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^(99m)Tc-labeled HAb18 McAb Fab fragment for radioimmunoimaging in nude mice bearing human hepatocellular carcinoma 被引量:8
1
作者 Qiu K Wang BC +4 位作者 Chen ZN Fang P Liu CG Wan WX Liu YF 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 1998年第2期25-28,共4页
AIM To establish a method of labeling anti hepatoma McAb (HAb18) Fab fragment modifier with 99m Tc. METHODS HAb18 Fab was modified with 2 iminotholane and labeled with 99m Tc by transchelation f... AIM To establish a method of labeling anti hepatoma McAb (HAb18) Fab fragment modifier with 99m Tc. METHODS HAb18 Fab was modified with 2 iminotholane and labeled with 99m Tc by transchelation from 99m Tc GH. Labeling yield, radiochemical purity and immunoreactivity were determined by thin layer chromatography (TLC SG), paper chromatography (PC), gel chromatography (GC) and cell binding assay, respectively. The nude mice bearing human hepatoma were used for radioimmunoimaging (RII). RESULTS A radiolabeling yield of 50%-80% was obtained, and immunoreactivity (IR) was 30%-40%. Radioimaging results showed that 99m Tc HAb18 McAb Fab fragment was concentrated in the tumor 4-8 hours after injection, and the maximum concentration was seen in 12-24 hours, and the T/NT value was 5 18 and 7 48 at 6h and 8h after the injection. CONCLUSION 99m Tc HAb18 McAb Fab fragment could be specifically localized in the tumor of nude mice bearing human hepatocellular carcinoma within 24 hours and this method might be effectively used for labeling McAb Fab fragment with 展开更多
关键词 liver neoplasms carcinoma HEPATOCELLULAR hab18 autibodies monoclonal radioimmunodetection FAB fragments 99m Tc NUDE MICE 99m Tc.
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二步法预定位技术对荷人肝癌裸鼠模型的MR免疫成像研究 被引量:6
2
作者 许乙凯 刘岘 叶靖 《中华放射学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期357-361,共5页
