基于网络药理学和动物实验研究HIF-1α信号通路调控糖酵解探讨阳和汤干预乳腺癌肺转移皮下瘤的机制 被引量：7

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作者 刘洋靖 李晓柳 +3 位作者 马朝群 陈德轩 王高元 朱太阳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2352-2359,共8页

采用网络药理学和动物实验研究阳和汤干预乳腺癌肺转移皮下瘤的作用机制,为探讨阳和汤治疗乳腺癌提供实验依据和参考。于TCMSP(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform)和SwissTargetPredic... 采用网络药理学和动物实验研究阳和汤干预乳腺癌肺转移皮下瘤的作用机制,为探讨阳和汤治疗乳腺癌提供实验依据和参考。于TCMSP(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform)和SwissTargetPrediction数据库检索阳和汤组方药物的化学成分并获取靶点;GeneCards、OMIM(Online Mendelian Inheritance in Man)数据库查询疾病靶点;Excel筛选交集靶点并绘制韦恩图;构建蛋白互作网络;R语言进行基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。53只SPF级雌性Bablc/6小鼠随机分为正常组、模型组以及阳和汤低、高剂量组,正常组8只,其余每组15只,阳和汤灌胃30 d,模型组、正常组灌胃同体积生理盐水。每日称量体质量、测量瘤体大小等情况,绘制小鼠体质量变化曲线、原位瘤生长曲线,结束后收集乳腺癌皮下瘤样本,HE染色观察皮下瘤,PCR及Western blot检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)、丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)、乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)、葡萄糖转运子1(glucose transporter 1,GLUT1)的mRNA及蛋白水平。网络药理学获取阳和汤213个活性成分、185个药物-疾病交集靶点,并提出阳和汤可能通过HIF-1α信号通路调控糖酵解干预乳腺癌的假设。动物实验证实,与模型组比较,阳和汤高、低剂量组HIF-1α、PKM2、LDHA、GLUT1的mRNA及蛋白表达水平均显著降低。综上,阳和汤早期对乳腺癌肺转移皮下瘤具有一定的抑制作用,可能通过HIF-1α信号通路调控糖酵解对乳腺癌肺转移进行干预。 展开更多

关键词 乳腺癌肺转移 阳和汤 hif-1α信号通路 糖酵解 网络药理学

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丙泊酚经HIF-1α信号通路对头颈鳞状细胞癌SCC-74细胞增殖、凋亡与侵袭的影响 被引量：1

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作者 王飞 朱贲贲 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2020年第2期120-125,共6页

目的探讨丙泊酚经HIF-1α信号通路对头颈鳞状细胞癌SCC-74细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法体外培养SCC-74细胞,丙泊酚低剂量组、丙泊酚中剂量组和丙泊酚高剂量组分别给予终浓度为2.5、10、20μg/mL的丙泊酚,对照组给予等量DMEM培养液... 目的探讨丙泊酚经HIF-1α信号通路对头颈鳞状细胞癌SCC-74细胞增殖、凋亡与侵袭的影响。方法体外培养SCC-74细胞,丙泊酚低剂量组、丙泊酚中剂量组和丙泊酚高剂量组分别给予终浓度为2.5、10、20μg/mL的丙泊酚,对照组给予等量DMEM培养液,继续培养48 h后收获细胞,检测SCC-74细胞增殖、凋亡与侵袭情况,同时检测SCC-74细胞中Akt、p-Akt、HIF-1α、Fas、FasL、Bcl-2、Bax蛋白和mRNA水平。结果与对照组比较,各丙泊酚剂量组SCC-74细胞增殖率和侵袭数降低,细胞凋亡率增加(P<0.05);与对照组比较,各丙泊酚剂量组SCC-74细胞中p-Akt蛋白、Bcl-2蛋白和mRNA水平降低,HIF-1α、Fas、FasL和Bax蛋白和mRNA水平增高,呈剂量依赖性(P<0.05)。各组SCC-74细胞中Akt蛋白和mRNA水平无统计学差异(P>0.05)。结论丙泊酚通过激活HIF-1α信号通路,抑制SCC-74细胞增殖和侵袭,促进SCC-74细胞凋亡。 展开更多

关键词 丙泊酚 hif-1α信号通路 头颈鳞状细胞癌 细胞增殖 细胞凋亡 细胞侵袭

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低氧三维培养微环境通过HIF-1α信号通路促进骨髓间充质干细胞增殖机制的研究 被引量：1

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作者 田琨 穆军升 伯平 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS CSCD 2019年第4期385-389,共5页

目的探究低氧三维培养微环境对骨髓间充质干细胞增殖的影响及影响机制。方法 P5代小鼠骨髓间充质干细胞和聚-3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[P(3HB-co-4HB)]分别在三维常氧(20%)和三维低氧(4%)条件下共同培养,24 h后CCK-8法测定两组细胞的... 目的探究低氧三维培养微环境对骨髓间充质干细胞增殖的影响及影响机制。方法 P5代小鼠骨髓间充质干细胞和聚-3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯[P(3HB-co-4HB)]分别在三维常氧(20%)和三维低氧(4%)条件下共同培养,24 h后CCK-8法测定两组细胞的增殖情况;12 h后实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)检测HIF-1α基因表达水平;24 h后Western blotting检测两组HIF-1α蛋白的表达情况。结果共同培养24 h后,CCK-8法检测显示低氧组OD值显著大于常氧组(0.455±0.027 vs. 0.352±0.090,n=12,P<0.05);低氧培养12 h后,低氧组的HIF-1αmRNA表达水平显著高于常氧组(P<0.05);低氧培养24 h后,同常氧组(0.47±0.05)比较,低氧组(0.63±0.06)HIF-1α蛋白相对表达水平显著增高(n=3,P<0.05)。结论低氧三维微环境可促进骨髓间充质干细胞的增殖,这种效应可能与HIF-1α信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 低氧微环境 三维培养 聚-3羟基丁酸酯-co-4羟基丁酸酯 心肌梗死 hif-1α信号通路

