丹参酮ⅡA对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的保护作用 被引量：11

1

作者 刘畅 王庸晋 曹文君 《国际心血管病杂志》 2015年第4期261-263,268,共4页

目的:探究丹参酮ⅡA对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的保护作用。方法:建立H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤模型。将体外培养的H9C2细胞随机分为空白对照组、DMSO溶剂对照组、H2O2模型组、丹参酮ⅡA高、中、低剂量组。用MTT法测定心肌细... 目的:探究丹参酮ⅡA对大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤的保护作用。方法:建立H2O2诱导大鼠心肌细胞H9C2氧化损伤模型。将体外培养的H9C2细胞随机分为空白对照组、DMSO溶剂对照组、H2O2模型组、丹参酮ⅡA高、中、低剂量组。用MTT法测定心肌细胞存活率,并检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)的水平。结果:与空白对照组相比,H2O2模型组细胞存活率显著降低,LDH、MDA水平升高,SOD水平降低;与H2O2模型组相比,丹参酮ⅡA高剂量组心肌细胞存活率显著增高,LDH和MDA水平降低,SOD水平升高(P<0.01)。结论:丹参酮ⅡA能够减轻心肌细胞氧化损伤。 展开更多

关键词 丹参酮ⅡA h9c2心肌细胞 氧化损伤

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参附益心颗粒对缺氧诱导的大鼠H_9C_2心肌细胞能量代谢的影响 被引量：11

2

作者 崔琳 王幼平 +7 位作者 王新陆 李彬 郝轩轩 谢世阳 高原 王小晓 王贺 朱明军 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2019年第10期862-868,共7页

目的探讨参附益心颗粒治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法以不同浓度(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 9、1. 2 mg/ml)的参附益心颗粒处理H_9C_2细胞24 h,MTT法检测细胞活性,筛选后续实验的药物浓度。将H_9C_2细胞分为正常组... 目的探讨参附益心颗粒治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法以不同浓度(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 9、1. 2 mg/ml)的参附益心颗粒处理H_9C_2细胞24 h,MTT法检测细胞活性,筛选后续实验的药物浓度。将H_9C_2细胞分为正常组(正常培养)、模型组(缺氧6 h)、曲美他嗪组(1×10^(-4)mol/L曲美他嗪+缺氧6 h)、辅酶Q10组(1×10^(-4)mol/L辅酶Q10+缺氧6 h)及中药低剂量组(0. 25 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h)、中药高剂量组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h),检测各组心肌细胞ATP含量、底物代谢酶脂肪酸转运酶(FAT)、肉碱脂酰转移酶1 (MCPT-1)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、葡萄糖转运子4 (GLUT-4)、腺苷酸转运体(ANT)、肌酸激酶(CK)蛋白表达水平;观察各组H_9C_2心肌细胞超微结构的变化。将H_9C_2细胞分为正常组、模型组、中药组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6 h),JC-1染色检测线粒体膜电位变化。结果 0. 5 mg/ml参附益心组及低于此浓度组无细胞毒性,以0. 5 mg/ml参附益心颗粒用于中药组。与正常组比较,模型组H_9C_2细胞ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量明显降低,AMPK、PDH蛋白含量明显升高(P <0. 05)。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组心肌细胞中ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量均明显升高(P <0. 05)。正常组细胞线粒体结构正常,模型组细胞膜破裂,线粒体肿胀,边界模糊不清。与模型组对比,中药组细胞损伤明显减轻,细胞膜完整,线粒体结构清晰。JC-1染色显示中药组可以改善线粒体膜电位的下降。结论参附益心颗粒可能通过升高心肌H_9C_2细胞ATP、GLUT-4、ANT、FAT、MCPT-1、MCAD、CK蛋白表达,降低AMPK、PDH蛋白表达,改善缺氧诱导H_9C_2心肌细胞线粒体膜电位,从而发挥治疗慢性心力衰竭的作用。 展开更多

关键词 慢性心力衰竭 参附益心颗粒 h9c2心肌细胞 线粒体损伤 能量代谢

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FGF-21对H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞H9c2氧化应激损伤的保护作用 被引量：11

3

作者 韩苗苗 王文飞 +4 位作者 刘铭瑶 李德山 周兵 于引航 任桂萍 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期470-475,共6页

