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共表达H5N1流感病毒M1和HA基因的DNA疫苗与腺病毒载体疫苗的小鼠免疫评价(英文) 被引量：7
1
作者 郭建强 姚立红 +4 位作者 陈爱珺 刘晓宇 付金奇 徐鹏卫 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期876-883,共8页
为评价在小鼠体内表达流感病毒M1和HA基因诱导的免疫反应,制备共表达H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)全长基质蛋白1(M1)基因和血凝素(HA)基因的重组DNA疫苗pStar-M1/HA和重组腺病毒载体疫苗Ad-M1/HA,将其按初免-加强程序免疫BALB/c... 为评价在小鼠体内表达流感病毒M1和HA基因诱导的免疫反应,制备共表达H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)全长基质蛋白1(M1)基因和血凝素(HA)基因的重组DNA疫苗pStar-M1/HA和重组腺病毒载体疫苗Ad-M1/HA,将其按初免-加强程序免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔14 d。第1、3次用DNA疫苗,第2、4次用重组腺病毒载体疫苗,每次免疫前及末次免疫后14 d采集小鼠血清用于检测体液免疫应答,末次免疫后14 d采集小鼠脾淋巴细胞用于检测细胞免疫应答。血凝抑制(HI)实验和ELISA实验检测到免疫后小鼠血清中抗H5N1亚型流感病毒特异性IgG抗体。ELISPOT实验检测到免疫后小鼠针对M1和HA的特异性细胞免疫应答。共表达H5N1流感病毒M1和HA基因的DNA疫苗与腺病毒载体疫苗在小鼠体内的免疫学评价,为研究开发新型重组流感疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 h5n1亚型流感病毒 基质蛋白1 血凝素(hA) 共表达 联合免疫
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甲型H5N1流感病毒M2与HA双基因载体疫苗在小鼠体内的免疫学评价 被引量：1
2
作者 郭建强 姚立红 +4 位作者 陈爱珺 徐一 刘晓宇 舒跃龙 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期649-656,共8页
高致病性H5N1亚型禽流感病毒(AIV)严重威胁到人类健康,因此研制高效、安全的禽流感疫苗具有重要意义。以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,PCR扩增基质蛋白2(M2)和血凝素(HA)基因全长开放阅读框片段,构... 高致病性H5N1亚型禽流感病毒(AIV)严重威胁到人类健康,因此研制高效、安全的禽流感疫苗具有重要意义。以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,PCR扩增基质蛋白2(M2)和血凝素(HA)基因全长开放阅读框片段,构建共表达H5N1亚型AIV膜蛋白基因M2和HA的重组质粒pStar-M2/HA。此外,还通过同源重组以293细胞包装出表达M2基因的重组腺病毒Ad-M2以及表达HA基因的重组腺病毒Ad-HA。用间接免疫荧光(IFA)方法检测到了各载体上插入基因的表达。按初免-加强程序分别用重组质粒pStar-M2/HA和重组腺病毒Ad-HA+Ad-M2免疫BALB/c小鼠,共免疫4次,每次间隔14d。第1、3次用DNA疫苗,第2、4次用重组腺病毒载体疫苗,每次免疫前及末次免疫后14d采集血清用于检测体液免疫应答,末次免疫后14d采集脾淋巴细胞用于检测细胞免疫应答。血凝抑制(HI)实验检测到免疫后小鼠血清中的HI活性。ELISA实验检测到免疫后小鼠血清中抗H5N1亚型流感病毒表面蛋白的IgG抗体。ELISPOT实验检测到免疫后小鼠针对M2蛋白和HA蛋白的特异性细胞免疫应答。流感病毒M2与HA双基因共免疫的研究,为研究开发新型重组流感疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 h5n1亚型流感病毒 基质蛋白2 血凝素 联合免疫
