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共转化法获得HAK1基因高表达烟草提高植株钾吸收能力
被引量：
22
1
作者
谭颖
秦利军
+2 位作者
赵丹
赵杰宏
赵德刚
《植物生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期689-699,共11页
通过农杆菌介导,将仅含钾转运体蛋白基因HAK1和烟草TMV抗性蛋白基因CN的pSH-TH表达载体和仅含选择标记基因GUS::NPTII的pSH737表达载体共转化烟草K326,从抗性转化苗中筛选出32株T0代转基因植株,自交分离后经筛选获得43株无选择标记的T1...
通过农杆菌介导,将仅含钾转运体蛋白基因HAK1和烟草TMV抗性蛋白基因CN的pSH-TH表达载体和仅含选择标记基因GUS::NPTII的pSH737表达载体共转化烟草K326,从抗性转化苗中筛选出32株T0代转基因植株,自交分离后经筛选获得43株无选择标记的T1代转基因烟株,Southern blotting分析和PCR产物测序结果证明HAK1及CN功能基因已整合到烟草基因组中,且不含标记基因。转基因植株中的钾转运相关基因表达分析表明,细胞质膜P-H+-ATPase基因NHA1和烟草无机焦磷酸酶基因NVP1表达上调,烟草液泡膜V-H+-ATPase基因VAG1表达下调;而烟草钾外流通道蛋白基因TORK1表达在株系T1-87中下调,其余株系均上调;HAK1表达量除了在株系T1-141中下调外,在其他所有株系中均上调,其中株系T1-12、T1-51、T1-87和T1-100的HAK1表达量比野生型高3倍以上。株系T1-51、T1-87和T1-100的根系活力、ATPase活性、阳离子交换量(CEC)及钾含量均显著高于野生型,表明钾离子转运体基因HAK1超量表达显著提高了烟草植株的富钾能力,所获得的无标记的安全转基因株系可作为优质烟叶品质培育的亲本材料。
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关键词
烟草
共转化
hak
1
钾
原文传递
獐茅HAK基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析
被引量：
3
2
作者
张高华
王鹤
+3 位作者
王旭达
丰明
李怀梅
李树英
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期742-748,共7页
獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因...
獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因转录起始位点上游长度约1.3 kb的启动子区域。启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA和CAAT盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件。为了明确AlHAK1启动子的功能,将其与GUS基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中。对转基因植株进行GUS组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS活性。GUS荧光定量分析显示AlHAK1启动子调节GUS表达活性低于组成型启动子CaMV35S和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS活性相对较高。对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE元件和-1 268 bp的MybBS元件可能在高温、ABA和干旱诱导的表达调控中起作用。
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关键词
獐茅
高亲和性K+转运蛋白基因(
hak
1
)
启动子克隆
顺式元件分析
GUS组织化学染色
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职称材料
转AlHAK1基因棉花耐盐能力分析
被引量：
3
3
作者
车文利
张书玲
+7 位作者
吴立柱
杨国军
董丽君
杜环
高佳佳
刘晗
蒋肖
刘建凤
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期49-56,共8页
为了获得超表达獐茅Al HAK1基因棉花纯合系并验证其耐盐能力,对转Al HAK1基因T3代材料进行了PCR与RT-PCR鉴定,并在水培条件下研究了纯合系植株长势、根系形态参数、离子含量和相关抗氧化酶活性变化。结果表明在盐胁迫条件下,转基因植株...
为了获得超表达獐茅Al HAK1基因棉花纯合系并验证其耐盐能力,对转Al HAK1基因T3代材料进行了PCR与RT-PCR鉴定,并在水培条件下研究了纯合系植株长势、根系形态参数、离子含量和相关抗氧化酶活性变化。结果表明在盐胁迫条件下,转基因植株偏高,较野生型增加了16.5%,同时转基因植株根系形态参数总根长、比根长和根表面积分别增加了62.23%、40.02%和29.22%,而根的平均直径降低了22.22%,均达到了差异显著水平(P<0.05)。此外,在盐胁迫条件下,转基因幼苗能维持根和叶中较高的K+含量,较低的Na+含量和较高的K+/Na+,其超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化酶(POD)活性均比野生型植株有所提高。该结果进一步表明供试外源Al HAK1基因在棉花中超表达,提高了转基因棉花耐盐能力,为培育适应盐渍化土壤环境下生长的棉花新品种提供重要的种质资源。
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关键词
钾转运蛋白基因(Al
hak
1
)
棉花
耐盐性
根系形态参数
原文传递
题名
共转化法获得HAK1基因高表达烟草提高植株钾吸收能力
被引量：
22
1
作者
谭颖
秦利军
赵丹
赵杰宏
赵德刚
机构
贵州大学贵州省农业生物工程重点实验室
贵州大学生命科学学院基因工程实验室
贵州大学
贵州省烟草科学研究院行业烟草分子遗传重点实验室
出处
《植物生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第7期689-699,共11页
基金
贵州省科学技术基金“富钾基因发掘及无选择标记转基因烟草培育研究”[黔科合J字(2010)2251]
中国烟草总公司贵州省公司科技项目“抗TMV、富钾转基因烟草育种研究”[合同号(200910)]