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二陈汤合桃红四物汤对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠主动脉Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路作用研究 被引量：24

4

作者 王俊岩 陈文娜 +4 位作者 贾连群 张林 徐跃 孙宏伟 杨关林 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2417-2420,共4页

目的:观察二陈汤合桃红四物汤对ApoE基因敲除AS小鼠主动脉Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路的干预作用。方法:50只ApoE-/-小鼠随机分成模型组、中药低、中、高剂量组、阳性对照组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组和各治疗组给予高... 目的:观察二陈汤合桃红四物汤对ApoE基因敲除AS小鼠主动脉Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路的干预作用。方法:50只ApoE-/-小鼠随机分成模型组、中药低、中、高剂量组、阳性对照组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组和各治疗组给予高脂饲料喂养,空白组给予普通饲料喂养。于第9周开始,中药低、中、高剂量组、阳性对照组分别给予对应药物治疗4周。Western Blot法检测主动脉Nox4、NK-κB p65蛋白表达水平,RT-PCR法检测主动脉VEGF、MMP-9、HIF-1αmRNA表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠主动脉Nox4、NF-κB p65蛋白表达水平和VEGF、MMP-9、HIF1-αmRNA表达水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组小鼠主动脉Nox4、NF-κB p65蛋白表达水平和VEGF、MMP-9、HIF1-αmRNA表达水平有不同程度改善,以中药中剂量组、中药高剂量组、阳性对照组效果较为明显(P<0.05,P<0.01)。结论:二陈汤合桃红四物汤抗AS的作用机制可能是通过抑制Nox4/NF-κB/HIF-1α信号通路实现的。 展开更多

关键词 二陈汤 桃红四物汤 动脉粥样硬化 Nox4/NF-κB/hif-1α信号通路

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补肾安胎冲剂调控VHL/HIF-1α信号通路改善复发性流产小鼠母胎界面血管生成的实验研究 被引量：16

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作者 郝乐乐 李伟莉 +3 位作者 吴花 金雅 王媛中 余欣慧 《安徽中医药大学学报》 2020年第1期65-70,共6页

目的研究补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠蜕膜组织中希佩尔-林道抑癌基因(Von Hippel-Lindau,VHL)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的影响,探讨其降低胚胎丢失率的作用机制。方法以CBA/J雌鼠与BALB/C雄鼠合笼复... 目的研究补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠蜕膜组织中希佩尔-林道抑癌基因(Von Hippel-Lindau,VHL)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的影响,探讨其降低胚胎丢失率的作用机制。方法以CBA/J雌鼠与BALB/C雄鼠合笼复制正常妊娠小鼠模型,以CBA/J雌鼠和DBA/2雄鼠合笼复制复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)小鼠模型,将其随机分为模型组,黄体酮组,补肾安胎冲剂高、中、低剂量组,每组10只。妊娠第1天,正常组与模型组采取蒸馏水灌胃,黄体酮组以26mg/(kg·d)灌胃,补肾安胎冲剂高、中、低剂量组分别按35.1、11.7、3.9g/(kg·d)灌胃。连续干预15d后处死小鼠,收集样本,采用ELISA检测各组小鼠血清VHL、HIF-1α水平,采用荧光定量PCR、免疫组织化学法、Western blot法分别检测各组小鼠蜕膜组织中VHL、HIF-1αmRNA及其蛋白表达水平。结果补肾安胎冲剂显著降低RSA小鼠胚胎丢失率(P<0.05),降低血清和蜕膜组织中VHL水平和VHL mRNA表达水平(P<0.05),升高血清和蜕膜组织中HIF-1α水平和HIF-1αmRNA表达水平(P<0.05),呈现明显的剂量依赖性(P<0.05)。结论补肾安胎冲剂降低RSA小鼠流产率的机制可能与激活VHL/HIF-1α信号通路有关。 展开更多

关键词 补肾安胎冲剂 复发性流产 母胎界面 VHL/hif-1α信号通路

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基于miR-126-3p调控mTOR/HIF-1α信号通路探讨电针促脑缺血大鼠血管新生的机制 被引量：10

6

作者 李梦醒 王玉 +5 位作者 李真 刘箐 史可鉴 兰崴 李斯亮 唐巍 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期749-758,共10页

目的:观察电针对脑缺血模型大鼠miR-126-3p及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路的影响,探讨电针疗法对脑缺血后血管新生的调控机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和抑制剂组,每组按治疗时... 目的:观察电针对脑缺血模型大鼠miR-126-3p及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路的影响,探讨电针疗法对脑缺血后血管新生的调控机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和抑制剂组,每组按治疗时程分为3、7、14 d共3个亚组,各亚组12只。采用Zea Longa法建立右侧大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型。电针组予“大椎”“百会”电针治疗,疏密波,频率2 Hz/20 Hz,强度0.5 mA,20 min/次,术后4 h开始电针治疗,1次/d,分别治疗3、7、14 d。抑制剂组在电针治疗的基础上予腹腔注射mTOR特异性抑制剂雷帕霉素(0.1 mg/mL),每次0.3 mg/kg, 1次/d,分别注射3、7、14 d。改良神经功能缺损评分(mNSS)评估大鼠神经功能缺损情况,透射电镜观察大鼠缺血半暗区皮层神经元及微血管内皮超微结构,免疫组织化学法检测大鼠缺血半暗区皮层内皮微血管密度(MVD),Western blot法和荧光定量PCR法分别检测大鼠缺血半暗区皮层mTOR、HIF-1α蛋白及其mRNA和miR-126-3p的表达。结果:与同时点对照组比较,模型组大鼠mNSS升高(P<0.01),缺血半暗区皮层神经元及微血管内皮细胞水肿,细胞结构损坏明显,MVD值与缺血半暗区皮层mTOR、HIF-1α蛋白及mRNA表达均升高(P<0.01), miR-126-3p表达降低(P<0.01)。与同时点模型组比较,两干预组mNSS显著降低(P<0.01,P<0.05),缺血半暗区皮层神经元与微血管内皮细胞超微结构有不同程度改善且电针组更佳,两治疗组3、14 d时MVD值升高(P<0.01),电针组7 d时MVD值升高(P<0.05),两干预组缺血半暗区皮层mTOR、HIF-1α蛋白及mRNA及miR-126-3p表达均升高(P<0.01,P<0.05)。与同时点电针组比较,抑制剂组MVD值降低(P<0.05,P<0.01),缺血半暗区皮层mTOR、HIF-1α蛋白及mRNA及miR-126-3p表达均降低(P<0.01)。与本组4 h和3、7 d时比较,模型组、电针组、抑制剂组mNSS评分均在14 d时最低(P<0.01);与本组3 d时比较,模型组、电针� 展开更多

