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农杆菌介导法获得小麦转基因植株的研究 被引量:37
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作者 黄益洪 周淼平 +3 位作者 叶兴国 唐克轩 程红梅 陆维忠 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期510-515,共6页
从 gus基因的瞬时表达入手 ,利用不同种类的农杆菌菌株感染小麦不同基因型和同一基因型的不同外植体 ,研究了农杆菌菌系、小麦基因型和外植体对转化效率的影响。从中优选出了对小麦愈伤组织感染力比较强的农杆菌菌系 AGL 0和 MOG10 1,... 从 gus基因的瞬时表达入手 ,利用不同种类的农杆菌菌株感染小麦不同基因型和同一基因型的不同外植体 ,研究了农杆菌菌系、小麦基因型和外植体对转化效率的影响。从中优选出了对小麦愈伤组织感染力比较强的农杆菌菌系 AGL 0和 MOG10 1,以及高敏感受体基因型 Alondra和扬麦 15 8等。实验结果还表明 ,预培养 10~ 15天的幼胚愈伤组织具有较高的瞬时表达率和再生能力 ,是较好的转化受体。对愈伤组织与农杆菌共培养后的筛选程序进行了摸索 ,获得了 70多个 PPT(Phosphinothricin)抗性植株 ,经 PCR等分子检测分析 ,证明部分植株实现了外源基因的成功转化 ,为进一步的研究工作打下了基础。 展开更多
关键词 农杆菌介导法 小麦 转基因植株 基因转化 gus 瞬时表达 PPT
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根癌农杆菌介导的苜蓿体胚转化 被引量:33
2
作者 黎茵 黄霞 黄学林 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2003年第2期109-113,共5页
以苜蓿体细胞胚胎作为根癌农杆菌介导转化的受体 ,通过对GUS基因瞬时表达率的分析 ,研究该转化体系的最佳实验参数。实验结果显示 ,负压处理 10min和共培养 5d时表达率最高 (可达 17.4%)。以这一转化方法分别对带有 3种不同启动子的表... 以苜蓿体细胞胚胎作为根癌农杆菌介导转化的受体 ,通过对GUS基因瞬时表达率的分析 ,研究该转化体系的最佳实验参数。实验结果显示 ,负压处理 10min和共培养 5d时表达率最高 (可达 17.4%)。以这一转化方法分别对带有 3种不同启动子的表达载体进行比较 ,发现由CaMV35S启动子驱动的GUS基因的瞬时表达率可达 82 .7%,Ubi1启动子驱动的可达5 7.8%,而Act1启动子驱动的则未见表达。 展开更多
关键词 转化 苜蓿 体胚 gus
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高效马铃薯遗传转化体系的建立及甜蛋白基因的导入 被引量:30
3
作者 杨美珠 潘乃穟 陈章良 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1992年第1期31-36,共6页
本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄... 本研究选用了三个马铃薯(Solanum Iuberosum L.)栽培品种“85T-14-3”、“86-2”及“Favorita”的块茎、微型薯和试管薯为起始材料,应用根癌农杆菌 Ti 质粒系统成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。其中试管薯薄片的转化速度最快,经根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)共培养后,薄片在100mg/L 卡那霉素的分化培养上,2—3周就可产生出抗性小芽,这些小芽进一步仲长后可在50—100mg/L 卡那霉素的无激素MS 培养基上生根。从共培养到转化植株的获得只需6—7周。微型薯和试管薯的转化频率较高,最高可达67.5%。大多数抗性植株均能检测到胭脂碱合成酶或 GUS 基因的表达。把带有甜蛋白基因和胭脂碱合成酶标记基因的Ti质粒导入马铃薯,获得大量转化植株。叶片抗性检测和 nopaline 检测可推断外源甜蛋白基因已进入马铃薯基因组。 展开更多
关键词 马铃薯 遗传转化 甜蛋白基因
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兰花圆球茎基因枪转化后的GUS基因表达 被引量:13
4
作者 陈志俊 明小天 +2 位作者 刘荣维 李毅 陈章良 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第4期94-96,共3页
