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铁皮石斛HSP70基因的克隆及冷胁迫表达分析 被引量：21
1
作者 李东宾 高燕会 +1 位作者 斯金平 朱玉球 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第20期3446-3452,共7页
目的:揭示铁皮石斛热激蛋白HSP70基因冷胁迫表达,为耐低温品系选育提供分子生物学基础。方法:根据已获得的HSP70基因片段序列,采用RACE方法从铁皮石斛中克隆到HSP70基因全长cDNA序列。预测其编码蛋白的结构与功能,并运用实时定量PCR进... 目的:揭示铁皮石斛热激蛋白HSP70基因冷胁迫表达,为耐低温品系选育提供分子生物学基础。方法:根据已获得的HSP70基因片段序列,采用RACE方法从铁皮石斛中克隆到HSP70基因全长cDNA序列。预测其编码蛋白的结构与功能,并运用实时定量PCR进行冷胁迫下表达分析。结果:核苷酸序列分析表明该基因全长2 296 bp,包含一完整的1 944 bp的开放阅读框,编码647个氨基酸。氨基酸序列具有典型的HSP70特征并且与其他植物的HSP70有很高的同源性。冷胁迫表达分析说明该基因确实能被低温诱导表达。结论:首次克隆获得受低温诱导表达的铁皮石斛HSP70基因,为进一步研究铁皮石斛健康栽培与抗寒品系的选育奠定基础。 展开更多
关键词 铁皮石斛 hsp70基因 生物信息学分析 冷胁迫表达分析
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水杨酸对龙须菜抗高温生理的影响 被引量：18
2
作者 朱招波 孙雪 +1 位作者 徐年军 骆其君 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1304-1312,共9页
以龙须菜为材料,研究了不同浓度水杨酸对高温下龙须菜的生长速率、抗氧化酶、渗透调节物质、藻胆蛋白、叶绿素荧光特性和HSP70基因的影响。结果表明,水杨酸处理组不论是生长、酶活性和膜脂受损情况都不同程度优于对照组,其中5.0、10.0μ... 以龙须菜为材料,研究了不同浓度水杨酸对高温下龙须菜的生长速率、抗氧化酶、渗透调节物质、藻胆蛋白、叶绿素荧光特性和HSP70基因的影响。结果表明,水杨酸处理组不论是生长、酶活性和膜脂受损情况都不同程度优于对照组,其中5.0、10.0μg/mL处理组效果较好。10.0μg/mL水杨酸处理组效果最为明显,日生长速率与对照组相比增长了340%。在处理第3天,10.0μg/mL处理组各指标达到最大,SOD增长了74%,POD增长了70%,CAT增长了40%。脯氨酸和甘露醇分别增长了70%和26%。藻红蛋白增加了46.2%,藻蓝蛋白增长了40%。与对照组相比,MDA含量第1天下降最为显著,下降了10%。高温胁迫下,龙须菜叶绿素荧光参数Fv/Fm、Fv/Fo、qP和ΦPSⅡ均明显降低,非光化学淬灭(NPQ)呈现先上升后下降的趋势。水杨酸处理能有效减缓5种龙须菜叶绿素荧光参数的降低程度。水杨酸处理后HSP70基因表达量较对照组低。本实验结果表明水杨酸具有增强龙须菜抗高温胁迫的作用。 展开更多
关键词 龙须菜 水杨酸 逆境生理 叶绿素荧光 hsp70基因
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侵染广东番茄的番茄褪绿病毒分子鉴定 被引量：17
3
作者 汤亚飞 何自福 +1 位作者 佘小漫 蓝国兵 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期133-137,共5页
在广东番茄上发现一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚等症状。利用番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)HSP70基因的两对特异引物对番茄病样进行RT-PCR检测,结果表明,从所采集的6份病样中均扩增到预期大小的DN... 在广东番茄上发现一种新病害,病株表现为叶片褪绿,叶脉颜色变深及叶片增厚等症状。利用番茄褪绿病毒Tomato chlorosis virus(ToCV)HSP70基因的两对特异引物对番茄病样进行RT-PCR检测,结果表明,从所采集的6份病样中均扩增到预期大小的DNA特异片段。对其中1份样品的扩增片段进行克隆与序列分析,结果表明,扩增片段包括1个长度为1 665个核苷酸的完整病毒基因,其核苷酸序列与已报道的ToCV HSP70基因有较高的同源性,表明广东番茄受到了ToCV的侵染。但ToCV广东番茄分离物的HSP70序列与国内外已报道的各分离物的同源性均低于82%,存在较大差异,其中与塞浦路斯tomato、约旦JU_20分离物的同源性最高,为81.8%。这是ToCV在广东发生的首次报道,也是该病毒HSP70基因序列存在显著差异分离物的首次发现。 展开更多