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长沙市禽类养殖和交易场所H5N1亚型流感病毒传播的流行病学特征调查 被引量：2
3
作者 刘如春 宁华杰 +6 位作者 陈发明 张锡兴 张如胜 李叶兰 叶文 谢知 陈田木 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2017年第2期114-119,共6页
目的探讨活禽"养殖-交易-消费"的网络式消费模式,了解长沙市禽类养殖和交易场所H5N1亚型流感病毒传播的流行病学特征。方法本研究采用现场调查的方式,调查长沙市活禽养殖交易网络,养殖场、批发市场、零售市场活禽中禽流感病... 目的探讨活禽"养殖-交易-消费"的网络式消费模式,了解长沙市禽类养殖和交易场所H5N1亚型流感病毒传播的流行病学特征。方法本研究采用现场调查的方式,调查长沙市活禽养殖交易网络,养殖场、批发市场、零售市场活禽中禽流感病毒的感染情况。采用基因测序方法,开展病毒基因特征分析。结果长沙市平均每日生产活禽9万余只,批发市场每日进货和销售量为13万余只,零售市场每日进货和销售量为15万余只。活禽监测结果显示,养殖场未检出H5N1阳性,批发市场和零售市场病毒分离阳性率分别为7.57%和13.30%。环境监测结果显示,养殖场、批发市场和零售市场病毒核酸阳性率分别为8.73%、23.37%、34.32%,经logistic回归分析,批发市场传播禽流感的风险高于养殖场所、零售市场传播禽流感的风险高于批发市场,OR值为2.010(95%CI:1.602~2.522)。基因测序结果显示,活禽交易场所检出的病毒为高致病性禽流感H5N1病毒。结论长沙市活禽养殖和交易网络庞大而复杂,非常有利于禽流感病毒的传播,而且传播速度非常快,溯源难度大。长沙市活禽H5N1感染率高,需要建立长效的多部门联防联控机制。 展开更多
关键词 活禽 禽流感 h5n1亚型流感病毒 流行病学特征
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重组H5N1亚型流感病毒铁蛋白纳米粒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定 被引量：1
4
作者 陈璐儿 庄忻雨 +7 位作者 张桐 孙世宇 汪伟 曾博宇 于潼 鲁会军 田明尧 金宁一 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2021年第11期1244-1248,共5页
目的设计抗H5N1亚型流感病毒的通用型mRNA疫苗,并完成候选疫苗的构建、表达及鉴定。方法设计3组候选疫苗抗原基因,分别命名为Flu、Flu-ferritin和CD5-Flu-ferritin(Flu含H1/H3/H5/B型流感病毒血凝素颈部区保守表位,并串联甲型流感病毒M2... 目的设计抗H5N1亚型流感病毒的通用型mRNA疫苗,并完成候选疫苗的构建、表达及鉴定。方法设计3组候选疫苗抗原基因,分别命名为Flu、Flu-ferritin和CD5-Flu-ferritin(Flu含H1/H3/H5/B型流感病毒血凝素颈部区保守表位,并串联甲型流感病毒M2e基因中保守序列;Flu-Ferrin在Flu后串联铁蛋白,用以形成多聚体;CD5为分泌型信号肽,将多聚体外泌)。3组基因依次克隆至设计的mRNA疫苗骨架载体上,通过质粒鉴定、线性化处理、体外转录、纯化、及Cap 1加帽处理,分别制备mRNA并转染A549细胞,通过Western blot和IFA方法鉴定目的蛋白的表达。结果成功构建3组mRNA候选疫苗,并在A549细胞上表达抗原蛋白。结论证明了抗原设计的可行性,为开展动物试验奠定了基础。 展开更多
关键词 h5n1亚型流感病毒 mRnA疫苗 铁蛋白
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禽流感病毒A/duck/Fujian/31/2007(H5N1)株M1基质蛋白的原核表达与免疫原性鉴定 被引量：1
5
作者 布日额 吴金花 +3 位作者 孙立杰 李明刚 刘洋 薛晓阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期46-49,共4页
