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LncRNA HOXB-AS1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响机制研究
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作者 王雨珂 田程 +1 位作者 李代龙 许新华 《中国妇幼健康研究》 2023年第8期56-62,共7页
目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)同源异型盒基因B-AS1(HOXB-AS1)通过Akt-mTOR自噬通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡的影响及机制。方法 人乳腺癌MCF-7细胞于2020年6月20购自中国科学院分子细胞科学卓越创新中心。将乳腺... 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)同源异型盒基因B-AS1(HOXB-AS1)通过Akt-mTOR自噬通路对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡的影响及机制。方法 人乳腺癌MCF-7细胞于2020年6月20购自中国科学院分子细胞科学卓越创新中心。将乳腺癌MCF-7细胞分为对照组(Con组,n=3)、阴性对照组(NC组,n=3)和HOXB-AS1过表达组(HOXB-AS1组,n=3),通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测HOXB-AS1的表达;用CCK-8法检测MCF-7细胞的增殖;用细胞迁移实验、细胞Transwell实验检测MCF-7细胞的迁移及侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡;用Western blot法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、Beclin 1、LC3B、p62、p-Akt、p-mTOR,并对检测结果进行统计分析。结果 乳腺癌MCF-7细胞转染后,Con组的LncRNA HOXB-AS1相对表达量为0.15±0.05、NC组为0.13±0.03、HOXB-AS1组为0.75±0.04,HOXB-AS1组的LncRNA HOXB-AS1相对表达量显著高于Con组和NC组(t=16.030,P=0.000)。MCF-7细胞经HOXB-AS1处理24h后,Con组的MCF-7细胞活力为(100.00±9.13)%、NC组为(100.00±2.94)%、HOXB-AS1组为(60.50±5.72)%,HOXB-AS1组的MCF-7细胞活力显著低于Con组和NC组(t=7.428,P=0.000)。转染HOXB-AS1后,Con组的划痕愈合速度为(61.00±3.61)%、NC组为(59.83±2.26)%、HOXB-AS1组为(39.03±3.61)%,HOXB-AS1组的划痕愈合速度显著低于Con组和NC组(t=16.090,P=0.002)。转染HOXB-AS1后,Con组的MCF-7细胞侵袭数为(343.36±20.82)个、NC组为(316.00±29.46)个、HOXB-AS1组为(105.02±15.00)个,HOXB-AS1组的MCF-7细胞侵袭数显著低于Con组和NC组(t=16.093,P=0.000)。转染HOXB-AS1后,Con组的MCF-7细胞凋亡率为(93.47±4.72)%、NC组为(90.67±7.37)%、HOXB-AS1组为(31.33±2.59)%,HOXB-AS1组的MCF-7细胞凋亡率显著低于Con组和NC组(t=19.992,P=0.000)。HOXB-AS1降低了p-Akt、p-mTOR蛋白的表达,上调了自噬相关蛋白Beclin 1、LC3B的表达,下调了自噬相关蛋白p62的表达,增强了MCF-7细胞的自噬活性。结论 HOXB-AS1抑制了乳腺� 展开更多
关键词 同源异型盒基因B-as1 乳腺癌 自噬 蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白
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硒抑制长链非编码RNA HOXB-AS1表达调控胃癌增殖的作用及其机制
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作者 樊斌 孙率真 +4 位作者 张家耀 张碧涛 姜毅楠 李炫飞 孙建华 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期2133-2136,共4页
目的探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法对人胃癌HGC-27、SNU-1,KATOⅢ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平;根据亚... 目的探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法对人胃癌HGC-27、SNU-1,KATOⅢ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平;根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5μmol/L组、10μmol/L组、15μmol/L组、20μmol/L组、25μmol/L组、30μmol/L组,分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力,筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度;用30μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞,采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平,采用CCK-8检测细胞活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果RT-PCR检测结果表明,与其他细胞株比较,人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14,F=386.913,P<0.05);CCK-8结果显示30μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组(F24 h=178.105,F48 h=1093.759,F72 h=473.833,P<0.05);RT-PCR检测结果表明,亚硒酸钠干预后的HGC-27人胃癌细胞的HOXB-AS1表达水平(0.11±0.01)显著低于对照组(t=43.895,P<0.05),而细胞凋亡率[(36.36±0.46)%]则显著高于对照组(t=-26.737,P<0.05);Western blot结果显示亚硒酸钠组的Akt(1.02±0.00)、磷酸化Akt(p-Akt,0.32±0.02)、mTOR(0.79±0.00)和磷酸化mTOR(p-mTOR,0.49±0.02)的相对表达量都显著低于对照组(tAkt=27.951,tp-Akt=47.666,tmTOR=37.898,tp-mTOR=25.307,P<0.05)。结论硒能够通过抑制人胃癌细胞的lncRNA HOXB-AS1表达来影响Akt/mTOR通路,从而促进人胃癌细胞的凋亡来抑制胃癌的增殖。 展开更多
关键词 硒 hoxb-as1 胃癌 蛋白激酶B/雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白通道
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