关键词 番茄病毒病 番茄褪绿病毒 hsp70基因
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血瘀证患者血小板CD62p基因、白细胞HSP70基因的表达 被引量：12
4
作者 马民 陈利国 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期307-310,共4页
目的从基因水平探讨血瘀证微观实质。方法以病证结合方式,严格按照诊断标准选取16 0例高血压病和2型糖尿病血瘀证(10 0例)和非血瘀证患者(6 0例) ,用血液生化指标和实验技术,进行血小板CD6 2 p基因、白细胞HSP70基因的表达的观察、对比... 目的从基因水平探讨血瘀证微观实质。方法以病证结合方式,严格按照诊断标准选取16 0例高血压病和2型糖尿病血瘀证(10 0例)和非血瘀证患者(6 0例) ,用血液生化指标和实验技术,进行血小板CD6 2 p基因、白细胞HSP70基因的表达的观察、对比、分析,并以健康人为对照。结果血瘀证患者存在CD6 2 p基因、HSP70基因的异常表达,两者表达水平较健康人显著升高(P <0. 0 1) ,且基因异常表达水平的高低与血瘀证各型之间存在密切关系。结论CD6 2p基因和HSP70基因为与血瘀证有密切相关的基因。 展开更多
关键词 CD62p基因 hsp70基因 血小板 白细胞 患者 糖尿病血瘀证 血液生化指标 基因异常表达 基因水平 结合方式 非血瘀证 高血压病 诊断标准 实验技术 密切关系 健康人 基因为
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复方中草药对凡纳滨对虾热应激蛋白70基因表达的影响 被引量：13
5
作者 雷爱莹 曾地刚 《广西农业科学》 CSCD 2008年第6期830-833,共4页
采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分别对在基础饲料中添加了1%复方中草药的试验组和只喂食基础饲料的对照组凡纳滨对虾的肝组织进行HSP 70基因的mRNA表达检测,并以18S rRNA为内参照进行基因表达水平的半定量分析。结果显示,试验组凡纳... 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分别对在基础饲料中添加了1%复方中草药的试验组和只喂食基础饲料的对照组凡纳滨对虾的肝组织进行HSP 70基因的mRNA表达检测,并以18S rRNA为内参照进行基因表达水平的半定量分析。结果显示,试验组凡纳滨对虾的肝组织HSP 70基因的mRNA表达显著高于对照组(p<0.05),说明复方中草药可提高凡纳滨对虾HSP 70基因mRNA的表达量,表明在饲料中添加复方中草药有利于凡纳滨对虾的生长和抗病、抗逆功能的增强。 展开更多
关键词 复方中草药 凡纳滨对虾 hsp70基因
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奶牛HSP70基因多态性与生产性能的关系 被引量：11
6
作者 陈强 李忠浩 王根林 《江西农业学报》 CAS 2007年第7期84-86,共3页
采用PCR-SSCP方法,对娟姗牛和荷斯坦奶牛HSP70基因5′-侧翼区多态性进行了检测。结果初步显示:A基因可能为抗热应激基因,AB型个体的生产性能与BB型个体差异不显著,耐热性能与生产性能的相关性可能不大。
关键词 hsp70基因 热应激 奶牛 多态性
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HSP70基因单核苷酸多态性与噪声性听力损失易感性的关系 被引量：10
7