经生物学软件DNAStar分析,参照已发表的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)(H5N1)基因组序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约750bp的M1基因片段,将目的片段定向克隆至pET30a表达载体,经酶切及测序鉴定正确后转化BL21表达菌... 经生物学软件DNAStar分析,参照已发表的禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)(H5N1)基因组序列,设计合成1对特异性引物,RT-PCR扩增了长约750bp的M1基因片段,将目的片段定向克隆至pET30a表达载体,经酶切及测序鉴定正确后转化BL21表达菌,经IPTG诱导获得以包涵体形式表达的重组蛋白。将重组蛋白变性、纯化和复性后,BCA法测定纯化蛋白的浓度为0.656mg/mL,免疫印迹检测结果表明,纯化的重组蛋白具有良好的反应活性。将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,间接ELISA检测结果表明,重组蛋白可产生抗M1蛋白特异性抗体,具有良好的免疫原性。本研究成功表达了流感病毒H5N1的基质蛋白M1,且重组蛋白具有良好的免疫原性,为进一步研制H5N1亚型流感病毒诊断试剂及基因工程疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 h5n1亚型流感病毒 M1蛋白 原核表达 免疫原性
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H5N1亚型流感病毒分子生物学研究进展
6
作者 包多多 纪丰民 高博 《畜牧与饲料科学》 2006年第4期35-38,共4页
H5N1亚型流感病毒是目前在亚太地区蔓延的人禽流感病毒,在给家禽养殖业造成巨大经济损失的同时也威胁到了人类社会的公共健康卫生。笔者综述了近年来对H5N1流感病毒的分子生物学研究,以助于更好地预防禽流感病毒传播、预测未来大流行病... H5N1亚型流感病毒是目前在亚太地区蔓延的人禽流感病毒,在给家禽养殖业造成巨大经济损失的同时也威胁到了人类社会的公共健康卫生。笔者综述了近年来对H5N1流感病毒的分子生物学研究,以助于更好地预防禽流感病毒传播、预测未来大流行病毒的变异和走向。 展开更多
关键词 h5n1亚型流感病毒 遗传变异 毒力判定 疫苗研究
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深圳地区人和鸡群中H9N2亚型流感病毒病原学和血清流行病学调查 被引量：26
7
作者 程小雯 刘建军 +1 位作者 何建凡 单芙香 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期319-321,共3页
目的　了解甲型流感病毒H9N2亚型毒株在深圳地区鸡群和人群中的分布。方法　采用常规的鸡胚双腔法来分离病毒。抗体测定 ,采用红细胞凝集抑制 (HI)试验和中和试验测定法。结果　从深圳地区农贸市场鸡群中分离到 2 7株H9N2亚型流感病毒 ... 目的　了解甲型流感病毒H9N2亚型毒株在深圳地区鸡群和人群中的分布。方法　采用常规的鸡胚双腔法来分离病毒。抗体测定 ,采用红细胞凝集抑制 (HI)试验和中和试验测定法。结果　从深圳地区农贸市场鸡群中分离到 2 7株H9N2亚型流感病毒 ,但未能从人群中分离到H9N2病毒。约有 2 6 %人血清中检测到H9亚型毒株的抗体 ,(HI滴度≥ 2 0 ) ,同时还发现抗体阳性率和几何均数随人群年龄增长而增高 ,同时与职业有关。然而 ,在鸡群中H9毒株的抗体阳性率仅为 7%。结论　禽H9N2毒株不仅能感染人 ,而且在深圳地区人群和禽类中较为广泛的分布。人H9N2很大可能来源于鸡的H9N2毒株。 展开更多
关键词 深圳地区 h9n2亚型流感病毒 病原学 流行病学 病因学 流感 血清学 免疫学
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甘草主要成分抗H9N2亚型流感病毒作用研究 被引量：20
8
作者 方炳虎 邱灵才 +3 位作者 陈建新 陈良柱 曾振灵 陈杖榴 《广东农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期66-69,共4页
