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BIX-01294对肝癌细胞周期、凋亡及移植瘤的影响
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作者 寇丹 杨兴祥 +5 位作者 刘冰 孙宏 刘仁伟 林剑 蒋奕 彭思璐 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第4期634-638,共5页
目的:探究组蛋白甲基转移酶G9a抑制剂(BIX-01294)对肝癌细胞周期、凋亡及移植瘤的影响。方法:将SMMC-7721、BEL-7402、HL-7702原始细胞株传代培养后,分为空白对照组和不同浓度(1μM、5μM、10μM、20μM)BIX-01294处理组。应用Western-b... 目的:探究组蛋白甲基转移酶G9a抑制剂(BIX-01294)对肝癌细胞周期、凋亡及移植瘤的影响。方法:将SMMC-7721、BEL-7402、HL-7702原始细胞株传代培养后,分为空白对照组和不同浓度(1μM、5μM、10μM、20μM)BIX-01294处理组。应用Western-blot法检测G9a及肝癌细胞内凋亡蛋白CC3、C-PARP、Bax、Bcl-2表达水平;应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度BIX-01294处理SMMC-7721、BEL-7402细胞24、48、72、96 h后的细胞增殖情况;应用流式细胞术检测不同浓度的BIX-01294处理肝癌细胞96h后细胞周期分布情况;移植瘤试验21 d后测量裸鼠体内肿瘤体积及重量,并检测瘤体内H3K9me2的蛋白水平。结果:G9a在肝癌细胞SMMC-7721、BEL-7402中表达水平高于HL-7702细胞(P<0.05)。不同浓度的BIX-01294对SMMC-7721细胞和BEL-7402细胞增殖具有抑制作用,且具有时间依赖性和剂量依赖性(均P<0.05)。不同浓度BIX-01294处理细胞96h后,SMMC-7721细胞和BEL-7402细胞G0/G1期细胞比例增加,S和G_(2)/M期的细胞比例降低(P<0.05)。5μM BIX-01294处理细胞96h后能明显增加CC3、Bax、C-PARP表达水平,并降低Bcl-2的表达水平(P<0.05),与空白对照组相比,BIX-01294处理组裸鼠肿瘤体积减小,重量较低,且肿瘤组织内H3K9me2的表达水平下降(P<0.05)。结论:BIX-01294导致SMMC-7721、BEL-7402细胞发生周期阻滞和凋亡,且对肿瘤的生长具有明显的抑制作用,其可能是通过抑制G9a的表达从而降低H3K9me2的表达来抑制肿瘤的生长。 展开更多
关键词 组蛋白甲基转移酶 肝癌 增殖 凋亡 BIX-01294
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组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶在卵巢癌中作用研究进展 被引量:5
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作者 屈函 董科显 傅松滨 《中华实用诊断与治疗杂志》 2021年第8期854-856,共3页
卵巢癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤,患者病死率高,近年来发病率有上升趋势。卵巢癌具有发现晚、易复发和耐药等特点,寻找有效的治疗方法有重要意义。组蛋白甲基化是一种表观遗传修饰,由组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶共同调控。组蛋白甲... 卵巢癌是女性生殖系统常见恶性肿瘤,患者病死率高,近年来发病率有上升趋势。卵巢癌具有发现晚、易复发和耐药等特点,寻找有效的治疗方法有重要意义。组蛋白甲基化是一种表观遗传修饰,由组蛋白甲基转移酶和去甲基化酶共同调控。组蛋白甲基化修饰异常与肿瘤的发生、发展密切相关,探讨组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶在卵巢癌中的作用对卵巢癌的靶向治疗有重要意义。本文就组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶在卵巢癌中作用及组蛋白甲基化修饰酶抑制剂在卵巢癌中临床应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 卵巢癌 组蛋白甲基转移酶 组蛋白去甲基化酶 组蛋白甲基化 抑制剂
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敲除里氏木霉hkmt基因可增强纤维素酶的酶活性和表达水平 被引量:1
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作者 张珂珂 周娇娇 +4 位作者 佘炜怡 高云雨 邓嘉雯 谢宁 田生礼 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期174-181,共8页
表观遗传是不涉及DNA序列变化的可遗传变化,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和miRNA调控等。在组蛋白甲基化修饰中,主要是组蛋白赖氨酸甲基转移酶(histone lysine methyltransferase,HKMT)参与调控。有文献报道,HKMT蛋白的催化核心为SET结构... 表观遗传是不涉及DNA序列变化的可遗传变化,包括DNA甲基化、组蛋白修饰和miRNA调控等。在组蛋白甲基化修饰中,主要是组蛋白赖氨酸甲基转移酶(histone lysine methyltransferase,HKMT)参与调控。有文献报道,HKMT蛋白的催化核心为SET结构域,它具有促进或抑制基因表达的作用。在里氏木霉(Trichoderma reesei)中,HKMT对纤维素酶基因的表达调控的机制尚不明确。本文阐述了以里氏木霉为研究对象,利用Split-Maker技术构建了组蛋白赖氨酸甲基转移酶基因敲除表达盒,并转化了里氏木霉T.reesei QM9414。经PCR及Southern印迹验证正确后,显微镜观察到T.reeseiΔhkmt菌株菌丝较长,分支较多。检测到突变体菌株连续7d滤纸酶活(filter paper enzyme activity,AFP)和羧甲基纤维素钠酶活(carboxymethyl cellulose sodium enzyme activity,CMCA)。结果分别比野生型菌株高出5.00 IU·mL-1、15.00 IU·mL-1。利用RT-qPCR检测到突变菌株纤维素酶及其相关基因cbh1、egl1和xyr1的表达分别高出野生型4.51、3.87和2.51倍。通过对野生型菌株和突变菌株形态特征、纤维素酶酶活性、纤维素酶相关基因表达量的探索,为进一步研究里氏木霉表观遗传调控对纤维素酶表达的影响提供了新思路和实验资料。 展开更多
关键词 表观遗传 组蛋白赖氨酸甲基转移酶 里氏木霉 基因敲除 突变体
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