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辣根过氧化物酶(HRP)底物的研究进展 被引量:3
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作者 戚红卷 陈苏红 王升启 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2007年第6期560-563,共4页
辣根过氧化物酶(HRP)在酶免疫分析中得到广泛应用。本文综述了三类主要的HRP底物:色原底物、荧光底物和化学发光底物的研究进展,介绍了相应的各种检测方法的优缺点和实际应用,对其他HRP底物的研究前沿也进行了探讨,指出一种包含巯基和... 辣根过氧化物酶(HRP)在酶免疫分析中得到广泛应用。本文综述了三类主要的HRP底物:色原底物、荧光底物和化学发光底物的研究进展,介绍了相应的各种检测方法的优缺点和实际应用,对其他HRP底物的研究前沿也进行了探讨,指出一种包含巯基和酚基的纳米金作为新型的HRP底物,具有灵敏度高、检测成本低、信号值恒定等一系列突出优点,在免疫组化、基因芯片等领域展现出广阔的应用前景。 展开更多
关键词 hrp底物 色原 荧光 化学发光 纳米金
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矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系及其在酶联免疫传感分析中的应用
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作者 龚福春 李定中 +4 位作者 杨荣 魏建科 曹忠 谭淑珍 谭亚非 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 2009年第2期153-158,共6页
以一种天然色素矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cyanidin-3-glucose,CAG)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系.CAG在540nm处有一个吸收峰(AP1),在HRP催化下被H2O2氧化,AP1降低;同时,其氧化产物在482nm处产生... 以一种天然色素矢车菊素-3-葡萄糖苷(Cyanidin-3-glucose,CAG)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了矢车菊甙-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系.CAG在540nm处有一个吸收峰(AP1),在HRP催化下被H2O2氧化,AP1降低;同时,其氧化产物在482nm处产生一个新吸收峰(AP2),并且反应体系中两峰值的比值R(AP2/AP1)与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此原理,以猪口蹄疫病毒蛋白(food and mouth disease virus antigen,FMDVAg)为分析模型,建立了检测猪口蹄疫病毒的酶联免疫传感分析新方法.该方法利用伴刀豆蛋白(Conconvalina,ConA)对糖蛋白的识别特性固定HRP-猪口蹄疫病毒抗体连接物(HRP-FMDVAb),由ConA介导和磁性分离实现了免疫反应特异性组分和非特异成分,以及反应免疫磁性珠与没反应免疫磁性珠的分离.运用制备的传感体系测定猪口蹄疫病毒的线性范围为1.5×10-8~2.7×10-6g/mL,抗原检出限为3.1×10-9g/mL,相对标准偏差为3.7%(n=11).底物CAG及其产物的水溶性好,对人体无毒副作用,在临床上可代替传统HRP底物进行免疫检测. 展开更多
关键词 矢车菊甙 hrp底物 酶联免疫传感 猪口蹄疫病毒
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以葛根素为辣根过氧化物酶底物的新体系及其分析应用 被引量:1
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作者 龚福春 刘平 +2 位作者 林尤宜 唐志姣 刘剑平 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第7期859-863,共5页
