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H-2K^b-OVA复合物的构建及体内特异性CTL的诱导
1
作者
钱丽
李锋
钱关祥
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
2003年第3期158-163,共6页
在扩增了H 2Kb 基因后 ,将可生物素化的序列连接到其胞外区末端 ,构建成可溶性重组分子 ,进行原核表达。通过定点突变获得了高表达的融合蛋白 ,再利用 6×Histidinetag进行蛋白纯化 ,在对H 2Kb分子高亲和力的OVA2 57 2 64肽及 β2 ...
在扩增了H 2Kb 基因后 ,将可生物素化的序列连接到其胞外区末端 ,构建成可溶性重组分子 ,进行原核表达。通过定点突变获得了高表达的融合蛋白 ,再利用 6×Histidinetag进行蛋白纯化 ,在对H 2Kb分子高亲和力的OVA2 57 2 64肽及 β2 m蛋白存在下 ,三者体外折叠成具有完整构象的H 2Kb OVA类分子复合物。用其作为免疫原诱导特异性CTL ,并构建H 2Kb OVA四聚体检测特异性CTL。应用H 2Kb OVA四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致 ,同时对胞外IFN γ进行了检测。说明H 2Kb OVA复合物可有效诱导体内特异性CTL反应 ,在体外构建MHC I类分子四聚体 。
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关键词
四聚体
^
h
-2
k
^
b
-
ova
复合物
表达
纯化
特异性CTL
原文传递
题名
H-2K^b-OVA复合物的构建及体内特异性CTL的诱导
1
作者
钱丽
李锋
钱关祥
机构
上海第二医科大学分子生物学实验中心
出处
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
2003年第3期158-163,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No 3 980 0 13 2
No 3 0 1710 48)
文摘
在扩增了H 2Kb 基因后 ,将可生物素化的序列连接到其胞外区末端 ,构建成可溶性重组分子 ,进行原核表达。通过定点突变获得了高表达的融合蛋白 ,再利用 6×Histidinetag进行蛋白纯化 ,在对H 2Kb分子高亲和力的OVA2 57 2 64肽及 β2 m蛋白存在下 ,三者体外折叠成具有完整构象的H 2Kb OVA类分子复合物。用其作为免疫原诱导特异性CTL ,并构建H 2Kb OVA四聚体检测特异性CTL。应用H 2Kb OVA四聚体对特异性CTL检测结果与经典的细胞毒试验一致 ,同时对胞外IFN γ进行了检测。说明H 2Kb OVA复合物可有效诱导体内特异性CTL反应 ,在体外构建MHC I类分子四聚体 。
关键词
四聚体
^
h
-2
k
^
b
-
ova
复合物
表达
纯化
特异性CTL
Keywords
tetramer
gene expression
refolding
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
H-2K^b-OVA复合物的构建及体内特异性CTL的诱导
钱丽
李锋
钱关祥
《上海免疫学杂志》
CSCD
北大核心
2003
0
原文传递
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