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长链非编码RNA HOXC-AS1对胃癌细胞增殖、迁移、成瘤的调节作用 被引量：3
1
作者 吴鹏 杨芬 +1 位作者 汤翠菊 陈锦飞 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第23期12-15,共4页
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)HOXC-AS1对胃癌细胞增殖、迁移、成瘤能力的调节作用。方法(1)采用实时定量PCR方法检测胃癌细胞株BGC823、SGC7901细胞和正常胃黏膜细胞株GES-1细胞中的HOXCAS1。(2)将胃癌BGC823、SGC7901细胞分别分为HOX... 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)HOXC-AS1对胃癌细胞增殖、迁移、成瘤能力的调节作用。方法(1)采用实时定量PCR方法检测胃癌细胞株BGC823、SGC7901细胞和正常胃黏膜细胞株GES-1细胞中的HOXCAS1。(2)将胃癌BGC823、SGC7901细胞分别分为HOXC-AS1小干扰RNA(siRNA)组、siRNA对照序列组、HOXCAS1过表达组、空质粒组。HOXC-AS1干扰组转染HOXC-AS1小干扰RNA(siRNA),siRNA对照序列组转染siRNA对照序列,HOXC-AS1过表达组转染HOXC-AS1过表达质粒,空质粒组转染空质粒。继续培养24 h,采用MTT法和克隆形成实验观察各组细胞增殖能力,采用Transwell小室实验和细胞划痕实验观察各组细胞迁移能力(结果以穿膜细胞数和划痕愈合率表示)。(3)取5周龄雌性裸鼠20只,随机分为移植瘤组和对照组,各10只,背部皮下分别注射转染后24 h的HOXC-AS1 siRNA组和siRNA对照序列组BGC823细胞约1.5×10~6个,16 d后处死小鼠测肿瘤体积。结果 (1)BGC823、SGC7901细胞中HOXC-AS1的表达量相对于GES-1细胞分别为4.58±0.62、2.89±0.25倍。BGC823、SGC7901细胞HOXC-AS1相对表达量均高于GES-1细胞(P均<0.05)。(2)BGC823、SGC7901细胞HOXC-AS1 siRNA组的OD490值、形成的克隆数、穿膜细胞数、划痕愈合率均低于siRNA对照序列组(P均<0.05);HOXC-AS1过表达组的OD490值、形成的克隆数、穿膜细胞数、划痕愈合率均高于空质粒组(P均<0.05)。(3)移植瘤组、对照组裸鼠肿瘤体积分别为(353.93±147.85)、(706.24±253.25)mm3;质量分别为(0.30±0.13)、(0.75±0.11)mg。移植瘤组裸鼠肿瘤体积和质量均大于对照组,P均<0.05。结论胃癌细胞中HOXC-AS1表达升高。lncRNA HOXC-AS1可促进胃癌细胞增殖、迁移和成瘤。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA hoxc-as1 细胞增殖 细胞迁移 移植瘤 动物实验
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lncRNA HOXC-AS1靶向miR-382-5p调控ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤实验研究
2
作者 徐慧 文薏 林琳 《河北医药》 CAS 2022年第20期3045-3049,共5页
目的探讨lncRNA HOXC-AS1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞HUVEC建立动脉粥样硬化模型;MTT法检测不同ox-LDL对HUVEC细胞活力的影响;pcDNA、pcDNA-lncRNA... 目的探讨lncRNA HOXC-AS1对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的影响及其可能作用机制。方法采用ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞HUVEC建立动脉粥样硬化模型;MTT法检测不同ox-LDL对HUVEC细胞活力的影响;pcDNA、pcDNA-lncRNA HOXC-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-382-5p、pcDNA-lncRNA HOXC-AS1和miR-NC、pcDNA-lncRNA HOXC-AS1和miR-382-5p mimics分别转染至HUVEC细胞后用100 mg/L ox-LDL处理24 h;qRT-PCR法检测lncRNA HOXC-AS1、miR-382-5p的表达量;ELISA法检测IL-1β、IL-6、TNF-α的水平;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测lncRNA HOXC-AS1与miR-382-5p的靶向关系;Western blot法检测Cleaved-caspase-3蛋白表达量。结果与NC组比较,25 mg/L ox-LDL组、50 mg/L ox-LDL组、100 mg/L ox-LDL组细胞活力降低(P<0.05);ox-LDL诱导的HUVEC中lncRNA HOXC-AS1的表达量降低(P<0.05),miR-382-5p的表达量升高(P<0.05);转染pcDNA-lncRNA HOXC-AS1或转染anti-miR-382-5p后可降低ox-LDL诱导的HUVEC中IL-1β、IL-6、TNF-α的水平(P<0.05),并可降低细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白水平(P<0.05);lncRNA HOXC-AS1可靶向调控miR-382-5p的表达;共转染pcDNA-lncRNA HOXC-AS1和miR-382-5p mimics可降低转染pcDNA-lncRNA HOXC-AS1对ox-LDL诱导的HUVEC细胞凋亡及炎性反应的抑制作用。结论lncRNA HOXC-AS1过表达可通过靶向调控miR-382-5p表达而抑制炎性反应及细胞凋亡从而减轻ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 lncRNA hoxc-as1 miR-382-5p 炎症 细胞凋亡
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