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洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律研究 被引量：13
1
作者 孙化鹏 阮琴妹 +2 位作者 曹雄军 李佳银 钟晓红 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第16期2916-2920,共5页
目的以洋常春藤Hedera helix 1年生扦插苗为材料,通过检测不同部位及1年生长周期内4种常春藤皂苷类化合物(α-常春藤皂苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B和常春藤皂苷D)的量,分析洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律,以期为确定药用洋常春藤... 目的以洋常春藤Hedera helix 1年生扦插苗为材料,通过检测不同部位及1年生长周期内4种常春藤皂苷类化合物(α-常春藤皂苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷B和常春藤皂苷D)的量,分析洋常春藤皂苷类化合物代谢累积规律,以期为确定药用洋常春藤原料的合理采收时间提供理论依据。方法实验通过合理设计洋常春藤材料的采样方法,采用HPLC法测定常春藤皂苷类化合物量。结果洋常春藤不同部位皂苷类化合物量测定结果为老叶>新叶>茎>根,并且在一年的生长周期内,不同常春藤皂苷类化合物在不同采样部位中的动态累积规律均有所不同。结论洋常春藤叶片和茎均可作为高质量药用原料的采收部位,且叶片的最适宜采收时期为3月份开始的生长发育期,而茎的适宜采收时期则可以从3月份开始的生长发育期持续到低温休眠开始前的11月份。 展开更多
关键词 洋常春藤 皂苷类化合物 不同生长期 累积规律 合理采收时期 α-常春藤皂苷 常春藤皂苷C 常春藤皂苷B 常春藤皂苷D
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一测多评法测定洋常春藤及其提取物中4个主要皂苷类成分 被引量：3
2
作者 倪力军 丁璐 +4 位作者 张立国 栾绍嵘 金汉台 朱美鹏 金志文 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期986-996,共11页
目的:建立洋常春藤及其提取物中常春藤萜苷C、α-常春藤素、常春藤萜苷D、常春藤皂苷B等4个主要皂苷成分一测多评定量检测法。方法:以常春藤萜苷C为参照成分,建立该成分与α-常春藤素、常春藤萜苷D、常春藤皂苷B的相对校正因子,采用校... 目的:建立洋常春藤及其提取物中常春藤萜苷C、α-常春藤素、常春藤萜苷D、常春藤皂苷B等4个主要皂苷成分一测多评定量检测法。方法:以常春藤萜苷C为参照成分,建立该成分与α-常春藤素、常春藤萜苷D、常春藤皂苷B的相对校正因子,采用校正因子计算这3个常春藤皂苷的含量。考察不同品牌色谱仪、色谱柱、检测波长、柱温、流速下各相对校正因子的变化,评价各校正因子的耐用性。分别采用外标法和所建立的一测多评法测定23批洋常春藤及30批提取物中4个皂苷类成分含量并比较两者的差异,以评价"一测多评"法的准确性。结果:23批洋常春藤中α-常春藤素、常春藤皂苷B、常春藤萜苷D的"一测多评"法测得含量与外标法结果之比分别为(100.56±0.29)%、(99.37±0.32)%、(99.52±0.18)%,30批提取物中相应成分2种方法的比值分别为(100.86±0.87)%、(99.84±0.02)%、(99.84±0.03)%;药材及提取物中2种方法所对应上述皂苷成分的相对偏差RE分别在0.10%~3.28%、0.12%~1.53%、0.11%~0.83%之间;3个常春藤皂苷的相对校正因子在不同仪器、不同色谱柱、不同检测波长、不同柱温及不同流速下的RSD分别为1.1%~3.6%、1.6%~2.0%、0.47%~3.1%、1.5%~2.9%与0.55%~2.5%,耐用性良好。结论:本文所建常春藤皂苷成分同时定量的一测多评方法准确度高、重复性及耐用性好,可用于洋常春藤及其提取物质量的常规检验与快速分析。 展开更多
关键词 一测多评 洋常春藤 常春藤提取物 常春藤皂苷 相对校正因子 耐用性评价
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洋常春藤及其栽培品种的HPLC-UV指纹图谱和质量评价研究 被引量：5
3
作者 孙化鹏 阮琴妹 +2 位作者 吴易雄 刘坤 钟晓红 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期2794-2799,共6页
目的通过建立洋常春藤及其栽培品种中皂苷类化合物的HPLC-UV指纹图谱,采用聚类分析和主成分分析方法进行统计学分析研究,同时结合标定化合物的测定,以期为常春藤属植物的药用质量评价提供参考。方法 Unitary C18色谱柱（250mm×4.6 ... 目的通过建立洋常春藤及其栽培品种中皂苷类化合物的HPLC-UV指纹图谱,采用聚类分析和主成分分析方法进行统计学分析研究,同时结合标定化合物的测定,以期为常春藤属植物的药用质量评价提供参考。方法 Unitary C18色谱柱（250mm×4.6 mm,5μm）;流动相为乙腈（A）-0.2%磷酸水溶液（B）;二元高压梯度洗脱;检测波长205 nm;体积流量1 m L/min;进样量20μL;柱温25℃。结果采用＂中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2004A）＂标定了17份常春藤属样品的12个共有指纹峰,计算其相似度在0.715～0.992;通过聚类分析和主成分分析结果初步判断洋常春藤的综合药用质量要优于其他品种。结论建立的方法能够成功应用于筛选高质量的常春藤原料以及进行洋常春藤及其栽培品种药材的质量评价与控制,同时可为制定洋常春藤及其栽培品种药用质量评价研究提供新的参考依据。 展开更多
关键词 洋常春藤 皂苷类化合物 指纹图谱 聚类分析 主成分分析 药用质量评价
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洋常春藤β-AS基因的全长克隆与表达分析 被引量：4
