逆灸对心肌缺血再灌注损伤大鼠HSP70的影响 被引量：12

1

作者 孙忠人 王一茗 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第7期1382-1383,共2页

目的:观察逆灸对心肌缺血再灌注损伤大鼠HSP70表达的影响,并与缺血预处理的效果进行比较,探讨逆灸有效性和对心肌的保护机制。方法:①选用健康Wistar大鼠30只,雄性,体重(250±20)g,随机分成5组:正常对照组、假手术组、心肌缺血再灌... 目的:观察逆灸对心肌缺血再灌注损伤大鼠HSP70表达的影响,并与缺血预处理的效果进行比较,探讨逆灸有效性和对心肌的保护机制。方法:①选用健康Wistar大鼠30只,雄性,体重(250±20)g,随机分成5组:正常对照组、假手术组、心肌缺血再灌注组(IR组)、心肌缺血预处理组(IP组)、逆灸组,每组6只。②免疫组织化学法检测大鼠心肌组织HSP70表达。③计量资料差异比较采用spss16.0软件统计。结果:逆灸"内关""膻中"穴可明显增加心肌缺血再灌注损伤型大鼠心肌组织中HSP70的表达,与IR组比较差异显著(P<0.05),且与IP组无显著差异(P>0.05)。结论:逆灸与缺血预处理均可增加HSP70的表达,减轻心肌缺血再灌注对心肌造成的损伤,丰富了"治未病"理论。 展开更多

关键词 心肌缺血 逆灸 hspto 缺血预处理

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烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯对烟粉虱地中海隐种hsp70 mRNA的诱导表达 被引量：11

2

作者 郭雅洁 梁沛 高希武 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期29-38,共10页

为深入理解杀虫剂胁迫对烟粉虱Bemisia tabaci适应逆境能力的影响,本研究运用实时荧光定量PCR技术测定了LC25,LC50和LC753种浓度的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯分别处理对烟粉虱地中海隐种B.tabaci Mediterranean成虫体内热激蛋白hs... 为深入理解杀虫剂胁迫对烟粉虱Bemisia tabaci适应逆境能力的影响,本研究运用实时荧光定量PCR技术测定了LC25,LC50和LC753种浓度的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯分别处理对烟粉虱地中海隐种B.tabaci Mediterranean成虫体内热激蛋白hsp70表达水平的影响。结果表明:在低温(15℃)条件下,LC50和LC75的烯啶虫胺、毒死蜱、高效氯氰菊酯可显著诱导烟粉虱地中海隐种hsp70的表达量增加,此后随时间延长hsp70表达量逐渐下降,到72h时恢复到对照水平,但LC25的3种杀虫剂对hsp70的表达无明显影响;在常温(25℃)下,较高浓度(LC50和LC75)的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯处理24h同样可促进hsp70表达量的增加,然后hsp70表达量逐渐下降,到72h时恢复至正常水平,但低浓度(LC25)的3种药剂处理后hsp70表达量随时间延长而增加,到72h时达到最高;在高温(32℃)条件下,LC25和LC50的烯啶虫胺、毒死蜱和高效氯氰菊酯处理24h可显著增强hsp70的表达水平,此后随时间的延长hsp70表达恢复至正常水平。杀虫药剂诱导的hsp70表达量增加增强了烟粉虱地中海隐种对杀虫药剂和高温的耐受能力,这可能是导致其在我国快速扩张的原因之一。 展开更多

关键词 烟粉虱地中海隐种 杀虫剂 热激蛋白 HSP70 MRNA表达量

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水蛭提取液对实验性脑血肿周围组织热休克蛋白70与转移生长因子β-1表达的影响 被引量：7