利用H9N2亚型流感病毒鼠肺适应株感染小鼠,以肺指数抑制率、肺组织病毒滴度、死亡保护率和生命延长率为评价指标,研究了甘草酸单铵盐、甘草次酸、甘草黄酮等甘草中3种主要成分和甘草粗提物对感染H9N2亚型流感病毒小鼠的防治效果。结果表... 利用H9N2亚型流感病毒鼠肺适应株感染小鼠,以肺指数抑制率、肺组织病毒滴度、死亡保护率和生命延长率为评价指标,研究了甘草酸单铵盐、甘草次酸、甘草黄酮等甘草中3种主要成分和甘草粗提物对感染H9N2亚型流感病毒小鼠的防治效果。结果表明,甘草粗提物及甘草酸单铵盐口服均能显著抑制H9N2亚型流感病毒鼠肺适应株引起的小鼠肺炎实变(P<0.01),甘草粗提物20 mg/kg组能明显延长流感病毒感染小鼠的生存时间。 展开更多
关键词 甘草 h9n2亚型流感病毒 小鼠 肺指数抑制率 肺组织病毒滴度 死亡保护率
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新型H7N9流感防控中的公共卫生问题与应对对策 被引量：11
9
作者 曹广文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期581-584,共4页
2013年3月,在中国境内报道了首例因感染新型甲型H7N9流感病毒而致死的病例。除了病毒基因重组、重要氨基酸位点变异等病毒进化生物因素外,还存在影响人感染新型甲型H7N9流感的社会因素。目前中国尚存在活禽养殖过程不规范、交易市场管... 2013年3月,在中国境内报道了首例因感染新型甲型H7N9流感病毒而致死的病例。除了病毒基因重组、重要氨基酸位点变异等病毒进化生物因素外,还存在影响人感染新型甲型H7N9流感的社会因素。目前中国尚存在活禽养殖过程不规范、交易市场管理混乱、从业人员卫生意识薄弱、居民自我防护措施不足等问题。这些因素通过增加人与生禽密切接触机会而促进流感病毒传播,增加人患禽流感的危险性。针对上述情况,在今后的流感防控工作中,应加强农、林、医等多部门联动机制的建设,进行高效的防控与监测;通过健康教育来提高居民的健康保护意识及风险意识。同时应该根据禽流感病毒进化监测数据加快科学研发流感疫苗进程。基于社会影响因素开展公共卫生预防应是今后降低人感染禽流感发生率的重要措施。 展开更多
关键词 流感 h7n9亚型流感病毒A型 社会因素 健康教育 传染病控制
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白及提取物体外抗流感病毒药效及其机理研究 被引量：10
10
作者 张兵 史亚 +2 位作者 周芳美 卢亦愚 程东庆 《中药材》 CAS 北大核心 2017年第12期2930-2935,共6页
目的:评价白及提取物体外抗流感病毒药效及研究其机理。方法:以病毒血凝效价及核酸量为指标,评价白及提取物在鸡胚模型的抗流感病毒作用。以流感病毒致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)及血凝抑制试验(HI)为指标,评价白及提取物抑... 目的:评价白及提取物体外抗流感病毒药效及研究其机理。方法:以病毒血凝效价及核酸量为指标,评价白及提取物在鸡胚模型的抗流感病毒作用。以流感病毒致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)及血凝抑制试验(HI)为指标,评价白及提取物抑制流感病毒的入侵作用及作用靶点。以CPE及病毒RNA合成量为指标,评价白及提取物对病毒复制及RNA合成的抑制作用。神经氨酸酶抑制(NAI)试验测定白及提取物对病毒NA活性的抑制作用。结果:鸡胚模型中,白及提取物各剂量组血凝滴度以及病毒核酸量与病毒对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。细胞实验中,白及水提物和醇提物均具有较好的抗病毒入侵效果,抑制率最高分别达到(87.04±7.81)%和(60.14±6.88)%;水提物通过干预MDCK细胞HA受体阻止病毒的入侵。白及水提物和白及醇提物均具有较好的抗流感病毒复制效果,与病毒对照组比较,白及提取物可显著降低病毒RNA的合成(P<0.01)。醇提物具有较好的神经氨酸酶抑制活性,NA-IC_(50)为16.0 mg/mL。结论:白及提取物通过抑制流感病毒与HA受体结合、干预病毒RNA合成及抑制神经氨酸酶活性发挥抗流感病毒作用。 展开更多
关键词 白及 甲型h3n2亚型流感病毒 血凝效价 细胞病变效应法
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H7N9禽流感的病毒特征及其对人类健康的潜在威胁 被引量：9
11
作者 张宏伟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期591-594,共4页
