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肝素结合生长因子Midkine基因在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化
被引量：
2
1
作者
吴晓冬
薛立娟
+2 位作者
杨绍娟
朱辉
王维忠
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期346-349,共4页
目的:用基因工程的方法构建、表达和纯化人肝素结合生长因子humanMidkine(hMK),并进行活性测定。方法:利用RTPCR技术从胎儿肾组织中扩增MK,将去除信号肽序列的hMK插入pET30a,构建成表达载体pEThMK,经表达和亲和层析、纯化获得目的蛋白,3...
目的:用基因工程的方法构建、表达和纯化人肝素结合生长因子humanMidkine(hMK),并进行活性测定。方法:利用RTPCR技术从胎儿肾组织中扩增MK,将去除信号肽序列的hMK插入pET30a,构建成表达载体pEThMK,经表达和亲和层析、纯化获得目的蛋白,3HTdR法测定活性。结果:hMK序列与Genebank发表的人MK基因编码序列一致,SDS-PAGE电泳显示表达出目的蛋白,3HTdR法测定有良好的活性。结论:人MK已被转入表达载体中,并在大肠杆菌中诱导表达,获得了hMK的表达菌株。
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关键词
肝素结合生长因子
克隆
表达
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职称材料
题名
肝素结合生长因子Midkine基因在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化
被引量：
2
1
作者
吴晓冬
薛立娟
杨绍娟
朱辉
王维忠
机构
吉林大学中日联谊医院中心实验室
吉林大学第一临床医院神经内科
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期346-349,共4页
基金
吉林省卫生厅资助项目(2001年编号039)
文摘
目的:用基因工程的方法构建、表达和纯化人肝素结合生长因子humanMidkine(hMK),并进行活性测定。方法:利用RTPCR技术从胎儿肾组织中扩增MK,将去除信号肽序列的hMK插入pET30a,构建成表达载体pEThMK,经表达和亲和层析、纯化获得目的蛋白,3HTdR法测定活性。结果:hMK序列与Genebank发表的人MK基因编码序列一致,SDS-PAGE电泳显示表达出目的蛋白,3HTdR法测定有良好的活性。结论:人MK已被转入表达载体中,并在大肠杆菌中诱导表达,获得了hMK的表达菌株。
关键词
肝素结合生长因子
克隆
表达
Keywords
heparin-binding growth factor
midkine
Clone
Gene
expression
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
肝素结合生长因子Midkine基因在大肠杆菌中的克隆、表达和纯化
吴晓冬
薛立娟
杨绍娟
朱辉
王维忠
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
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