利用花椰菜花叶病毒 (CaMV ) 35S启动子引导的葡糖醛酸糖苷酶 (β glu curonidase ,GUS)基因检测基因枪法转化兰花圆球茎组织的瞬间表达效率。发现在基因枪轰击时在DNA 金粉悬液中加入 0 1mol/L的生长激素NAA ,轰击前预培养时使用0 1m... 利用花椰菜花叶病毒 (CaMV ) 35S启动子引导的葡糖醛酸糖苷酶 (β glu curonidase ,GUS)基因检测基因枪法转化兰花圆球茎组织的瞬间表达效率。发现在基因枪轰击时在DNA 金粉悬液中加入 0 1mol/L的生长激素NAA ,轰击前预培养时使用0 1mol/L甘露醇处理 ,每个培养皿轰击两次和轰击压力为 110 0 psi下 。 展开更多
关键词 gus 兰花圆球式 基因枪 瞬间表达
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莴苣高效瞬时表达体系的建立 被引量:18
5
作者 李静 陈敏 +2 位作者 刘现伟 沈法富 王鹏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期405-407,共3页
以GUS基因作为报告基因,利用农杆菌真空渗透法,采取正交试验设计对莴苣(LactucasativaL.sp)的瞬时表达条件进行研究,建立了高表达水平的瞬时转化体系(乙酰丁香酮200μmol/L、菌液密度OD600值0.8、真空处理30min、共培养6d)。应用结果表... 以GUS基因作为报告基因,利用农杆菌真空渗透法,采取正交试验设计对莴苣(LactucasativaL.sp)的瞬时表达条件进行研究,建立了高表达水平的瞬时转化体系(乙酰丁香酮200μmol/L、菌液密度OD600值0.8、真空处理30min、共培养6d)。应用结果表明:优势组合的表达水平比对照的表达水平提高16.3倍。 展开更多
关键词 莴苣 农杆菌 真空渗透 gus 瞬时表达
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酚类化合物促进含双元载体农杆菌对胡萝卜悬浮细胞的转化和植株再生 被引量:14
6
作者 刘明志 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1996年第3期203-208,共6页
含双元载体的非致瘤根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens) LBA4404经乙酰丁香酮和复合酚类化合物活化预处理后,感染胡萝卜(Daucus carota)悬浮培养细胞,在含50 m g/LKm ... 含双元载体的非致瘤根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens) LBA4404经乙酰丁香酮和复合酚类化合物活化预处理后,感染胡萝卜(Daucus carota)悬浮培养细胞,在含50 m g/LKm 的选择培养基上筛选Km r 克隆。实验表明:酚类化合物活化预处理组的转化率分别为0.24% 和0.17% ,而未经酚类化合物活化处理组的转化率仅为0.02% 。Km r 克隆在含50 m g/L Km 的无激素培养基上通过体细胞胚胎发生形成完整植株。组织化学分析表明:报告基因GUS的活性可出现于Km r 克隆细胞、再生植株的根、茎、叶、叶柄维管束薄壁细胞、叶片的气孔保卫细胞、皮层细胞、叶肉细胞和毛状体。 展开更多
关键词 胡萝卜 悬浮培养 细胞 根癌农杆菌 遗传转化
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种子特异性启动子(napinB promoter)分离、表达载体构建及转基因植物获得 被引量:13
7
作者 李丽 张景昱 +1 位作者 杜桂森 宋艳茹 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2001年第2期216-220,共5页
利用PCR技术从油菜BrassicanapusH1 65基因组DNA中分离了napinB启动子。序列分析表明 ,扩增片段 (nap30 0 )与文献报道的napinB启动子相应区域的同源性为 97%。将其与gus连接构建种子特异性表达载体 ,农杆菌介导转化烟草。PCR、Souther... 利用PCR技术从油菜BrassicanapusH1 65基因组DNA中分离了napinB启动子。序列分析表明 ,扩增片段 (nap30 0 )与文献报道的napinB启动子相应区域的同源性为 97%。将其与gus连接构建种子特异性表达载体 ,农杆菌介导转化烟草。PCR、Southern结果显示 ,nap30 0已整合到烟草基因组DNA中 ,获得了转基因植株。 展开更多
关键词 种子 特异性启动子 植物 表达载体 转基因植株
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苜蓿愈伤组织高频再生遗传和转化体系的建立 被引量:16
8
作者 金淑梅 管清杰 +3 位作者 罗秋香 王涛 高野哲夫 柳参奎 《分子植物育种》 CAS CSCD 2006年第4期571-578,共8页