关键词 脑缺血 电针 血管新生 微小RNA mTOR/hif-1α信号通路

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苯乙醇苷类化合物通过PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α信号通路对高原低氧大鼠认知功能损伤的保护作用 被引量：11

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作者 王建 李晓琳 +3 位作者 李茂星 马剑平 沈育桦 邱彦 《国际药学研究杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期1137-1145,共9页

目的研究毛蕊花糖苷、松果菊苷及酪醇等苯乙醇苷类化合物对高原低氧大鼠认知功能损伤的保护作用及机制。方法采用八臂迷宫训练大鼠认知能力,随机取72只训练成功的大鼠并分为6组:常氧空白组(蒸馏水,2 ml/200 g)、低氧模型组(蒸馏水,2 ml/... 目的研究毛蕊花糖苷、松果菊苷及酪醇等苯乙醇苷类化合物对高原低氧大鼠认知功能损伤的保护作用及机制。方法采用八臂迷宫训练大鼠认知能力,随机取72只训练成功的大鼠并分为6组:常氧空白组(蒸馏水,2 ml/200 g)、低氧模型组(蒸馏水,2 ml/200 g)、毛蕊花糖苷组(150 mg/kg)、松果菊苷组(150 mg/kg)、酪醇组(150 mg/kg)及红景天苷组(150 mg/kg),每组12只。连续灌胃给药7 d。第4天给药后,除常氧空白组置于常氧(海拔1500 m)外,其余组置于大型模拟高原低氧环境动物实验舱(海拔7500 m,72 h)。低氧暴露前后八臂迷宫测试(海拔4000 m)评价其认知功能,HE染色观察海马组织病理学改变,并测定相关组织中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,PCR及West⁃ern印迹法检测海马组织中PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α信号通路相关mRNA及蛋白表达。结果与常氧空白组相比,低氧组大鼠记忆相关指标错误率显著升高(均P<0.01),低氧模型组海马结构明显损伤,海马组织ROS、MDA及血清MDA显著升高(均P<0.01),海马组织和血清GSH含量、SOD活性显著降低(均P<0.01),PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α信号通路被抑制(P<0.01);与低氧模型组相比,各给药组对大鼠相关指标均有改善作用,其中酪醇组的效果最好,大鼠记忆错误率有所下降(P<0.01),海马结构损伤减轻,海马组织ROS、MDA及血清MDA含量都呈现不同程度的降低(P<0.01),海马组织和血清GSH含量、SOD活性呈现不同程度的升高(P<0.01),PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α信号通路相关mRNA及蛋白表达有所改善(P<0.01)。结论毛蕊花糖苷、松果菊苷、酪醇及红景天苷对高原低氧认知功能损伤有一定的保护作用,其中酪醇效果最明显。其机制可能与抑制组织损伤、抗氧化应激及改善PI3K/Akt/mTOR-HIF-1α信号通路有关。 展开更多

关键词 苯乙醇苷 毛蕊花糖苷 松果菊苷 酪醇 高原低氧认知损伤 PI3K/Akt/mTOR-hif-1α信号通路 海马组织

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当归红芪超滤膜提取物调控肾脏缺氧介导的HIF⁃1α信号通路改善DKD大鼠肾脏纤维化的机制

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作者 张小琳 李荣科 +4 位作者 高婷 徐庆全 万生芳 张磊 卢添翼 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1602-1610,共9页

通过当归红芪超滤膜提取物干预糖尿病肾病(diabetic kidneydisease,DKD)模型大鼠,观察DKD大鼠肾脏缺氧介导的缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和HI... 通过当归红芪超滤膜提取物干预糖尿病肾病(diabetic kidneydisease,DKD)模型大鼠,观察DKD大鼠肾脏缺氧介导的缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和HIF⁃1α/血小板源性生长因子(platelet⁃derived growth factor,PDGF)/血小板源性生长因子受体(platelet derived growth factor receptor,PDGFR)信号通路的表达,探讨当归红芪超滤膜提取物改善DKD大鼠肾脏纤维化的作用机制。将50只SPF级雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白组7只及造模组,造模组禁食24 h后一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高糖高脂饲料喂养制备DKD模型,造模成功后,将造模组随机分为模型组,当归红芪超滤膜提取物低、中剂量组,各7只,厄贝沙坦组和当归红芪超滤膜提取物高剂量组各8只。给予药物干预12周,观察大鼠一般情况,每周检测大鼠的体质量及血糖,于灌胃第6、12周检测大鼠24 h尿蛋白(urinary protein,UP);末次给药后,检测大鼠肾功能相关指标;Masson染色观察肾组织病理变化;免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测肾组织脯胺酰羟化酶2(prolyl hydroxylase domain 2,PHD2)、HIF⁃1α蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real⁃time qPCR)检测肾组织PHD2、VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白的表达。结果显示,与模型组比较,各给药组大鼠血清中糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平不同程度降低(P<0.05或P<0.01),呈剂量相关性;大鼠肾脏病理明显改善;大鼠肾脏中PHD2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达显著下调(P<0.05或P<0.01);大鼠肾脏中HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白表达水平显著降低(P<0.01);PHD2阳性细胞率表达上升(P<0.01)。综上,当归� 展开更多

