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MMTV-PyMT转基因小鼠自发成瘤乳腺癌细胞的分离培养及鉴定
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作者 颜文欣 冯玉梅 《天津医科大学学报》 2023年第1期9-14,共6页
目的:分离培养小鼠乳腺肿瘤病毒介导多瘤病毒中间T抗原(MMTV-PyMT)转基因小鼠自发成瘤的乳腺癌细胞,初步研究其生长特性、分子表型、体内成瘤和转移能力。方法:取MMTV-PyMT小鼠自发成瘤的乳腺癌组织(n=3),采用酶解贴壁培养法进行原代细... 目的:分离培养小鼠乳腺肿瘤病毒介导多瘤病毒中间T抗原(MMTV-PyMT)转基因小鼠自发成瘤的乳腺癌细胞,初步研究其生长特性、分子表型、体内成瘤和转移能力。方法:取MMTV-PyMT小鼠自发成瘤的乳腺癌组织(n=3),采用酶解贴壁培养法进行原代细胞分离并传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态特征;采用CCK-8检测细胞的增殖能力;通过Western印迹检测细胞的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)表达以鉴定细胞分子亚型。将分离培养的细胞接种于C57BL/6雌性小鼠(n=4)乳腺脂肪垫,观察细胞成瘤能力和生长特性;取肿瘤组织和内脏器官,制备组织切片后采用苏木精-伊红(HE)染色,观察组织形态学特点;采用免疫组织化学(IHC)染色检测ER、PR、HER2及Ki-67蛋白表达,分析分子分型。结果:成功分离得到MMTV-PyMT转基因小鼠自发成瘤的乳腺癌细胞(MMTV-PyMT细胞)并可稳定生长和传代,细胞倍增时间为56.0 h;MMTV-PyMT细胞可在C57BL/6雌性小鼠乳腺脂肪垫成瘤并生长,但未见远处内脏转移。该细胞在细胞学和组织学中的分子分型皆为HER2过表达亚型,肿瘤组织中Ki-67阳性表达率为34%。结论:成功构建得到可体外稳定传代并具有体内成瘤能力的HER2过表达分子亚型小鼠乳腺癌细胞系,该细胞可作为HER2过表达亚型乳腺癌体内、外实验研究的细胞模型。 展开更多
关键词 小鼠乳腺癌细胞系 原代培养 her2过表达分子亚型
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