目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二... 目的利用生物素亲和素系统(biotin avidinsystem,BAS)的靶向定位效应和生物放大作用,提高MR分子免疫成像的敏感性。方法制备生物素化抗人肝癌细胞单克隆抗体HAb18并测定其生物素化程度及抗原结合活性。20只荷人肝细胞癌裸鼠分为3组,二步法预定位组8只,先静脉注射生物素化单克隆抗体600μg,24h后再给予钆喷替酸葡甲胺链霉亲和素(Gd DTPA streptavidin,Gd DTPA SA);HAb18单克隆抗体Gd DTPA组6只,经尾静脉注射Gd DTPA HAb18;Gd DTPA对照组6只,静脉注射Gd DTPA。对实验动物行MR扫描,测量SET1WI平扫及增强后10、30、60min及3、6、12、24、48h图像内肿瘤的信号强度,绘制信号强度时间曲线,并计算肿瘤强化率及对比度噪声比(contrast to noiseratio,CNR)。结果HAb18单克隆抗体经生物素化后,每个抗体分子平均可结合20个分子生物素,其抗原结合活性约为91%。二步法预定位组内,肿瘤信号强度缓慢升高,增强后第6小时,肿瘤的强化率、CNR达到最大值,与其他两组相比较差异有统计学意义。48h后,肿瘤的强化仍肉眼可辨。单克隆抗体组内,肿瘤表现为缓慢轻度强化,增强后24h的强化率达13.5%,肿瘤信号强度、CNR与平扫比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Gd DTPA对照组内,肿瘤表现为快进快出特点的强化特点。结论二步法预定位技? 展开更多
关键词 预定位技术 二步法 成像研究 裸鼠模型 生物素-亲和素系统 单克隆抗体 hab18 抗原结合活性 钆喷替酸葡甲胺 强度-时间曲线 DTPA 生物素化 system 信号强度 对比度噪声比 人肝癌细胞 人肝细胞癌 链霉亲和素 尾静脉注射 分子生物素
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^(131)I-HAb18肝癌单克隆抗体对荷肝癌裸鼠的导向治疗药效研究 被引量:4
3
作者 米力 陈志南 +2 位作者 曲萍 边惠洁 刘成刚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第2期51-52,共2页
 ̄(131)I-HAb18肝癌单克隆抗体对荷肝癌裸鼠的导向治疗药效研究米力,陈志南,曲萍,边惠洁,刘成刚(第四军医大学国家863肝癌导向药物项目组,西安710032)单克隆抗体对肿瘤相应抗原具有高度的亲和性,用放射性...  ̄(131)I-HAb18肝癌单克隆抗体对荷肝癌裸鼠的导向治疗药效研究米力,陈志南,曲萍,边惠洁,刘成刚(第四军医大学国家863肝癌导向药物项目组,西安710032)单克隆抗体对肿瘤相应抗原具有高度的亲和性,用放射性核素标记MCAb.可选择性地杀伤瘤... 展开更多
关键词 肝肿瘤 单克隆抗体 hab18 导向疗法 碘131
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单抗导向阿霉素免疫毫微粒的^(131)I标记及其体内抗肝癌作用 被引量:1
4
作者 李云春 陈绪全 +3 位作者 蔡美英 杨晓川 刘晓波 梁正路 《同位素》 CAS 2002年第1期12-16,共5页
将HAb18-ADR-HSA-NP和ADR-HSA-NP或其131I标记物进行荷肝癌裸鼠实验,观察其在动物体内对肝癌细胞的靶向性及其抑瘤作用。结果表明:HAb18-ADR-HSA-NP的有效载药量为1.44%,比ADR-HSA-NP(1.69%)有所降低;呈缓慢释药状,其最大释药量(41%)明... 将HAb18-ADR-HSA-NP和ADR-HSA-NP或其131I标记物进行荷肝癌裸鼠实验,观察其在动物体内对肝癌细胞的靶向性及其抑瘤作用。结果表明:HAb18-ADR-HSA-NP的有效载药量为1.44%,比ADR-HSA-NP(1.69%)有所降低;呈缓慢释药状,其最大释药量(41%)明显低于ADR-HSA-NP(65%)(P<0.05)。正常裸鼠显像显示,131I-HAb18-ADR-HSA-NP在体内的趋肝性和稳定性均优于131I-ADR-HSA-NP,肝脏清除较131I-ADR-HSA-NP慢。HAb18-ADR-HSA-NP主要滞留于瘤体,随时间延长,其滞留量明显多于ADR-HSA-NP(P<0.05);它能明显抑制癌细胞生长,其抑癌率显著高于ADR-HSA-NP(P<0.05)。因此,HAb18-ADR-HSA-NP在体内能和肝癌细胞结合并抑制其生长。 展开更多
关键词 hab18 阿霉素白蛋白免疫毫微粒 肝癌靶向性 抗癌活性 碘131标记 肝癌 放射性同位素 治疗
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基于表面重塑方法的抗体HAb18可变区人源化设计
5
作者 杨滨 杨向民 陈志南 《科学技术与工程》 2007年第14期3378-3382,共5页
在分析抗体空间结构特点和残基间相互作用基础上,利用计算机辅助的分子设计和表面残基替换法进行鼠源抗体人源化设计。在抗体同源模建的基础上,利用序列分析和结构分析确定鼠源抗体可变区中外露的非人样差异残基,参考分子内、间氢键相... 在分析抗体空间结构特点和残基间相互作用基础上,利用计算机辅助的分子设计和表面残基替换法进行鼠源抗体人源化设计。在抗体同源模建的基础上,利用序列分析和结构分析确定鼠源抗体可变区中外露的非人样差异残基,参考分子内、间氢键相互作用,最终选定将要突变的残基位点。使用这种方法对一株抗人肝癌细胞的单克隆抗体HAb18进行了人源化改造设计,并将候选位点分为三类,以便于在实验中依次突变,寻找降低鼠源抗体免疫原性和保持其生物功能之间适宜的平衡点。结果表明表面重塑方法可以有效地减少抗体人源化设计中CDR空间构象的变化,维持抗体生物活性,为试验提供有力的理论依据。 展开更多