3

作者 吴文斌 胡长林 +4 位作者 杨友松 郭富强 孙红斌 肖军 罗永杰 《临床神经病学杂志》 CAS 北大核心 2006年第6期435-437,共3页

目的探讨水蛭提取液对实验性脑血肿周围组织热休克蛋白70（HSPTO）及转移生长因子β-1（TGFβ-1）表达的影响。方法采用成组设计的随机对照研究，用定量胶原酶注人大鼠尾状核建立脑出血模型，并于制模后随机分为水蛭提取液治疗组和生理... 目的探讨水蛭提取液对实验性脑血肿周围组织热休克蛋白70（HSPTO）及转移生长因子β-1（TGFβ-1）表达的影响。方法采用成组设计的随机对照研究，用定量胶原酶注人大鼠尾状核建立脑出血模型，并于制模后随机分为水蛭提取液治疗组和生理盐水对照组，分别经尾静脉注射水蛭提取液和生理盐水，每日1次；制模后每日给予神经功能缺损评分，术后第3d、6d及10d通过免疫组化染色观察鼠脑血肿周围脑组织HSPTO与TGFβ-1的表达，图像分析仪计算阳性细胞面积。结果脑出血后两组神经功能缺失评分均随时间延长而显著改善（P〈0．01～0．001），治疗组评分各时间点明显优于对照组（均P〈0．01）；术后第3d、6d及10d治疗组脑血肿周围组织HSPTO及TGFβ—1阳性细胞面积显著高于对照组（均P〈0．05）。结论水蛭提取液对实验性脑出血血肿周围组织保护作用机制可能与HSPTO与TGFβ—1表达增强有关。 展开更多

关键词 脑出血 水蛭提取液 热休克蛋白70 转移生长因子β-1

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地衣芽孢杆菌对凡纳滨对虾Toll和HSP70基因表达的影响 被引量：5

4

作者 曹煜成 文国樑 +3 位作者 张华军 张家松 胡晓娟 李卓佳 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2013年第8期882-886,共5页

目的分析地衣芽孢杆菌对凡纳滨对虾Toll和HSP70基因表达的影响。方法根据芽孢杆菌的使用量设置测试1组(LDG,用菌量2.0×103CFU/mL),测试2组(HDG,用菌量1.0×104CFU/mL)及未使用芽孢杆菌的对照组(CG),每7 d施菌1次,实验持续24 d... 目的分析地衣芽孢杆菌对凡纳滨对虾Toll和HSP70基因表达的影响。方法根据芽孢杆菌的使用量设置测试1组(LDG,用菌量2.0×103CFU/mL),测试2组(HDG,用菌量1.0×104CFU/mL)及未使用芽孢杆菌的对照组(CG),每7 d施菌1次,实验持续24 d。每6 d取样对虾肌肉和肝胰腺检测Toll基因和HSP70基因的mRNA相对表达量。结果对虾肝胰腺Toll基因mRNA表达量在LDG组和HDG组分别较CG组提高了410.05%和78.31%,但在肌肉中CG组的表达量则分别较LDG组和HDG组提高了31.81%和8.43%。可见,芽孢杆菌在一定程度上可提高Toll基因mRNA在对虾肝胰腺的表达,但对其在肌肉中的表达则呈一定的限制作用。在肝胰腺HSP70基因的mRNA表达量,HDG组显著高于CG组和LDG组(P<0.05),CG组和LDG组的差异无统计学意义(P>0.05);在肌肉中LDG组和HDG组的HSP70基因mRNA表达分别较CG组提高了26.07%和26.46%,但实验组的组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在水体中施用芽孢杆菌104CFU/mL和2.0×103CFU/mL可分别提高对虾肝胰腺和肌肉HSP70基因的mRNA表达量。 展开更多

关键词 地衣芽孢杆菌 凡纳滨对虾 TOLL HSP70 表达

原文传递

葛根素对急性缺血脑神经细胞损伤的保护及对HSP_(70)蛋白表达的干预作用 被引量：3

5

作者 杨嘉珍 潘洪平 +6 位作者 李吕力 莫祥兰 黄进 黄振录 叶劲 焦伟 董艳玲 《广西医学》 CAS 2005年第11期1721-1723,共3页

目的探讨葛根素对大鼠急性脑缺血损伤的保护作用和对HSP70表达的影响及其作用机制。方法采用闭夹大脑中动脉造成局部脑缺血模型,对实验标本作HE染色及用免疫组化SP法作HSP70染色,观察其组织病理学改变及HSP70表达情况。结果葛根素干预... 目的探讨葛根素对大鼠急性脑缺血损伤的保护作用和对HSP70表达的影响及其作用机制。方法采用闭夹大脑中动脉造成局部脑缺血模型,对实验标本作HE染色及用免疫组化SP法作HSP70染色,观察其组织病理学改变及HSP70表达情况。结果葛根素干预组死亡神经元数明显少于单纯缺血组,脑水肿程度较轻,而HSP70表达强度显著强于单纯缺血组。葛根素干预暴露因素与神经细胞死亡呈显著负相关(P<0.01)。结论葛根素对大鼠急性脑缺血损伤有保护作用,其作用机制与上调HSP70的表达有关。 展开更多

关键词 葛根素 HSP70 脑急性缺血 大鼠

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滞育及冷暴露对白纹伊蚊卵Hsp70基因表达的影响 被引量：2

6

作者 李玉伟 鲁亮 刘起勇 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 2014年第3期211-214,共4页