作者 李艳红 陈国顺 +6 位作者 焦洁 周文慧 吴辉 谷桂珍 张焕玲 郑玉新 余善法 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 2016年第12期889-894,共6页
目的探讨我国汉族噪声作业工人热休克蛋白（HSP）70基因rs1043618、rs2075800和rs2763979位点的单核苷酸多态性（SNP）与噪声性听力损失（NINE）易感性的关系。方法采用病例对照方法，以河南省某钢铁厂2006至2015年参加体检的5934名噪... 目的探讨我国汉族噪声作业工人热休克蛋白（HSP）70基因rs1043618、rs2075800和rs2763979位点的单核苷酸多态性（SNP）与噪声性听力损失（NINE）易感性的关系。方法采用病例对照方法，以河南省某钢铁厂2006至2015年参加体检的5934名噪声作业工人为研究对象。按照纯音测听双耳高频（3000、4000、6000r／z）平均听闵≥40B（HL），或在双耳高频损失的基础上，单耳语频（500、1000、2000Hz）平均听阈≥26dB（HL）且排除非NIHL的标准，共收集听力损失组286人；根据同性别、同工种、年龄相差不超过5岁，接触噪声工龄相差不超过2年的匹配标准，得到对照组286人。使用2ml血液基因组DNA提取试剂盒对采集的外周血进行DNA抽提，采用多重SNP分型试剂盒对572个样本的3个位点进行基因分型，分析这3个位点的SNP与NIHL易感性的关系。结果研究对象各工种接触噪声的等效声级（LAeq）为75．0～96．8dB（A）；听力损失组工人的双耳高频听阈明显高于对照组，差异有统计学意义（t=56．908，P〈0.05）。以CC＋TC基因型为对照，HSP70基因的rs2763979位点的TT基因型与NIHL易感性有关联（OR=1．731，95％CI：1．021～2．935）；在累积噪声暴露量（CNE）96～dB（A）·年组中，rs2763979位点的TT基因型与NIHL的易感性有关联（OR=5．694，95％CI：1．256～25．817）；而HSP70基因的rs1043618和rs2075800位点与NIHL的易感性无关联（均P〉0．05）；调整混杂因素吸烟、饮酒和高血压后，单体型CCT与NIHL易感性有关联（OR=I．425，95％CI：1．035—1．961）。结论HSP70基因的rs2763979位点TT基因型和单体型CCT是NIHL的危险因素。 展开更多
关键词 噪声 职业性 听力损失 易感性 hsp70基因
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罗非鱼感染链球菌后hsp70基因表达研究 被引量：9
8
作者 王瑞 黄艳华 +2 位作者 陈明 梁万文 黄钧 《广西农业科学》 CAS CSCD 2010年第4期371-374,共4页
采用实时荧光定量RT-PCR检测吉富罗非鱼感染链球菌后脑和脾脏中热休克蛋白70(hsp70)基因表达情况,并按2-△△CT分析方法、使用7500 Software v2.0.1进行分析。结果表明,罗非鱼感染链球菌48 h内,hsp70 mRNA在脑组织表达变化不明显,而在... 采用实时荧光定量RT-PCR检测吉富罗非鱼感染链球菌后脑和脾脏中热休克蛋白70(hsp70)基因表达情况,并按2-△△CT分析方法、使用7500 Software v2.0.1进行分析。结果表明,罗非鱼感染链球菌48 h内,hsp70 mRNA在脑组织表达变化不明显,而在脾脏中表达升高,攻毒感染24 h后hsp70 mRNA表达量是正常脾脏组织的5.5倍多,说明hsp70在罗非鱼链球菌感染的免疫反应中具有重要作用。研究结果为进一步分析hsp70在罗非鱼感染链球菌过程中所行使的功能奠定基础。 展开更多
关键词 罗非鱼 hsp70基因 链球菌 实时荧光定量RT-PCR 基因表达
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两种入侵粉虱热激基因Hsp70的克隆及温度胁迫下的种间差异表达 被引量：9
9
作者 王海鸿 雷仲仁 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期693-701,共9页