成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)是机体内重要的代谢调节因子,但尚不清楚FGF-21对心血管系统的直接影响。本研究利用H2O2诱导的心肌细胞H9c2氧化应激模型,分别用MTT、流式细胞术、real-time PCR等方法评价FG... 成纤维细胞生长因子-21(fibroblast growth factor-21,FGF-21)是机体内重要的代谢调节因子,但尚不清楚FGF-21对心血管系统的直接影响。本研究利用H2O2诱导的心肌细胞H9c2氧化应激模型,分别用MTT、流式细胞术、real-time PCR等方法评价FGF-21是否具有对抗氧化损伤引起的心肌细胞凋亡的能力及其相关作用机制。结果显示,FGF-21能提高H2O2处理后的H9c2细胞存活率,降低心肌细胞凋亡,并减少H2O2引起的ROS累积;而且FGF-21通过上调SOD活性以及调控Bcl-2/Bax的表达量,发挥抑制细胞凋亡的作用。研究结果证实,FGF-21能够保护心肌细胞免受氧化应激带来的损伤。 展开更多

关键词 FGF-21 心肌细胞 过氧化氢 氧化应激损伤 细胞凋亡

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鹿茸多肽对阿霉素诱导H9c2细胞损伤保护作用的研究 被引量：8

4

作者 李鑫 律广富 +6 位作者 韩冬 徐岩 赵昕彤 周佳 刘玥欣 黄晓巍 隋欣 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2020年第10期1089-1093,共5页

目的:探讨鹿茸多肽对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤的保护作用与其作用机制。方法:培养H9c2细胞,采用CCK-8方法考察ADR和PAP对H9c2细胞存活率的影响,选择最优给药时间与浓度,分成4组,空白对照组(BCG组)、阿霉素诱导组(ADR组)、鹿茸多肽组(PA... 目的:探讨鹿茸多肽对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤的保护作用与其作用机制。方法:培养H9c2细胞,采用CCK-8方法考察ADR和PAP对H9c2细胞存活率的影响,选择最优给药时间与浓度,分成4组,空白对照组(BCG组)、阿霉素诱导组(ADR组)、鹿茸多肽组(PAP组)、阿霉素与鹿茸多肽联合诱导组(ADR+PAP组),ELISA检测H9c2上清液中cTnT和cTnI的含量,免疫荧光法检测Caspase9的表达水平,Western blot法检测各组细胞相关蛋白TGF-β1、SMAD7、PKC表达。结果:与BCG组比较,ADR组cTnT和cTnI含量显著升高(P<0.05),Caspase9活性表达降低,TGF-β1蛋白表达升高(P<0.01),SMAD7、PKC蛋白表达降低(P<0.01),PAP组无显著性差异(P>0.05),与ADR组比较,ADR+PAP组cTnT和cTnI含量减少(P<0.05),Caspase9活性表达升高,TGF-β1蛋白表达降低(P<0.05),SMAD7、PKC蛋白表达升高(P<0.01,P<0.05)。结论:鹿茸多肽可以对阿霉素诱导的H9c2细胞损伤有保护作用,其作用机制可能与调控TGF-β1、SMAD7、PKC蛋白表达量有关。 展开更多

关键词 鹿茸多肽 阿霉素 h9c2细胞损伤 作用机制

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木豆叶提取物对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及机制研究 被引量：6

5

作者 孙琳 柴智 张涛 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期297-300,共4页

目的研究木豆叶提取物(ECCL)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,于H2O2刺激前加入PI3K信号通路阻断剂LY294002(LY)预处理10 min,加入20、50μg/m L ECCL预处理24 h。MTT法... 目的研究木豆叶提取物(ECCL)对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,于H2O2刺激前加入PI3K信号通路阻断剂LY294002(LY)预处理10 min,加入20、50μg/m L ECCL预处理24 h。MTT法检测细胞存活率,比色法测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,Western blotting检测细胞内p-Akt、p-e NOS蛋白表达。结果与模型组比较,ECCL可明显增加H9c2细胞H2O2损伤后细胞存活率(P<0.01),增加SOD活力,降低MDA、LDH水平,增加p-Akt和p-e NOS蛋白表达(P<0.05、0.01),LY可阻断ECCL对H9c2的上述作用。结论 ECCL能够减轻H2O2所致的H9c2细胞损伤,可能是通过激活PI3K通路促进其下游因子Akt和e NOS磷酸化发挥作用。 展开更多