本研究以MS为基本培养基,在不同浓度的2,4-D与6-BA联合使用的诱导培养基上,以苜蓿子叶为外植体,诱导愈伤组织,诱导率为55%~90.6%,其中2mg/L2,4-D+1mg/L6-BA诱导率最高,达90.6%;浅黄色至淡绿色的愈伤组织在MS+2mg/LKT+0.15mg/L6-BA+0.3m... 本研究以MS为基本培养基,在不同浓度的2,4-D与6-BA联合使用的诱导培养基上,以苜蓿子叶为外植体,诱导愈伤组织,诱导率为55%~90.6%,其中2mg/L2,4-D+1mg/L6-BA诱导率最高,达90.6%;浅黄色至淡绿色的愈伤组织在MS+2mg/LKT+0.15mg/L6-BA+0.3mg/LNAA分化培养基的分化率最高并且植株颜色深绿。丛生芽在1/2MS+2mg/L酵母提取物的生根培养基上再生成完整的苜蓿植株。以建立的苜蓿高频再生体系为基础,愈伤组织为转化的受体,用根癌农杆菌介导苜蓿,利用GUS组织化学染色法,研究影响遗传转化的若干因素,获得了100株转基因植株。乙酰丁香酮的浓度为100!mol/L,菌液浓度OD600为0.3~0.5,最佳的侵染时间为15min,共培养时间为4d,卡那霉素浓度为50mg/L时转化频率最合适。最高转化频率可达80%,Kana抗性植株Northernblotting检测表明,目的基因已整合进苜蓿基因组中。建立了苜蓿快速有效的遗传转化体系,为获得其它基因转化苜蓿,奠定基础。 展开更多
关键词 苜蓿 gus 愈伤组织 根癌农杆菌
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不同长度马铃薯GBSS基因启动子的块茎专一性表达的初报 被引量:10
9
作者 宋东光 黄大庆 +1 位作者 王光清 汪训明 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期559-563,共5页
将0.4,0.8,1.6,2.9kbGBSS基因的5'侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体.0.8kbGBSS-GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达.已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯.X-Gluc染色及PCR结果均证实已获得... 将0.4,0.8,1.6,2.9kbGBSS基因的5'侧翼区与GUS基因融合,构建了双元表达载体.0.8kbGBSS-GUS通过基因枪转化法在块茎切片中获得了瞬间表达.已将上述构建体通过农杆菌转化法导入了马铃薯.X-Gluc染色及PCR结果均证实已获得转基因再生植株.在离体诱导块茎中,2.9,1.6,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性均明显高于茎段,高出1~15倍;1.6,2.9kbGBSS启动子驱动的GUS活性则大大高于0.8,0.4kbGBSS启动子驱动的GUS活性;其中2.9kb的GBSS启动子显示最强烈的块茎表达专一性. 展开更多
关键词 马铃薯 GBSS gus 块茎专一表达 基因表达 启动子
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提高根癌农杆菌介导的香石竹遗传转化效率的研究 被引量:11
10
作者 林荣呈 陈龙清 +1 位作者 包满珠 孙振元 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2003年第2期123-128,共6页
以无菌苗叶片为外植体,在根癌农杆菌介导下建立并优化了香石竹5个品种的遗传转化体系。预培养2d可明显提高转化率;香石竹品种间在转化上存在差异;培养基中添加20μmol的AgNO3抑制不定芽的分化。转化植株在含25mg·L-1卡那霉素的生... 以无菌苗叶片为外植体,在根癌农杆菌介导下建立并优化了香石竹5个品种的遗传转化体系。预培养2d可明显提高转化率;香石竹品种间在转化上存在差异;培养基中添加20μmol的AgNO3抑制不定芽的分化。转化植株在含25mg·L-1卡那霉素的生根培养基上培养,生根率为72 1%,GUS检测结果55%的转化植株呈蓝色,PCR扩增表明阳性率为32 2%,Southern杂交证实外源基因已整合到植物基因组中。 展开更多
关键词 香石竹 根癌农杆菌 遗传转化 gus
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农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究 被引量:17
11
作者 张妙彬 梁擎中 +3 位作者 肖浩 岑鹏 范干群 潘丽晶 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期565-570,共6页
