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H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析
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作者 沈开元 代小丽 +3 位作者 杨婷 佘春 石德顺 李湘萍 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1-6,共6页
该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和... 该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用. 展开更多
关键词 h3k4甲基化 h3k9甲基化 卵母细胞 体细胞核移植胚胎
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外阴鳞状细胞癌组织中VEGF和Bcl-2基因组蛋白H3K4三甲基化水平的表达
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作者 文京华 李伯埙 +3 位作者 黄小平 赵文 江卫红 朱彦菲 《中国麻风皮肤病杂志》 2012年第9期620-622,共3页
目的:检测外阴鳞状细胞癌患者癌组织血管内皮生长因子(VEGF)和Bcl-2基因组蛋白H3K4三甲基化(me3)甲基状态及其mRNA的表达。方法:采用染色质免疫共沉淀-实时定量聚合酶链反应(ChIP-qPCR)技术对15例外阴鳞状细胞癌患者癌组织和毗邻正常组... 目的:检测外阴鳞状细胞癌患者癌组织血管内皮生长因子(VEGF)和Bcl-2基因组蛋白H3K4三甲基化(me3)甲基状态及其mRNA的表达。方法:采用染色质免疫共沉淀-实时定量聚合酶链反应(ChIP-qPCR)技术对15例外阴鳞状细胞癌患者癌组织和毗邻正常组织VEGF和Bcl-2基因组蛋白H3K4me3甲基化状态进行定量分析;随后采用定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测基因的mRNA表达。结果:外阴鳞状细胞癌组织中VEGF和Bcl-2基因呈现组蛋白H3K4me3水平增高(P<0.05);VEGF和Bcl-2基因的mRNA表达增加。结论:外阴鳞状细胞癌组织VEGF和Bcl-2基因可能参与外阴鳞状细胞癌的发生,成为外阴鳞状细胞癌新的治疗靶点。 展开更多
关键词 外阴鳞状细胞癌 染色质免疫共沉淀 h3k4甲基化 VEGF BCL-2
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慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中蛋白精氨酸甲基转移酶6的表达及意义 被引量:3
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作者 梁彦超 陈哲 +1 位作者 王倩 陈燕 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS 2014年第4期334-337,共4页
目的观察慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者肺组织中蛋白精氨酸甲基转移酶6(PRMT6)的mRNA及组蛋白H3R2位点非对称双甲基化(H3R2me2a)和H3K4位点三甲基化(H3K4me3)信号水平情况,探讨PRMT6是否通过调控组蛋白甲基化而参与慢阻肺的发病。... 目的观察慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者肺组织中蛋白精氨酸甲基转移酶6(PRMT6)的mRNA及组蛋白H3R2位点非对称双甲基化(H3R2me2a)和H3K4位点三甲基化(H3K4me3)信号水平情况,探讨PRMT6是否通过调控组蛋白甲基化而参与慢阻肺的发病。方法选取胸外科因肺癌行肺叶切除术的患者31例,据术前肺功能、吸烟史及慢阻肺诊断标准将患者分成对照组(非吸烟非慢阻肺,n=10)、吸烟组(吸烟非慢阻肺,n=10)和吸烟慢阻肺组(n=11)。选取远离原发病灶5 cm以上、肉眼观察无肺癌浸润的外周肺组织,采用QRT-PCR检测PRMT6、白细胞介素13(IL-13)、环氧酶2(COX-2)的mRNA表达,同时Western-Blotting检测PRMT6蛋白表达及组蛋白H3R2me2a和H3K4me3信号水平。结果吸烟慢阻肺组FEV1%pred、FEV1/FVC及PEF%pred较对照组和吸烟组明显降低(P<0.05)。与对照组比较,吸烟组及吸烟慢阻肺组PRMT6 mRNA表达、PRMT6蛋白表达及组蛋白H3R2me2a信号水平均显著降低(P<0.01),而IL-13、COX-2的mRNA表达及H3K4me3信号水平均显著增高(P<0.01)。结论慢阻肺患者肺组织中PRMT6表达下降,可能通过下调组蛋白H3R2me2a信号水平而上调组蛋白H3K4me3的信号水平参与慢阻肺的形成。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 蛋白精氨酸甲基转移酶6 组蛋白h3R2位点非对称双甲 基化 h3k4位点甲基化
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