关键词 抗体人源化 表面重塑 hab18
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肝癌放免治疗剂^(131)I-HAb18对大鼠各组织的病理学变化 被引量:1
6
作者 曲萍 陈志南 +2 位作者 赵建业 米力 仇凯 《陕西医学杂志》 CAS 2000年第6期381-382,共2页
目的:观察不同剂量^(131)Ⅰ-HAb18在长期毒性试验中对大鼠各组织的病理损伤,为确定安全的临床使用剂量提供依据。方法:80只SD大鼠随机分为4组(含对照组),实验组腹腔注射3种剂量的^(131)Ⅰ-HAb18,对照组注射等体积生理盐水,每月2次,共3月... 目的:观察不同剂量^(131)Ⅰ-HAb18在长期毒性试验中对大鼠各组织的病理损伤,为确定安全的临床使用剂量提供依据。方法:80只SD大鼠随机分为4组(含对照组),实验组腹腔注射3种剂量的^(131)Ⅰ-HAb18,对照组注射等体积生理盐水,每月2次,共3月,末次注射24h后处死,解剖一半大鼠,取各组织制成石蜡切片,镜检。停药恢复2月后,处死解剖余下的大鼠,制成切片,观察。结果:与对照组相比,低剂量组的大鼠各组织基本正常,中剂量组的大鼠约有一半组织出现轻度的病理改变,高剂量组的大鼠部分组织出现坏死等不可复性病理改变。结论:在长期毒性试验中低剂量为安全剂量,中剂量对SD大鼠有毒性作用,高剂量对SD大鼠有较重的毒性。 展开更多
关键词 肝癌 放射免疫治疗 碘131 hab18 病理学
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治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制 被引量:1
7
作者 李玲 米力 +5 位作者 刘蓉 汪莉 徐力青 冯强 田蓉 陈志南 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期507-510,共4页
目的进行治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制研究.方法用细胞计数、ELISA和FCM分别检测细胞生长、抗体生成速度和抗原结合活性;冻存细胞复苏后及体外传代3个月,检测抗体分泌稳定性和克隆阳性率;进行无菌检查、细胞核型... 目的进行治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制研究.方法用细胞计数、ELISA和FCM分别检测细胞生长、抗体生成速度和抗原结合活性;冻存细胞复苏后及体外传代3个月,检测抗体分泌稳定性和克隆阳性率;进行无菌检查、细胞核型和同工酶谱分析,了解细胞遗传稳定性、外源因子污染和细胞间交叉污染情况.结果肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速度分别为0.047~0.052/h和1.1~1.4 pg/cell·h,与靶细胞FHCC98结合的阳性率达99%,平均荧光强度在200以上.冻存细胞复苏后及体外连续传代3个月后,其特异性抗体生成速度维持在1.0 pg/cell·h以上,培养上清抗体效价仍为1:1000.不同批次的生成细胞核型均符合杂交瘤细胞特征,外源因子检查阴性,无细胞间交叉污染.结论HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速率、抗体稳定性和特异性均符合已建立的规模化放大培养的种子细胞质控标准. 展开更多
关键词 治疗性肝癌 单克隆抗体 hab18 种子细胞 质量控制 细胞培养 细胞生长
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肝癌特异性单克隆抗体HAb18可变区基因的克隆和序列测定
8
作者 牛利国 陈志南 +1 位作者 苏成芝 药立波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第4期306-307,共2页
鉴于基因工程抗体具有分子小、免疫原性低,不被细胞受体结合,在体内成象定位检查时本底低,图像清晰,能进入实体瘤周围微循环,在治疗实体瘤时较完整抗体分子的效能高等优点。我们从肝癌特异性mAbHAb18中克隆了其轻、重链可... 鉴于基因工程抗体具有分子小、免疫原性低,不被细胞受体结合,在体内成象定位检查时本底低,图像清晰,能进入实体瘤周围微循环,在治疗实体瘤时较完整抗体分子的效能高等优点。我们从肝癌特异性mAbHAb18中克隆了其轻、重链可变区基因,并测定了其核苷酸序列,为... 展开更多
关键词 肝肿瘤 单克隆抗体 hab18 可变区基因 克隆
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肝癌膜相关抗原Hab18g为CD147分子的鉴定 被引量:11
9