利用根癌农杆菌介导转化石斛兰类原球茎(PLBs),研究了石斛兰对潮霉素的敏感性,并通过gus瞬时表达率比较不同类型农杆菌、侵染液浓度及乙酰丁香酮(AS)等对石斛兰转化的影响。结果表明:带有pCAMBIA1301的根癌农杆菌(Agrobacterium... 利用根癌农杆菌介导转化石斛兰类原球茎(PLBs),研究了石斛兰对潮霉素的敏感性,并通过gus瞬时表达率比较不同类型农杆菌、侵染液浓度及乙酰丁香酮(AS)等对石斛兰转化的影响。结果表明:带有pCAMBIA1301的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105(简称为E1301)比带有相同表达载体的LBA4404(简称L1301)对石斛兰的转化效率更高,前者约为后者的6倍;较高浓度的侵染液转化效率更高(OD600为1.0或1.2时的转化效率约为OD600为0.6或0.8时的2倍);在农杆菌生长至OD600值为0.8时,添加AS可提高转化效率;而当OD600为0.6、1.0和1.2时,添加AS反而不同程度地降低转化效率;在各种处理中,OD600为1.0时不添加AS的转化效率最高,达44.4%。经过5—6个月选择培养,抗性小苗经GUS染色、PCR和Southern杂交检测证明为转基因植株。 展开更多
关键词 石斛兰 gus 根癌农杆菌 转化 SOUTHERN杂交
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转基因白桦中GUS基因表达的定量分析 被引量:17
12
作者 曾凡锁 钱晶晶 +3 位作者 康君 王红艳 王亦洲 詹亚光 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期484-490,共7页
以转基因白桦(Betula platy phylla)为材料,采用单酶切结合Southern杂交的方法揭示不同转基因植株中GUS基因的整合拷贝数为1-4个。采用组织化学染色法定性分析不同整合方式转基因白桦植株中GUS基因的表达。结果表明,11个转基因植株中有... 以转基因白桦(Betula platy phylla)为材料,采用单酶切结合Southern杂交的方法揭示不同转基因植株中GUS基因的整合拷贝数为1-4个。采用组织化学染色法定性分析不同整合方式转基因白桦植株中GUS基因的表达。结果表明,11个转基因植株中有2株出现了GUS基因沉默,其余植株均有不同水平的GUS表达。在此基础上应用分光光度法定量分析不同拷贝数的GUS转基因白桦中β-葡萄糖醛酸酶活性。结果表明,在11个转基因无性系中除2个株系的GUS基因沉默外,其它9个转基因植株中GUS酶活力差异明显,但这种差异与GUS基因的拷贝数没有必然联系。 展开更多
关键词 基因表达 gus 整合方式 分光光度法 转基因白桦
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GUS基因概述 被引量:10
13
作者 韦莉莉 樊妙姬 陈丽梅 《广西农业大学学报》 CAS CSCD 1998年第3期299-301,共3页
GUS( β 葡糖苷酸酶 )基因是从大肠杆菌中克隆的 ,作为基因融合系统中的报告基因广泛应用于细菌、植物 ,甚至动物的基因调控、表达等分子遗传学的研究中。本文简要介绍 GUS基因产物 (酶 )的特性、化学分析 。
关键词 gus 基因 报告基因
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转MnSOD基因仙客来植株的获得及其对高温胁迫的抗性 被引量:14
14
作者 陈莉 周连霞 +2 位作者 马锋旺 梁东 华智锐 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2008年第3期155-160,共6页
【目的】制备转MnSOD基因仙客来植株,检测其对高温胁迫的抗性。【方法】以仙客来组培苗的叶片为受体材料,采用根癌农杆菌介导法将MnSOD基因导入仙客来,对获得的抗性株系进行分子生物学检测,并测定转MnSOD基因仙客来组培苗在36℃高温胁... 【目的】制备转MnSOD基因仙客来植株,检测其对高温胁迫的抗性。【方法】以仙客来组培苗的叶片为受体材料,采用根癌农杆菌介导法将MnSOD基因导入仙客来,对获得的抗性株系进行分子生物学检测,并测定转MnSOD基因仙客来组培苗在36℃高温胁迫下的SOD活性、MDA含量、细胞膜相对透性和可溶性蛋白含量。【结果】获得35个仙客来抗性株系,其中3个株系经GUS组织化学染色、PCR和Southern印迹检测表现为阳性,表明外源基因整合到仙客来基因组中。转基因仙客来的SOD活性始终高于非转基因植株,细胞膜透性和MDA含量上升的速度低于非转基因植株,可溶性蛋白含量高于非转基因植株。【结论】获得了转MnSOD基因仙客来植株,其对高温胁迫的抗性高于非转基因植株。 展开更多
关键词 仙客来 遗传转化 gus SOUTHERN 高温胁迫
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PEG-mediated Transformation of Lentinus edodes 被引量:12
15
作者 孙丽 许伟宏 +2 位作者 蔡华清 胡鸢雷 林忠平 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第10期1089-1092,共4页
