Background and Objective Our previous studies have proved that nm23-H1 gene was a tumor metastatic suppressive gene, tumor metastasis phenotype of human lung cancer could
该文研究了在诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化过程中miR-155的作用及其是否是通过调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against de-capentaplegic)信号通路发挥作用。在诱导C3H10T1/2细胞成骨分...该文研究了在诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化过程中miR-155的作用及其是否是通过调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against de-capentaplegic)信号通路发挥作用。在诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,采用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测miR-155水平的变化。转染miR-155模拟剂(miR-155)至C3H10T1/2细胞后,miR-155水平显著增高(P<0.001),而转染其抑制剂(anti-miR-155)至C3H10T1/2细胞后,miR-155水平显著降低(P<0.001)。转染后成骨诱导培养基诱导成骨7 d,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及染色结果显示,miR-155能显著降低C3H10T1/2细胞成骨分化过程中的ALP活性(P<0.01)、减弱ALP染色,而anti-miR-155则能逆转其作用。成骨诱导14 d茜素红S染色结果显示,miR-155组钙盐结节较对照组少,下调miR-155的水平后,钙盐沉积结节增多。q RT-RCR检测结果显示,miR-155显著降低BMP9 m RNA水平(P<0.001),且miR-155组成骨基因Runx2和ALP表达均显著低于对照NC组(P<0.05、P<0.01)。Western blot检测BMP9、Runx2和p-Smad1/5/8蛋白质水平,结果显示,miR-155组蛋白质水平均显著降低(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。该研究结果提示,miR-155对C3H10T1/2细胞成骨分化的抑制作用可能是通过抑制BMP9/Smad信号通路发挥作用的。展开更多
目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western...目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western Blot技术检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA以及蛋白表达的影响。结果:60、80、100μmol/L小豆蔻明能够显著抑制C3H10T1/2细胞存活率(P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够抑制C3H10T1/2细胞脂滴的形成,从而抑制成脂分化;5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低细胞中甘油三酯的含量(P<0.05,P<0.01);10、30μmol/L小豆蔻明能够显著下调PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA的表达(P<0.05,P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低成脂关键转录因子PPARγ、C/EBPα和成脂分化标志因子FABP4蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:小豆蔻明通过下调PPARγ、C/EBPα、FABP4 m RNA以及蛋白表达抑制细胞成脂分化并降低胞内甘油三酯含量。展开更多
基金supported by the grants from the Key Project of National Natural Science Foundation of China (No.30430300 , to Qinghua ZHOU)Key Projects of Tian-jin Sci-Tech Support Program (No. 07SYSYSF05000 and No. 06YFSZSF05300, to Qinghua ZHOU)
文摘Background and Objective Our previous studies have proved that nm23-H1 gene was a tumor metastatic suppressive gene, tumor metastasis phenotype of human lung cancer could
文摘目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western Blot技术检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA以及蛋白表达的影响。结果:60、80、100μmol/L小豆蔻明能够显著抑制C3H10T1/2细胞存活率(P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够抑制C3H10T1/2细胞脂滴的形成,从而抑制成脂分化;5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低细胞中甘油三酯的含量(P<0.05,P<0.01);10、30μmol/L小豆蔻明能够显著下调PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA的表达(P<0.05,P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低成脂关键转录因子PPARγ、C/EBPα和成脂分化标志因子FABP4蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:小豆蔻明通过下调PPARγ、C/EBPα、FABP4 m RNA以及蛋白表达抑制细胞成脂分化并降低胞内甘油三酯含量。