4
作者 孙化鹏 钟晓红 +1 位作者 徐子健 乔飞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期733-739,共7页
β-香树素合成酶(β-AS)是三萜皂苷生物合成途径中关键酶基因,可以催化形成齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的骨架结构。本研究利用RACE克隆技术克隆并分析了洋常春藤中的β-AS基因,结果表明:洋常春藤β-AS基因的c DNA全长2784 bp,命名为Hh... β-香树素合成酶(β-AS)是三萜皂苷生物合成途径中关键酶基因,可以催化形成齐墩果烷型三萜皂苷类化合物的骨架结构。本研究利用RACE克隆技术克隆并分析了洋常春藤中的β-AS基因,结果表明:洋常春藤β-AS基因的c DNA全长2784 bp,命名为Hhβ-AS(Gen Bank登录号:KU942522),其包含编码763个氨基酸的开放阅读框。预测该基因编码的蛋白质分子量为87.8 k D,理论等电点为5.94。经过氨基酸序列比对,结果表明洋常春藤中的β-AS与刺楸的β-AS同源性最高,达到96%。通过RT-q PCR分析Hhβ-AS基因在洋常春藤中的时空表达规律,表明Hhβ-AS基因与常春藤皂苷含量之间存在明显的正相关性,为探讨其在常春藤皂苷生物合成途径中的作用以及深入的研究该基因的分子调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 洋常春藤 β-AS基因 常春藤皂苷 表达分析
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超高效液相色谱法同时测定洋常春藤中8种成分含量 被引量：4
5
作者 倪力军 文丹瑶 +5 位作者 胡甜甜 高丽丽 胡江宁 金汉台 金志文 张立国 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1369-1373,1378,共6页
建立了同时测定洋常春藤中绿原酸、隐绿原酸、芦丁、烟花苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷D、常春藤皂苷B和α-常春藤皂苷8种成分的超高效液相色谱法(UHPLC)。以80%甲醇为溶剂,将药材粉末于85℃、料液比1∶100条件下水浴回流1 h,制备供试品... 建立了同时测定洋常春藤中绿原酸、隐绿原酸、芦丁、烟花苷、常春藤皂苷C、常春藤皂苷D、常春藤皂苷B和α-常春藤皂苷8种成分的超高效液相色谱法(UHPLC)。以80%甲醇为溶剂,将药材粉末于85℃、料液比1∶100条件下水浴回流1 h,制备供试品溶液;采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus-C 18(2.1 mm×100 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱。结果表明,上述8种成分均获得良好的分离度;仪器精密度、方法重复性的相对标准偏差(RSD)均小于3.0%;样品溶液在室温条件下24 h内稳定;8种成分在对应质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.9995),检出限为0.40~10.58μg·mL^-1,定量下限为1.31~34.61μg·mL^-1,平均回收率为97.3%~108%,RSD(n=6)为0.51%~3.2%。该方法适用于洋常春藤中上述8种化学成分的定量分析。 展开更多
关键词 洋常春藤 超高效液相色谱(UHPlC) 常春藤皂苷 有机酸 黄酮类化合物
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洋常春藤HMGS基因克隆与表达分析 被引量：4
6
作者 孙化鹏 钟晓红 +1 位作者 徐子健 乔飞 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期3453-3459,共7页
3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶（HMGS）是MVA途径中的关键酶基因,其作用主要是催化乙酰辅酶A和乙酰乙酰辅酶A缩合成3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-Co A）。为分析洋常春藤HMGS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的功能及调控机制,本研... 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合成酶（HMGS）是MVA途径中的关键酶基因,其作用主要是催化乙酰辅酶A和乙酰乙酰辅酶A缩合成3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A（HMG-Co A）。为分析洋常春藤HMGS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的功能及调控机制,本研究利用RACE克隆技术克隆获得了洋常春藤HMGS基因c DNA全长序列并进行了生物信息学分析。结果表明：洋常春藤HMGS基因的c DNA全长1 751bp,命名为Hh HMGS（Gen Bank登录号：KX056075）,其包含编码468个氨基酸的开放阅读框。预测该基因编码的蛋白质分子量为52.0 k D,理论等电点为5.99。氨基酸序列比对结果表明,洋常春藤中的HMGS与人参的HMGS同源性最高,达到95%。通过RT-q PCR分析Hh HMGS基因在洋常春藤中的时空表达规律,结果表明Hh HMGS基因与常春藤皂苷含量之间并未呈现出相关性。本研究为探讨HMGS基因在常春藤皂苷生物合成途径中的作用以及深入的研究该基因的分子调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 洋常春藤 HMGS基因 常春藤皂苷 表达分析
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