乳糖诱导人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中的表达 被引量：8

1

作者 杨渐 俞昌喜 +1 位作者 廖联明 廖虹婷 《海峡药学》 2010年第8期248-252,共5页

目的以含有人源性胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因的大肠杆菌DH5α为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时目的融合蛋白的表达规律。方法利用可表达hIGF-1的工程菌,研究乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌在不同条件下表达目的蛋白的一般规律,并优化... 目的以含有人源性胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因的大肠杆菌DH5α为研究对象,研究以乳糖作为诱导剂时目的融合蛋白的表达规律。方法利用可表达hIGF-1的工程菌,研究乳糖代替IPTG诱导大肠杆菌在不同条件下表达目的蛋白的一般规律,并优化表达条件,表达结果借助SDS-PAGE等方法进行分析。结果乳糖可诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达,最优表达条件为37℃下重组菌株生长至OD600值为0.7时加入诱导浓度为0.8%的乳糖继续诱导4h。诱导的目的融合蛋白相对表达量能够达到占总蛋白的40-60%水平,接近IPTG的诱导表达水平。结论乳糖能够代替IPTG作为诱导剂成功诱导hIGF-1在大肠杆菌中的表达。 展开更多

关键词 人源性胰岛素样生长因子-1 表达 乳糖诱导 大肠杆菌

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人IGF-1在大肠杆菌中的可溶表达和纯化 被引量：5

2

作者 张守涛 梁会娟 张芸 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期14-16,共3页

目的:在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)。方法:根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌OrigamiB(DE3)中与硫氧还蛋白TrxA融合表达,并... 目的:在大肠杆菌中的可溶表达和纯化人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)。方法:根据hIGF-1的氨基酸序列和大肠杆菌密码子偏爱性,利用重叠延伸PCR的方法合成hIGF-1DNA序列,构建表达载体,在大肠杆菌OrigamiB(DE3)中与硫氧还蛋白TrxA融合表达,并通过盐析和镍柱亲合层析进行纯化。结果:SDS-PAGE分析显示,重组融合蛋白以可溶形式存在,分子量约为28kDa,占上清总蛋白的50%以上。经盐析和镍柱亲合层析进行纯化,目标蛋白纯度可达到90%左右。结论:复合干扰素在大肠杆菌中的高效可溶表达。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子1 硫氧还蛋白 可溶表达 纯化

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hIGF-1基因转染促进退变椎间盘Ⅱ型胶原的表达 被引量：3

3

作者 黄宗强 刘尚礼 郑召民 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期369-372,共4页

[目的]探讨人胰岛素样生长因子（human insulin-like growth factor-1，hIGF-1）基因在退变椎间盘中的表达及对椎间盘中Ⅱ型胶原表达的影响。[方法]参考文献制备出腰椎间盘退变（intervertebral disk degeneration，IVDD）动物模型24只... [目的]探讨人胰岛素样生长因子（human insulin-like growth factor-1，hIGF-1）基因在退变椎间盘中的表达及对椎间盘中Ⅱ型胶原表达的影响。[方法]参考文献制备出腰椎间盘退变（intervertebral disk degeneration，IVDD）动物模型24只，随机分为携带hIGF-1基因重组腺病毒（Ad／CMV-hIGF-1）、hIGF-1生长因子及PBS组。L4，5、L5,6椎间盘中分别注射25μl第2代Ad／CMV-hIGF-1（8×10^8PFU）、hIGF-1生长因子（100μg／L）、PBS。注射后1、2、4、8周，Western blot检测hIGF-1蛋白表达；半定量RT-PCR检测Ⅱ型胶原mRNA的表达。[结果]hIGF-1蛋白带出现在7540．00U。Ad／CMV-hIGF-1组hIGF-1蛋白表达持续达4周以上，hIGF-1组表达持续约2周；PBS注射组无hIGF-1蛋白表达。Ⅱ型胶原电泳条带出现在200～300bp；在注射后1～4周，Ad／CMV-hIGF-1组内Ⅱ型胶原mRNA相对表达量进行性增加，8周轻度下降，4个时期比较（F=12．18，P〈0．001）；注射后1～8周，hIGF-1注射组、PBS注射组Ⅱ型胶原mRNA相对表达量进行性下降（F=27．38、21．56，P〈0．001）。相同时间点3组比较，Ⅱ型胶原mRNA相对表达量Ad／CMV-hIGF-1组最高，PBS组最低（F=27．31～39．85，P〈0．001）。[结论]hIGF-1基因在退变椎间盘中的表达能够促进合成Ⅱ型胶原。 展开更多