关键词 当归红芪超滤膜提取物 糖尿病肾病 肾脏缺氧 细胞外基质沉积 hif⁃1α信号通路

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怀中1号地黄中2-phenylethyl-beta-glucopyranoside通过调节PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α通路对低氧性肺动脉高压的影响

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作者 曾梦楠 张宇涵 +8 位作者 郭彭莉 张梓玉 刘晏灵 王茹 铁玘美 王媛媛 常方卓 冯卫生 郑晓珂 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第14期3857-3867,共11页

研究怀中1号地黄中2-phenylethyl-beta-glucopyranoside(Phe)对低氧诱导肺动脉高压小鼠的保护作用及其机制,为临床治疗肺动脉高压提供理论依据。首先将雄性C57BL/6N小鼠随机分为正常组,模型组,阳性药波生坦组(100 mg·kg^(-1)),Phe... 研究怀中1号地黄中2-phenylethyl-beta-glucopyranoside(Phe)对低氧诱导肺动脉高压小鼠的保护作用及其机制,为临床治疗肺动脉高压提供理论依据。首先将雄性C57BL/6N小鼠随机分为正常组,模型组,阳性药波生坦组(100 mg·kg^(-1)),Phe低、高剂量(20、40 mg·kg^(-1))组。除正常组外,其余各组均在10%的低氧环境中连续造模5周,并在第3周开始灌胃给药14 d,探究各组小鼠心肺功能、右心室压力、咳喘指数、肺部损伤、细胞凋亡、氧化应激相关指标、免疫细胞及磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)/缺氧诱导因子(hypoxic inducible facter,HIF)^(-1)α通路相关蛋白或mRNA水平。接着进一步采用缺氧诱导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cell,PASMC)合并PI3K激动剂(740Y-P)对Phe干预肺动脉高压的机制进一步探究。结果显示Phe可显著提高肺动脉高压小鼠的心肺功能,降低右心室压力、咳喘指数及肺部损伤,减少细胞凋亡、氧化应激相关指标及磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphorylated mammalian target of rapamycin,p-mTOR)入核水平,抑制HIF^(-1)α和PI3K mRNA与蛋白表达水平,并维持小鼠机体免疫细胞稳态。进一步的机制探究中发现,Phe显著降低缺氧诱导PASMC的细胞活力与迁移能力,减少HIF^(-1)α和PI3K蛋白表达及p-Akt、p-mTOR入核水平,且此作用可被740Y-P阻断。因此,推测Phe可通过减轻肺组织氧化应激失衡与凋亡,调节免疫水平来发挥抗肺动脉高压作用,其机制可能和调控PI3K/Akt/mTOR/HIF^(-1)α通路有关。该研究以期为肺动脉高压的治疗提供药物参考及研究思路。 展开更多

关键词 肺动脉高压 怀中1号地黄 2-phenylethyl-beta-glucopyranoside 缺氧 PI3K/Akt/mTOR/hif-1α信号通路

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白头翁汤调控PI3K/AKT-HIF-1α通路治疗VVC小鼠的研究

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作者 陆松侠 段强军 +3 位作者 王瑞麟 郭希 高敏 黄茸茸 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期804-811,共8页

目的基于磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)-缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)通路探究白头翁汤对外阴阴道假丝酵母菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)小鼠... 目的基于磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)-缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)通路探究白头翁汤对外阴阴道假丝酵母菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)小鼠的作用机制。方法雌性SPF级昆明种小鼠采用苯甲酸雌二醇皮下注射联合白色念珠菌混悬液阴道接种建立VVC小鼠模型。造模成功小鼠随机分为模型组,白头翁汤高、中、低剂量组(23.4、11.7、5.85 g·kg^(-1)),氟康唑组(0.02 g·kg^(-1)),每组20只。另取20只小鼠只注射苯甲酸雌二醇作为空白组。模型成功后次日给药,连续14 d。末次给药2 h后,巴氏染色法观测阴道灌洗液内中性粒细胞数量;HE染色法观察阴道组织形态;ELISA法测定阴道组织中烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(Nicotinamide adenine dinucleo-tide phosphate oxidase 2,NOX2)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性及活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平;qPCR检测阴道组织PI3K、AKT、HIF-1α的mRNA表达;Western blot检测阴道组织p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、HIF-1α蛋白表达。结果与空白组小鼠相比,模型组小鼠阴道灌洗液含有大量中性粒细胞(P<0.001);阴道黏膜层脱落严重,大量炎细胞浸润;阴道组织ROS、MDA水平升高(P<0.001),NOX2活性提高(P<0.001),SOD活性降低(P<0.001),PI3K、AKT、HIF-1αmRNA表达降低(P<0.001),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的比值、HIF-1α蛋白表达降低(P<0.001)。与模型组小鼠相比,白头翁汤高、中剂量组阴道灌洗液内中性粒细胞数量降低明显(P<0.01,P<0.001);阴道组织黏膜状况呈现不同程度的改善;阴道组织ROS、MDA水平有所降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001),NOX2活性降低(P<0.01,P<0.001),SOD活性升高(P<0.01,P<0.001);白头翁汤高剂量组阴道组织PI3K、AKT、HIF-1αmRNA表达升高(P<0.001),p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT的比值、HIF-1α蛋白表达升高(P<0.001)。结论白头翁汤可通过调控PI3K/A 展开更多