国家转基因生物新品种培育重大专项“安全转基因技术研究”[2011ZX08010003-002]
文摘
通过农杆菌介导,将仅含钾转运体蛋白基因HAK1和烟草TMV抗性蛋白基因CN的pSH-TH表达载体和仅含选择标记基因GUS::NPTII的pSH737表达载体共转化烟草K326,从抗性转化苗中筛选出32株T0代转基因植株,自交分离后经筛选获得43株无选择标记的T1代转基因烟株,Southern blotting分析和PCR产物测序结果证明HAK1及CN功能基因已整合到烟草基因组中,且不含标记基因。转基因植株中的钾转运相关基因表达分析表明,细胞质膜P-H+-ATPase基因NHA1和烟草无机焦磷酸酶基因NVP1表达上调,烟草液泡膜V-H+-ATPase基因VAG1表达下调;而烟草钾外流通道蛋白基因TORK1表达在株系T1-87中下调,其余株系均上调;HAK1表达量除了在株系T1-141中下调外,在其他所有株系中均上调,其中株系T1-12、T1-51、T1-87和T1-100的HAK1表达量比野生型高3倍以上。株系T1-51、T1-87和T1-100的根系活力、ATPase活性、阳离子交换量(CEC)及钾含量均显著高于野生型,表明钾离子转运体基因HAK1超量表达显著提高了烟草植株的富钾能力,所获得的无标记的安全转基因株系可作为优质烟叶品质培育的亲本材料。
关键词
烟草
共转化
hak
1
钾
Keywords
tobacco
co-transformation
hak
1
potassium
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
原文传递
题名
獐茅HAK基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析
被引量：
3
2
作者
张高华
王鹤
王旭达
丰明
李怀梅
李树英
机构
辽宁省农业科学院大连生物技术研究所
出处
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第6期742-748,共7页
基金
辽宁省博士科研启动基金(编号:20101054)资助
文摘
獐茅高亲和性K+转运蛋白基因(AlHAK1)是从单子叶禾本科盐生植物獐茅(Aeluropus littoralis(Gouan)Parl)中克隆,对于细胞营养和离子渗透调节起关键作用。为了进一步了解AlHAK1基因的表达调控机制,文章采用基因组步移法分离了AlHAK1基因转录起始位点上游长度约1.3 kb的启动子区域。启动子顺式元件分析显示该序列具有典型的TATA和CAAT盒,以及一些与植物生长发育和环境响应相关的顺式元件。为了明确AlHAK1启动子的功能,将其与GUS基因融合构建到植物表达载体pCAMBIA1301上,通过农杆菌介导转化法导入水稻中。对转基因植株进行GUS组织化学染色,结果显示在转化AlHAK1启动子水稻的根、茎、叶、花药和内外稃部位均检测到GUS活性。GUS荧光定量分析显示AlHAK1启动子调节GUS表达活性低于组成型启动子CaMV35S和Ubiquitin,但其根部和茎部的GUS活性相对较高。对转化植株进行不同胁迫处理后检测GUS活性,结果表明受到ABA、干旱、高温的诱导后其茎部和根部GUS活性有所提高,推测位于该启动子-682 bp的HSE元件和-1 268 bp的MybBS元件可能在高温、ABA和干旱诱导的表达调控中起作用。
关键词
獐茅
高亲和性K+转运蛋白基因(
hak
1
)
启动子克隆
顺式元件分析
GUS组织化学染色
Keywords
Aeluropus littoralis
high-affinity K＋ transporter gene （
hak
1
）
promoter isolation
Cis-regulatory elements analysis
GUS assays
分类号
S511 [农业科学—作物学]
下载PDF
职称材料
题名
转AlHAK1基因棉花耐盐能力分析
被引量：
3
3
作者
车文利
张书玲
吴立柱
杨国军
董丽君
杜环
高佳佳
刘晗
蒋肖
刘建凤
机构
河北大学生命科学学院
廊坊市农林科学院
河北农业大学生命科学学院
河北省唐山市丰润区农业畜牧水产局
出处
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第1期49-56,共8页
基金
河北省自然科学基金项目(C2013201219)
河北大学引进人才科研启动项目(2011-221
+1 种基金
2014-277)
生物学强势特色学科项目(植物学)资助
文摘
为了获得超表达獐茅Al HAK1基因棉花纯合系并验证其耐盐能力,对转Al HAK1基因T3代材料进行了PCR与RT-PCR鉴定,并在水培条件下研究了纯合系植株长势、根系形态参数、离子含量和相关抗氧化酶活性变化。结果表明在盐胁迫条件下,转基因植株偏高,较野生型增加了16.5%,同时转基因植株根系形态参数总根长、比根长和根表面积分别增加了62.23%、40.02%和29.22%,而根的平均直径降低了22.22%,均达到了差异显著水平(P<0.05)。此外,在盐胁迫条件下,转基因幼苗能维持根和叶中较高的K+含量,较低的Na+含量和较高的K+/Na+,其超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化酶(POD)活性均比野生型植株有所提高。该结果进一步表明供试外源Al HAK1基因在棉花中超表达,提高了转基因棉花耐盐能力,为培育适应盐渍化土壤环境下生长的棉花新品种提供重要的种质资源。
关键词
钾转运蛋白基因(Al
hak
1
)
棉花
耐盐性
根系形态参数
Keywords
potassium transporter transgenic（Al
hak
1
）
cotton（Gossypium hirsutum L.）
salt tolerance
root system morphology parameter
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
共转化法获得HAK1基因高表达烟草提高植株钾吸收能力
谭颖
秦利军
赵丹
赵杰宏
赵德刚
《植物生理学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
22
原文传递
2
獐茅HAK基因表达调控区的分离及其在水稻中的功能分析
张高华
王鹤
王旭达
丰明
李怀梅
李树英
《遗传》
CAS
CSCD
北大核心
2012
3
下载PDF
职称材料
3
转AlHAK1基因棉花耐盐能力分析
车文利
张书玲
吴立柱
杨国军
董丽君
杜环
高佳佳
刘晗
蒋肖
刘建凤
《中国农业科技导报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
3
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