作者 郭晓楠 陈志南 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期7-10,共4页
目的 从蛋白水平验证肝癌膜相关抗原Hab18g为CD147分子 ,并探讨单抗Hab18和抗CD147mAb识别抗原表位的异同。方法 间接免疫荧光染色 ,免疫组化ABC法 ,斑点杂交及FCM加成试验。结果 抗CD147mAb与Hab18两者识别抗原的阳性反应结果一致 ... 目的 从蛋白水平验证肝癌膜相关抗原Hab18g为CD147分子 ,并探讨单抗Hab18和抗CD147mAb识别抗原表位的异同。方法 间接免疫荧光染色 ,免疫组化ABC法 ,斑点杂交及FCM加成试验。结果 抗CD147mAb与Hab18两者识别抗原的阳性反应结果一致 ,先后加用两种单抗所测的平均荧光强度值高于单独用任一种单抗所测的值。结论 Hab 18g应称为CD147分子 ,Hab 18和抗CD147两株单抗识别抗原不同表位。 展开更多
关键词 肝癌 抗原 hab18G CD147 膜相关抗原
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Inhibitory effects of antisense RNA of HAb18G/CD147 on invasion of hepatocellular carcinoma cells in vitro 被引量:22
10
作者 Yu Li Peng Shang Ai-Rong Qian Li Wang Yong Yang Zhi-Nan Chen, Department of Cell Biology, Fourth Military Medical University, Xi’an 710032, Shaanxi Province, China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2003年第10期2174-2177,共4页
AIM: To study the inhibitory effects of antisense RNA of HAb18G/CD147 on invasion of hepatocellular carcinoma (HCC) cells in vitro.METHODS: Antisense RNA of HAb18G/CD147 vector PCIasHAb18G was constructed by reversely... AIM: To study the inhibitory effects of antisense RNA of HAb18G/CD147 on invasion of hepatocellular carcinoma (HCC) cells in vitro.METHODS: Antisense RNA of HAb18G/CD147 vector PCIasHAb18G was constructed by reversely inserting HAb18G/CD147 cDNA to eukaryotic expression vector PCI-neo. The HCC cell line HHCC was transfected by PCI-asHAb18G via cation liposome. Expression of HAb18G/CD147 of transfected cells selected by G418 (geneticin) was observed by immunohistochemical SP staining and FACS (fluorescence activated cell sorting). Gelatin zymography was used to determine the effect of PCI-asHAb18G on reducing secretions of MMP2 and MMP-9 of the transfected cells. Boyden chamber was employed to test the invasion of HCC cells in vitro.RESULTS: The construction of antisense RNA vector PCIasHAb18G was verified correct by partial nucleotide sequencing and restricted endonuclease digestion. The expression of HAb18G/CD147 in transfected HHCC was inhibited by PCI-asHAb18G. Secretions of MMP-2 and MMP9 of transfected HHCC were reduced and the invasion of transfected HHCC was inhibited compared to HHCC,respectively.CONCLUSION: Invasion of HCC cells can be inhibited by antisense RNA of HAb18G/CD147. HAb18G/CD147 may be used as a potential target of drugs for anti-invasion and metastasis of HCC. 展开更多