关键词 白头翁汤 外阴阴道假丝酵母菌病 PI3K/AKT-hif-1α信号通路 ROS

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甘草酸对慢性肾脏病大鼠心肌HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α信号通路的影响 被引量：2

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作者 张雪 王家瑞 陈康寅 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期155-160,共6页

目的 探讨应用甘草酸(Gly)治疗时对慢性肾脏病(CKD)大鼠心室肌高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子κB/缺氧诱导因子1α(HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α)信号通路的影响。方法 将38只Wistar大鼠按随机数字表法分为4组:假手术(Sham)组、Sham... 目的 探讨应用甘草酸(Gly)治疗时对慢性肾脏病(CKD)大鼠心室肌高迁移率族蛋白B1/Toll样受体4/核因子κB/缺氧诱导因子1α(HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α)信号通路的影响。方法 将38只Wistar大鼠按随机数字表法分为4组:假手术(Sham)组、Sham+Gly组、CKD组、CKD+Gly组,5/6肾切除制备CKD模型,Gly腹腔注射给药(80 mg/kg)。4周后行血流动力学及心脏彩超观察各组大鼠心脏功能;心室取血检测生化指标;心肌组织取材检测HMGB1、TLR4、NF-κB、HIF-1α蛋白表达的变化。结果 与Sham组相比,CKD组肌酐、尿酸、尿素氮和血清镁水平增高(P<0.05),血压升高,舒张期室间隔厚度、收缩期左心室内径增加,左心室射血分数降低,E/A比值降低,肺动脉血流加速时间延长(P<0.05);HE染色可见心肌细胞肥大,Masson染色见心肌纤维化程度增加(P<0.05),心肌组织HMGB1、NF-κB、HIF-1α蛋白表达水平上调(P<0.05)。与CKD组相比,CKD+Gly组收缩期室间隔厚度增加,左心室射血分数升高,E/A比值升高(P<0.05),HE染色心肌细胞肥大情况有所好转,心肌纤维化程度降低(P<0.05),心肌组织HMGB1、NF-κB、HIF-1α蛋白表达水平下调(P<0.05)。结论 CKD会影响大鼠心功能,加重大鼠心肌纤维化,Gly可减轻CKD大鼠心肌纤维化程度,其机制可能与抑制HMGB1/TLR4/NF-κB/HIF-1α信号通路下传有关。 展开更多

关键词 甘草酸 大鼠 Wistar 慢性肾脏病 心肌纤维化 HMGB1/TLR4/NF-κB/hif-1α信号通路

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龙眼肉多糖对Aβ诱导耐受的小胶质细胞吞噬功能的影响及其机制

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作者 赵晨阳 崔鹤蓉 +3 位作者 岳德琼 张晗 李昶 李红艳 《中南药学》 CAS 2024年第2期352-357,共6页

目的探究龙眼肉多糖(LAPs)对Aβ诱导耐受的小胶质细胞(BV2)吞噬功能的影响及其机制。方法采用4μmol·L^(-1)Aβ处理(48+24)h诱导细胞成为耐受模型,使用LAPs 0.8、1.6 mg·mL^(-1)进行干预。MTT法检测细胞增殖,JC-1试剂盒检测... 目的探究龙眼肉多糖(LAPs)对Aβ诱导耐受的小胶质细胞(BV2)吞噬功能的影响及其机制。方法采用4μmol·L^(-1)Aβ处理(48+24)h诱导细胞成为耐受模型,使用LAPs 0.8、1.6 mg·mL^(-1)进行干预。MTT法检测细胞增殖,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,倒置荧光显微镜观察细胞吞噬功能及mTOR抑制剂(Rapa)和HIF-1α抑制剂(BAY)对LAPs作用的影响,Western blot检测PI3K、Akt、p-Akt及HIF-1α蛋白表达。结果经Aβ处理的BV2细胞增殖率和目的蛋白表达提高,线粒体膜电位和细胞吞噬能力降低(P<0.05,P<0.01);LAPs能逆转上述指标变化,并且其提高吞噬功能的作用可被抑制剂阻断(P<0.05,P<0.01)。结论LAPs能提高Aβ诱导耐受的BV2细胞吞噬功能,作用途径可能与其促进耐受BV2细胞的增殖、提高其线粒体膜电位水平有关,并涉及PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α信号通路的激活。 展开更多

关键词 龙眼肉多糖 BV2细胞 吞噬功能 PI3K/Akt/mTOR/hif-1α信号通路

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红景天对尾吊小鼠眼压、视网膜结构及PI3K/AKT/HIF⁃1α信号通路的影响

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作者 崔德蓉 郭海燕 +4 位作者 屈春慧 王玉艳 李晴晴 闫兆帅 李志勇 《载人航天》 CSCD 北大核心 2024年第4期449-455,共7页

针对微重力环境导致的航天相关眼综合征存在眼压升高与视网膜病变问题,研究红景天对尾吊小鼠眼压、视网膜结构的影响及作用机制。实验取55只C57小鼠,分为5组,每组11只,经2周造模,4周给药干预,历时6周;第2、4、6周测量小鼠眼压,6周后HE... 针对微重力环境导致的航天相关眼综合征存在眼压升高与视网膜病变问题,研究红景天对尾吊小鼠眼压、视网膜结构的影响及作用机制。实验取55只C57小鼠,分为5组,每组11只,经2周造模,4周给药干预,历时6周;第2、4、6周测量小鼠眼压,6周后HE染色观察小鼠视网膜结构,RT⁃PCR测定小鼠视网膜内PI3K、AKT、HIF⁃1α基因表达水平。结果显示:尾吊模拟微重力状态下,小鼠眼压4周显著性高(P<0.01),6周时出现自然回落;6周小鼠视网膜结构未发生明显病理性改变,视网膜内PI3K、AKT、HIF⁃1α基因表达水平显著升高(P<0.05);应用红景天干预,可有效降低尾吊小鼠4周时的眼压(P<0.01),调节6周时视网膜内PI3K、AKT、HIF⁃1α基因表达水平(P<0.05);高剂量红景天干预造成6周时小鼠眼压较空白组显著升高(P<0.05)。红景天可降低尾吊小鼠的眼压升高,调节小鼠PI3K/AKT/HIF⁃1α信号通路表达水平,低剂量红景天干预安全性更佳。 展开更多

