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A族链球菌表面新发现蛋白Fba真核表达质粒的构建及其诱导的免疫应答 被引量:6
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作者 李彩虹 马翠卿 +1 位作者 王锦 魏林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期835-838,共4页
目的:构建新发现的A族链球菌(GAS)表面蛋白Fba的真核表达质粒,并将其以及Fba蛋白、M蛋白分别免疫小鼠,对它们诱导的体液免疫及细胞免疫应答进行评价分析。探讨Fba蛋白作为GAS候选疫苗的可能性。方法:以SSI-9菌株(GASM1血清型标准株)作... 目的:构建新发现的A族链球菌(GAS)表面蛋白Fba的真核表达质粒,并将其以及Fba蛋白、M蛋白分别免疫小鼠,对它们诱导的体液免疫及细胞免疫应答进行评价分析。探讨Fba蛋白作为GAS候选疫苗的可能性。方法:以SSI-9菌株(GASM1血清型标准株)作为模板,采用PCR方法扩增Fba基因,测序正确后克隆至真核表达质粒pcDNA3.1,构建真核表达质粒pcDNA3.1/fba;将雌性CD1小鼠随机分成6组,分别为Fba蛋白免疫组、M蛋白免疫组、pcDNA3.1/fba+Fba蛋白免疫组、pcDNA3.1/fba免疫组、pcDNA3.1空质粒对照及PBS对照组。ELISA检测各免疫组血清IgG的动态变化水平;脾细胞增殖试验检细胞增殖水平,并用流式细胞术检测小鼠体内CD4+、CD8+淋巴细胞的变化。试验结果经SPSS10.0统计处理。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1/fba;质粒或蛋白免疫后小鼠IgG产生水平以Fba蛋白免疫组增高最为明显,其次为Fba质粒蛋白混合免疫组及Fba质粒组。特异性抗原诱导后体外脾细胞增殖试验显示:pcDNA3.1/fba免疫组增殖水平明显高于其它组,流式细胞检测结果与此一致,并显示以CD4+T细胞水平升高为主,CD8+T细胞水平在各组别之间也有一定的差异。结论:(1)Fba蛋白与M蛋白一样均能有效地诱导机体产生抗体,提示Fba蛋白很有希望成为GAS的候选疫苗。(2)成功构建了Fba蛋白的真核表达质粒pcDNA3.1/fba,且该重组质粒能有效地诱导抗链球菌所需的抗体,并能增强CD4+T细胞、CD8+T细胞的增殖功能。 展开更多
关键词 A族链球菌(gas) Fba蛋白 真核表达质粒 免疫
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儿童A族β溶血性链球菌耐药及其原因分析 被引量:7
2
作者 刘小荣 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第1期19-22,共4页
A族β溶血性链球菌简称A族链球菌(group Astreptococcus,GAS),又称为酿脓链球菌(streptococcus pyogcnes),是引起儿科感染性疾病的重要致病菌。是一种常见的致病性化脓性革兰阳性球菌,健康人群呼吸道内对GAS的携带率为5%~15... A族β溶血性链球菌简称A族链球菌(group Astreptococcus,GAS),又称为酿脓链球菌(streptococcus pyogcnes),是引起儿科感染性疾病的重要致病菌。是一种常见的致病性化脓性革兰阳性球菌,健康人群呼吸道内对GAS的携带率为5%~15%或更低,主要通过呼吸道飞沫在人与人之间广泛传播,只有当人体免疫功能低下或细菌有能力穿透皮肤保护屏障(如外伤感染)时才会致病。 展开更多
关键词 A族链球菌 耐药
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A族链球菌表面蛋白Fba单克隆抗体的制备及其对应表位的初步鉴定 被引量:3
3
作者 马翠卿 顾海燕 +3 位作者 郭奕阳 胡光磊 魏澎 魏林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1046-1048,1053,共4页