关键词 木豆叶提取物 h2O2 h9c2细胞 氧化应激损伤 PI3K

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马里苷减轻高糖诱导的大鼠心肌细胞系H9c2损伤

6

作者 祖力皮亚·阿布拉 赵强 +1 位作者 张泰民 李甜 《基础医学与临床》 CAS 2024年第9期1269-1273,共5页

目的研究马里苷对高糖所致大鼠心肌细胞系(H9c2)损伤的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(Ctrl)、高糖(30 mmol/L)损伤模型组和马里苷(25、50、100μmol/L)干预模型组。MTT法检测H9c2细胞的活性;Western blot检测细胞LC-3Ⅱ/Ⅰ、p62、mTO... 目的研究马里苷对高糖所致大鼠心肌细胞系(H9c2)损伤的影响。方法将H9c2细胞分为对照组(Ctrl)、高糖(30 mmol/L)损伤模型组和马里苷(25、50、100μmol/L)干预模型组。MTT法检测H9c2细胞的活性;Western blot检测细胞LC-3Ⅱ/Ⅰ、p62、mTOR蛋白表达。结果与对照组相比,模型组细胞活性下降(P<0.01),马里苷组H9c2细胞活性显著增强(P<0.01);模型组LC-3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平降低(P<0.05),p62及mTOR水平升高(P<0.01),马里苷组LC-3Ⅱ/Ⅰ水平增加,p62及mTOR降低(P<0.01),且随着浓度的增加蛋白质表达量更加明显。结论马里苷能够影响高糖诱导的心肌细胞损伤的自噬相关蛋白质的表达。 展开更多

关键词 马里苷 h9c2细胞 高糖损伤 自噬

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FOXO4通过抑制炎症反应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

7

作者 徐尚娴 彭科 +4 位作者 单希胜 孟晓文 刘华跃 陶文辉 嵇富海 《国际麻醉学与复苏杂志》 CAS 2023年第4期353-359,共7页

目的探讨叉头框蛋白O(forkhead box protein O,FOXO)4在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用及对炎症反应的影响。方法H9c2细胞体外培养至密度30%~50%,按随机数字表法分为6组(每组3孔):对照组(Con组)、缺氧/复氧... 目的探讨叉头框蛋白O(forkhead box protein O,FOXO)4在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用及对炎症反应的影响。方法H9c2细胞体外培养至密度30%~50%,按随机数字表法分为6组(每组3孔):对照组(Con组)、缺氧/复氧组(H/R组)、过表达FOXO4+H/R组(OF+H/R组)、过表达FOXO4阴性对照+H/R组(OF⁃NC+H/R组)、沉默FOXO4+H/R组(siFOXO4+H/R组)、沉默FOXO4阴性对照+H/R组(siRNA⁃NC+H/R组)。Con组细胞正常培养。H/R组细胞进行缺氧6 h复氧6 h处理。OF+H/R组、OF⁃NC+H/R组、siFOXO4+H/R组和siRNA⁃NC+H/R组细胞在质粒或RNAoligo转染5 h后正常培养48 h,再进行H/R处理。Cell Counting Kit⁃8试剂盒检测细胞活性,乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量,实时荧光定量聚合酶链反应(real⁃time fluorescence quantitative PCR,RT⁃qPCR)检测细胞内炎症因子TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6 mRNA表达水平,Western blot检测细胞内FOXO4蛋白水平。结果与Con组比较,H/R组FOXO4蛋白水平下降(P<0.05),细胞活性降低(P<0.01),培养液中LDH水平升高(P<0.01),细胞中TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6 mRNA表达水平升高(P<0.01)。与H/R组比较,OF+H/R组FOXO4蛋白水平升高(P<0.01),细胞活性升高(P<0.05),培养液中LDH水平下降(P<0.01),细胞中TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6 mRNA表达水平降低(P<0.01或P<0.05)。与H/R组比较,siFOXO4+H/R组FOXO4蛋白水平降低(P<0.05),细胞活性降低(P<0.05),培养液中LDH水平升高(P<0.05),TNF⁃α、L⁃1β、IL⁃6 mRNA表达水平升高(P<0.05)。结论FOXO4可以减轻H9c2心肌细胞的H/R损伤,其机制与抑制炎症反应有关。 展开更多

关键词 叉头框蛋白O h9c2细胞 缺氧/复氧损伤 炎症因子

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胡黄连苷Ⅱ减轻阿霉素诱发H9C2心肌细胞损伤的潜在机制研究