Expression vector p301-bG1 contains a Sw gene and a bialaphos resistance gene both driven by glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase (GPD) gene promoter isolated from Lentinus edodes ( Berk.) Sing. Using p301-bG1, P... Expression vector p301-bG1 contains a Sw gene and a bialaphos resistance gene both driven by glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase (GPD) gene promoter isolated from Lentinus edodes ( Berk.) Sing. Using p301-bG1, PEG-mediated transformation of protoplast of L. edodes was studied. Mixed with PEG-purified plasmid DNA, the protoplasts of L. edodes were treated with PEG solution and cultured on CYM regeneration plate containing 40 mug/mL bialaphos. Bialaphos-resistant and GUS-positive transformants were obtained using this transformation system. Although the transformation efficiency was relatively low, the protocols release large expenses on expensive instrument and restriction enzymes, providing a simple and economical method for mushroom breeding at the molecular level. 展开更多
关键词 Lentinus edodes TRANSFORMATION GPD promoter gus PEG
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ACA基因启动子的克隆及功能初探 被引量:6
16
作者 刘召华 郭洪年 +1 位作者 郑光宇 田颖川 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期139-143,共5页
根据已知的ACA基因的 5 '端序列设计三个基因特异的反向引物 (GSP_1,GSP_2 ,GSP_3)分别与 11个简并引物 (AD1_AD11)配对 ,进行热不对称嵌套PCR(ThermalasymmetricinterlacedPCR ,TAIL_PCR)扩增 ,获得了ACA基因起始密码子上游约70 0b... 根据已知的ACA基因的 5 '端序列设计三个基因特异的反向引物 (GSP_1,GSP_2 ,GSP_3)分别与 11个简并引物 (AD1_AD11)配对 ,进行热不对称嵌套PCR(ThermalasymmetricinterlacedPCR ,TAIL_PCR)扩增 ,获得了ACA基因起始密码子上游约70 0bp的片段。为检测其表达特性 ,构建了该片段与Gus嵌合基因的表达载体pBpAG ,在真空条件下通过农杆菌介导 ,转化了植物的叶、果实、种子三种不同组织 ,Gus瞬时表达染色结果显示 ,该DNA片段具有种子特异的启动子活性。对该启动子的一些顺式元件进行了讨论。 展开更多
关键词 TAIL-PCR ACA启动子 gus 种子特异表达
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影响麻竹基因转化的几个因子研究 被引量:12
17
作者 卓仁英 刘晓光 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期551-554,共4页
对影响麻竹转基因过程中的几个关键性因素展开研究。卡那霉素和潮霉素都可以用于麻竹抗性愈伤组织筛选,25mg/L的潮霉素基本上可以排除非转化体;共培养时间对抗性愈伤组织和不定芽诱导再分化有明显影响,考虑到抑制农杆菌过度生长需要,选... 对影响麻竹转基因过程中的几个关键性因素展开研究。卡那霉素和潮霉素都可以用于麻竹抗性愈伤组织筛选,25mg/L的潮霉素基本上可以排除非转化体;共培养时间对抗性愈伤组织和不定芽诱导再分化有明显影响,考虑到抑制农杆菌过度生长需要,选择共培养时间为3d。通过研究,初步建立了麻竹转基因技术体系,为丛生竹类转基因育种奠定了基础。 展开更多
关键词 麻竹 转基因 gus