目的研究白纹伊蚊卵在滞育以及冷暴露条件下,热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达情况,探究Hsp70在增强白纹伊蚊卵耐寒性方面的作用。方法以无冷暴露的非滞育卵作为对照组,采用RT.qPCR方法检测白纹伊蚊滞育卵和非滞育卵Hsp70 mRNA的表达情况... 目的研究白纹伊蚊卵在滞育以及冷暴露条件下,热休克蛋白70基因(Hsp70)的表达情况,探究Hsp70在增强白纹伊蚊卵耐寒性方面的作用。方法以无冷暴露的非滞育卵作为对照组,采用RT.qPCR方法检测白纹伊蚊滞育卵和非滞育卵Hsp70 mRNA的表达情况。结果室温25℃条件下,滞育卵与非滞育卵表达的Hsp70差异无统计学意义(P=0.392)。与对照组相比,冷暴露后蚊卵Hsp70表达量均增加,且滞育卵Hsp70的表达量明显高于非滞育卵的表达量,分别是其对照组的16.44和5.22倍。结论Hsp70并不是白纹伊蚊滞育期间的重要组成部分,但是在冷暴露的恢复期表达量上调。 展开更多

关键词 白纹伊蚊 卵 冷暴露 滞育 热休克蛋白70基因

原文传递

牦牛鲜精与冻精HSP70表达差异比较研究 被引量：2

7

作者 唐朋 凌笑笑 +5 位作者 贾聪俊 梁春年 吴晓云 王宏博 褚敏 阎萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2514-2520,共7页

旨在研究冷冻前后牦牛精子质量和HSP70表达变化。采集健康且繁殖能力正常的6头大通牦牛精液,将试验分为鲜精组和冻精组,以精子活力和质膜完整率作为评价精子质量的指标。采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光技术检测HSP70在精... 旨在研究冷冻前后牦牛精子质量和HSP70表达变化。采集健康且繁殖能力正常的6头大通牦牛精液,将试验分为鲜精组和冻精组,以精子活力和质膜完整率作为评价精子质量的指标。采用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫荧光技术检测HSP70在精子冷冻前后的表达差异。结果表明,与鲜精相比,冻融后精子活力和质膜完整率均极显著下降(P<0.01),HSP70mRNA转录水平显著降低(P<0.05),蛋白水平极显著下降(P<0.01)。鲜精HSP70蛋白定位于精子顶体区、顶体赤道段、后顶体区和精子中段,而冻融精子HSP70蛋白主要位于后顶体区和精子中段,且平均光密度值极显著降低(P<0.01)。综上表明,冻融后牦牛精子质量与HSP70表达量均降低,推测两者之间存在一定关联。 展开更多

关键词 HSP70 牦牛 精子活力 质膜完整率 免疫荧光

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小体鲟HSP70基因全长cDNA序列的分离及表达分析 被引量：2

8

作者 倪蒙 温海深 +5 位作者 步艳 迟美丽 钱焜 尹相菡 张冬茜 丁玉霞 《中国海洋大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期21-28,共8页

采用RT-PCR法首次从小体鲟(Acipenser ruthenus)肝脏RNA分离获得HSP70基因全长cDNA序列(HSP70cDNA)。生物信息学分析显示,小体鲟HSP70基因含有众多的蛋白激酶C磷酸化位点,Ser、Thr、Thy磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号... 采用RT-PCR法首次从小体鲟(Acipenser ruthenus)肝脏RNA分离获得HSP70基因全长cDNA序列(HSP70cDNA)。生物信息学分析显示,小体鲟HSP70基因含有众多的蛋白激酶C磷酸化位点,Ser、Thr、Thy磷酸化位点和N-糖基化位点,推测其可能在细胞信号转导与调控中发挥作用。经过BLAST比对,认为该序列与西伯利亚鲟(Acipenserbaerii)、斑点叉尾鮰(Ietalurus punetaus)、斑马鱼(Danio rerio)、罗非鱼(Oreochromis niloticus)、非洲爪蟾(Xenopus lae-vis)、中华鳖(Pelodiscus sinensis)、原鸡(Gallus gallus)、家鼠(Mus musculus)和人(Homo sapiens)的同源性均在80%以上,表明HSP70具有高度的保守性。组织表达分析表明,HSP70mRNA在小体鲟肝脏、心、脾、脑、肾、肌肉、胃、肠、垂体、精巢和卵巢组织中均有表达,但表达量不同,心脏、脾和肝脏中表达量高,脑、垂体和性腺中表达较少,鳃中没有表达。小体鲟HSP70基因的表达分析为研究应激条件下鲟科HSP70基因的差异表达和抗逆机理提供了基础。 展开更多

