注 PCR法 CASPASE-3 神经保护 神经功能缺损
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基于JNK信号通路调控细胞自噬探讨化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤的保护作用 被引量：7
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作者 赵敏菡 储心乔 +5 位作者 曹晓慧 霍瑞卿 孙阔 李芳钊 韩宇帆 田军彪 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期115-125,共11页
目的:研究化浊解毒活血通络方通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路调控神经细胞自噬减轻脑缺再灌注损伤的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞/再灌注(MCAO/R)组(模型组)、化浊解毒活血通络方(中药)组(25.0 g... 目的:研究化浊解毒活血通络方通过c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路调控神经细胞自噬减轻脑缺再灌注损伤的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞/再灌注(MCAO/R)组(模型组)、化浊解毒活血通络方(中药)组(25.0 g·kg^(-1))、JNK抑制剂SP600125(SP)组(5 mg·kg^(-1))、中药+SP组和JNK激动剂Anisomycin(Ani)组(15 mg·kg^(-1))6组。造模24 h后中药组和中药+SP组给予中药汤剂灌胃,连续给药3 d,其余各组灌胃等容积蒸馏水。神经功能评分评估神经功能缺损程度,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色确定脑梗死体积;苏木素-伊红(HE)染色观察脑组织结构变化;尼氏染色检测神经元损伤;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡;透射电镜观察自噬小体超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测脑组织中微管相关蛋白1轻链3A/B(LC3A/B)、自噬相关基因5(Atg5)、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、p62、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、JNK、磷酸化(p)-JNK和c-Jun的蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组大鼠脑组织中LC3A/B、Beclin1、p62、Atg5、Bcl-2、JNK、c-Jun mRNA表达量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分明显升高(P<0.05),脑组织梗死体积明显变大(P<0.05),海马区及其周围脑组织形成典型梗死表现,皮层有大量神经元细胞变性、坏死、液化、固缩和深染,有炎性细胞浸润,电镜下可见炎症细胞浸润,线粒体、溶酶体、自噬体和自噬溶酶体严重肿胀。细胞凋亡情况较重,TUNEL阳性细胞明显增加(P<0.05),脑组织内神经元核膜和核仁模糊,突起不连续,胞质尼氏体色浅且数量减少。Western blot结果显示大鼠脑组织LC3A/B、Beclin1、Atg5、JNK、p-JNK、c-Jun蛋白表达明显升高(P<0.05),p62和Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),Real-time PCR结果显示LC3A/B、Beclin1、Atg5、JNK、c-Jun mRNA表达明显增加(P<0.05),p62、Bcl-2 展开更多
关键词 化浊解毒活血通络方 脑缺血再灌注损伤 自噬 c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路 大脑中动脉阻塞/再灌注(MCAO/R)模型
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化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞自噬相关蛋白的抑制作用 被引量：8
5
作者 赵敏菡 曹晓慧 +5 位作者 霍瑞卿 孙亚萍 孙阔 李芳钊 韩宇帆 田军彪 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1401-1406,共6页
目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞自噬相关蛋白的抑制作用。方法:50只SPF级SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、中药组、抑制剂组、中药+抑制剂组。采用线栓法制备大脑中动脉缺血/再灌注模型,假手术组仅分离血... 目的:研究化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠细胞自噬相关蛋白的抑制作用。方法:50只SPF级SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、中药组、抑制剂组、中药+抑制剂组。采用线栓法制备大脑中动脉缺血/再灌注模型,假手术组仅分离血管不进栓,各组予相应干预。给药3 d后观察各组大鼠神经功能评分,TTC检测脑组织梗死面积,HE染色观察脑组织结构变化,透射电镜观察自噬小体超微结构,Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin1、p62、Atg5的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分显著升高(P<0.05),脑梗死面积显著增大(P<0.05),病理改变严重,电镜下自噬小体、自噬溶酶体清晰可见,LC3、Beclin1、Atg5表达显著升高(P<0.05),P62表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,中药组、抑制剂组和中药+抑制剂组神经功能缺损评分均显著降低(P<0.05),脑梗死面积显著缩小(P<0.05),脑组织病理状态有所改善,电镜下细胞核核膜轻度融合,自噬小体、自噬溶酶体可见但数量较少,LC3、Beclin1、Atg5表达显著降低(P<0.05),P62表达显著升高(P<0.05)。结论:化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤有改善作用,可能与抑制细胞自噬,上调LC3、Beclin1、Atg5蛋白的表达,下调P62蛋白水平有关。 展开更多
关键词 化浊解毒活血通络方 脑缺血再灌注损伤 自噬 LC3 BECLIN1 Atg5 P62 缺血性脑卒中
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化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化损伤和炎症因子的影响 被引量：2
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作者 曹晓慧 赵敏菡 +4 位作者 霍瑞卿 孙亚萍 谢占维 石瑞 田军彪 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1979-1984,共6页
目的:观察化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其抗氧化、抗炎性损伤的作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,中药高、中、低剂量组,每组10只。采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞/再灌注大鼠模型... 目的:观察化浊解毒活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其抗氧化、抗炎性损伤的作用机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组,中药高、中、低剂量组,每组10只。采用改良线栓法制备大脑中动脉阻塞/再灌注大鼠模型,造模24 h后,中药高、中、低剂量组给予相应浓度化浊解毒活血通络方灌胃,连续给药14 d,假手术组和模型组灌胃等体积蒸馏水。观察各组大鼠一般情况,记录大鼠体质量;评定神经功能缺损程度;HE染色观察脑组织结构变化;免疫荧光检测梗死侧脑组织活性氧(ROS)含量;比色法检测大鼠血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠一般情况较差,取材前体质量显著下降(P<0.05),神经功能缺损评分显著升高(P<0.05),梗死侧脑组织有大量细胞变形、坏死、液化,伴有炎症细胞浸润,脑组织ROS荧光范围和强度明显增加,血清MDA、IL-1β和IL-18含量均显著升高(P<0.05),SOD活性显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠一般情况有所改善,取材前体质量显著增加(P<0.05),中药高剂量组神经功能缺损评分显著下降(P<0.05),各给药组脑组织病理状态有所改善,脑组织ROS荧光范围均有所减少,荧光强度均有不同程度的减弱,各给药组血清MDA含量均显著下降(P<0.05),中药高、中剂量组SOD活性显著提升(P<0.05),血清IL-1β和IL-18含量均显著下降(P<0.05)。结论:化浊解毒活血通络方可能通过减少大鼠脑组织ROS含量和血清MDA含量,增加SOD活性,减少脑组织炎症细胞浸润和炎症因子IL-1β、IL-18的表达而发挥脑保护作用,且药物剂量与疗效总体呈现量效关系。 展开更多
关键词 化浊解毒活血通络方 脑缺血再灌注损伤 活性氧 超氧化物歧化酶 丙二醛 白细胞介素-1Β 白细胞介素-18
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