关键词 肝细胞癌 肿瘤侵袭 抑制效应 hab18G/CD147 体外试验
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HAb18G/CD147拮抗肽抗肝癌转移作用的体外实验 被引量:16
11
作者 骞爱荣 商澎 +4 位作者 李郁 黄宝成 朱平 梅其炳 陈志南 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第3期255-259,共5页
目的:筛选获得HAb18G/CD147高亲和性拮抗肽中具有体外抗肝癌细胞转移作用的拮抗肽.方法:对于采用HAb18G/CD147纯抗原筛选噬菌体随机12肽库所获得的9条高亲和性的12肽(AP-1-AP-9).分别采用:MTT法测定AP-1-AP-9的对肝癌细胞(HHCC)的直接毒... 目的:筛选获得HAb18G/CD147高亲和性拮抗肽中具有体外抗肝癌细胞转移作用的拮抗肽.方法:对于采用HAb18G/CD147纯抗原筛选噬菌体随机12肽库所获得的9条高亲和性的12肽(AP-1-AP-9).分别采用:MTT法测定AP-1-AP-9的对肝癌细胞(HHCC)的直接毒性;明胶酶谱法分析AP1-AP-9对基质金属蛋白酶(MMPs)产生及其激活过程的影响;重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭抑制实验测定AP-1-9对肝癌细胞(HHCC)侵袭力的的影响;观察AP-1-AP-9对HHCC与细胞外基质蛋白(Matrigel,FN,LN,CollogenⅣ)、HHCC与间质细胞(成纤维细胞fb)黏附能力;以及AP1-9对HHCC运动能力的影响.结果:拮抗肽AP-1-AP-9对HHCC无明显细胞毒性作用;AP-1,6,9对HHCC刺激fb细胞产生MMP-2其激活过程具有明显的抑制作用;AP-1,3,6,7,8,9对HHCC侵袭力有明显的抑制作用(P<0.05),抑制率分别为78.22%,90.1%,62.83%,56.44%,68.32%和81.19%;9条拮抗肽对HHCC与细胞外基质蛋白Matrigel,FN无明显的抑制作用,但AP-3,9对HHCC与CollogenⅣ,LN的黏附有抑制作用;AP-1,6,9对HHCC与fb细胞之间的黏附有抑制作用;AP-6可抑制HHCC的运动能力,抑制率54%,但统计学上差异无显著性(P>0.05).结论:HAb18G/CD147拮抗肽(AP-1-AP-9)对肝癌的侵袭转移相关的多个环节有明显的抑制作用,为研究开发新的抗肿瘤转移多肽药物开辟了新途径. 展开更多
关键词 hab18G/CD147 拮抗肽 抗肝癌转移 体外实验 肿瘤转移
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HAb18G/CD147拮抗肽的筛选及对肝癌细胞侵袭力的抑制 被引量:13
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作者 黄宝成 商澎 +3 位作者 骞爱荣 王贤辉 施光华 陈志南 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期111-114,共4页
目的 筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法 利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽... 目的 筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法 利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽并用质谱仪进行鉴定。最后利用侵袭力抑制实验从中筛选拮抗肝癌细胞转移的功能多肽。结果 经纯化的HAb18G/CD14 7分子量为6 5 0 0 0 ,Westernblot验证结果阳性。用此纯化分子筛选噬菌体肽库 ,得到 9条多肽。经体外功能验证 ,9条肽抑制肝癌细胞侵袭力的活性不一 ,其中 3条有显著活性 (P <0 .0 1) ,活性最好的一条肽能使穿过Boyden小室膜的肝癌细胞数量较对照减少 90 .1%。结论 以亲和层析法和噬菌体随机肽库法相结合 ,筛选获得了有抗肝癌细胞侵袭力功能的多肽 ,此结果为抗肝癌转移肽类药物的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤转移 抑制 habl8G/CD147拮抗肽 亲和层析法 噬菌体随机肽库法