关键词 红景天 尾吊小鼠 眼压 视网膜 PI3K/AKT/hif⁃1α信号通路

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SIRT1/HIF-1α信号通路介导IL-38改善胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡 被引量：5

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作者 裴冰 陈克研 +1 位作者 吴腾飞 肖卫国 《解剖科学进展》 CAS 2021年第2期164-168,共5页

目的探讨IL-38对胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡的调节作用,明确SIRT1/HIF-1α信号通路在其中的作用。方法 SPF级SD大鼠40只,随机分为正常对照组(CON组)、CIA模型组(CIA组)、CIA+IL-38(5ng/g)组(IL-38组)和CIA+IL-38(5ng/g)+SIRT1... 目的探讨IL-38对胶原诱导性关节炎大鼠Th17/Treg失衡的调节作用,明确SIRT1/HIF-1α信号通路在其中的作用。方法 SPF级SD大鼠40只,随机分为正常对照组(CON组)、CIA模型组(CIA组)、CIA+IL-38(5ng/g)组(IL-38组)和CIA+IL-38(5ng/g)+SIRT1抑制剂(1μg/kg)组(SIRT1i组)。观察大鼠后足及关节情况,关节指数评分评估大鼠症状,流式细胞术检测Th17/Treg细胞变化,qRT-PCR检测Th17/Treg相关基因的表达情况,免疫荧光及Western blot检测SIRT1、HIF-1α、myd88、NF-κB的表达变化。结果 IL-38可显著降低大鼠关节炎积分,改善大鼠关节肿胀程度(P<0.05);IL-38干预后,脾MNCs CD4+CD25+Foxp3+细胞的细胞百分数及Treg/Th17细胞比值较CIA组回升,CD4+IL-17A+细胞的细胞百分数有所回落(P<0.05);IL-17、IL-21、IL-22、 TGF-β表达下降,IL-10表达升高(P<0.05);上调SIRT1表达,下调HIF-1α、myd88、NF-κB的表达(P<0.05);而SIRT1抑制剂逆转了上述结果。结论 IL-38可通过SIRT1/HIF-1α信号通路调节Th17/Treg失衡对胶原诱导性关节炎大鼠起到保护作用。 展开更多

关键词 IL-38 胶原诱导性关节炎 Th17/Treg失衡 SIRT1/hif-1α信号通路

原文传递

半枝莲总黄酮通过Smad4/PKM2/HIF-1α改善高糖诱导的足细胞损伤的机制研究 被引量：1

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作者 闫东 顾长瑞 张响 《海南医学院学报》 CAS 2023年第2期102-108,共7页

目的:观察半枝莲总黄酮(TF-SB)对高糖诱导的足细胞(MPC-5)损伤及Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路的影响。方法:首先采用CCK8法分析TF-SB对MPC-5细胞的安全性及药效浓度。随后MPC-5分为空白组、模型组和TF-SB组,除空白组外,模型组和TF-SB组... 目的:观察半枝莲总黄酮(TF-SB)对高糖诱导的足细胞(MPC-5)损伤及Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路的影响。方法:首先采用CCK8法分析TF-SB对MPC-5细胞的安全性及药效浓度。随后MPC-5分为空白组、模型组和TF-SB组,除空白组外,模型组和TF-SB组采用高糖诱导建立MPC-5细胞损伤模型,分别检测TF-SB对MPC-5细胞ATP、凋亡和ROS水平的影响,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞因子(IL-1β、TNF-α、MCP-1)含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖酵解基因(GLU1、PFK1和HK1)表达丰度,蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路中相关蛋白的表达水平;结果:与空白组相比,模型组MPC-5细胞ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著下降,凋亡和ROS水平、IL-1β、TNF-α与MCP-1的含量均显著增加(P<0.01);与模型组相比,TF-SB组ATP含量、GLU1、PKF1和HK1表达丰度显著升高,凋亡和ROS水平、IL-1β、TNF-α与MCP-1的含量均显著降低(P<0.01)。此外,与空白组相比,模型组Smad4、HIF-1α蛋白表达及细胞核中PKM2表达显著升高,细胞质中PKM2表达显著降低(P<0.01);与模型组相比,TF-SB组Smad4、HIF-1α表达及细胞核中PKM2表达显著降低,而细胞质中PKM2表达显著升高(P<0.01);结论:TF-SB促进MPC-5细胞线粒体活性诱导糖酵解,进而抑制炎症的分泌,达到治疗糖尿病肾病的作用可能与通过抑制Smad4/PKM2/HIF-1α信号通路有关。 展开更多

关键词 TF-SB 糖尿病肾病 足细胞 Smad4/PKM2/hif-1α信号通路

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miR-26a-5p基于PHD2/HIF-1α通路对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡作用的研究

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作者 赵洁 李嘉 +2 位作者 赵小丹 丁鹏 苗昌荣 《标记免疫分析与临床》 CAS 2023年第3期492-498,共7页