关键词 椎间盘 退变 表达 higf-1

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人骨形态发生蛋白-2/人胰岛素样生长因子-1对钛种植体表面细胞的成骨效率的影响 被引量：3

4

作者 张迪 邓甜 +5 位作者 罗震 朱安棣 杨勃 钟惠兰 李少萍 杨晓喻 《南方医科大学学报》 CSCD 北大核心 2021年第8期1277-1282,共6页

目的制备人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)/人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)涂层钛(Ti)片,探索其作为牙种植体的功效与机制。方法将hBMP-2与hIGF-1两个生长因子涂覆到具有光滑表面的Ti上,比较两种生长因子包被的Ti与原始Ti在增强骨形成和骨整... 目的制备人骨形态发生蛋白-2(hBMP-2)/人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)涂层钛(Ti)片,探索其作为牙种植体的功效与机制。方法将hBMP-2与hIGF-1两个生长因子涂覆到具有光滑表面的Ti上,比较两种生长因子包被的Ti与原始Ti在增强骨形成和骨整合的功效。通过扫描电子显微镜SEM和接触角测量,分别测定金属样品的表面特性。将MG63细胞种植于Ti上,MTT实验检测细胞增殖,茜素红实验检查细胞钙化结节,Elisa实验检测碱性磷酸酶,Western blot实验检测骨钙素与骨调素的表达。结果SEM检测显示,包被了hBMP-2/hIGF-1的Ti,表面呈雪花辐射样。与原始Ti相比,hBMP-2/Ti、hIGF-1/Ti和hBMP-2/hIGF-1/Ti显示出较低的接触角(P=0.032,0.029,0.028),样本呈现良好的亲水性。MTT实验结果显示,MG63细胞能在hBMP 2/hIGF-1加持的钛片表面良好生长。茜素红实验显示,hBMP-2/hIGF-1的加持能提高MG63细胞的成骨效率(P<0.05)。Elisa实验显示,hBMP-2/hIGF-1能促进碱性磷酸酶的分泌(P=0.021,0.014)。Western blot实验显示,hBMP-2/hIGF-1的加持能诱导骨钙素与骨调素的表达(P<0.05)。结论以hBMP-2和hIGF-1两种生长因子涂覆的Ti,能提高其表面细胞的成骨效率,可以作为一种种植材料进一步用于牙科实验。 展开更多

关键词 HBMP-2 higf-1 肝素 骨形成 骨整合

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人hIGF-1在Pichia pastoris酵母中的分泌表达及表达产物的鉴定

5

作者 彭鸿娟 李明 +3 位作者 杨林 陈晓光 陈新华 王珣章 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第z2期44-47,共4页

根据人ＩＣＦ－１（Ｈｕｍａｎ　Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ－１，ｈＩＧＦ－１）的天然基因序列，在尽量保存原基因序列的基础上，将一些密码子换成Ｐｉｃｈｉａ　ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母的偏爱密码子，人工合... 根据人ＩＣＦ－１（Ｈｕｍａｎ　Ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ－１，ｈＩＧＦ－１）的天然基因序列，在尽量保存原基因序列的基础上，将一些密码子换成Ｐｉｃｈｉａ　ｐａｓｔｏｒｉｓ酵母的偏爱密码子，人工合成ｈＩＧＦ－１双链ＤＮＡ．将此合成基因整合人Ｘ－３３酵母的染色体上，用Ｚｅｏｃｉｎ＋平板筛选得到重组菌株．以胞外分泌的方式表达了ｈＩＧＦ－１蛋白，表达产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳和ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析，得到该表达产物的相对分子质量约为７２００． 展开更多