8

作者 陈泺帆 赵金丹 饶红 《重庆医学》 CAS 2023年第19期2899-2904,2911,共7页

目的研究胡黄连苷Ⅱ(Pic)减轻阿霉素(Dox)诱发H9C2心肌细胞损伤的潜在机制。方法采用Dox(1μmol/L)处理H9C2心肌细胞24 h以构建Dox诱发心肌损伤的细胞模型。采用CCK-8法检测不同浓度Pic对细胞活性的影响,以确定Pic最佳的干预浓度。将细... 目的研究胡黄连苷Ⅱ(Pic)减轻阿霉素(Dox)诱发H9C2心肌细胞损伤的潜在机制。方法采用Dox(1μmol/L)处理H9C2心肌细胞24 h以构建Dox诱发心肌损伤的细胞模型。采用CCK-8法检测不同浓度Pic对细胞活性的影响,以确定Pic最佳的干预浓度。将细胞汇合度达到60%~70%的H9C2心肌细胞随机分为对照组(Con组)、阿霉素组(Dox组)和治疗组(Dox+Pic组)。采用乳酸脱氢酶(LDH)水平评价Dox对细胞的损伤;采用膜联蛋白V(Annexin V)-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)染色和TUNEL染色评估细胞凋亡率;使用JC-1染色判定Dox和Pic对H9C2心肌细胞线粒体膜电位(MMP)的影响;通过Western blot检测各组凋亡相关蛋白(BAX、BCL2、C-caspase-3)的表达情况;使用去乙酰化酶沉默信息调节因子1(SIRT1)选择性抑制剂(SIRT1-IN-1)研究Pic是否通过调控SIRT1来发挥对Dox处理细胞的保护作用。结果Dox能明显降低H9C2心肌细胞活性,而Pic则可抑制这一过程,与Con组比较,Dox+Pic组细胞培养基中的LDH水平明显降低。Annexin V-FITC/PI染色和TUNEL染色均表明Pic可以抑制Dox导致的细胞凋亡。JC-1染色结果显示,与Dox组比较,Dox+Pic组细胞的MMP降低。Western blot检测表明,Pic能够抑制促凋亡蛋白BAX、C-caspase-3表达,促进抗凋亡蛋白BCL2表达。Dox组细胞SIRT1蛋白表达降低,但Pic能够上调SIRT1表达,而SIRT1-IN-I(2μmol/L)逆转了Pic的抗凋亡作用。结论Pic可以通过激活SIRT1蛋白表达抑制Dox引起的细胞损伤。 展开更多

关键词 胡黄连苷Ⅱ 阿霉素 心肌细胞凋亡 h9c2心肌细胞损伤

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miR-19b对H_2O_2诱导的大鼠心肌细胞H9c2氧化应激损伤的保护作用及机制研究 被引量：2

9

作者 阮怀玉 廖小婷 曾彬 《心血管病学进展》 CAS 2021年第2期177-182,共6页

目的研究microRNA(miR)-19b是否在H2O2诱导的心肌细胞的氧化应激损伤中具有保护作用。方法将大鼠H9c2心肌细胞株分为6组,空白对照组(L1),H2O2组(L2),H2O2+miR-19b mimic阴性对照(NC)组(L3),H2O2+miR-19b mimic组(L4),H2O2+miR-19b inhib... 目的研究microRNA(miR)-19b是否在H2O2诱导的心肌细胞的氧化应激损伤中具有保护作用。方法将大鼠H9c2心肌细胞株分为6组,空白对照组(L1),H2O2组(L2),H2O2+miR-19b mimic阴性对照(NC)组(L3),H2O2+miR-19b mimic组(L4),H2O2+miR-19b inhibitor组(L5),H2O2+miR-19b inhibitor NC组(L6)。NC组细胞转染随机合成的miRNA片段作为阴性对照。采用CCK8和流式细胞术检测细胞活性和凋亡情况,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测miR-19b的表达量,并利用试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平,Western blot法检测核因子相关因子2(Nrf2)、血红素氧合酶-1(HO-1)表达水平。结果与L1组比较,L2组和L3组中miR-19b表达量、H9c2细胞活性和细胞内SOD、GSH水平均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率和细胞内LDH、MDA水平、Nrf2和HO-1表达水平均显著增加(P<0.01)。与L2组及L3组比较,L4组中miR-19b表达量、H9c2细胞活性和细胞内SOD、GSH水平、Nrf2和HO-1表达水平均显著增加(P<0.01),细胞凋亡率和细胞内LDH、MDA水平均显著降低(P<0.01),L5组中miR-19b表达量和H9c2细胞活性和细胞内SOD、GSH水平、Nrf2和HO-1表达水平均显著降低(P<0.01),细胞凋亡率和细胞内LDH、MDA水平均显著增加(P<0.01),L6组miR-19b表达量、H9c2细胞活性、细胞凋亡率、细胞内SOD、GSH、LDH、MDA水平以及Nrf2和HO-1表达水平均未见统计学差异(P>0.05)。结论miR-19b高表达可显著抑制H9c2细胞的氧化应激损伤,发挥心肌细胞保护作用。 展开更多

