-
题名人肝肿瘤细胞的裸小鼠原位癌建模条件优化及评价
- 1
-
-
作者
孟雨
梁冬丽
郑琳琳
周园园
王朝霞
-
机构
上海交通大学生命科学技术学院
上海交通大学实验动物中心
-
出处
《实验动物与比较医学》
CAS
2024年第5期511-522,共12页
-
文摘
目的优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件,并探索适宜的给药治疗时间。方法选用稳定表达萤光素酶报告基因(LUC)的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株,使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞数量之间的线性相关性,验证人源肝肿瘤细胞的发光效率。在5周龄雌性BALB/c裸小鼠的肝叶原位接种不同浓度(8×10^(6)、2.4×10^(7)、7.2×10^(7)个/mL)、不同重悬介质(PBS、Matrigel)的人肝肿瘤细胞悬液HepG2-LUC和Hep3B-LUC(共12组,每组7只),分别构建人肝肿瘤裸小鼠原位癌模型。每7 d为1个周期记录各组小鼠体重,用小动物活体成像系统定期监测原位肿瘤的生长过程,观察肿瘤生长趋势。接种肿瘤细胞后第35天剖取小鼠肝脏,制备病理切片,进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织病理学变化。结果两种人肝肿瘤细胞株的发光强度均与细胞数量呈正相关(R^(2)=0.9831,R^(2)=0.9705),适宜用于原位癌模型的构建。HepG2-LUC高浓度组,HepG2-LUC+Matrigel低、中、高浓度组,Hep3B-LUC中、高浓度组与Hep3B-LUC+Matrigel低、中、高浓度组均成功造模。HepG2-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重显著下降(P<0.05),Hep3B-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重也显著下降(P<0.05)。成功造模组小鼠的荧光发光强度随时间呈指数型增长(R^(2)>0.9500),且在移植后14 d发光强度至少可达到1.0×10^(7) p/(s·cm^(2)·sr)。HepG2-LUC低、中浓度组和Hep3B-LUC低浓度组小鼠肝脏未见明显的病理学变化,其余组肝脏肿瘤和肝细胞病变明显。结论对于HepG2-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射2.4×10^(7)个/mL(50μL)且与Matrigel重悬的混合细胞液体造模,并于造模后第7天给药或采取预后措施;而对于Hep3B-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射7.2×10^(7)个/mL(50μL)(不与Matrigel重悬混合)造模,并于造模后�
-
关键词
肝癌
原位移植
hepg2-luc
Hep3B-luc
BALB/C裸小鼠
-
Keywords
Liver cancer
Orthotopic transplantation
hepg2-luc
Hep3B-luc
BALB/c nude mice
-
分类号
R73-3
[医药卫生—肿瘤]
Q95-33
[医药卫生—临床医学]
-