关键词 higf-1 PICHIA PASTORIS 表达

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钴金属螯合亲和层析在hIGF-1融合蛋白分离纯化中的应用 被引量：2

6

作者 杨渐 俞昌喜 +1 位作者 许盈 廖联明 《药物生物技术》 CAS 2013年第3期220-224,共5页

为探讨钴金属螯合亲和层析应用于分离纯化制备人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的可行性与纯化条件,以重组工程菌E.coli DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,使用钴亲和层析技术分离纯化其表达产物并与镍亲和层析比较,在此基础上尝试应用钴亲和层... 为探讨钴金属螯合亲和层析应用于分离纯化制备人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)的可行性与纯化条件,以重组工程菌E.coli DH5α/pET32a(IGF-1)为对象,使用钴亲和层析技术分离纯化其表达产物并与镍亲和层析比较,在此基础上尝试应用钴亲和层析分离纯化制备较大量的hIGF-1融合蛋白。结果显示,钴亲和层析在分离纯化hIGF-1融合蛋白时表现出更好的可操作性与纯化效果,线性放大条件后分离纯化效果稳定,制备hIGF-1融合蛋白产物纯度约为95%,蛋白获得率约为10.78%。研究初步建立了切实可行的钴金属螯合亲和层析分离纯化制备hIGF-1融合蛋白的工艺。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 金属螯和亲和层析 固相化金属离子亲和层析 六聚组氨酸 纯化 镍离子 钴离子

原文传递

hIGF-1腺相关病毒质粒的构建、包装和滴度测定

7

作者 陈志宏 牛嗣云 +1 位作者 岳凤鸣 高福禄 《承德医学院学报》 2007年第4期354-357,F0002,共5页

目的:构建pAAV/biGF-1载体,并测定pAAV/hIGF-1病毒粒子包装盒病毒滴度。方法:将hIGF- 1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞包装病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。结果:获得插入方向正确的hIGF-1腺相关病毒载体,HEK293... 目的:构建pAAV/biGF-1载体,并测定pAAV/hIGF-1病毒粒子包装盒病毒滴度。方法:将hIGF- 1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞包装病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。结果:获得插入方向正确的hIGF-1腺相关病毒载体,HEK293细胞包装得到了1012滴度的病毒上清。结论:成功构建了hIGF-1腺相关病毒载体,并且获得了较高滴度包装病毒颗粒。 展开更多

关键词 higf-1 腺相关病毒载体(AAV) 病毒滴度

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hIGF-1基因在退变椎间盘中的表达 被引量：1

8

作者 黄宗强 刘尚礼 郑召民 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第21期1651-1653,共3页

[目的]探讨hIGF-1基因在退变椎间盘中的表达。[方法]参考文献制备出椎间盘退变（intervertebral disk degeneration，IVDD）动物模型24只，随机分为Ad／CMV—hIGF-1、hIGF-1生长因子及PBS组，每组有新西兰大白兔8只。L4,5、L5,6椎间盘... [目的]探讨hIGF-1基因在退变椎间盘中的表达。[方法]参考文献制备出椎间盘退变（intervertebral disk degeneration，IVDD）动物模型24只，随机分为Ad／CMV—hIGF-1、hIGF-1生长因子及PBS组，每组有新西兰大白兔8只。L4,5、L5,6椎间盘中分别注射第2代Ad／CMV—hIGF-1（8×10^8PFU）、hIGF-1生长因子（100μg／L）、PBS25μL。注射后1、2、4、8周，Western blot检测椎间盘中hIGF-1蛋白表达。[结果]hIGF-1蛋白带出现在7539．96μ。Ad／CMV—hIGF-1、hIGF-1蛋白表达持续达4周以上，hIGF-1组表达持续约2周；PBS注射组无hIGF-1蛋白表达。[结论]hIGF-1基因能够在退变椎间盘中表达；hIGF-1基因转染表达的持续时间长于单纯hIGF-1生长因子直接注射。 展开更多