关键词 miR-19b h9c2心肌细胞 氧化应激损伤 凋亡 Nrf2/hO-1信号通路

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曲美他嗪对缺氧/复氧心肌细胞焦亡的影响 被引量：2

10

作者 陈玉磊 吕风华 +3 位作者 陈云玲 尹宏磊 王卓 司澳洋 《新乡医学院学报》 CAS 2020年第1期34-38,共5页

目的探讨曲美他嗪(TMZ)对急性缺氧/复氧(H/R)心肌细胞焦亡的影响。方法选择大鼠胚胎H9C2心肌细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、H/R组、H/R+50μmol·L^-1TMZ组、H/R+100μmol·L^-1TMZ组、H/R+500μmol·L^-1TMZ组。H/... 目的探讨曲美他嗪(TMZ)对急性缺氧/复氧(H/R)心肌细胞焦亡的影响。方法选择大鼠胚胎H9C2心肌细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、H/R组、H/R+50μmol·L^-1TMZ组、H/R+100μmol·L^-1TMZ组、H/R+500μmol·L^-1TMZ组。H/R组、H/R+50μmol·L^-1TMZ组、H/R+100μmol·L^-1TMZ组、H/R+500μmol·L^-1TMZ组细胞行缺氧12 h/复氧4 h处理模拟大鼠心肌缺血再灌注损伤;H/R+50μmol·L^-1TMZ组、H/R+100μmol·L^-1TMZ组、H/R+500μmol·L^-1TMZ组细胞在构建H/R模型前分别给予50、100、500μmol·L^-1TMZ共孵育1 h;正常对照组细胞常规培养;采用细胞计数试剂盒(CCK8)检测各组心肌细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测各组心肌细胞培养基中LDH活性,采用实时荧光定量聚合酶链反应法和Western blot法检测心肌细胞中Caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和Nod样受体蛋白3(NLRP3)mRNA及蛋白表达水平的变化。结果与正常对照组比较,H/R组心肌细胞活性降低,LDH活性显著升高,细胞中Caspase-1、NLRP3、ASC mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05);与H/R组比较,H/R+50μmol·L^-1TMZ组、H/R+100μmol·L^-1TMZ组、H/R+500μmol·L^-1TMZ组细胞活性显著增加,LDH活性显著下降,细胞中Caspase-1、NLRP3、ASC mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);与H/R+50μmol·L^-1TMZ组和H/R+500μmol·L^-1TMZ组比较,H/R+100μmol·L^-1TMZ组细胞活性增加,LDH活性下降,细胞中Caspase-1、NLRP3、ASC mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05);H/R+50μmol·L^-1TMZ组细胞活性、LDH活性、细胞中Caspase-1、NLRP3、ASC mRNA和蛋白表达水平与H/R+500μmol·L^-1TMZ组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论TMZ能通过抑制细胞焦亡对H/R的心肌细胞起保护作用;TMZ处理心肌细胞的最适浓度为100μmol·L^-1。 展开更多

关键词 曲美他嗪 缺氧/复氧 h9c2细胞 缺血再灌注损伤 细胞焦亡

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miR-342-5p减轻缺氧/复氧诱导H9c2细胞的损伤研究

11

作者 侯骉 黄伟民 +4 位作者 王晓明 韩志伟 员建平 邹龙 王亮 《中国体外循环杂志》 2022年第6期360-364,共5页

目的探讨miR-342-5p对缺氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的保护机制。方法应用H(24h)/R(2h)方式培养H9c2细胞,建立心肌细胞损伤模型,分为空白对照(Sham)组,H/R组,miR-342-5p转染H/R(miR-342-5p)组和对照质粒转染H/R(miR-NC)组。通过激... 目的探讨miR-342-5p对缺氧/复氧(H/R)引起的心肌细胞损伤的保护机制。方法应用H(24h)/R(2h)方式培养H9c2细胞,建立心肌细胞损伤模型,分为空白对照(Sham)组,H/R组,miR-342-5p转染H/R(miR-342-5p)组和对照质粒转染H/R(miR-NC)组。通过激光共聚焦检测转染后H9c2细胞荧光强度。实时定量聚合酶链反应检测H9c2细胞表达miR-342-5p。细胞增殖能力和凋亡率分别通过细胞计数试剂(CCK-8)和流式细胞术进行评估。使用蛋白免疫印迹法对凋亡相关蛋白表达水平进行评估。结果经转染后,miR-342-5p组的荧光强度和miR-342-5p表达率明显高于Sham组与miR-NC组。实验结果表明,miR-342-5p并不会对细胞增殖产生负面效应。miR-342-5p可以有效减少缺氧/复氧诱导H9c2细胞的凋亡。miR-342-5p组在H/R诱导下细胞凋亡率显著低于H/R组和miR-NC组(P<0.05),凋亡半胱氨酸蛋白-3(Caspase-3)和B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)蛋白表达水平明显低于H/R组和miR-NC组(P<0.05),B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达水平显著高于H/R组和miR-NC组(P<0.05)。结论miR-342-5可成功转染于H9c2细胞,并且miR-342-5p可通过调节凋亡相关蛋白的水平,减轻H/R诱导的细胞凋亡。 展开更多