关键词 小体鲟 HSP70基因 CDNA 基因分离 序列分析 表达分析

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人食管、胃、大肠癌组织中HSP70蛋白表达分析

9

作者 屈二军 蒋达和 曹志贱 《平顶山工学院学报》 2007年第6期25-27,共3页

采用Western Blot方法,检测、分析人食管、胃、大肠的正常组织、癌旁组织及癌组织中的HSP70蛋白表达差异。在不同器官的不同组织中,HSP70的表达情况有较大差异。在人胃、食管、大肠三个器官的正常组织、癌旁组织和癌组织中,HSP70的表达... 采用Western Blot方法,检测、分析人食管、胃、大肠的正常组织、癌旁组织及癌组织中的HSP70蛋白表达差异。在不同器官的不同组织中,HSP70的表达情况有较大差异。在人胃、食管、大肠三个器官的正常组织、癌旁组织和癌组织中,HSP70的表达量依次升高。消化道癌组织中大量表达的HSP70蛋白可能在上述组织癌变进程中起一定作用,为深入研究消化道肿瘤的致病机理和治疗提供理论依据。 展开更多

关键词 癌组织 WESTERN BLOT HSP70

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乐至黑山羊与藏山羊HSC70、HSP70.1和HSF1基因的mRNA表达差异分析

10

作者 牛惠然 字向东 +4 位作者 任陶 王永 任称罗 尔日 朱万岭 付锡三 《家畜生态学报》 北大核心 2013年第2期11-14,共4页

试验旨在利用qPCR技术对热休克同源蛋白(HSC70)、热休克蛋白70.1(HSP70.1)和热休克转录因子1(HSF1)基因在乐至黑山羊和藏山羊五个组织样中的表达量进行研究,以探讨热休克蛋白家族70(HSP70)与山羊生态适应性的关系。结果表明,HSC70mRNA... 试验旨在利用qPCR技术对热休克同源蛋白(HSC70)、热休克蛋白70.1(HSP70.1)和热休克转录因子1(HSF1)基因在乐至黑山羊和藏山羊五个组织样中的表达量进行研究,以探讨热休克蛋白家族70(HSP70)与山羊生态适应性的关系。结果表明,HSC70mRNA在藏山羊心脏中的表达量是乐至黑山羊中的4.5倍(P<0.05),但在脑垂体中乐至黑山羊的表达量是藏山羊的3.7倍(P<0.05),在卵巢、肝脏和子宫中两品种间无显著差异;HSF1mRNA在藏山羊卵巢、心脏中的表达量分别是乐至黑山羊的7.9倍和3.1倍(P<0.05),在肝脏和子宫中乐至黑山羊的表达量却分别是藏山羊的6.3倍和10.4倍(P<0.05);HSP70.1mRNA在乐至黑山羊脑垂体中的表达量是藏山羊的6.8倍(P<0.05)。说明HSC70、HSP70.1和HSF1基因的表达与山羊的生活环境及饲养方式有一定的关系。 展开更多

关键词 山羊 qPCR HSC70基因 hspto 1基因 HSF1基因

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铁皮石斛HSP70基因的克隆及冷胁迫表达分析 被引量：21

11

作者 李东宾 高燕会 +1 位作者 斯金平 朱玉球 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第20期3446-3452,共7页

目的:揭示铁皮石斛热激蛋白HSP70基因冷胁迫表达,为耐低温品系选育提供分子生物学基础。方法:根据已获得的HSP70基因片段序列,采用RACE方法从铁皮石斛中克隆到HSP70基因全长cDNA序列。预测其编码蛋白的结构与功能,并运用实时定量PCR进... 目的:揭示铁皮石斛热激蛋白HSP70基因冷胁迫表达,为耐低温品系选育提供分子生物学基础。方法:根据已获得的HSP70基因片段序列,采用RACE方法从铁皮石斛中克隆到HSP70基因全长cDNA序列。预测其编码蛋白的结构与功能,并运用实时定量PCR进行冷胁迫下表达分析。结果:核苷酸序列分析表明该基因全长2 296 bp,包含一完整的1 944 bp的开放阅读框,编码647个氨基酸。氨基酸序列具有典型的HSP70特征并且与其他植物的HSP70有很高的同源性。冷胁迫表达分析说明该基因确实能被低温诱导表达。结论:首次克隆获得受低温诱导表达的铁皮石斛HSP70基因,为进一步研究铁皮石斛健康栽培与抗寒品系的选育奠定基础。 展开更多