关键词 椎间盘 退变 higf-1

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胰岛素样生长因子-1基因原核表达载体的构建及表达蛋白的生物学活性 被引量：3

9

作者 曹传平 陈晓虹 +6 位作者 吴建国 商阿丽 虞慧华 康五朋 郑玲莉 张敬 鞠佃文 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第10期848-851,共4页

目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1(rhIGF-1)蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans载体,进行DNA序列分析后,亚克隆入表达载体pTE,转化大肠杆... 目的构建人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)基因原核表达载体,并检测表达的重组人IGF-1(rhIGF-1)蛋白的生物学活性。方法以pUC57-hIGF-1质粒为模板,PCR扩增hIGF-1基因,克隆入pTEtrans载体,进行DNA序列分析后,亚克隆入表达载体pTE,转化大肠杆菌W3110,进行诱导表达,表达产物经阳离子交换层析和凝胶过滤层析纯化,并进行Tricine-SDS-PAGE和Western blot分析。MTT法检测rhIGF-1促MCF-7细胞的增殖作用。结果转化质粒pTE-hIGF-1的大肠杆菌经诱导后,以可溶性形式表达相对分子质量约为7700的目的蛋白,表达量约占菌体总蛋白的8%。Western blot证实该蛋白具有良好的反应原性,Tricine-SDS-PAGE证实纯度达98%以上,MTT证实具有良好的促MCF-7细胞增殖的作用。结论已成功构建了含hIGF-1基因的原核表达载体,并获得具有生物学活性的高纯度rhIGF-1。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 原核表达 纯化 生物学活性

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hIGF-1转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的实验研究 被引量：2

10

作者 朱清远 王玉发 +1 位作者 顾加祥 李立森 《中国实验诊断学》 北大核心 2010年第6期808-811,共4页

目的了解周围神经损伤后人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的作用。方法构建hIGF-1的真核细胞表达质粒,90只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外... 目的了解周围神经损伤后人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因促周围神经再生和抑制肌肉萎缩的作用。方法构建hIGF-1的真核细胞表达质粒,90只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA为4μg);模型组注射pcDNA3.1、LipfectAmine和生理盐水混合液10μl;空白对照组:不注射任何物质。根据不同的时间点(2天,7天,14天和28天)观察hIGF-1质粒转染、坐骨神经再生、骨骼肌萎缩、脊髓运动神经元细胞病理变化。结果不同时相再生神经纤维质和量、骨骼肌萎缩程度、中枢神经元的变化等hIGF-治疗组明显大于模型组和空白对照组(P<0.01)。超微结构见hIGF-1治疗组的再生神经纤维成熟度优于其它两组。结论周围神经损伤后hIGF-1体内转基因能促进周围神经的再生和抑制骨骼肌的萎缩。 展开更多

关键词 周围神经 胰岛素样生长因子-1 电生理学 组织学

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胰岛素样生长因子-1工程细胞在糖尿病中的治疗作用 被引量：1

11

作者 牛嗣云 岳凤鸣 +4 位作者 高福禄 陈志宏 杨慧 赵焕英 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期558-563,共6页

