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题名苜蓿夜蛾促前胸腺激素基因的克隆与原核表达
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作者
周夏
郭博智
高艳玲
赵奎军
樊东
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机构
东北农业大学农学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期144-150,共7页
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基金
国家现代农业产业技术体系建设专项基金项目(CARS-04)
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文摘
促前胸腺激素(Prothoracicotropic hormone,PTTH)是一类重要的昆虫激素,它对昆虫生长、蜕皮、变态、滞育具有重要调控作用。以苜蓿夜蛾5龄幼虫为材料提取总RNA,利用RT-PCR和RACE技术,扩增得到苜蓿夜蛾促前胸腺激素基因的cDNA序列,该序列含有823个碱基,包括1个681个碱基的开放阅读框,编码1个含226个氨基酸的蛋白,分子量约为26.3 kD,等电点为8.51。序列分析表明,苜蓿夜蛾PTTH的氨基酸序列与其他昆虫,尤其是鳞翅目夜蛾科昆虫的PTTH高度同源。获得的基因已登录GenBank,登录号为JF731347。利用原核表达载体pET21b在大肠杆菌中成功表达了苜蓿夜蛾PTTH基因,并用Ni-NTA亲和层析柱将带His-tag的目的蛋白进行纯化。
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关键词
苜蓿夜蛾
促前胸腺激素
基因序列克隆
原核表达
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Keywords
heliothis viriplaca prothoracicotropic hormone cdna cloning prokaryotic expression
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分类号
S433.4
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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