H7N9病毒是一种来自鸟类的禽流感病毒毒株基因重配的新型病毒。H7N9病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)在种间传播、病毒复制和致病性等方面起着重要作用。新型H7N9病毒最显著的特征之一是在家禽中无明显致病性,却能感染人类并引起较高... H7N9病毒是一种来自鸟类的禽流感病毒毒株基因重配的新型病毒。H7N9病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)在种间传播、病毒复制和致病性等方面起着重要作用。新型H7N9病毒最显著的特征之一是在家禽中无明显致病性,却能感染人类并引起较高的病死率。H7亚型禽流感病毒可有不同的NA亚型,具有较强的兼容性,已引起多次人类的感染事件。可以预见这种影响还将会持续并引起严重的公共卫生问题,必须对此加以高度关注。健全的防控网络的建立有助于最大限度地减少禽流感对人类健康和生命的危害。 展开更多
关键词 h7n9亚型流感病毒A型 病毒特征 公共卫生 传染病控制
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2017年深圳地区A/H3N2亚型流感病毒HA和NA基因的分子进化特征 被引量：7
12
作者 范颖 李雪云 +1 位作者 房师松 彭博 《中华疾病控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1114-1120,共7页
目的了解深圳市2017年上半年流行的甲型H3N2亚型流感病毒HA和NA基因的分子进化特征,为预测流感病毒流行和变异提供科学依据。方法利用DNAStar、MEGA 7.0等生物信息学软件对研究分离的40株H3N2流感病毒的HA和NA基因及其编码的氨基酸序列... 目的了解深圳市2017年上半年流行的甲型H3N2亚型流感病毒HA和NA基因的分子进化特征,为预测流感病毒流行和变异提供科学依据。方法利用DNAStar、MEGA 7.0等生物信息学软件对研究分离的40株H3N2流感病毒的HA和NA基因及其编码的氨基酸序列进行比对,构建分子进化树,分析基因特征和变异情况。结果深圳分离株的同源性均达到97.8%~100.0%,位于亚洲北美人源分支。与世界卫生组织(World Health Organization, WHO)推荐的疫苗株A/Switzerland/9715293/2013(H3N2)和A/Hong Kong/4801/2014(H3N2)相比,有较高的序列相似性;与当年疫苗株对比发现,HA发生6个抗原位点和2个受体结合位点的改变,NA出现第151位酶活性位点的改变;HA和NA的潜在N-糖基化位点在数量和位置上也发生变化。结论深圳市2017年上半年甲型H3N2亚型流感病毒在流行过程中尚未发生明显变异,目前推荐的疫苗株仍对深圳地区人群有一定保护作用,HA和NA多个氨基酸位点的变异提示仍需加强H3N2亚型流感病毒分子水平的动态监测。 展开更多
关键词 h3n2亚型流感病毒 hA基因 nA基因 分子进化 序列分析
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1996～2005年中国H3N2亚型人流感病毒神经氨酸酶基因特性分析 被引量：6
13
作者 黄维娟 董丽波 +10 位作者 张烨 温乐英 赵翔 黎满香 郭俊峰 蓝雨 李梓 王敏 董婕 郭元吉 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期345-349,共5页
测定了1996～2005年间在中国分离并保存的395株H3N2亚型人流感病毒神经氨酸酶（NA）基因序列，应用生物信息学工具进行了分析。结果表明：NA基因序列的进化树表现为一主要进化主干伴随多侧分支进化，同一年份的毒株可以分为几个分支存... 测定了1996～2005年间在中国分离并保存的395株H3N2亚型人流感病毒神经氨酸酶（NA）基因序列，应用生物信息学工具进行了分析。结果表明：NA基因序列的进化树表现为一主要进化主干伴随多侧分支进化，同一年份的毒株可以分为几个分支存在；疫苗株在NA基因序列进化树上存在明显的滞后现象；NA没有氨基酸的丢失与插入；抗原决定簇大部分位点保守且各抗原决定簇之间的变异情况各有特点，其中197～199位、431～434位和339～347位点的变异频率最高，而153位、328～336位、367～370位、400～403位抗原决定簇的氨基酸变异频率相对比较小；除了抗原决定簇外还有些氨基酸位点的变异频率很高，它们分别是18、23、30、93、143、208、216、221、249、265、267、307、385、437位氨基酸，其中143位和267位这两个位点的变异频率高于抗原决定簇位点，具体生物学意义还需要进一步研究；NA蛋白的酶活性中心位点高度保守；二硫键和糖基化位点保守。NA基因的这些特点为流感的预防、控制以及NA抑制剂药物的应用提供了一定的参考依据。 展开更多