目的观察胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程细胞移植对糖尿病模型鼠的降血糖作用。方法将hIGF-1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞及病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。将高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞(MSCs)并... 目的观察胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)工程细胞移植对糖尿病模型鼠的降血糖作用。方法将hIGF-1基因克隆入pAAV腺病毒相关病毒载体,以HEK293包装细胞及病毒颗粒,HT1080细胞检测病毒滴度。将高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞(MSCs)并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察病毒感染MSCs植入对糖尿病模型小鼠血糖的影响。结果成功构建了hIGF-1腺病毒相关病毒载体,HEK293细胞包装得到了1012滴度的病毒上清。MSCs病毒感染率达60%。稳定表达hIGF-1的MSCs腹腔移植后,可见糖尿病小鼠的血糖明显下降(P<0.05)。结论稳定表达hIGF-1的MSCs对糖尿病动物模型有降糖作用,说明IGF-1基因可作为糖尿病基因治疗的候选基因。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子-1 腺病毒相关病毒载体(AAV) 骨髓基质细胞 糖尿病

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水稻种子表达人源性胰岛素样生长因子1基因

12

作者 戴晴 肖刚 李建粤 《种子》 CSCD 北大核心 2011年第11期15-19,共5页

人源性胰岛素样生长因子1(hIGF-1)是一类在许多人类疾病治疗中都具有重要作用的细胞因子。本研究成功构建了以水稻种子高效表达的谷蛋白Gt1基因5.3 kb启动子引导hIGF-1基因(higf-1)的表达载体:pCAMBIA 1301-5.3kbGt1-higf-1-nos。在此... 人源性胰岛素样生长因子1(hIGF-1)是一类在许多人类疾病治疗中都具有重要作用的细胞因子。本研究成功构建了以水稻种子高效表达的谷蛋白Gt1基因5.3 kb启动子引导hIGF-1基因(higf-1)的表达载体:pCAMBIA 1301-5.3kbGt1-higf-1-nos。在此基础上,将构建好的表达载体,通过根癌农杆菌介导法转化水稻,获得转基因植株。通过对转基因水稻植株叶片总DNA的PCR检测,初步确定表达载体的T-DNA区段已经成功整合入水稻基因组中。目的基因RT-PCR检测结果显示,higf-1在转基因水稻种子中能够正常转录。开展本试验为利用水稻及其他单子叶植物表达IGF-1研究奠定了基础。 展开更多

关键词 胰岛素样生长因子1基因 水稻 Gt1启动子 生物反应器

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核基质附着区(MAR)调控的人胰岛素样生长因子(hIGF-1)转基因兔的制备

13

作者 葛宝生 朱裕鼎 +2 位作者 陈永福 沈孝宙 安民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期521-525,共5页

用ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子－１（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收... 用ＥｃｏＲＩ＋ＨｉｎｄⅢ双酶解含鸡α－珠蛋白基因５′端核基质附着区（ＭＡＲ）、小鼠金属硫蛋白基因启动子（ＭＴ－１）和人胰岛素样生长因子－１（ｈＩＧＦ－１）基因的ｐＭＴＳＭＣＡＧ质粒，０．６％琼脂糖凝胶电泳，玻璃乳回收纯化ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１片段（３．９ｋｂ），用该片段制备转基因兔。利用水平显微注射系统注射１－细胞兔胚胎４６８枚，移植到３６只受体兔，有８只妊娠，共产下１９只活仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ，应用ＰＣＲ技术分析其外源基因整合情况，获得８只阳性兔（显示出约６００ｂｐ外源ＤＮＡ条带）。再对８只阳性兔的ＰＣＲ产物进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，得到５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１外源基因的转基因兔，转基因整合率为２６．３％（５／１９）。用１只阳性转基因公兔（５０２号）繁殖了６窝，共获得４２只仔兔。采仔兔耳样提取基因组ＤＮＡ后，如上用ＰＣＲ分析和做Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，Ｆ１代中有５只整合有ＭＡＲ／ＭＴ／ｈＩＧＦ－１融合基因。 展开更多