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根癌农杆菌介导获得转基因西瓜植株 被引量:12
18
作者 孙玉宏 韩长磊 +5 位作者 张椿雨 肖勇 曾红霞 彭金光 代书桃 孟金陵 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期684-688,共5页
利用包含双元载体pBI121的农杆菌LBA4404转化西瓜子叶外植体,获得转基因西瓜植株。结果表明:转化受体材料西瓜品种早花、克伦生、黑美人母本F23的分化效率没有明显差别;外植体浸染菌液10 min的处理较为合适;125 mg/L卡那霉素和300 mg/L... 利用包含双元载体pBI121的农杆菌LBA4404转化西瓜子叶外植体,获得转基因西瓜植株。结果表明:转化受体材料西瓜品种早花、克伦生、黑美人母本F23的分化效率没有明显差别;外植体浸染菌液10 min的处理较为合适;125 mg/L卡那霉素和300 mg/L羧苄青霉素适合于外植体筛选培养。通过PCR检测获得了3株转基因植株,转化效率为1.5%,其中只有2株整合了gus报告基因。Southern杂交和gus染色检测证明2株的基因组中整合了外源基因,报告基因在植株T0-1-3后代呈现3∶1分离。 展开更多
关键词 西瓜 转化 农杆菌 gus 转基因植株
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银杏查尔酮合成酶基因启动子(GbCHSP)调控元件及功能分析 被引量:13
19
作者 李琳玲 程华 +3 位作者 程水源 许锋 王燕 姜德志 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1919-1928,共10页
通过染色体步移方法从银杏(Ginkgo biloba L.)基因组中克隆到查尔酮合成酶基因(CHS)翻译起始位点上游1711bp的启动子序列。生物信息学分析表明,该启动子片段中存在多个顺式作用元件,包括紫外/蓝光响应单元、植物激素响应单元、真菌诱导... 通过染色体步移方法从银杏(Ginkgo biloba L.)基因组中克隆到查尔酮合成酶基因(CHS)翻译起始位点上游1711bp的启动子序列。生物信息学分析表明,该启动子片段中存在多个顺式作用元件,包括紫外/蓝光响应单元、植物激素响应单元、真菌诱导元件、MYB结合位点、TATA-box和CAAT-box等。亚克隆了CHS转录起始位点上游1402bp序列,将其与GUS基因构建融合表达载体pBI121+CHSP,以pBI121-35S作为负对照,通过农杆菌(LBA4404)介导法分别转入烟草。结果表明,银杏CHS启动子序列能驱动GUS基因在烟草中的表达,表达具有组织特异性。GbCHSP的功能研究将有助于揭示银杏叶黄酮的积累与GbCHS基因表达的分子机理。 展开更多
关键词 银杏 查尔酮合成酶基因启动子 gus 调控元件分析
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苹果成花抑制蛋白SVP基因的克隆、表达及启动子活性分析 被引量:13
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作者 王世祥 左希亚 +4 位作者 邢利博 樊胜 张东 韩明玉 张林森 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1445-1457,共13页
以‘长富2号’苹果短枝顶芽为材料,采用同源重组法克隆得到成花抑制蛋白SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)家族的1个关键基因MdMADS50,开放阅读框(ORF)长度为675 bp,编码224个氨基酸。序列分析发现,该基因含有1个保守的MADS-box结构域和1个K-... 以‘长富2号’苹果短枝顶芽为材料,采用同源重组法克隆得到成花抑制蛋白SHORT VEGETATIVE PHASE(SVP)家族的1个关键基因MdMADS50,开放阅读框(ORF)长度为675 bp,编码224个氨基酸。序列分析发现,该基因含有1个保守的MADS-box结构域和1个K-box结构域,属于MIKC型。氨基酸多重序列比对和系统进化分析表明,MdMADS50蛋白序列与苹果MdSVP具有较高的同源性。qRT-PCR分析结果表明,MdMADS50具有组织表达特异性,在苹果芽和叶中表达量较高。外源GA3处理促进了MdMADS50的表达,且在难成花品种‘长富2号’苹果芽中的表达量显著高于其他苹果品种。另外,GUS活性检测结果表明MdMADS50基因启动子具有启动活性,且受外源GA3诱导后活性增强。综上,研究表明MdMADS50可能响应GA3处理对苹果成花诱导发挥抑制作用,并介导赤霉素信号参与苹果花芽孕育的调控。 展开更多
关键词 苹果 成花诱导 SVP GA 基因克隆 基因表达 gus
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