为了检测B型烟粉虱和温室白粉虱在受到温度胁迫时热激基因Hsp70的差异表达谱,克隆了2种粉虱Hsp70基因的全长cDNA序列,并用实时定量PCR的方法分析了在不同温度条件下该基因的表达谱。结果表明:B型烟粉虱和温室白粉虱的Hsp70基因BTH-sp70... 为了检测B型烟粉虱和温室白粉虱在受到温度胁迫时热激基因Hsp70的差异表达谱,克隆了2种粉虱Hsp70基因的全长cDNA序列,并用实时定量PCR的方法分析了在不同温度条件下该基因的表达谱。结果表明:B型烟粉虱和温室白粉虱的Hsp70基因BTH-sp70和TVHsp70(GenBank登录号分别为DQ093385和EU861391),在5’-非编码区(UTR)中有类似TATA-box样元件;在3’-UTR中有poly(A)信号AATAA和富含A-T区;根据基因开放阅读框序列(ORF)推导的氨基酸序列均含有全部3个Hsp70蛋白家族高度保守的基序。在整个检测的温度范围内(-19℃～46℃),诱导温室白粉虱Hsp70表达的起始温度(Ton)或最大温度(Tmax)要比B型烟粉虱低2.5℃～7.5℃。这些结果表明,所克隆的基因属于有功能的温度诱导型Hsp70基因;在基因表达水平上,温室白粉虱比B型烟粉虱更耐冷,而后者更耐热;Hsp70的Ton(或者Tmax)能代表这2种粉虱的温度耐受能力。本研究结果在一定程度上解释了自然界中这2种粉虱种群地理分布和季节发生差异的原因。 展开更多
关键词 B型烟粉虱 温室白粉虱 hsp70基因 克隆 表达 温度胁迫 实时定量PCR
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颅脑外伤后局部脑组织HSP70基因的表达 被引量：8
10
作者 陈峻严 黄金钟 +2 位作者 黄种心 邱建龙 周培萱 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期623-624,共2页
当今对于颅脑外伤后神经细胞热休克蛋白70（HSP70）基因的表达己有许多文献报道，但多数研究是在脑外伤动物模型上进行的，迄今国内尚未见直接检测人颅脑外伤后HSP70基因表达的报道。笔者旨在检测颅脑损伤患者损伤局部脑组织神经细胞中H... 当今对于颅脑外伤后神经细胞热休克蛋白70（HSP70）基因的表达己有许多文献报道，但多数研究是在脑外伤动物模型上进行的，迄今国内尚未见直接检测人颅脑外伤后HSP70基因表达的报道。笔者旨在检测颅脑损伤患者损伤局部脑组织神经细胞中HSP70基因的表达，并初步探讨其临床意义。 展开更多
关键词 hsp70基因 脑外伤后 脑组织 热休克蛋白70(hsp70) 局部 颅脑损伤患者 神经细胞 直接检测 文献报道 动物模型
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吉富罗非鱼HSP70基因的多态性及其与耐寒性状的相关性研究 被引量：8
11
作者 宾石玉 钟丹丹 +4 位作者 杜雪松 张永德 林勇 黄姻 文露婷 《广西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第1期211-217,共7页
利用PCR-SSCP技术对吉富罗非鱼HSP70基因多态性进行检测,并采用最小二乘法分析多态性与罗非鱼Oreochromis niloticus耐寒性状的相关性。结果发现,依据HSP70基因序列设计的引物HP70-1、HP70-4、HP70-6不同耐寒能力样本中的电泳图具有带... 利用PCR-SSCP技术对吉富罗非鱼HSP70基因多态性进行检测,并采用最小二乘法分析多态性与罗非鱼Oreochromis niloticus耐寒性状的相关性。结果发现,依据HSP70基因序列设计的引物HP70-1、HP70-4、HP70-6不同耐寒能力样本中的电泳图具有带型多态性,且该基因多态性与其耐寒性状显著相关。据此推断HSP70基因是潜在的罗非鱼耐寒相关基因。 展开更多
关键词 吉富罗非鱼 耐寒性状 多态性 PCR-SSCP hsp70基因
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近江牡蛎HSP70基因对溶藻弧菌感染的反应 被引量：7
12
作者 陈晨 张其中 +1 位作者 张占会 崔淼 《生态科学》 CSCD 2011年第3期295-300,共6页