目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对... 目的:制备抗A组溶血性链球菌(GAS)表面蛋白Fba(fibronectin-binding proteins a)的单克隆抗体(mAb),并对单抗的生物学功能及其相应表位进行了初步鉴定。方法:以重组Fba蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术及间接ELISA筛选出针对Fba的杂交瘤细胞株,以Western blot鉴定mAb的特异性,并将获得的mAb与Fba+GAS和Fba-GAS分别行全菌ELISA、与Fba的分段表达蛋白行Western blot,初步鉴定mAb针对的表位所在区域。结果:获得了稳定分泌抗Fba-mAb的杂交瘤细胞株,其中一株mAb能特异结合天然Fba+链球菌,且该单抗针对的表位包含了Fba蛋白的第104~108位氨基酸,该位点也是链球菌Fba蛋白结合补体调节蛋白FH的位点。结论:成功地制备了抗GAS表面Fba蛋白的mAb,其中一株mAb对应的表位为位于菌体表面的天然表位,并检测出了该mAb对应的表位所在区段,这为深入研究GAS的致病机制提供了有力工具。 展开更多
关键词 A族链球菌 Fba蛋白 单克隆抗体 表位
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A群链球菌疫苗的研究进展 被引量:3
4
作者 喻刚 董太明 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第8期830-833,共4页
A群链球菌(GAS)是人类细菌感染最常见的病原菌之一,其疫苗的研发仍是尚未解决的难题。本文介绍了目前GAS疫苗研发的不同策略,并重点阐述了M蛋白多肽疫苗的最新研究进展。
关键词 A群链球菌 M蛋白 多肽疫苗
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阴阳毒与A组链球菌感染 被引量:1
5
作者 刘旻 谢云雪 王睦天 《河南中医》 2023年第10期1464-1468,共5页
阴阳毒是《伤寒杂病论》中唯一以“毒”命名的疾病,为毒邪蓄结阴阳二经所致,病变部位广泛,毒发势重,有传染性,可分为阴毒和阳毒。A组链球菌(group a streptococcus, GAS)引起的感染起病急骤,其临床症状、病程与阴阳毒证候群吻合。阳毒... 阴阳毒是《伤寒杂病论》中唯一以“毒”命名的疾病,为毒邪蓄结阴阳二经所致,病变部位广泛,毒发势重,有传染性,可分为阴毒和阳毒。A组链球菌(group a streptococcus, GAS)引起的感染起病急骤,其临床症状、病程与阴阳毒证候群吻合。阳毒对应猩红热,猩红热特征为全身泛发的大量细小网状皮疹,咽喉红肿糜烂,与阳毒咽喉痛、唾脓血且发斑吻合。阴毒对应链球菌中毒性休克综合征,其临床表现腹膜炎、心内膜炎,对应阴毒的“腹中绞痛,毒气攻心,心下坚强,短气不得息”等症,后期因休克及弥散性血管内凝血使体温偏低,对应“呕逆,唇青面黑,四肢厥冷”。治疗需以解毒为主,升麻鳖甲汤解毒、活血散瘀、阴阳并济,不同于伤寒所用之汗法、下法、清法与温法,为后世治疗热入血分证提供了参考。 展开更多
关键词 阴阳毒 阴毒 阳毒 A组链球菌 《金匮要略》 张仲景
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2011-2017年北京市东城区儿童A群链球菌的M蛋白基因分型 被引量:2
6
作者 李艳宇 彭晓旻 +4 位作者 高鹏 杨鹏 李姗姗 李源菁 杨建新 《医学动物防制》 2019年第10期958-960,共3页