关键词 miR-342-5p h9c2细胞 缺氧/复氧 凋亡 心肌损伤

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FGF21对H9C2心肌细胞H/R损伤及Angpt2、GLUT1表达的影响

12

作者 胡硕强 曹树军 +3 位作者 韩兰唐 邢成伟 谢刚 柳景华 《中国医药导报》 CAS 2017年第6期32-36,共5页

目的探讨FGF21对H9C2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤及Angpt2、GLUT1表达的影响。方法体外培养H9C2心肌细胞并分为H9C2组、H/R组、H/R+FGF21组,H9C2组即H9C2细胞阴性对照组,H/R组给予缺氧6 h/复氧24 h处理,H/R+FGF21组则在细胞复氧时给予FG... 目的探讨FGF21对H9C2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤及Angpt2、GLUT1表达的影响。方法体外培养H9C2心肌细胞并分为H9C2组、H/R组、H/R+FGF21组,H9C2组即H9C2细胞阴性对照组,H/R组给予缺氧6 h/复氧24 h处理,H/R+FGF21组则在细胞复氧时给予FGF21(1μg/m L)处理。利用FCM检测各组细胞凋亡率,QPCR及Western blot检测各组Angpt2、GLUT1、Caspase-3的表达水平。结果 H/R组细胞凋亡率显著高于H9C2组(P<0.01)。与H/R组比较,H/R+FGF21组细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。QPCR及Western blot检测发现,与H9C2组比较,H/R组Angpt2、Caspase-3表达显著增加,GLUT1表达显著降低(P<0.01);与H/R组比较,H/R+FGF21组Angpt2、Caspase-3表达显著降低(P<0.05或P<0.01),GLUT1表达显著增加(P<0.05)。结论外源性FGF21可显著减轻H/R损伤所致H9C2细胞凋亡,抑制炎症因子Angpt2表达和增加GLUT1表达可能是其内在机制。 展开更多

关键词 FGF21 h9c2细胞 缺氧/复氧损伤 Angpt2 凋亡

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上调抗增殖蛋白表达对TNF-α诱导的H9c2心肌细胞损伤的影响 被引量：9

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作者 张杰 刘亮 +5 位作者 周辉 郭桂喜 于强 银鹏飞 陈文强 苏兴 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2019年第5期728-732,共5页

目的:研究抗增殖蛋白(PHB)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:将心肌H9c2细胞分为4组,以不感染病毒且不用TNF-α处理的H9c2细胞作为对照组,以不感染病毒、仅用20μg/L的TNF-α细胞培养液培养的细胞作为TNF-α... 目的:研究抗增殖蛋白(PHB)在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的心肌细胞损伤中的作用。方法:将心肌H9c2细胞分为4组,以不感染病毒且不用TNF-α处理的H9c2细胞作为对照组,以不感染病毒、仅用20μg/L的TNF-α细胞培养液培养的细胞作为TNF-α组,以行Lv-PHB或Lv-NC感染、并用含有20μg/L的TNF-α细胞培养液培养24 h的细胞作为Lv-PHB+TNF-α组和Lv-NC+TNF-α组。采用MTT法测定4组细胞的增殖活性,比色法检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,双染法检测细胞凋亡,Western blot检测细胞中Cleaved Caspase-3、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、Cleaved Caspase-12蛋白表达水平。结果:Lv-PHB+TNF-α组细胞中PHB蛋白和mRNA表达水平高于TNF-α组(P<0.05)。与对照组比较,TNF-α组细胞增殖活性降低,LDH漏出率升高,凋亡率升高,细胞中Cleaved Caspase-3、CHOP、Cleaved Caspase-12蛋白水平也升高(P<0.05)。与TNF-α组比较,Lv-PHB+TNF-α组细胞增殖活性升高,LDH漏出率降低,凋亡率降低,细胞中Cleaved Caspase-3、CHOP、Cleaved Caspase-12蛋白水平降低(P<0.05)。结论:上调PHB表达可以减轻TNF-α诱导的心肌细胞损伤,提高心肌细胞活性、降低细胞凋亡水平。 展开更多