关键词 铁皮石斛 HSP70基因 生物信息学分析 冷胁迫表达分析

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急性脑梗死患者不同时期Apelin-13及应激相关蛋白水平的变化及其与预后的关系研究 被引量：17

12

作者 张学敏 唐建国 +2 位作者 谢娟 陆刚 张羽 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期2302-2306,共5页

目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,... 目的探讨急性脑梗死(ACI)患者不同时期Apelin-13和应激相关蛋白热休克蛋白70(HSP-70)、β内啡肽(β-EP)水平的变化及其与预后的相关性。方法选取2013年1月—2014年12月在复旦大学附属上海市第五人民医院确诊为ACI的患者50例作为ACI组,另选取同期在本院体检正常者40例作为对照组。采集两组受试者血液,并检测对照组和ACI组发病第1、3、7、14、21、30天Apelin-13、HSP-70、β-EP水平。ACI患者根据改良Rankin分级法评估预后,分为预后好(n=28)、一般(n=15)、差(n=7),并比较不同预后患者发病第1天的Apelin-13、HSP-70、β-EP水平、格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、美国国立卫生研究所卒中量表(NHISS)评分、洼田饮水试验分级。结果对照组、ACI组不同时期Apelin-13、HSP-70水平比较,差异有统计学意义(P<0.05),β-EP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);其中ACI组第1天Apelin-13水平低于对照组,ACI组第14、21、30天Apelin-13水平高于ACI组第1天(P<0.05);ACI组第1、3天HSP-70水平高于对照组,ACI组第3、7、14、21、30天HSP-70水平低于ACI组第1天(P<0.05)。ACI患者Apelin-13与HSP-70呈直线负相关(r=-0.909,P=0.012),Apelin-13与β-EP无直线相关性(r=-0.172,P=0.744),HSP-70与β-EP无直线相关性(r=0.121,P=0.820)。不同预后ACI患者β-EP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同预后ACI患者Apelin-13、HSP-70水平、GCS评分、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中预后差者Apelin-13水平、GCS评分均低于预后好和预后一般者,HSP-70水平、APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好和预后一般者(P<0.05);预后一般者GCS评分低于预后好者,APACHEⅡ评分、NHISS评分、洼田饮水试验分级高于预后好者(P<0.05)。结论Apelin-13水平在ACI发病第1天降低,随ACI病程逐渐升高;HSP-70水平在A 展开更多

关键词 脑梗死 APELIN-13 HSP70热休克蛋白质类 Β内啡肽 预后

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甜菜碱对夏季热应激奶牛产奶性能和HSP70及其mRNA表达的影响 被引量：11

13

作者 张丽 韩兆玉 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期89-94,共6页

为研究日粮中添加不同剂量甜菜碱对夏季热应激奶牛生产性能和HSP70及其mRNA表达的影响,根据年龄、胎次、泌乳期、产奶量相近的原则选取32头荷斯坦奶牛,随机均分为4组,对照组(C)不添加甜菜碱,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在日粮中添加10、15和20... 为研究日粮中添加不同剂量甜菜碱对夏季热应激奶牛生产性能和HSP70及其mRNA表达的影响,根据年龄、胎次、泌乳期、产奶量相近的原则选取32头荷斯坦奶牛,随机均分为4组,对照组(C)不添加甜菜碱,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在日粮中添加10、15和20 g·d-1甜菜碱。结果表明:试验期牛舍平均温湿指数(THI)为78.68;试验Ⅱ和Ⅲ组奶牛产奶量比对照组和试验Ⅰ组显著提高(P<0.05);试验Ⅱ组乳糖含量显著高于对照组和试验Ⅲ组(P<0.05),试验Ⅰ和Ⅲ组显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅱ组乳蛋白率显著高于对照组(P<0.05);试验后期试验Ⅱ组奶牛外周血HSP70含量与对照组相比显著降低(P<0.05)。结论:添加甜菜碱可提高奶牛生产性能,且以添加15 g·d-1的效果最优;添加15 g·d-1甜菜碱后降低了奶牛外周血HSP70含量,因而缓解了奶牛热应激。 展开更多

关键词 甜菜碱 热应激 HSP70 mRNA 奶牛

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温度、盐度对马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量的联合效应 被引量：8

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作者 王亚男 王辉 +3 位作者 朱晓闻 罗明明 刘志刚 杜晓东 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期3467-3473,共7页