采用实时荧光定量RT-PCR方法,检测了注射溶藻弧菌(Vibiro alginolyticus)后近江牡蛎鳃,闭壳肌,消化腺,外套膜,心脏以及血细胞中HSP70基因的表达变化。结果显示近江牡蛎这五种器官组织中的HSP70基因表达量均出现显著性高表达,且在鳃、外... 采用实时荧光定量RT-PCR方法,检测了注射溶藻弧菌(Vibiro alginolyticus)后近江牡蛎鳃,闭壳肌,消化腺,外套膜,心脏以及血细胞中HSP70基因的表达变化。结果显示近江牡蛎这五种器官组织中的HSP70基因表达量均出现显著性高表达,且在鳃、外套膜和血细胞中的HSP70基因表达变化规律表现为典型的时间依赖性。血细胞中,显著高表达的峰值出现在24h,至72h恢复到对照水平,高表达持续时间最长:鳃中表达峰值出现时间较早,在第3h,随后在第12h便恢复到对照水平;外套膜,消化腺以及心脏中的峰值分别出现在6h,6h和3h,而在闭壳肌组织中,没出现显著性高表达。由此可见,近江牡蛎HSP70s可能在机体抗菌免疫过程中起了重要作用。 展开更多
关键词 近江牡蛎 hsp70基因 溶藻弧菌 实时荧光定量RT-PCR MRNA表达
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壳聚糖对香鱼溶菌酶活性和hsp70基因表达的影响 被引量：7
13
作者 金思 龚一富 +2 位作者 章丽 张文青 童丽娟 《生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期11-14,10,共5页
壳聚糖是一种理想的水产动物免疫增强剂和饲料添加剂。为了研究壳聚糖对香鱼非特异性免疫机能的影响,探讨其调节机体免疫功能的机理,以香鱼为研究对象,在基础饲料中分别添加0%、0.5%、1.0%、2.0%和4.0%的壳聚糖,连续投喂35 d后测定香鱼... 壳聚糖是一种理想的水产动物免疫增强剂和饲料添加剂。为了研究壳聚糖对香鱼非特异性免疫机能的影响,探讨其调节机体免疫功能的机理,以香鱼为研究对象,在基础饲料中分别添加0%、0.5%、1.0%、2.0%和4.0%的壳聚糖,连续投喂35 d后测定香鱼肝脏、脾脏和肾脏组织中溶菌酶活性和免疫相关基因hsp70基因表达的影响。结果表明,基础饲料中添加1.0%壳聚糖可使香鱼肝脏、脾脏和肾脏组织中溶菌酶活性显著提高,溶菌酶活性与对照分别提高了0.8倍、3.1倍和5.2倍。定量PCR分析结果表明,添加1.0%壳聚糖可显著促进肝脏、脾脏和肾脏中hsp70基因的表达量,且hsp70基因表达量与溶菌酶活性表现出一定的相关性,表明壳聚糖可通过调节免疫相关基因的表达来调节香鱼的免疫功能。 展开更多
关键词 壳聚糖 香鱼 溶菌酶活性 hsp70基因 非特异性免疫
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芝麻全基因组Hsp70基因的鉴定与生物信息学分析 被引量：7
14
作者 徐剑文 赵君 +1 位作者 刘剑光 肖松华 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期493-502,共10页
利用隐马可链夫模型(HMM)对芝麻全基因组Hsp70基因进行了系统分析,共鉴定出21个Hsp70基因,其中17个属于Dnak基因亚家族,4个属于Hsp110/SSE基因亚家族。根据系统进化树分析和亚细胞定位结果,将芝麻21个Hsp70基因分为6个亚组,其中I亚组3个... 利用隐马可链夫模型(HMM)对芝麻全基因组Hsp70基因进行了系统分析,共鉴定出21个Hsp70基因,其中17个属于Dnak基因亚家族,4个属于Hsp110/SSE基因亚家族。根据系统进化树分析和亚细胞定位结果,将芝麻21个Hsp70基因分为6个亚组,其中I亚组3个,定位于叶绿体;II亚组2个,定位于线粒体;III亚组5个,定位于内质网;IV亚组6个,定位于细胞质基质;V亚组4个,属于Hsp110/SSE基因家族;VI亚组1个。芝麻Hsp70基因启动子区域顺式作用元件功能预测结果显示,Hsp70基因参与芝麻的生长发育和逆境胁迫响应等生理过程。 展开更多
关键词 芝麻 hsp70基因 生物信息学分析
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热休克蛋白70及pim-1基因在白血病骨髓单个核细胞的表达特点及临床意义 被引量：3
15
作者 李颖 旷文勇 +2 位作者 李睿娟 张广森 彭宏凌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期267-271,共5页
