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一种国产乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂不同检测平台上的验证情况分析 被引量:7
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作者 李云霞 邬兰 邱樊 《标记免疫分析与临床》 CAS 2017年第3期341-344,360,共5页
目的将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价。方法依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量... 目的将圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在不同荧光定量PCR系统进行性能验证,以给出该试剂盒在不同检测平台上的性能评价。方法依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)颁布的EP系列文件和《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件,应用Roche LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统对圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)进行临床样本精密度、正确度、可报告范围和检测下限的性能验证实验。结果 LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统:2×10~6IU/mL浓度水平批内精密度为1.38%,批间精密度为0.25%;2×10~4IU/mL浓度水平批内精密度为0.35%,批间精密度为0.79%。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2.1×10~2IU/mL至2.1×10~7IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R^2=0.9994),临床可报告范围为2.1×10~2IU/mL^2.1×10~8IU/mL。该系统检测下限为148 IU/mL。ABI 7500型实时荧光定量PCR系统:2×10~6IU/mL浓度水平批内精密度为0.70%,批间精密度为1.34%。2.5×10~4IU/mL浓度水平批内精密度为1.18%,批间精密度为3.01%。正确度验证可溯源标准品,偏倚均小于7.5%,符合厂家说明及文件要求。HBV DNA定量结果在2×10~2IU/mL至2×10~8IU/mL浓度水平范围内线性关系良好(R^2=0.9991),临床可报告范围为2×10~2IU/mL^2×10~9IU/mL。该系统检测下限为203 IU/mL。结论圣湘公司乙型肝炎病毒(HBV)核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法)在Roche LightCycler~480 II实时荧光定量PCR系统及美国ABI 7500型实时荧光定量PCR系统上的性能验证结果均符合试剂说明书性能范围,检测结果无明显差异,均可准确快捷的对HBV DNA定量检测,为后续超敏定量工作奠定基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒定量检测 实时荧光定量聚合酶链反应 ROCHE LightCycler^(R)480 Ⅱ实时荧光定量PCR仪 ABI 7500型实时荧光定量PCR仪 性能验证
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乙肝病毒DNA检测2种不同核酸提取方法的性能验证情况分析 被引量:9
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作者 董剑 许小华 《医疗卫生装备》 CAS 2019年第6期40-43,共4页
目的:对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测的2种不同核酸提取方法,即手工法(煮沸法)和全自动核酸提取仪法(磁珠法),在使用相同的检测试剂和核酸扩增仪的条件下进行性能验证,以评价其验证结果。方法:依据《医学实验室质量和能力认可准则》《全国... 目的:对乙肝病毒DNA(HBV-DNA)检测的2种不同核酸提取方法,即手工法(煮沸法)和全自动核酸提取仪法(磁珠法),在使用相同的检测试剂和核酸扩增仪的条件下进行性能验证,以评价其验证结果。方法:依据《医学实验室质量和能力认可准则》《全国临床检验操作规程》等相关文件,由同一操作人员应用中山达安公司生产的HBV-DNA检测试剂盒和ABI7500实时荧光核酸扩增仪,分别采用手工法和全自动核酸提取仪法提取HBV-DNA进行临床样本的批内精密度、批间精密度、正确度、线性范围性能验证实验。结果:手工法的高值血清批内精密度为2.18%,低值血清批内精密度为3.76%;高值质控品批间精密度为3.29%。全自动核酸提取仪法的高值血清批内精密度为1.78%,低值血清批内精密度为2.44%;高值质控品批间精密度为2.84%。正确度验证分别取浓度为2.0×10^3、2.0×10^4、2.0×10^5、2.0×10^6copies/ml的可溯源标准品进行验证,手工法偏倚分别为-4.88%、-2.51%、-2.46%,-2.12%,全自动核酸提取仪法偏倚分别为-2.37%、-0.95%、0.74%、-1.33%。线性范围验证中,手工法和全自动核酸提取仪法的相关系数分别为0.9660、0.9858,均能满足临床检测的需求。结论:全自动核酸提取仪法较手工法提取核酸有利于简化HBV-DNA提取流程,实现分子生物实验室自动化提取核酸。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒dna定量检测 手工(煮沸法) 全自动核酸提取仪法(磁珠法) 性能验证 血清