目的通过缺氧诱导信号通路PHD2/HIF-1α探究miR-26a-5p对慢性心力衰竭(CHF)模型大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、CHF组、NC组和miR-26a-5p组,每组16只。CHF组、NC组与miR-26a-5p组建立大鼠CHF模型,假手术组除不进... 目的通过缺氧诱导信号通路PHD2/HIF-1α探究miR-26a-5p对慢性心力衰竭(CHF)模型大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法将大鼠随机分为假手术组、CHF组、NC组和miR-26a-5p组,每组16只。CHF组、NC组与miR-26a-5p组建立大鼠CHF模型,假手术组除不进行结扎外其他操作相同。NC组和miR-26a-5p组分别尾静脉注射5nmol NC-agomiR和miR-26a-5p-agomiR,每3天1次,连续注射4周,假手术组和CHF组通过尾静脉注射给予等量生理盐水。对大鼠心肌组织进行masson染色,实时定量PCR法检测大鼠心肌组织miR-26a-5p表达水平,Tunel法检测大鼠心肌组织进行凋亡检水平,ELISA法检测心肌组织氧化损伤因子超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,实时定量PCR法和Western blotting法检测心肌组织脯氨酸羟化酶2(PHD2)及低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达水平。结果与假手术组相比,CHF组和NC组出现心肌肥大并伴有大量纤维细胞出现,miR-26a-5p组大鼠心肌肥大有所缓解,纤维细胞减少;CHF组和NC组心肌组织miR-26a-5p表达水平有降低趋势,miR-26a-5p组表达显著上升(P<0.01);CHF组和NC组心肌细胞显著增加(P<0.01),miR-26a-5p组心肌细胞凋亡与CHF组和NC组相比显著降低,但仍高于假手术组(P<0.01);CHF组和NC组大鼠心肌组织SOD显著降低、MDA表达显著升高(P<0.01),与CHF组和NC组相比,miR-26a-5p组SOD显著升高、MDA表达显著降低(P<0.01);CHF组和NC组PHD2 mRNA和蛋白均有上调趋势,HIF-1α有下调趋势,与CHF组和NC组相比,miR-26a-5p组PHD2 mRNA及其蛋白表达下调,HIF-1α表达上调(P<0.05)。结论miR-26a-5p可以抑制CHF大鼠心肌细胞凋亡,提高SOD表达,降低MDA表达,降低氧化损伤,其机制与缺氧诱导信号通路PHD2/HIF-1α的调控相关。 展开更多

关键词 miR-26a-5p 慢性心力衰竭 凋亡 氧化损伤 PHD2/hif-1α信号通路

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黄芪-莪术协同作用调节SIRT3/HIF-1α通路对人肺腺癌A549细胞侵袭迁移的影响

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作者 周豫昆 苏海华 《吉林中医药》 2023年第5期566-571,共6页

目的观察黄芪-莪术药对通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及侵袭和迁移能力的影响。方法复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,观察黄芪-莪术不同配比(1:1、2:1、3:1)干预14 d后对移植瘤重和肺转移的影响,计算... 目的观察黄芪-莪术药对通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及侵袭和迁移能力的影响。方法复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,观察黄芪-莪术不同配比(1:1、2:1、3:1)干预14 d后对移植瘤重和肺转移的影响,计算抑瘤率,以抑瘤率优选黄芪-莪术配比;体外培养人肺腺癌A549细胞,采用CCK-8法检测不同浓度黄芪-莪术提取物对A549细胞增殖的抑制作用,筛选其最佳给药浓度和作用时间,流式细胞仪检测A549细胞凋亡率,细胞划痕实验和Transwell实验检测A549细胞移动性及侵袭能力变化,Western-blot检测侵袭相关蛋白(COX-2、CD44v6、MMP-9)的表达水平,Western-blot及RT-PCR检测SIRT3/HIF-1α通路蛋白和mRNA表达。结果黄芪-莪术不同配比干预后,小鼠瘤重和肺转移灶数明显减少(P<0.05),其中3:1配比抑瘤作用最显著(P<0.05);黄芪-莪术提取物0.4~0.8 mg/mL干预48 h对A549细胞增殖的抑制作用明显,应用0.4、0.6、0.8 mg/mL浓度处理48 h后,A549细胞凋亡率较空白对照组明显提升,迁移能力减弱,创面愈合率明显降低,侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞COX-2、CD44v6、MMP-9的蛋白表达显著降低(P<0.05),同时明显下调了HIF-1α的蛋白和m RNA表达,上调了SIRT3的蛋白和m RNA表达(P<0.05)。结论黄芪-莪术药对可有效抑制肺癌肿瘤的生长和转移,并能通过调节SIRT3/HIF-1α信号通路发挥对A549细胞的促凋亡和抗侵袭、迁移作用。 展开更多

关键词 黄芪 莪术 肺腺癌 A549细胞 SIRT3/hif-1α信号通路

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黄芪多糖对低氧诱导肺动脉高压小鼠肺血管重构的保护作用 被引量：3

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作者 邓海艳 鲁美丽 王洪新 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1112-1118,共7页

目的研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对低氧诱导的肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)小鼠肺血管重构的影响并探讨其相关作用机制。方法将C57BL/6小鼠置于含10%O_(2)的常压低氧舱中持续饲养4周制备肺动脉高... 目的研究黄芪多糖(Astragalus polysaccharide,APS)对低氧诱导的肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)小鼠肺血管重构的影响并探讨其相关作用机制。方法将C57BL/6小鼠置于含10%O_(2)的常压低氧舱中持续饲养4周制备肺动脉高压模型。50只雄性C57BL/6小鼠按完全随机法分为正常对照组,模型组,模型+APS 200、400、800 mg/kg组。4周后检测小鼠右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)、右心肥厚指数[RV/(LV+S)];HE染色观察肺小动脉病理变化;Masson染色观察肺小动脉胶原纤维沉积面积;组织免疫荧光检测肺小动脉α-SMA蛋白水平;ELISA检测血清C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;Western blot检测肺组织KLF5、HIF-1α、Cyclin B1、Cyclin D1、VEGF、TGF-β1蛋白水平。结果与正常对照组相比,模型组小鼠RVSP、RV/(LV+S)显著增加,肺小动脉血管增厚,胶原纤维沉积面积增大,CRP、IL-6、TNF-α含量增加,α-SMA、KLF5、HIF-1α、Cyclin B1、Cyclin D1、VEGF、TGF-β1蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组相比,各APS治疗组小鼠RVSP、RV/(LV+S)、肺小动脉病理改变均不同程度减轻,胶原纤维沉积面积明显减少,CRP、IL-6、TNF-α含量降低,α-SMA、KLF5、HIF-1α、Cyclin B1、Cyclin D1、VEGF、TGF-β1蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论APS对低氧诱导的肺动脉高压小鼠肺血管重构具有保护作用,其作用机制可能与抑制KLF5/HIF-1α信号通路有关。 展开更多