关键词 h3n2亚型流感病毒 神经氨酸酶基因 变异
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深圳市2007年H3N2亚型流感病毒基因特性分析 被引量：6
14
作者 周丽 程小雯 +1 位作者 吕星 吴春利 《中国热带医学》 CAS 2008年第6期900-902,908,共4页
目的了解深圳市2007年H3N2亚型流感病毒流行情况及血凝素基因特性。方法用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离。收获病毒后提取病毒RNA,进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后送大连宝生物公司纯化... 目的了解深圳市2007年H3N2亚型流感病毒流行情况及血凝素基因特性。方法用狗肾传代细胞(MDCK)和鸡胚进行流感病毒分离。收获病毒后提取病毒RNA,进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定后送大连宝生物公司纯化及测序。测序结果用Simmonic软件和Mega3.1软件进行序列分析。结果H3N2亚型流感毒株为深圳市2007年流感流行的优势株,与2006年的深圳株比较未发生明显变异,但与2007年的疫苗株相比,有多个位点的氨基酸发生了替换,造成了其间的抗原性发生了一定的变化。结论深圳市2007年H3N2亚型流行株,并未形成一个新的变种。推测是由于与疫苗株之间的抗原性的变异导致了2007年深圳市H3N2亚型流感的流行。 展开更多
关键词 h3n2亚型流感病毒 变异 序列分析
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全球禽流感研究的发展态势:文献计量分析 被引量：5
15
作者 陈大明 毛开云 江洪波 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期607-611,共5页
目的从文献计量的角度研究全球禽流感研究的发展态势。方法检索ISI Web of Science的SCI-E数据库,利用TDA分析工具和文献引用树的分析方法对检索结果进行分析。结果得益于美国、中国等国家研究者的努力,自2005年以来全球禽流感研究快速... 目的从文献计量的角度研究全球禽流感研究的发展态势。方法检索ISI Web of Science的SCI-E数据库,利用TDA分析工具和文献引用树的分析方法对检索结果进行分析。结果得益于美国、中国等国家研究者的努力,自2005年以来全球禽流感研究快速增长。从研究质量上看,日本和荷兰在国际研究项目的支持下,表现十分抢眼。美国、日本和荷兰完成的H5N1病毒突变研究是近年来该领域的典型研究成果,但也引发了不少争议。结论全球关于H7N9等亚型的禽流感病毒研究有待进一步加强。 展开更多
关键词 禽流感 h5n1亚型流感病毒A型 h7n9亚型流感病毒A型 文献计量学
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众生丸对H1N1流感小鼠的保护及免疫调节作用研究 被引量：5
16
作者 戴卫平 李耿 +3 位作者 申小花 吴依娜 张奉学 赖小平 《环球中医药》 CAS 2015年第4期395-399,共5页