本研究观察热休克蛋白70(HSP70)基因/蛋白,pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达,确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT-PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70 mRNA及pim-1 mRN... 本研究观察热休克蛋白70(HSP70)基因/蛋白,pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达,确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT-PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70 mRNA及pim-1 mRNA的表达并半定量;用Western blot检测34例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70蛋白表达并半定量,并结合白血病类型、肿瘤负荷程度及对治疗的反应进行分析。结果表明:白血病组与对照组BMMNC均存在HSP70 mRNA和蛋白表达,在白血病组显著高于对照组;CML组、AML组HSP70 mRNA/蛋白表达的平均ODR值均显著高于ALL组;肿瘤重度负荷的急性白血病患者组HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于肿瘤轻度负荷组;白血病患者化疗后HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于化疗前;白血病组及对照组BMMNC均表达pim-1mRNA,在白血病组显著高于对照组;ALL组pim-1 mRNA表达显著高于AML组和CML组;经相关性分析,白血病患者HSP70 mRNA表达与pim-1 mRNA表达成正相关(r=0.327,p<0.05)。结论:白血病患者BMMNC存在HSP70、pim-1高表达,其中pim-1 mRNA表达与HSP70 mRNA表达呈正相关,HSP70与pim-1基因/蛋白过表达亦与白血病肿瘤负荷程度有关。 展开更多
关键词 白血病 骨髓单个核细胞 hsp70基因 hsp70蛋白 pim-1基因
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牛源HSP70基因点突变、分子进化和pET32a-c(+)原核表达 被引量：4
16
作者 蔡亚非 王根林 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1080-1090,共11页
设计引物PCR方法克隆了奶牛1926bp的HSP70基因,连接到pGEMR○-T Easy Vector上测序,与NCBI上的序列比对,发现开放阅读框内的点突变(941位点,T→C),致使314位L(亮氨酸)→P(脯氨酸)。DNAstar Protean分析点突变对蛋白的原核表达一、二级... 设计引物PCR方法克隆了奶牛1926bp的HSP70基因,连接到pGEMR○-T Easy Vector上测序,与NCBI上的序列比对,发现开放阅读框内的点突变(941位点,T→C),致使314位L(亮氨酸)→P(脯氨酸)。DNAstar Protean分析点突变对蛋白的原核表达一、二级结构、等电点进行了分析,结果显示螺旋转角区数目增多,不规则卷曲发生轻微变化,但其它指标均不变。此外,通过DNAstar MegAlign用Clustal V方法分析HSP70家族蛋白的同源性、氨基酸残基替换频率并构建了分子进化树,结果发现碱性、酸性氨基酸(R和K)、分支的氨基酸(V和L)、极性氨基酸(S和T)等在生物HSP70分子进化中氨基酸发生替换的频率最高,HSP70可以作为研究生物系统演化的一个重要的工具。在上述基础上,在HSP70基因上、下游引物分别加上EcoRⅠ和HindⅢ酶切位点,构建了pET-32a-c(+)-bHSP70原核表达质粒,IPTG诱导成功得到重组牛源HSP70蛋白,293细胞和Hela细胞的体外实验表明原核表达的蛋白有抗凋亡生物活性[动物学报51(6)1080-1090,2005]。 展开更多
关键词 hsp70基因 分子进化 pET-32a—c(+)-bhsp70
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水稻Hsp70基因的第一个内含子编码2种核仁小分子RNA 被引量：5