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HAb18G/CD147拮抗肽对体内血管生成的影响 被引量:9
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作者 商澎 骞爱荣 +3 位作者 胡佩珍 马福成 朱平 陈志南 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期355-357,共3页
关键词 hab18G CD147 拮抗肽 血管生成
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非小细胞肺癌组织中HAb18G、MMP-9和MMP-2表达与预后的相关性 被引量:15
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作者 赵天源 张艳敏 常延河 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期819-822,共4页
目的探讨HAb18G、MMP-9和MMP-2的表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)转移和预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测121例NSCLC组织中HAb18G、MMP-9和MMP-2的表达,并对NSCLC患者术后5年生存期进行追踪随访。结果HAb18... 目的探讨HAb18G、MMP-9和MMP-2的表达与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)转移和预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测121例NSCLC组织中HAb18G、MMP-9和MMP-2的表达,并对NSCLC患者术后5年生存期进行追踪随访。结果HAb18G表达与患者性别、年龄和病理类型无关(P>0.05),与肿瘤大小、分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05);MMP-9和MMP-2的表达与患者性别、年龄和分化程度无关(P>0.05),与肿瘤大小、组织类型、TNM分期、淋巴结转移密切相关(P<0.05);HAb18G表达与MMP-9和MMP-2表达均呈正相关;HAb18G、MMP-9和MMP-2高表达组NSCLC患者术后5年生存率均显著低于低表达组(P<0.05)。结论HAb18G、MMP-9和MMP-2的表达水平与NSCLC的转移和预后密切相关,可作为早期诊断和预后判断的参考指标。 展开更多
关键词 肺肿瘤 非小细胞肺癌 hab18G MMP-9 MMP-2 免疫组织化学
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HAb18G/CD147在多种恶性肿瘤中的表达及其临床意义 被引量:14
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作者 封兰兰 朱少君 +6 位作者 张阳 李艳红 巩丽 兰淼 韩秀娟 姚丽 张伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期958-961,共4页
目的探讨HAb18G/CD147表达与食管癌、结肠癌、宫颈癌、肺癌、卵巢癌和肝细胞癌的临床相关性。方法应用免疫组织化学SP染色法分析上述6种恶性肿瘤及其癌旁组织和淋巴结转移灶标本中CD147基因表达和定位,并对CD147表达与肿瘤分化程度、浸... 目的探讨HAb18G/CD147表达与食管癌、结肠癌、宫颈癌、肺癌、卵巢癌和肝细胞癌的临床相关性。方法应用免疫组织化学SP染色法分析上述6种恶性肿瘤及其癌旁组织和淋巴结转移灶标本中CD147基因表达和定位,并对CD147表达与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况进行分析。结果相对于癌旁组织,CD147在6种肿瘤中的表达均明显生升高。CD147表达与肿瘤的分化程度、浸润深度和淋巴结转移均显著正相关。结肠癌、宫颈癌以及食管癌中,CD147在浸润深的组织中的表达显著升高(P<0.05);宫颈癌、食管癌、肺癌以及卵巢癌中,CD147在淋巴结转移灶中的表达显著升高(P<0.05),但在结肠癌中差别不显著;结肠癌、宫颈癌、食管癌以及肺癌中,CD147在分化差的组织中的表达显著升高(P<0.05)。结论CD147表达在分化差、浸润深以及淋巴结转移的组织中明显升高,提示CD147可能是恶性肿瘤的预后指标。 展开更多
关键词 hab18G 恶性肿瘤 免疫组化 预后
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免疫磁性海藻酸钠载药纳米微球的制备与评价 被引量:8
