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郑州与北京地区HCV5′-非编码区酶切基因分型对比研究 被引量：1
1
作者 许青田 李新月 +2 位作者 熊飞升 杜绍财 陶其敏 《中国误诊学杂志》 CAS 2002年第12期1770-1772,共3页
目的　探讨郑州与北京地区丙型肝炎病毒 (HCV)基因型分布情况。方法　分别对郑州地区的 90例抗 -HCV阳性献血员及北京地区 2 6 9例肝炎患者血清采用逆转录套式聚合酶链反应 (RT- nested- PCR)进行 HCV RNA检测 ,其中郑州地区 80例呈 HCV... 目的　探讨郑州与北京地区丙型肝炎病毒 (HCV)基因型分布情况。方法　分别对郑州地区的 90例抗 -HCV阳性献血员及北京地区 2 6 9例肝炎患者血清采用逆转录套式聚合酶链反应 (RT- nested- PCR)进行 HCV RNA检测 ,其中郑州地区 80例呈 HCV RNA阳性 ,北京地区 5 6例呈 HCV RNA阳性 ,并对两地区病例的阳性 PCR产物进行5′-非编码区 (5′- NCR)酶切基因分型。结果　郑州地区 HCV 型感染 5 5例 (6 8.8% ) ,HCV 型感染 2 1例 (2 6 .2 % ) ,HCV / 型混合感染 4例 (5 .0 % )。北京地区 HCV 型感染 4 9例 (87.5 % ) ,HCV 型感染 7例 (12 .5 % ) ,无 HCV / 型混合感染。结论　 HCV 型感染是郑州地区的优势株 ,其次是 HCV 型 , / 型混合感染较少见。而北京地区主要以 HCV 型为主 ,HCV 型感染少见。 展开更多
关键词 郑州 北京 HcV5′-非编码区 基因分型 逆转录聚合酶链反应 丙型肝炎病毒 酶切法
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酵母双杂交技术筛选克隆HCV核心蛋白结合蛋白基因1 被引量：66
2
作者 李克 王琳 +12 位作者 成军 张玲霞 段惠娟 陆荫英 杨继珍 刘妍 洪源 夏小兵 王刚 董菁 李莉 钟彦伟 陈菊梅 《世界华人消化杂志》 CAS 2001年第12期1379-1383,共5页
目的克隆与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白结合的肝细胞中的未知蛋白基因。方法应用酵母双杂交系统3.构建HCV核心蛋白诱饵质粒,转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出30个阳性克隆,对既... 目的克隆与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白结合的肝细胞中的未知蛋白基因。方法应用酵母双杂交系统3.构建HCV核心蛋白诱饵质粒,转化酵母AH109后与含文库质粒的酵母Y187进行配合,在营养缺陷培养基上进行双杂交筛选。筛选出30个阳性克隆,对既能在4缺营养缺陷培养基上生长(SD/-Trp-Leu-Ade-His)又能在涂有X-α-半乳糖(X-α-gal)的四缺培养平皿上长出蓝色菌落,提取此酵母克隆的质粒转化大肠杆菌后进行测序,进行生物信息学分析.将HCV核心蛋白基因分为大、中、小三段,与所克隆的未知功能基因回交,以证实其相互作用的部位。结果分析的结果显示,其中1号克隆的测序结果与GenBank中的1个未知功能序列有99％的同源性,初步证明了此基因与HCV核心蛋白有结合活性(GenBank号:AY032593).HCV核心蛋白的全长、2/3,1/3三段,回交显示三段均能在酵母中与此未知基因具有结合作用。结论 HCV核心蛋白结合蛋白肝细胞基因克隆成功,核心蛋白与此未知基因的作用部位应是氨基端.此项研究结果,为以后研究此基因在HCV致病机制以及在肝细胞中的生理功能提供了线索。 展开更多
关键词 c型肝炎样病毒属 遗传学 病毒蛋白质类 遗传学 病毒基因 分子克隆 遗传学技术
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