关键词 核基质附着区 人胰岛素样 生长因子 转基因兔

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hIGF-1转基因抑制失神经肌肉萎缩的实验研究

14

作者 朱清远 王玉发 +1 位作者 顾加祥 李立森 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第12期1675-1677,共3页

目的了解人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因抑制肌肉萎缩的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA... 目的了解人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)体内转基因抑制肌肉萎缩的作用。方法30只雄性Wistar大鼠,建立坐骨神经再生室动物模型后随机分为3组。hIGF-1治疗组:挤压伤处神经外膜下即刻注射pcDNAhIGF-1和LipfectAmine混合液10μl(hIGF-1 DNA为4μg);模型组:注射pcDNA3.1、LipfectAmine和生理盐水混合液10μl;空白对照组:不注射任何物质。术后8周行神经-肌电检查和腓肠肌肌湿重与肌纤维横截面积检测。结果术后8周检查小腿三头肌复合肌肉活动电位(CMAP)的最大波幅和潜伏期,腓肠肌肌湿重和肌纤维横截面积,hIGF-1治疗组明显好于模型组和空白对照组(P<0.01)。结论周围神经损伤后胰岛素样生长因子-1体内转基因能有效抑制靶肌肉的萎缩。 展开更多

关键词 周围神经 胰岛素样生长因子-1 电生理学 肌肉萎缩

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hIGF-1工程细胞对糖尿病小鼠血糖的影响

15

作者 牛嗣云 岳凤鸣 +3 位作者 高福禄 陈志宏 杨慧 徐群渊 《承德医学院学报》 2007年第4期348-350,F0002,共4页

目的:观察hIGF-1工程细胞移植对糖尿病模型小鼠的降血糖作用。方法:用高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞,并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察糖尿病模型小鼠血糖的变化。结果:稳定表达hIGF-1的骨髓基质细胞腹腔移植后,可见糖尿病小鼠... 目的:观察hIGF-1工程细胞移植对糖尿病模型小鼠的降血糖作用。方法:用高病毒滴度的病毒上清感染骨髓基质细胞,并植入糖尿病模型小鼠腹腔内,观察糖尿病模型小鼠血糖的变化。结果:稳定表达hIGF-1的骨髓基质细胞腹腔移植后,可见糖尿病小鼠的血糖明显下降(P<0.05)。结论:稳定表达hIGF- 1的骨髓基质细胞对糖尿病动物模型有降糖作用,说明IGF-1基因可作为糖尿病基因治疗的候选基因。 展开更多

关键词 hlGF—1 腺相关病毒载体(AAV) 骨髓基质细胞 糖尿病

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人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达和活性检测 被引量：5

16

作者 岳凤鸣 赵焕英 +2 位作者 杨慧 高福禄 徐群渊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期306-311,共6页

目的　克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型 (hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测 ,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。　方法　提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段 ,重组于pUCM T载体 ,测序正确后构建表达载体 ,转染猴肾... 目的　克隆人胰岛素样生长因子Ⅰ型 (hIGF 1) ,构建真核表达载体并进行表达及活性检测 ,为IGF 1基因治疗糖尿病奠定基础。　方法　提取胎儿肝脏总RNA ,RT PCR法扩增IGF 1cDNA片段 ,重组于pUCM T载体 ,测序正确后构建表达载体 ,转染猴肾成纤维细胞系COS 7,用原位杂交和免疫组织化学检测表达 ,收集培养上清以胰岛素刺激释放实验进行活性测定。　结果　扩增得到 710bp带有Kozak序列的IGF 1cDNA片段 ;成功构建了真核表达载体pCI neo hIGF 1;IGF 1在COS 7细胞得到了表达 ,并具有刺激胰岛素分泌的活性。　结论　新构建的载体pCI neo hIGF 1能在COS 7细胞中表达、分泌 ,且所分泌的IGF 1具有生物活性。 展开更多

关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因克隆 基因表达 检测 生物活性 糖尿病

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