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2527例乙肝患者HBV-DNA定量检测与其血清标志物的相关性研究 被引量:4
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作者 李彦黎 袁红霞 +2 位作者 刘传丽 田小星 魏红璐 《保健医学研究与实践》 2022年第8期83-88,共6页
目的 探讨外周血乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量检测与其乙肝血清标志物(HBV-M)的相关性。方法选取2019年1月-2020年12月于重庆市第五人民医院就诊的2 527例乙肝两对半检测中HBV表面抗原(HBsAg)为阳性的患者作为研究对象,进行HBV-DN... 目的 探讨外周血乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量检测与其乙肝血清标志物(HBV-M)的相关性。方法选取2019年1月-2020年12月于重庆市第五人民医院就诊的2 527例乙肝两对半检测中HBV表面抗原(HBsAg)为阳性的患者作为研究对象,进行HBV-DNA及HBV-M的检测,并对检测结果进行统计分析。结果 研究对象HBV-DNA低拷贝组“小三阳”检出率(89.38%)高于高拷贝组(48.44%);高拷贝组“大三阳”检出率(48.68%)高于低拷贝组(4.08%),差异均有统计学意义(均P <0.001)。在HBsAg和HBV核心抗体(HBcAb)同时阳性的患者中,HBV e抗原(HBeAg)无论存在与否,均可出现HBV-DNA复制。HBV-DNA检出率随着HBsAg、HBeAg浓度的升高而增加,HBV-DNA拷贝数与HBsAg浓度呈正相关,但关系不密切(r=0.210,P <0.001);HBV-DNA拷贝数与HBeAg浓度无相关性(r=0.170,P=0.093)。研究对象HBV-DNA检出率(63.55%)明显高于HBeAg检出率(11.67%),差异有统计学意义(P <0.001)。以HBV-DNA的检出作为HBV复制的金标准来评价HBeAg,HBeAg检测的灵敏度、特异度,阴、阳性预测值分别为16.19%、96.20%、39.70%及88.14%,在HBeAg阴性组中以HBV-DNA低拷贝检出为主(90.49%),在HBeAg阳性组中以HBV-DNA高拷贝检出为主(69.49%),差异有统计学意义(P <0.001)。结论 HBV-DNA和HBV-M定量检测二者独立又互补,应联合检测减少漏检率,以指导实施更科学的治疗方案。 展开更多
关键词 乙型病毒 hbv-dna定量检测 PCR荧光探针法 乙肝血清标志物 时间分辨免疫荧光
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乙型肝炎病人血浆与血清中游离HBV-DNA含量的差异分析 被引量:1
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作者 颜丽娟 《数理医药学杂志》 2017年第2期199-200,共2页
目的:对乙型肝炎病人血浆与血清中游离HBV-DNA含量的差异进行分析探讨,为今后的临床工作提供有价值的参考信息。方法:选择2014年1月~2015年12月间,某院收治的获得明确诊断的乙型肝炎患者108例作为研究对象,采取实时荧光定量基因扩增技... 目的:对乙型肝炎病人血浆与血清中游离HBV-DNA含量的差异进行分析探讨,为今后的临床工作提供有价值的参考信息。方法:选择2014年1月~2015年12月间,某院收治的获得明确诊断的乙型肝炎患者108例作为研究对象,采取实时荧光定量基因扩增技术对受试者血浆、血清中游离的HBV-DNA水平进行检测,并对检测结果进行对比分析。结果:经统计发现,乙肝患者血浆标本中、血清标本中HBV-DNA阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:临床检验工作中,血浆、血清标本在乙肝患者HBV-DNA定量检测中均比较适用。值得注意的是,因血液在凝固过程中,纤维蛋白收缩、红细胞聚集等,会造成血液中乙肝病毒颗粒包裹在一起产生凝块,从而导致血清中HBV含量较血液中实际含量略低,又由于抗凝标本能够快速分离出血浆,实验室检验方便,因此在今后的工作中,建议采取血浆标本展开HBV病毒定量检测。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 血浆标本 血清标本 hbv-dna定量检测 临床分析
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