17
作者 屈良鹄 钟翎 +4 位作者 施苏华 陆勇军 周惠 方荣祥 王群 《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》 1997年第2期234-241,共8页
90年代以来,一系列由内含子编码的核仁小分子RNA(snoRNA)的发现,是分子生物学的一个重大进展。它不仅为阐明真核生物核糖体RNA复杂的加工体系和机制开辟了道路,而且对于全面地认识真核生物基因的结构和组织以及基因表达调控的新机制都... 90年代以来,一系列由内含子编码的核仁小分子RNA(snoRNA)的发现,是分子生物学的一个重大进展。它不仅为阐明真核生物核糖体RNA复杂的加工体系和机制开辟了道路,而且对于全面地认识真核生物基因的结构和组织以及基因表达调控的新机制都具有重要的意义。 展开更多
关键词 水稻 hsp70基因 内含子编码 核仁小分子
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基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体TaqMan检测方法的建立及其遗传演化分析
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作者 江锦秀 张靖鹏 +3 位作者 林裕胜 刘维巍 胡奇林 万春和 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期1684-1695,共12页
热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实... 热休克蛋白70 (heat shock protein 70,Hsp70)是绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae, Movi)的重要膜蛋白,是机体内高度保守的生物分子,但在种间差异大,可作为分子生物学检测的候选靶区。为建立基于Hsp70基因的Movi通用型TaqMan实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,并进一步了解其遗传变异情况,本研究基于GenBank中Movi的Hsp70基因特征,设计特异性的引物及探针,建立了基于Hsp70基因的绵羊肺炎支原体qPCR检测方法。应用建立的检测方法对88份山羊鼻拭子样品及43份疑似羊支原体性肺炎(Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats, MPSG)病料进行检测。将检测结果为Movi阳性的肺组织样品进行分离鉴定,并对分离株Hsp70基因进行序列分析。结果显示,建立的qPCR检测方法其相关系数为1.00,扩增效率为96.0%,斜率为-3.411,Y轴截距为37.29。特异性强,与丝状支原体山羊亚种(Mycoplasma mycoides subsp.capri, Mmc)、山羊支原体山羊肺炎亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capripneumoniae, Mccp)、莱氏无胆甾原体(Acholeplasmalaidlawii, AL)、无乳支原体(Mycoplasma agalactiae, Maga)、伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis, CP)、羊口疮病毒(orf virus, ORFV)、牛支原体(Mycoplasma bovis, Mb)等牛羊常见病原均无交叉反应;敏感性高,最低检测限为5.72 copies·μL^(-1);重复性优,组内变异系数和组间变异系数均小于1.00%。6株Movi分离株Hsp70基因全长均为1 818 bp,与其它Movi参考株核苷酸和氨基酸同源性分别为96.0%~99.4%和98.0%~100.0%;进一步分析发现,山羊源Movi均比绵羊源多1个N-糖基化位点。遗传演化分析表明,其均处于ClusterⅠA亚分支(均为山羊源)。综上,本研究建立了特异性强、敏感性高、重复性优的基于Hsp70基因的Movi的qPCR检测方法。序列分析发现,不同来源Movi的Hsp70基因核苷酸同源性高;遗传演化分析证实,Movi福建株与山羊源分离株遗传关系较近。本研究不仅为Movi 展开更多