关键词 黄芪多糖 低氧性肺动脉高压 KLF5/hif-1α信号通路 血管重构

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基于PI3K/AKT/HIF-1α信号通路研究易层敷贴缓解TGF-β1诱导的膝骨关节炎大鼠滑膜纤维化的机制

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作者 刘德仁 廖太阳 +4 位作者 魏义保 方媛 王培民 茆军 吴鹏 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期738-745,共8页

目的探讨易层敷贴对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜纤维化TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达的影响以及对PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的调控作用。方法将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和易层组,膝关节腔注射200 ng转化生长因子-β1重组蛋白(... 目的探讨易层敷贴对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜纤维化TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达的影响以及对PI3K/AKT/HIF-1α信号通路的调控作用。方法将30只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组和易层组,膝关节腔注射200 ng转化生长因子-β1重组蛋白(TGF-β1)建立膝关节滑膜纤维化动物模型,2 d 1次,持续3次,造模14 d后给予易层敷贴外用治疗28 d后取滑膜组织。HE和Masson染色观察滑膜病理变化;免疫组化检测滑膜p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达水平。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLSs),以10 ng·mL-1 TGF-β1诱导24 h建立KOA滑膜纤维化细胞模型,易层冻干粉干预24 h,Western blot检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的蛋白表达,qPCR检测HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达。结果与空白组相比,模型组HE染色滑膜炎加重(P<0.01),Masson染色滑膜纤维化占比显著增加(P<0.01),免疫组化中p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1表达均增加(P<0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均上升(P<0.01)。与模型组相比,易层组滑膜炎和滑膜纤维化状况改善,p-PI3K、p-AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达均减少(P<0.05,P<0.01);滑膜细胞中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1蛋白表达均降低(P<0.05),HIF-1α、TGF-β1、α-SMA、COL1A1 mRNA表达均下调(P<0.05,P<0.01)。结论易层敷贴通过调控PI3K/AKT/HIF-1α信号通路,降低TGF-β1、α-SMA、COL1A1的表达,有效改善TGF-β1诱导的KOA大鼠滑膜纤维化。 展开更多

关键词 膝骨关节炎 滑膜纤维化 PI3K/AKT/hif-1α信号通路 易层敷贴

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心痛泰含药血清干预PI3K/Akt/HIF-1α通路抑制兔主动脉平滑肌细胞凋亡的作用机制

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作者 易琼 彭清华 +2 位作者 郭志华 彭筱平 魏佳明 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2023年第6期1998-2011,共14页

目的通过生信分析和细胞实验探讨心痛泰含药血清干预PI3K/Akt/HIF-1α对兔主动脉平滑肌细胞(Aortic vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡的作用机制。方法采用ox-LDL诱导实验兔主动脉平滑肌细胞凋亡,构建动脉粥样硬化的细胞模型。采... 目的通过生信分析和细胞实验探讨心痛泰含药血清干预PI3K/Akt/HIF-1α对兔主动脉平滑肌细胞(Aortic vascular smooth muscle cell,VSMC)凋亡的作用机制。方法采用ox-LDL诱导实验兔主动脉平滑肌细胞凋亡,构建动脉粥样硬化的细胞模型。采用细胞增殖与活性检测(Cell counting Kit8,CCK8)法筛选心痛泰含药血清最佳作用浓度。在中药药理数据分析平台中收集心痛泰的主要化学成分,通过PubChem数据库收集各活性化合物成分信息,SwissTargetPrediction数据库预测活性化合物相关靶点,通过GeneCards和DisGeNET数据库收集“动脉粥样硬化”、“细胞凋亡”的作用靶点,STRING平台构建蛋白质-蛋白质相互作用(Protein-protein interaction network,PPI)网络,DAVID在线分析GO分析和KEGG分析。VSMC分为空白血清组、模型组、心痛泰含药血清组、磷脂酰肌醇3激酶(Phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)抑制剂(LY294002)组、心痛泰含药血清+LY294002组。分别采用原位末端标记(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,TUNEL)法和流式细胞术检测VSMC凋亡,计算凋亡率;聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)法测定PI3K、丝/苏氨酸蛋白激酶(Phospho-Alpha serine/threonine-protein kinase,Akt)、缺氧诱导因子(Hypoxia-Inducible factor 1-Alpha,HIF-1α)、caspase-3、caspase-9的mRNA表达;蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定磷酸化的PI3K(p-PI3K)/PI3K、磷酸化的Akt(p-Akt)/Akt、HIF-1α、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9的蛋白表达;细胞免疫荧光法检测VSMC中收缩型特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的荧光定量。结果CCK-8筛选出最佳干预浓度为20%心痛泰中剂量含药血清;TUNEL法和流式细胞术表明,与空白组相比,模型组的VSMC凋亡阳性细胞百分比、早期凋亡率、晚期凋亡率和总凋亡率均明显升高(P<0.01),PI3K、Akt、HIF-1α、caspase-3、caspase-9 mRNA表达明显增加(P<0.01),p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HIF-1α 展开更多

关键词 心痛泰 动脉粥样硬化 生信分析 PI3K/Akt/hif-1α信号通路 平滑肌细胞凋亡

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