采用中心复合设计和响应曲面分析法,在实验室条件下研究了温度(16～40℃)、盐度(10～50)对马氏珠母贝鳃热休克蛋白Hsp70基因表达量的联合效应.设定温度范围为16～40℃,盐度范围为10～50.结果表明:温度的一次效应、二次效应对马氏珠母贝... 采用中心复合设计和响应曲面分析法,在实验室条件下研究了温度(16～40℃)、盐度(10～50)对马氏珠母贝鳃热休克蛋白Hsp70基因表达量的联合效应.设定温度范围为16～40℃,盐度范围为10～50.结果表明:温度的一次效应、二次效应对马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量影响显著;盐度的一次效应对马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量无显著影响、二次效应对马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量影响显著,温度、盐度之间的互作效应对马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量无显著影响,且温度的效应大于盐度.建立了马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量模型方程,决定系数98.7%、矫正决定系数97.4%,预测决定系数89.2%,模型的拟合度极高,可用于预测马氏珠母贝鳃Hsp70基因的表达量.通过对模型方程优化,得到在温度26.78℃、盐度29.33时,马氏珠母贝鳃Hsp70基因表达量达到最小值0.5276,满意度达到98%.试验结果可为马氏珠母贝鳃Hsp70基因的上调表达、维持细胞内环境稳定以及提高马氏珠母贝抗逆性提供理论指导. 展开更多

关键词 马氏珠母贝 热休克蛋白70 相应曲面 优化

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细粒棘球蚴2HSP70重组质粒的构建、原核表达、纯化和初步鉴定 被引量：5

15

作者 丁淑琴 王洁 +2 位作者 王淑静 张焱 赵巍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期764-766,799,共4页

目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,EG)2热休克蛋白70(heat shock protein,2HSP70)表达重组质粒,原核表达及纯化重组蛋白,并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法从EG2HSP70/pGEM-T/JM109质粒中分离EG2HSP70目的基因,将... 目的构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,EG)2热休克蛋白70(heat shock protein,2HSP70)表达重组质粒,原核表达及纯化重组蛋白,并对重组蛋白进行免疫学特性的初步鉴定。方法从EG2HSP70/pGEM-T/JM109质粒中分离EG2HSP70目的基因,将此片段重组入表达载体pGEX-6P-1后转化入大肠杆菌BL21,鉴定后以IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE检测其表达水平,用亲和层析纯化并分离重组蛋白,利用Western blot来鉴定重组蛋白的免疫学特性。结果酶切鉴定及测序分析表明,成功构建细粒棘球蚴pGEX-6P-1/EG2HSP70重组质粒;IPTG诱导表达后,融合蛋白占菌体总蛋白的39%,占裂解物上清总蛋白的70.4%,表明重组的EG2HSP70基因能在BL21中高效表达,表达的蛋白大部分以可溶性状态存在。亲和层析法纯化重组蛋白EG2HSP70,通过Western blot证实该重组蛋白能被细粒棘球蚴囊壁免疫兔血清识别。结论成功构建细粒棘球蚴中国大陆株pGEX-6P-1/EG2HSP70重组质粒,重组的EG2HSP70能够高效表达,表达的EG2HSP70具有免疫学活性。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 热休克蛋白hspto 重组质粒 表达

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夏季高温条件下饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅生长性能、脂质代谢及肝脏中热休克蛋白70基因表达的影响 被引量：5

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作者 李梦云 姚国佳 +3 位作者 杨建平 姬向波 刘健 张晓根 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期4518-4524,共7页

本试验旨在研究夏季高温条件下饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅生长性能、脂质代谢及肝脏中热应激蛋白70(HSP70)基因表达的影响。挑选28日龄、体重相近的健康皖西白鹅150只,随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组,每组5个重复,每个重... 本试验旨在研究夏季高温条件下饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅生长性能、脂质代谢及肝脏中热应激蛋白70(HSP70)基因表达的影响。挑选28日龄、体重相近的健康皖西白鹅150只,随机分成3组,即对照组、试验1组和试验2组,每组5个重复,每个重复10只鹅。对照组试验鹅饲喂基础饲粮,试验1组和试验2组试验鹅分别饲喂在基础饲粮中添加100和200 mL/kg刺梨提取物的试验饲粮。预试期7 d,正试期14 d,试验期间最高气温37℃,最低气温24℃,日平均气温31.6℃。饲喂2周后,每个重复挑选1只鹅屠宰,采集血样,并分离出肝脏,测定血清脂质代谢指标和肝脏中HSP70基因的相对表达量。结果表明:饲粮中添加刺梨提取物对皖西白鹅的平均日采食量和平均日增重均无显著影响(P>0.05),但添加200 mL/kg刺梨提取物可显著降低料重比(P<0.05);饲粮中添加100和200 mL/kg刺梨提取物均可显著提高血清高密度脂蛋白含量(P<0.05),但对血清总胆固醇和甘油三酯含量无显著影响(P>0.05);与对照组相比,试验1组和试验2组肝脏中HSP70基因的相对表达量均极显著提高(P<0.01),同时试验1组肝脏中HSP70基因的相对表达量还极显著高于试验2组(P<0.01)。由此得出,在夏季高温条件下,在皖西白鹅饲粮中添加刺梨提取物可提高饲料转化率、调节脂质代谢、上调肝脏中HSP70基因的表达,具有较明显的抗应激效果,且添加量为100 mL/kg时的抗应激效果优于添加量为200 mL/kg时。 展开更多