以一种天然活性成分葛根素(Puerarin)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了葛根素-辣根过氧化物酶-过氧化氢反应新体系.在反应体系中HRP催化H2O2氧化葛根素(弱荧光)形成二聚体产物(强荧光),该产物在315 nm的激发光下能发射波长为478 nm的强... 以一种天然活性成分葛根素(Puerarin)为辣根过氧化物酶(HRP)底物建立了葛根素-辣根过氧化物酶-过氧化氢反应新体系.在反应体系中HRP催化H2O2氧化葛根素(弱荧光)形成二聚体产物(强荧光),该产物在315 nm的激发光下能发射波长为478 nm的强荧光,并且反应体系荧光强度增加与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关.根据此关系和竞争型免疫定量原理,以兔布氏杆菌抗体为分析对象建立了基于葛根素的酶联荧光免疫传感分析新方法.对葛根素性质的研究结果证实,葛根素在空气中稳定、对温度稳定,对H2O2+HRP敏感性优于传统底物如对羟基苯乙酸、Amplex Red和高香草酸.优化了酶联荧光免疫传感分析方法的实验条件如HRP-BrAb用量、温度等.运用新体系测定了兔血清样品的布氏杆菌抗体,该方法线性范围为1.3~120 ng/mL,检测限为1.3 ng/mL(3σ),相对标准偏差为3.8%. 展开更多
关键词 葛根素 hrp荧光底物 布氏杆菌抗体 酶联荧光免疫分析
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基于对羟基桂皮醇的新型酶联荧光免疫传感系统测定布氏杆菌抗体
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作者 湛雪辉 周随安 +3 位作者 龚福春 李飞 曹芬 李侠 《中南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第3期890-895,共6页
以一种纯天然产物对羟基桂皮醇(4-hydroxycinnamic alcohol,HCA)为辣根过氧化物酶(HRP)底物,建立对羟基桂皮醇-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系。对羟基桂皮醇本身只有极弱的荧光,在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物,该二聚体在315nm... 以一种纯天然产物对羟基桂皮醇(4-hydroxycinnamic alcohol,HCA)为辣根过氧化物酶(HRP)底物,建立对羟基桂皮醇-辣根过氧化物酶-过氧化氢新体系。对羟基桂皮醇本身只有极弱的荧光,在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物,该二聚体在315nm的激发光下能发射波长为467nm的强荧光,并且反应体系荧光强度增加值与HRP量在一定浓度范围内呈线性相关。根据此关系和竞争型免疫定量原理,建立兔布氏杆菌抗体测定的荧光酶联免疫传感体系,并对免疫测定条件如pH值、HRP-BrAb用量、BSA和流速等进行优化。运用制备传感体系测定兔布氏杆菌抗体的质量浓度线性范围为2.7~90μg/L,检测限为2.7μg/L,相对标准偏差为4.6%;对羟基桂皮醇在空气中较稳定,对人体无毒害,在临床上可代替传统HRP底物。 展开更多
关键词 对羟基桂皮醇 hrp荧光底物 布氏杆菌抗体 免疫传感体系
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基于新型HRP底物白藜芦醇和Ag/SiO_2纳米粒子的酶联荧光免疫传感体系
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作者 龚福春 曹忠 +2 位作者 谭淑珍 谭亚非 何小川 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 2008年第6期511-517,共7页
以一种纯天然产物——白藜芦醇(resveratrol,RST)作为辣根过氧化物酶(HRP)荧光底物运用于酶联荧光免疫传感体系.RST对HRP,H2O2的荧光响应性能优于传统HRP荧光底物,诸如对羟苯丙酸、AmplexRed和佳味醇.RST本身只有极弱的荧光,在HRP催化... 以一种纯天然产物——白藜芦醇(resveratrol,RST)作为辣根过氧化物酶(HRP)荧光底物运用于酶联荧光免疫传感体系.RST对HRP,H2O2的荧光响应性能优于传统HRP荧光底物,诸如对羟苯丙酸、AmplexRed和佳味醇.RST本身只有极弱的荧光,在HRP催化下可被H2O2氧化成二聚体产物,该二聚体在315nm的激发光下能发射波长为462nm的强荧光,并且反应体系的荧光强度增加值与HRP量在一定浓度范围内成线性相关.根据此关系和竞争型免疫定量原理,以日本血吸虫抗体(SjAb)为模型分析对象,建立了基于新HRP荧光底物的酶联荧光传感分析新方法.运用制备的传感装置测定SjAb的线性范围为1.5×10-6~7.3×10-4g/L,检出限为1.5×10-6g/L,测定浓度为5×10-6g/LSjAb的相对标准偏差为4.7%(n=10).RST的二聚体产物水溶性很低,通过该装置可将酶反应产物沉积在具Ag/SiO2纳米粒子的传感界面上,利用纳米Ag/SiO2对产物吸附富集作用,不仅解决了传统方法不便于测定低水溶性的产物的问题,而且提高了分析灵敏性. 展开更多
关键词 白藜芦醇 hrp新荧光底物 Ag/SiO2纳米粒子 传感体系 日本血吸虫抗体
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