关键词 心肌细胞 抗增殖蛋白 TNF-Α 细胞损伤 h9c2细胞

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小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用

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作者 张晨阳 张琳 杨卫利 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第1期68-78,共11页

目的 探究小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞分成对照组、模型组、正常给药组、模型给药组,对照组用无血清DMEM培养,正常给药组于无血清DMEM中加药,模型组用含50 mmol·L^(-1)... 目的 探究小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞分成对照组、模型组、正常给药组、模型给药组,对照组用无血清DMEM培养,正常给药组于无血清DMEM中加药,模型组用含50 mmol·L^(-1)葡萄糖的无血清DMEM培养(造模剂量筛选实验设置25、50、100、200 mmol·L^(-1)),模型给药组于高糖无血清DMEM中加药,加药浓度分别为小檗碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),二氢小檗碱(DHB) 0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1),小檗红碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),非洲防己碱(COL)1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),巴马汀3.125、6.250、12.500、25.000μmol·L^(-1),药根碱6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),去亚甲基小檗碱(DEM)6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),处理48 h后,通过细胞增殖计数(CCK-8)法检测细胞存活率;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测经典代谢调控通路沉默调节蛋白1(Sirt1)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子1α(PGC1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)基因水平,葡萄糖代谢相关基因丙酮酸脱氢酶激酶4 (PDK4)、葡萄糖激酶(GCK)、己糖激酶(HK2)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达水平,线粒体动力学相关基因线粒体融合蛋白2 (Mfn2)、视神经萎缩蛋白1 (OPA1)、动力学相关蛋白1(Drp1)水平及细胞凋亡相关基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、 B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)水平;通过Westernblotting实验检测PGC1α、 Glut4、线粒体氧化磷酸化系统(OXPHOS)蛋白表达。结果 与高糖模型组相比,小檗碱2.5、5.0、10.0μmol·L^(-1),DHB 1、2μmol·L^(-1),COL 5、10μmol·L^(-1),巴马汀12.5μmol·L^(-1),药根碱25、50μmol·L^(-1),DEM 12.5、25.0μmol·L^(-1)处理48 h的细胞存活率均显著上升(P<0.05、0.01、0.001);小檗碱、DHB、药根碱、DEM处理的心肌细胞中PDK4水平显著 展开更多

关键词 小檗碱 体内代谢产物 高糖 h9c2细胞 心肌细胞损伤 糖代谢 线粒体 凋亡 二氢小檗碱 小檗红碱 非洲防己碱 巴马汀 药根碱 去亚甲基小檗碱

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吴茱萸次碱对阿霉素致大鼠胚胎心肌细胞H9c2损伤的保护作用 被引量：10

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作者 王丽 董雪 +1 位作者 许慧芳 杨佳伟 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2020年第6期621-625,共5页

目的研究吴茱萸次碱对阿霉素致大鼠胚胎心肌细胞H9c2损伤的保护作用及其机制。方法选用1、5、10、20、40μmol·L^-1吴茱萸次碱作用H9c2心肌细胞48 h,用MTT法检测吴茱萸次碱对H9c2细胞的作用。选用1、5、10μmol·L^-1吴茱萸次... 目的研究吴茱萸次碱对阿霉素致大鼠胚胎心肌细胞H9c2损伤的保护作用及其机制。方法选用1、5、10、20、40μmol·L^-1吴茱萸次碱作用H9c2心肌细胞48 h,用MTT法检测吴茱萸次碱对H9c2细胞的作用。选用1、5、10μmol·L^-1吴茱萸次碱或10μmol·L^-1右丙亚胺作为阳性对照预处理H9c2心肌细胞48 h,随后阿霉素(IC50=25μmol·L^-1)刺激4 h造成细胞损伤模型,采用MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)释放法、流式细胞术、荧光探针DCFH-DA染色检测吴茱萸次碱预处理对阿霉素损伤H9c2心肌细胞的活力、完整性、凋亡及活性氧水平的影响。结果10μmol·L^-1以下吴茱萸次碱对H9c2心肌细胞无增殖抑制作用,而20μmol·L^-1以上吴茱萸次碱对H9c2细胞表现出增殖抑制作用。与阿霉素损伤组比较,5、10μmol·L^-1吴茱萸次碱预处理H9c2心肌细胞48 h后,可显著改善阿霉素损伤后H9c2细胞的活力,减少LDH的释放和细胞凋亡。与阿霉素损伤组比较,1、5、10μmol·L^-1吴茱萸次碱预处理组活性氧的水平均有降低。结论吴茱萸次碱对阿霉素引起H9c2心肌细胞的损伤具有保护作用,其机制可能与减少活性氧的释放有关。 展开更多

