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HDAC1和HDAC2对小鼠卵母细胞组蛋白去乙酰化的作用
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作者 孙小凡 雷础峤 +1 位作者 刘红林 张雪 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第1期5-9,共5页
旨在探索组蛋白去乙酰化酶1 (histone deacetylase 1,HDAC1)和组蛋白去乙酰化酶2 (histone deacetylase 2,HDAC2)在卵母细胞减数分裂期组蛋白去乙酰化过程中的作用。首先利用免疫荧光技术,检测HDAC1与HDAC2在体细胞及卵母细胞不同时期... 旨在探索组蛋白去乙酰化酶1 (histone deacetylase 1,HDAC1)和组蛋白去乙酰化酶2 (histone deacetylase 2,HDAC2)在卵母细胞减数分裂期组蛋白去乙酰化过程中的作用。首先利用免疫荧光技术,检测HDAC1与HDAC2在体细胞及卵母细胞不同时期的表达分布,然后分别利用抑制剂抑制HDAC1和HDAC2的活性,观察其对卵母细胞组蛋白去乙酰化的作用。结果:HDAC1与HDAC2分布在间期的体细胞和卵母细胞的细胞核中,但分裂期细胞中只有卵母细胞染色体上存在HDAC1的表达,抑制酶活性后该HDAC1的表达也消失;在小鼠卵母细胞第一次减数分裂双线期(germinal vesicle stage,GV期)卵母细胞体外成熟液中添加TSA (trichostatin A,HDACs广谱抑制剂)、Pyroxamide (HDAC1特异性抑制剂)、Santacruzamate A (HDAC2特异性抑制剂),发现Pyroxamide和Santacruzamate A均能显著抑制卵母细胞减数分裂过程中组蛋白乙酰化修饰的去除,但未能达到广谱抑制剂的抑制效果。研究表明,小鼠卵母细胞在减数分裂组蛋白去乙酰化过程中,HDAC1和HDAC2均具有组蛋白去乙酰化的作用,且与HDAC2相比,HDAC1发挥着主要的去乙酰化作用,这为组蛋白去乙酰化作用机理提供理论参考。 展开更多
关键词 hDac1 hDac2 减数分裂 去乙酰化
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ACSS2通过H4K12ac靶向调控SH-SY5Y细胞中mTOR的表达机制
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作者 陈大广 张捷 +2 位作者 陈庆亭 李耿华 颜振艺 《热带医学杂志》 CAS 2024年第3期313-317,共5页
目的 探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)通过组蛋白H4赖氨酸12乙酰化(H4K12ac)靶向调控SH-SY5Y细胞中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达机制。方法 构建ACSS2慢病毒载体,感染SH-SY5Y细胞系,建立ACSS2低表达(ACSS2低表达组)、ACSS2过表达(ACSS2过表... 目的 探讨乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)通过组蛋白H4赖氨酸12乙酰化(H4K12ac)靶向调控SH-SY5Y细胞中雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达机制。方法 构建ACSS2慢病毒载体,感染SH-SY5Y细胞系,建立ACSS2低表达(ACSS2低表达组)、ACSS2过表达(ACSS2过表达组)细胞系和对照细胞系(NC组);采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏立诺他(SAHA)处理上述细胞系并分别计为ACSS2低表达+SAHA组、ACSS2过表达+SAHA组、NC+SAHA组。采用Western blot法检测各组蛋白相对表达水平。结果 ACSS2过表达组ACSS2、mTOR的蛋白相对表达水平和H4K12ac修饰水平均显著高于ACSS2低表达组和NC组,差异均有统计学意义(t=15.83、26.38、18.56,26.25、19.52、17.21,P均<0.05);且NC组ACSS2、mTOR的蛋白相对表达水平和H4K12ac修饰水平均显著高于ACSS2低表达组,差异均有统计学意义(t=6.83、7.52、13.21,P均<0.05)。转染SAHA后,ACSS2低表达+SAHA组、ACSS2过表达+SAHA组和NC+SAHA组ACSS2表达均出现显著表达变化,两两组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05);ACSS2过表达+SAHA组H4K12ac修饰水平和mTOR的蛋白相对表达水平显著高于ACSS2低表达+SAHA组和NC+SAHA组,差异均有统计学意义(t=21.56、11.56,10.21、9.75,P均<0.05),NC+SAHA组H4K12ac修饰水平和mTOR的蛋白相对表达水平高于ACSS2低表达+SAHA组,差异均有统计学意义(t=15.63、12.31,P均<0.05)。结论 ACSS2通过调节H4K12ac修饰水平靶向介导mTOR的表达。 展开更多
关键词 acSS2 h4k12ac修饰 Sh-SY5Y MTOR
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