目的研究众生丸对H1N1流感病毒感染小鼠的保护及免疫调节作用。方法以奥司他韦为阳性药,H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠复制小鼠病毒性肺炎模型。比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺组织形态学、死亡保护率、小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子干... 目的研究众生丸对H1N1流感病毒感染小鼠的保护及免疫调节作用。方法以奥司他韦为阳性药,H1N1流感病毒滴鼻感染小鼠复制小鼠病毒性肺炎模型。比较小鼠病毒性肺炎模型的肺指数、肺组织形态学、死亡保护率、小鼠T淋巴细胞亚群和细胞因子干扰素-γ(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的数量变化。结果与病毒对照组比较,众生丸可显著降低H1N1感染小鼠的肺指数,提高存活率,调节T细胞亚群含量,促进血清中IFN-γ和IL-10产生。结论众生丸可通过减轻炎症,调节免疫而减轻H1N1亚型流感病毒所致小鼠肺部病变,提高染毒小鼠存活率。 展开更多
关键词 众生丸 h1n1亚型流感病毒 炎症 免疫 细胞因子
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重组流感病毒H1N1活菌疫苗的构建及其免疫效果的初步研究 被引量：4
17
作者 姚碧涛 李鹏 +3 位作者 焦新安 周丽丽 刘秀梵 王希良 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期686-689,共4页
目的获得两种流感病毒重组沙门氏菌X4550(asd-pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-NA)活菌疫苗,并对其免疫效果进行初步的研究。方法将本室已构建好的重组质粒pVAX1-HA及pVAX1-NA双酶切后得到HA、NA基因,将其克隆入asd-pVAX1构建重组的表达质... 目的获得两种流感病毒重组沙门氏菌X4550(asd-pVAX1-HA)和X4550(asd-pVAX1-NA)活菌疫苗,并对其免疫效果进行初步的研究。方法将本室已构建好的重组质粒pVAX1-HA及pVAX1-NA双酶切后得到HA、NA基因,将其克隆入asd-pVAX1构建重组的表达质粒。将重组质粒转染COS-7细胞,用免疫细胞化学方法鉴定重组质粒体外的表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,以2×109CFU/只的剂量三次口服免疫Balb/c小鼠。结果asd-pVAX1-HA和asd-pVAX1-NA均能在COS-7细胞中表达;免疫小鼠不仅可以检测到HA、NA特异性的血清IgG及IgA抗体;刺激黏膜免疫反应,产生sIgA抗体,而且能抵抗40LD50同型病毒滴鼻的攻击。结论H1N1流感病毒DNA疫苗的减毒沙门氏菌运送系统在体内能够成功释放所携带的质粒,并且能够刺激机体产生保护性免疫应答。 展开更多
关键词 减毒沙门氏菌 DnA疫苗 h1n1亚型流感病毒 免疫保护性
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2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒抗原漂移分析 被引量：4
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作者 方斌 余晓 +2 位作者 李翔 叶国军 刘琳琳 《疾病监测》 CAS 2017年第5期387-393,共7页
目的了解2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒流行特征、基因进化和抗原漂移情况。方法通过2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒核酸检测阳性率划分流行高峰,分析各流行高峰病毒的阳性数、分离数和进化簇分布,结合抗原决定簇氨基酸突变位... 目的了解2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒流行特征、基因进化和抗原漂移情况。方法通过2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒核酸检测阳性率划分流行高峰,分析各流行高峰病毒的阳性数、分离数和进化簇分布,结合抗原决定簇氨基酸突变位点和三维建模数据,分析3C.2a簇病毒抗原决定簇氨基酸突变位点变化情况。结果 2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒存在8个流行高峰,流行高峰会受到其他型别流感流行的影响,3C.2a簇病毒主要在第Ⅶ流行高峰后流行,与3C.3a簇病毒在HA蛋白3处抗原决定簇上存在7处不同氨基酸突变位点,3C.2a簇病毒159Y-160T位点和3C.3a簇病毒159S-160K位点在三维模拟结构图中差异明显。结论 2010-2015年湖北省H3N2亚型流感病毒进化簇不断进化,加强对近期3C.2a簇病毒的进化学监测和抗原漂移分析,有助于提高湖北省流感病原学和流行病学监测水平和能力。 展开更多