关键词 吴茱萸次碱 阿霉素 右丙亚胺 h9c2心肌细胞 细胞损伤 MTT法 心脏保护 机制 细胞活力 凋亡 活性氧

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缺锌对心肌细胞的损伤作用及机制 被引量：5

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作者 龚莹 徐菁蔓 +1 位作者 习瑾昆 徐哲龙 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期677-683,共7页

本研究旨在观察缺锌对心肌细胞损伤作用并探讨其可能的机制。利用锌离子螯合剂四吡啶甲基乙二胺[N,N,N’,N’-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethylenediamine,TPEN]处理H9c2心肌细胞建立模拟缺锌模型,采用MTT法测定细胞存活率,用光学显微镜... 本研究旨在观察缺锌对心肌细胞损伤作用并探讨其可能的机制。利用锌离子螯合剂四吡啶甲基乙二胺[N,N,N’,N’-tetrakis(2-pyridylmethyl)ethylenediamine,TPEN]处理H9c2心肌细胞建立模拟缺锌模型,采用MTT法测定细胞存活率,用光学显微镜观察细胞形态学改变,用乳酸脱氢酶(lacate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测心肌细胞上清液LDH水平,使用JC-1染色法检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨm),采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平,用Western blot检测ERK蛋白的磷酸化水平。结果显示,TPEN引起心肌细胞形态改变,LDH释放量明显增高,细胞ΔΨm降低,细胞内ROS水平明显增加。同时,TPEN下调心肌细胞ERK蛋白磷酸化水平,降低细胞存活率;MEK/ERK信号通路抑制剂PD98059预处理可进一步抑制ERK蛋白磷酸化水平,进一步降低细胞存活率;而S-亚硝基-N-乙酰-DL-青霉胺(SNAP,可激活MEK/ERK信号通路)和MPG(ROS清除剂)均可逆转TPEN的上述抑制作用。以上结果表明,缺锌通过促进细胞内ROS生成而抑制ERK通路,引起心肌细胞损伤。 展开更多

关键词 缺锌 h9c2心肌细胞 细胞损伤 ERK信号通路

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五味子醇甲对去甲肾上腺素诱导心肌肥大损伤的cT-I、cT-T、ET-1调控作用的影响 被引量：4

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作者 杨敏 姜兴粲 +7 位作者 冯海鹏 王磊 张康 庞红红 张景艳 张凯 李建喜 王学智 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1553-1559,共7页

培养大鼠源H9C2心肌细胞进行试验,共分为6组,对照组(加入细胞培养液);模型组(10^-6mol/L去甲肾上腺干预48 h);卡托普利组与模型组同样处理后,加入卡托普利5 mg/L;五味子醇甲低、中、高剂量组与模型组同样处理后,分别加入五味子醇甲5,10,... 培养大鼠源H9C2心肌细胞进行试验,共分为6组,对照组(加入细胞培养液);模型组(10^-6mol/L去甲肾上腺干预48 h);卡托普利组与模型组同样处理后,加入卡托普利5 mg/L;五味子醇甲低、中、高剂量组与模型组同样处理后,分别加入五味子醇甲5,10,20 mg/L,作用48 h。通过观察HE染色细胞的形态变化,图像分析系统测定心肌细胞表面积,MTT法检测细胞存活率,Hoechst33342染色法检测心肌细胞的凋亡率,JC-1法测定线粒体膜电位,Western blot检测CT-I、CT-T、ET-1蛋白表达。结果显示,五味子醇甲可降低心肌细胞凋亡率和提高心肌细胞存活率,对心肌细胞的形态具有改善作用,并下调了CT-1、CT-T、ET-1蛋白表达。结果表明,五味子醇甲对去甲肾上腺素诱导的心肌细胞损伤具有保护作用,可能通过下调CT-I、CT-T、ET-1蛋白表达,降低炎性反应,减少对心肌细胞的损伤凋亡。 展开更多

关键词 大鼠源h9c2心肌细胞 五味子醇甲 去甲肾上腺素 心肌细胞肥大 心肌肌钙蛋白I和T 内皮素-1

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