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三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体的构建及初步检测应用
被引量:
2
1
作者
杨新星
郝友华
+4 位作者
丁红晖
宋娜
刘贽
陈玲
杨东亮
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期146-149,共4页
目的体外构建三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体,并初步用该三种四聚体对抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)进行了初步检测。方法原核高效表达的HLA-A*0201-BSP和β2m蛋白,分别和三种HBV抗原肽(HBVCore18-27,Env335-343,Pol575-...
目的体外构建三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体,并初步用该三种四聚体对抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)进行了初步检测。方法原核高效表达的HLA-A*0201-BSP和β2m蛋白,分别和三种HBV抗原肽(HBVCore18-27,Env335-343,Pol575-583)体外复性折叠成可溶性的HLA-A*0201抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成相应的三种抗原肽四聚体。最后进行流式细胞仪检测。结果Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了三种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体。构建的三种四聚体均可以检测到相应特异性的CTL,在自限性感染患者体内针对乙肝核心抗原(core18-27)的CTL细胞频数(0.18%)高于针对聚合酶抗原(pol575-583)(0.08%)和包膜抗原(env335-343)(0.06%)。结论成功构建了三种具有完整构象的生物素化HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体,所构建的三种四聚体都可以检测到抗原特异性的CTL。
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关键词
hbv
抗原
肽
-
hla
-A*
0201
单体
T淋巴细胞
四聚体
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职称材料
题名
三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体的构建及初步检测应用
被引量:
2
1
作者
杨新星
郝友华
丁红晖
宋娜
刘贽
陈玲
杨东亮
机构
华中科技大学同济医院临床免疫研究室
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第2期146-149,共4页
基金
国家重大基础研究计划973项目(20014CB510008
2005CB522901)
国家自然科学基金项目(30400412)资助
文摘
目的体外构建三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体,并初步用该三种四聚体对抗原肽特异性的细胞毒性T细胞(CTL)进行了初步检测。方法原核高效表达的HLA-A*0201-BSP和β2m蛋白,分别和三种HBV抗原肽(HBVCore18-27,Env335-343,Pol575-583)体外复性折叠成可溶性的HLA-A*0201抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体,分别将复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成相应的三种抗原肽四聚体。最后进行流式细胞仪检测。结果Dot-ELISA和ELISA检测显示获得了三种具有天然构象的生物素化的HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体。构建的三种四聚体均可以检测到相应特异性的CTL,在自限性感染患者体内针对乙肝核心抗原(core18-27)的CTL细胞频数(0.18%)高于针对聚合酶抗原(pol575-583)(0.08%)和包膜抗原(env335-343)(0.06%)。结论成功构建了三种具有完整构象的生物素化HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物单体,所构建的三种四聚体都可以检测到抗原特异性的CTL。
关键词
hbv
抗原
肽
-
hla
-A*
0201
单体
T淋巴细胞
四聚体
Keywords
hbv
-
hla
-A *
0201
-peptide complexes
T-lymphocytes
Tetramers
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
三种常见HBV抗原肽-HLA-A*0201复合物四聚体的构建及初步检测应用
杨新星
郝友华
丁红晖
宋娜
刘贽
陈玲
杨东亮
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2008
2
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