关键词 绵羊肺炎支原体 hsp70基因 TaqMan实时荧光定量PCR方法 序列分析
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朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因TCHSP70-4的克隆与表达 被引量：6
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作者 李明 卢文才 +3 位作者 冯宏祖 袁亮 王进军 何林 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1235-1243,共9页
为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长21... 为了研究朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Boisduval)热激蛋白HSP70的表达与其适应高温和低温胁迫的关系,我们利用物种的同源性及RACE技术,获得朱砂叶螨热激蛋白HSP70基因1个,命名为TCHSP70-4(GenBank登录号为EU977182)。该基因全长2182bp,包含1959bp的开放阅读框,编码653个氨基酸,理论分子量为70.9kDa,等电点为5.4,含有HSP70家族高度保守的基序。运用real-time PCR分析冷激(4℃)和热激(40℃)1h后TCHSP70-4在朱砂叶螨体内的表达量。结果显示冷激后TCHSP70-4表达量明显下降,而热激后TCHSP70-4表达量却明显上升。这些结果一方面表明该基因属于诱导型HSP70基因,另一方面揭示了朱砂叶螨分别受到冷和热胁迫后体内TCHSP70-4的表达及所起的保护作用是不同的。 展开更多
关键词 朱砂叶螨 热激蛋白 hsp70基因 克隆 表达 温度胁迫 实时定量PCR
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热应激诱导奶牛乳腺上皮细胞凋亡及其对HSP70基因表达的影响 被引量：6
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作者 张响英 唐现文 +1 位作者 陈静波 李腾腾 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第8期142-146,共5页
为探讨热应激对乳腺上皮细胞凋亡的影响,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的乳腺上皮细胞分别置于39℃和41℃热处理1 h(以37℃正常培养的细胞为对照),在37℃恢复培养0、6、12 h后收集细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,... 为探讨热应激对乳腺上皮细胞凋亡的影响,以体外培养的奶牛乳腺上皮细胞为模型,取对数生长期的乳腺上皮细胞分别置于39℃和41℃热处理1 h(以37℃正常培养的细胞为对照),在37℃恢复培养0、6、12 h后收集细胞,采用MTT法检测细胞生长抑制率,Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡,比色法分析Caspase-3活性,荧光定量PCR检测HSP70基因的表达水平。结果表明,39℃热应激组细胞生长抑制率和死亡率高峰期均发生在热修复6 h,细胞死亡率为15.42%,而41℃热应激组发生在热修复12 h,细胞死亡率高达23.18%;高温处理后,Caspase-3活性呈上升趋势;39℃热应激组在热恢复6 h,HSP70基因表达量显著高于对照组,41℃热应激组在热恢复0、6、12 h,HSP70基因的表达量分别为对照组的3.53倍、5.61倍和2.93倍。综上可知,高温应激激活了Caspase-3活性,从而诱导乳腺上皮细胞凋亡,并随高温强度的增加而作用增强,同时高温诱导了HSP70基因过表达,协助细胞获得热耐受性。 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 热应激 细胞凋亡 hsp70基因
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