关键词 皖西白鹅 刺梨提取物 生长性能 脂质代谢 HSP70基因表达

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5个品系罗非鱼热休克蛋白Hsp70基因序列比对分析 被引量：4

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作者 李莉萍 陈明 +6 位作者 唐章生 张永德 唐瞻杨 陈忠 曾兰 苏世坤 林勇 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期828-833,共6页

采用RT-PCR技术,对美国尼罗、埃及尼罗、美国奥利亚、中国奥利亚、奥尼杂交罗非鱼(埃及尼罗♀×美国奥利亚♂)5个品系罗非鱼热休克蛋白Hsp70基因进行扩增并克隆测序,最终获得5个品系罗非鱼Hsp70基因完整编码区(code sequences,CDS)c... 采用RT-PCR技术,对美国尼罗、埃及尼罗、美国奥利亚、中国奥利亚、奥尼杂交罗非鱼(埃及尼罗♀×美国奥利亚♂)5个品系罗非鱼热休克蛋白Hsp70基因进行扩增并克隆测序,最终获得5个品系罗非鱼Hsp70基因完整编码区(code sequences,CDS)cDNA序列,全长均为1923 bp,编码640个氨基酸,含有Hsp70家族3个签名序列IDLGTTYS、IFDLGGGTFD和VVLVGGSTRIP-KIQK,以及C末端保守序列EEVD,核定位信号标签KRKHKKDISQNKRALRR;Dank特征基序DLGTT-S-V;胞质Hsp70特征基序EEVD;靠近C末端的GGMP4肽序列;2个糖基化位点NKSI和NVSA。对5个品系罗非鱼Hsp70基因序列比较分析发现,它们之间共有12个核苷酸位点发生转换,但氨基酸序列完全一致。研究结果为深入研究不同品系罗非鱼的抗逆机理以及指导罗非鱼抗性育种奠定了可行性支撑基础。 展开更多

关键词 罗非鱼 品系 mpTO基因 序列分析

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HSP70基因多态性对矮小型黄羽肉鸡热耐受性的影响 被引量：2

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作者 孔丽娜 甘建伉 +3 位作者 张德祥 张细权 张文武 罗庆斌 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期80-88,共9页

采用PCR产物直接测序和PCR-RFLP检测的方法,选取HSP70基因的C.-69A>G、C.+258A>G、C.+276C>G、C.+909C>A、C.+1044A>G、C.+1437C>T和C.+1476C>T 7个多态位点,分别在15和35℃条件下对矮小型黄羽肉鸡纯系母鸡进行与... 采用PCR产物直接测序和PCR-RFLP检测的方法,选取HSP70基因的C.-69A>G、C.+258A>G、C.+276C>G、C.+909C>A、C.+1044A>G、C.+1437C>T和C.+1476C>T 7个多态位点,分别在15和35℃条件下对矮小型黄羽肉鸡纯系母鸡进行与热耐受性相关的部分生理与免疫指标的关联分析。结果表明:热应激状态下(35℃),C.+276C>G位点与CD3+T细胞含量显著相关(P<0.05),GG基因型个体的CD3+T细胞含量极显著高于CC基因型个体(P<0.01)、显著高于CG基因型个体(P<0.05);C.+1437C>T位点与CD4+T细胞含量极显著相关(P<0.01),CC基因型个体CD4+T细胞含量极显著低于CT和TT基因型个体(P<0.01)。C.+1476C>T位点的CT基因型个体H/L值显著低于CC基因型个体(P<0.05)。常温状态下(15℃),C.-69A>G位点的GG基因型个体CD4+T细胞含量显著高于AG基因型个体(P<0.05);C.+1044A>G位点与CD4+T细胞含量显著相关(P<0.05),AG基因型个体CD4+T细胞含量显著高于AA基因型个体(P<0.05);C.+1437C>T位点与CD3+T细胞含量、皮质酮值显著相关(P<0.05),CC基因型个体的CD3+T细胞含量和皮质酮值都显著高于CT和TT基因型个体(P<0.05)。与常温状态相比,各位点同一基因型在热应激状态下T3水平、H/L值和CD4+T细胞含量都显著升高,皮质酮含量和CD3+T细胞含量都显著下降。C.-69A>G、C.+276C>G、C.+1044A>G、C.+1437C>T和C.+1476C>T 5个位点与部分生理、免疫指标显著相关。其中C.+1437C>T位点与多个生理、免疫指标都有显著或极显著相关,表明该位点对矮小型黄羽肉鸡的热耐受性具有潜在的遗传效应。 展开更多