关键词 h3n2亚型流感病毒 3C.2a簇病毒 流行特征 抗原漂移 进化
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广西野鸟H9N2亚型流感病毒的分离与鉴定 被引量：3
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作者 黄胜斌 蒋家霞 +4 位作者 何奇松 付薇 孙翔翔 马琳 熊毅 《南方农业学报》 CAS CSCD 2011年第5期539-543,共5页
【目的】探讨H9N2亚型流感病毒在野鸟中的存在与传播,为广西流感疫情动态监测和防控及人流感预防监测提供重要依据。【方法】采集广西野鸟肺脏组织,将病料接种于9~11日龄SPF鸡胚尿囊腔进行分离培养,血清学试验鉴定HA和NA亚型,并克隆扩增... 【目的】探讨H9N2亚型流感病毒在野鸟中的存在与传播,为广西流感疫情动态监测和防控及人流感预防监测提供重要依据。【方法】采集广西野鸟肺脏组织,将病料接种于9~11日龄SPF鸡胚尿囊腔进行分离培养,血清学试验鉴定HA和NA亚型,并克隆扩增其HA和NA基因。【结果】该分离株能被H9亚型阳性血清抑制,神经氨酸酶抑制（NI）试验结果将其鉴定为N2亚型,判断该病毒属于H9N2亚型流感病毒,命名为A/wildbird/Guangxi/H2/07,对HA和NA基因进行序列分析,发现与流感病毒H9亚型和N2亚型同源性最高,分别达到82.4%~99.0%和83.1%~99.9%。【结论】H9N2亚型流感病毒已在广西野鸟中存在,该结论为广西流感疫情动态监测和防控提供了重要依据。 展开更多
关键词 野鸟 h9n2亚型流感病毒 分离 鉴定 hA基因 nA基因 广西
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转谷氨酰胺酶2抑制H1亚型流感病毒在MDCK细胞中的增殖 被引量：1
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作者 郭寿清 廖月姣 +8 位作者 仇真毓 刘耿 王家敏 杨迪 张家友 乔自林 马忠仁 李倬 刘振斌 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1124-1137,共14页
组织转谷酰胺酶(transglutaminase 2,TGM2)是一种普遍存在的多功能蛋白,与不同细胞的粘附和肿瘤形成有关。有证据表明,TGM2参与了宿主细胞与病毒间的相互作用,但是对于流感病毒在细胞内增殖的影响还未有报道。为了探究MDCK细胞中TGM2对H... 组织转谷酰胺酶(transglutaminase 2,TGM2)是一种普遍存在的多功能蛋白,与不同细胞的粘附和肿瘤形成有关。有证据表明,TGM2参与了宿主细胞与病毒间的相互作用,但是对于流感病毒在细胞内增殖的影响还未有报道。为了探究MDCK细胞中TGM2对H1N1亚型流感病毒增殖的影响,本研究构建了TGM2过表达和敲除的MDCK稳定细胞系,感染H1N1亚型流感病毒48 h后检测病毒NP和NS1蛋白mRNA和蛋白表达水平的变化,测定病毒滴度。结果显示,过表达TGM2能够有效抑制H1N1亚型流感病毒的NP、NS1基因的表达,而敲除TGM2可上调病毒NP、NS1基因的表达,其中NP蛋白的蛋白表达情况与mRNA水平一致。病毒增殖曲线结果显示,TGM2过表达后H1N1亚型流感病毒滴度显著降低,而敲除TGM2后结果相反,48h时病毒滴度在敲除细胞中达到高峰,进一步证明TGM2在MDCK细胞中参与对H1N1亚型流感病毒增殖的抑制。通过对流感病毒应答信号途径下游基因的表达分析发现,TGM2可能通过促进激活JAK-STAT分子途径和抑制RIG-1信号途径,抑制H1N1亚型流感病毒增殖。以上发现对于揭示宿主细胞与病毒互作机制以及建立高产的流感疫苗生产基因工程细胞系具有重要意义。 展开更多
关键词 TGM2 MDCK细胞 h1n1亚型流感病毒
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