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作者 颜秋平 李富荣 +3 位作者 汤顺清 桂林 毛萱 周汉新 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期305-309,共5页
靶向治疗系统是目前研究的热点,用微乳化-离子交联方法制备包覆阿霉素的碳包铁/海藻酸钠复合纳米微球,以水溶性碳二亚胺为交联剂,将载药微球与单抗Hab18连接,制备出了免疫磁性药物纳米微球。对该免疫磁性微球的理化性能进行了表征,同时... 靶向治疗系统是目前研究的热点,用微乳化-离子交联方法制备包覆阿霉素的碳包铁/海藻酸钠复合纳米微球,以水溶性碳二亚胺为交联剂,将载药微球与单抗Hab18连接,制备出了免疫磁性药物纳米微球。对该免疫磁性微球的理化性能进行了表征,同时检测了免疫磁性微球中抗体的活性和免疫磁性微球与靶细胞的体外结合情况,结果表明,免疫磁性药物纳米微球平均粒径约为171.2nm,外观为球型,铁含量为14.6%,载药量为10.8%,且具有强磁响应性和长时间药物缓释效果。同时在体外该微球能够与靶细胞特异性结合。这种免疫磁性药物纳米微球有望成为一种优良的靶向肿瘤药物载体。 展开更多
关键词 磁性微球 海藻酸钠 阿霉素 hab18单抗
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降低mRNA翻译起始区的稳定性原核非融合表达HAb18GEF 被引量:9
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作者 张思河 邢金良 +1 位作者 姚西英 陈志南 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期175-180,共6页
为在大肠杆菌中非融合表达肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段 (HAb18GEF) ,将HAb18GEF基因的cDNA插入原核表达载体pET2 1a +。通过计算机辅助设计 ,对重组的HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的二级结构和密码子偏性同时进行预测。... 为在大肠杆菌中非融合表达肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段 (HAb18GEF) ,将HAb18GEF基因的cDNA插入原核表达载体pET2 1a +。通过计算机辅助设计 ,对重组的HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的二级结构和密码子偏性同时进行预测。结果发现其存在稳定的茎环结构和许多稀有密码子。通过优化二级结构和优化密码子偏性二种策略分别来降低HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的稳定性。在不改变氨基酸序列的前提下 ,利用密码子的简并性 ,通过非连续定点突变实现这两种优化。将突变前后的重组子经酶切鉴定和测序验证后 ,转化感受态JM10 9 DE3宿主菌后 ,随机挑菌 3 7℃下用IPTG诱导表达。SDS PAGE、间接ELISA、Westernblot和细胞分级分离法分析这些重组子的诱导表达情况。RNAdotblot对比分析优化前后目的基因mRNA的量。结果证明 ,成功地构建了HAb18GEF pET2 1a +及其二种优化突变体。仅优化TIR区二级结构或仅优化TIR区密码子偏性均能实现HAb18GEF蛋白的非融合表达 ,而未优化的重组子不表达任何HAb18GEF。非融合表达产物在大肠杆菌中主要以包涵体形式存在 ,高达 2 9 3 %。由于过表达和细胞渗漏 ,培养基和周质腔中也可检测到少许的HAb18GEF。优化二级结构和优化密码子偏性二种策略的HAb18GEF的非融合? 展开更多
关键词 MRNA 翻译起始区 非融合表达 habl8G胞外区 二级结构 密码子偏性 肝癌 粘附分子
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HAb18G/CD147刺激人肝癌细胞分泌基质金属蛋白酶的机制探讨 被引量:9
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作者 蒋建利 姚西英 +3 位作者 周筠 黄勇 张阳 陈志南 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期534-537,共4页