关键词 鸡 HSP70基因 单核甘酸多态性 生理指标 免疫指标

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4种罗非鱼不同组织中HSP70基因对盐胁迫的响应 被引量：2

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作者 刘志刚 刘玉姣 +5 位作者 卢迈新 朱华平 可小丽 高风英 曹建萌 王淼 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期182-189,共8页

为了从分子水平评估莫桑比克罗非鱼、荷那龙罗非鱼及其正交子代（莫桑比克罗非鱼♀×荷那龙罗非鱼）和反交♂子代（荷那龙罗非鱼♀×莫桑比克罗非鱼）的耐盐性能,利♂用RT-PCR方法研究了盐胁迫下这4种罗非鱼不同组织中（鳃、肾... 为了从分子水平评估莫桑比克罗非鱼、荷那龙罗非鱼及其正交子代（莫桑比克罗非鱼♀×荷那龙罗非鱼）和反交♂子代（荷那龙罗非鱼♀×莫桑比克罗非鱼）的耐盐性能,利♂用RT-PCR方法研究了盐胁迫下这4种罗非鱼不同组织中（鳃、肾、垂体和肌肉）热休克蛋白70（HSP70）基因的表达规律。结果表明：在盐度为22条件胁迫下4种罗非鱼各组织中HSP70表达水平总体呈现先增加后降低的规律,24 h时达最大值,48 h时下降至初始水平;盐度提高至35后HSP70的表达无显著变化。但不同种罗非鱼及不同组织之间也存在差异,反交子代鳃中HSP70在整个盐胁迫过程中都未上调表达;在盐度为22条件胁迫下,正反交子代肾中HSP70基因表达量比父母本肾中HSP70更早达到峰值;反交子代垂体中HSP70表达量在0~48 h内持续缓慢增加,48 h时达最大值;莫桑比克罗非鱼肌肉中HSP70基因在盐度22条件胁迫下表达量迅速升高,且维持较高水平直至盐度35条件胁迫之后。结果表明：HSP70表达水平的高低与罗非鱼的耐盐能力和应激程度密切相关,其中盐胁迫下肾中HSP70的表达规律与以上4种罗非鱼的耐盐能力之间相关性较强,可以作为评价这4种罗非鱼耐盐能力的潜在分子指标。 展开更多

关键词 莫桑比克罗非鱼(Oreochromis mossambicus) 荷那龙罗非鱼(O.hornorum) 正交子代 反交子代 盐胁迫 HSP70基因

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瓶囊碘泡虫HSP70基因的克隆、鉴定及功能预测 被引量：2

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作者 刘晓聪 赵元莙 张金叶 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期37-42,F0002,共7页

HSP70(Heat shock proteins 70)是分子量约为70kD的热休克蛋白,具有保护细胞和生命体的重要作用。通过分子克隆和染色体步移技术首次获得瓶囊碘泡虫(Myxobolus ampullicapsulatus Zhao et al.,2008)HSP70家族同源基因的完整序列,并利用... HSP70(Heat shock proteins 70)是分子量约为70kD的热休克蛋白,具有保护细胞和生命体的重要作用。通过分子克隆和染色体步移技术首次获得瓶囊碘泡虫(Myxobolus ampullicapsulatus Zhao et al.,2008)HSP70家族同源基因的完整序列,并利用生物信息学方法对该基因进行鉴定,同时对它编码的蛋白序列进行分析。结果显示:瓶囊碘泡虫HSP70蛋白为HSPA8同源物,命名为MaHSPA8;MaHSPA8基因核苷酸序列全长2 696bp,共编码662个氨基酸,MaHSPA8蛋白相对分子量为72.5kD,等电点为5.37,无跨膜区和信号肽,共有24个潜在的抗原位点。此发现将为进一步研究HSP70基因在瓶囊碘泡虫寄生过程中的作用提供基础资料。 展开更多

关键词 瓶囊碘泡虫 HSP70基因 克隆 生物信息学分析

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