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幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合蛋白表达的研究 被引量：1
1
作者 冉向阳 邹全明 +1 位作者 毛旭虎 王缚鲲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期41-45,共5页
目的　获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位 (HspA)的融合蛋白。方法　PCR扩增ltB和hspA基因 ,依次构建至表达载体pIM 1,转化大肠杆菌 ,SDS PAGE、免疫印迹分析目的蛋白表达情况。采用GM1 EL... 目的　获得大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 (LTB)与幽门螺杆菌保护性抗原热休克蛋白A亚单位 (HspA)的融合蛋白。方法　PCR扩增ltB和hspA基因 ,依次构建至表达载体pIM 1,转化大肠杆菌 ,SDS PAGE、免疫印迹分析目的蛋白表达情况。采用GM1 ELISA和D(+) 半乳糖亲和层析方法检测重组LTB HspA融合蛋白LTB组分与GM1 神经节苷脂结合活性。结果　重组LTB HspA融合蛋白表达量最高可达细菌总蛋白的 2 5 %。免疫印迹检测结果证实为重组LTB HspA融合蛋白。GM1ELISA和D(+) 半乳糖亲和层析方法检测结果证实重组LTB HspA融合蛋白具有与GM1 神经节苷脂结合的活性。结论　LTB HspA融合蛋白的表达研究 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 热休克蛋白A亚单位 大肠杆菌不耐热毒素B亚单位 融合蛋白 重组表达
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重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化 被引量：1
2
作者 冉向阳 邹全明 +2 位作者 毛旭虎 田文标 王缚鲲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期539-542,共4页
目的　在大肠杆菌中高效表达幽门螺杆菌的热休克蛋白A基因 (hspA) ,并对其初步纯化。 方法　用巢式PCR扩增hspA基因。经测序证实后 ,克隆于表达载体 pIM 1中 ,转化大肠杆菌。以SDS PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达 ,并测定N 端氨基酸... 目的　在大肠杆菌中高效表达幽门螺杆菌的热休克蛋白A基因 (hspA) ,并对其初步纯化。 方法　用巢式PCR扩增hspA基因。经测序证实后 ,克隆于表达载体 pIM 1中 ,转化大肠杆菌。以SDS PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达 ,并测定N 端氨基酸的序列。采用固相镍离子亲和层析 ,对重组hspA进行初步纯化。结果　扩增的hspA基因为 35 7bp ,并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达。重组蛋白的表达量最高可达细菌总蛋白的 6 0 .5 %。免疫印迹及氨基酸测序结果证实 ,表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位。固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为 87.8%。结论　hspA亚单位的高效表达与初步纯化 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 热休克蛋白A亚单位 重组表达 纯化 SDS-PAGE 免疫印迹
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幽门螺杆菌热休克蛋白B亚单位的克隆和序列分析 被引量：2
3
作者 董勇前 陈翠萍 +2 位作者 谢贵林 王秉瑞 马清钧 《微生物学免疫学进展》 2002年第2期26-28,共3页
幽门螺杆菌是消化道疾病的主要致病菌。其有效抗原成份热休克蛋白B亚单位 (HspB)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用高保真PCR扩增系统扩增出HspB基因片段 ,将其克隆至质粒PUC19中 ,对其全序列进行了测定。克隆的HSpB基因序列与报道的... 幽门螺杆菌是消化道疾病的主要致病菌。其有效抗原成份热休克蛋白B亚单位 (HspB)可刺激机体产生保护性的免疫反应。用高保真PCR扩增系统扩增出HspB基因片段 ,将其克隆至质粒PUC19中 ,对其全序列进行了测定。克隆的HSpB基因序列与报道的序列完全一致。这一研究获得了序列正确的HspB基因 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 热休克蛋白B亚单位 克隆 序列分析
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