目的 探讨HAb18G/CD14 7诱导肝癌细胞基质金属蛋白酶 (MMP)分泌和活化的机制。方法 应用明胶酶谱分析方法观察HAb18G/CD14 7分子及其细胞内、外片段高表达对人SMMC 772 1肝癌细胞分泌MMP(MMP 2和MMP 9)及其活化的影响 ,以及细胞内Ca2 ... 目的 探讨HAb18G/CD14 7诱导肝癌细胞基质金属蛋白酶 (MMP)分泌和活化的机制。方法 应用明胶酶谱分析方法观察HAb18G/CD14 7分子及其细胞内、外片段高表达对人SMMC 772 1肝癌细胞分泌MMP(MMP 2和MMP 9)及其活化的影响 ,以及细胞内Ca2 +信号调控在此过程的作用。结果 HAb18G/CD14 7分子的高表达明显诱导MMP 2和MMP 9的分泌和活化 ,分泌总量升高 ( 30 .4 5± 3.4 1) % (P <0 .0 1) ,而细胞内、外各片段的表达均不能有效刺激MMP的分泌与活化。细胞内Ca2 +库释放诱导剂Thapsigargin(Tg)在未转染 772 1细胞可有效诱导MMP 2和MMP 9的分泌与活化 ,较对照组升高 ( 5 8.6 3± 31.0 4 ) % (P <0 .0 5 ) ,其诱导作用可受到细胞内Ca2 +调节抑制剂S 亚硝基 乙酰青霉胺 (S nitroso N acetylpenicillamine,SNAP)的明显抑制 ,而HAb18G/CD14 7的高表达则抑制了以上细胞内Ca2 +信号通路对MMP分泌和活化的调节作用 ,使转染的T772 1细胞MMP的分泌与活化始终处于高水平稳定状态。结论 全长的HAb18G/CD14 7分子可通过抑制细胞内Ca2 +信号调控通路诱导肝癌细胞稳定高表达和活化MMP。 展开更多
关键词 肝细胞 肿瘤细胞 培养的 SMMC-7721细胞 基质金属蛋白酶类 hab18G/CD147 钙离子通道
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肝癌DSA血供类型与经肝动脉灌注^(131)Ⅰ-HAb18F(ab')_2治疗后瘤体大小变化的关系探讨 被引量:8
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作者 吴少平 卢武胜 +1 位作者 徐大伟 郑志勇 《介入放射学杂志》 CSCD 2007年第4期243-245,共3页
目的探讨不同血供类型的原发性肝癌(简称肝癌)经肝动脉灌注131Ⅰ-HAb18F(ab')2的疗效差异。方法使用Seldinger技术,超选择性肝动脉插管灌注0.75mCi/kg131Ⅰ-HAb18F(ab')2注射液,CT随访治疗前后的瘤体大小变化。按照DSA造影表现,... 目的探讨不同血供类型的原发性肝癌(简称肝癌)经肝动脉灌注131Ⅰ-HAb18F(ab')2的疗效差异。方法使用Seldinger技术,超选择性肝动脉插管灌注0.75mCi/kg131Ⅰ-HAb18F(ab')2注射液,CT随访治疗前后的瘤体大小变化。按照DSA造影表现,将30例患者分为多、中等、少血供3型,分析不同类型患者瘤体缩小的差异。结果DSA显示多、中等血供型肝癌肿瘤缩小的比率分别为60%、37.5%,2例少血供型肝癌治疗后1例瘤体显著缩小。结论131Ⅰ-HAb18F(ab')2免疫内照射治疗对不同血供类型的肝癌均有一定的缩小瘤体的效果。 展开更多
关键词 肝癌 数字减影血管造影术 ^131 Ⅰ—hab18 放射免疫治疗 肝动脉
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抗人肝癌单克隆抗体HAb18 Fd及轻链基因的克隆与鉴定 被引量:9
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作者 陈志南 邢金良 +2 位作者 杨向民 宋斐 张思河 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第2期105-109,共5页
目的 :克隆抗人肝癌单抗HAb18Fd及轻链基因 ,并对其可靠性和准确性进行验证。方法 :从分泌单抗HAb18的杂交瘤细胞株中提取总RNA ,利用RT PCR扩增抗体Fd及轻链基因 ,连入 pMD18T载体后 ,挑选阳性克隆进行序列测定并利用相应的软件对序列... 目的 :克隆抗人肝癌单抗HAb18Fd及轻链基因 ,并对其可靠性和准确性进行验证。方法 :从分泌单抗HAb18的杂交瘤细胞株中提取总RNA ,利用RT PCR扩增抗体Fd及轻链基因 ,连入 pMD18T载体后 ,挑选阳性克隆进行序列测定并利用相应的软件对序列进行分析。然后将轻链及Fd基因依次克隆到噬菌体展示载体 pComb3中 ,转化大肠杆菌XL1 blue并利用辅助噬菌体M 13K0 7进行挽救 ,收获噬菌体后利用间接ELISA方法检测其抗原特异性。结果 :扩增的HAb18全长轻链和Fd基因大小分别为 6 6 5bp和 6 6 8bp ,序列分析显示 :VH及VL均含有 2个特征性的半胱氨酸 ,CH1属于IgG1亚类 ,CL属于κ亚型。ELISA证实 ,Fab基因表达产物具有与相应抗原特异结合的活性。结论 :成功克隆了肝癌单抗HAb18的Fd及轻链基因 ,为下一步构建多种形式的基因工程抗体奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 抗人肝癌单克隆抗体 hab18Fd 轻链基因 克隆 鉴定
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