目的了解北京市东城区2011-2017年儿童A群链球菌(group A Streptococcus,GAS) M蛋白基因分型情况。方法从猩红热病人的咽拭子中分离鉴定出GAS进行emm基因分型,使用SPSS 15. 0统计软件对数据进行分析。结果分离出66株GAS,64株emm基因阳... 目的了解北京市东城区2011-2017年儿童A群链球菌(group A Streptococcus,GAS) M蛋白基因分型情况。方法从猩红热病人的咽拭子中分离鉴定出GAS进行emm基因分型,使用SPSS 15. 0统计软件对数据进行分析。结果分离出66株GAS,64株emm基因阳性。共检测到两个基因型(emm1. 00型和emm12. 00型)和8个基因亚型(emm12. 00、emm12. 09、emm12. 12、emm12. 19、emm12. 20、emm1. 00、emm1. 16、emm1. 25)。emm基因型分布在儿童年龄上差异无统计学意义(χ^2=0. 209,P> 0. 05)、在诊断型别上差异有统计学意义(χ^2=13. 347,P <0. 01)。结论北京市东城区在2011-2017年儿童感染GAS的主要基因型为emm12. 00型和emm1. 00型,但emm1. 00型有上升趋势。 展开更多
关键词 A群链球菌 emm分型 猩红热
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A族链球菌多价疫苗的完善制备及其动物免疫保护作用研究 被引量:1
7
作者 王家超 袁婷 +6 位作者 邹东花 高雪 郭奕阳 李剑 张征峥 杨丽娟 马翠卿 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期392-397,共6页
目的:完善A族链球菌(GAS)多价疫苗并探究其免疫保护效果。方法:构建GAS的多肽疫苗F7M6,将其中的M6多肽克隆作为对照,表达纯化后,将两种蛋白连同本室保存的GAS M1蛋白分别免疫小鼠,末次免疫后10 d,半数小鼠行ELISPOT检测IL-4和IFN-γ,EL... 目的:完善A族链球菌(GAS)多价疫苗并探究其免疫保护效果。方法:构建GAS的多肽疫苗F7M6,将其中的M6多肽克隆作为对照,表达纯化后,将两种蛋白连同本室保存的GAS M1蛋白分别免疫小鼠,末次免疫后10 d,半数小鼠行ELISPOT检测IL-4和IFN-γ,ELISA检测各组的Ig G、Ig G1、Ig G2a;同时,以F7M6蛋白为诊断抗原检测其与抗链"O"阳性人血清的特异性结合;致死量的M1GAS攻毒并计算存活率。结果:无论是诱导细胞免疫,还是诱导抗体产生,F7M6组的水平均为最高;攻毒后F7M6蛋白的生存率为66.7%。F7M6蛋白检测抗链"O"阳性血清的阳性检出率为95%。结论:GAS的多肽疫苗F7M6能诱导特异性细胞和体液免疫应答,对GAS感染具有良好的保护效果,且F7M6的多价表位涵盖于时下流行的大部分GAS的血清型中。 展开更多
关键词 A族链球菌(gas) 多价疫苗 M蛋白 Fba A蛋白 免疫应答
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A型链球菌(GAS)毒素调控因子及其调控机制 被引量:1
8
作者 孙卫国 李少华 邵宁生 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第3期256-260,共5页
A型链球菌是一类革兰氏阳性病原菌,其产生的多种毒素因子是导致人体多重感染的重要原因。这些菌毒素因子的表达直接或间接地受多个毒素调控系统调控,各个调控系统之间存在相互关联并对病原菌与宿主的相互作用产生影响。干扰毒素的产... A型链球菌是一类革兰氏阳性病原菌,其产生的多种毒素因子是导致人体多重感染的重要原因。这些菌毒素因子的表达直接或间接地受多个毒素调控系统调控,各个调控系统之间存在相互关联并对病原菌与宿主的相互作用产生影响。干扰毒素的产生或调控通路对于发展特异的抗A型链球菌感染药物具有重要的意义。 展开更多
关键词 A型链球菌 毒素调控 双组分调控系统
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A群链球菌四价重组蛋白的表达、纯化及其免疫原性 被引量:1
9
作者 喻刚 杨京生 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期17-21,共5页
目的原核表达并纯化A群链球菌M1、3、6、18型四价重组蛋白,并检测其免疫原性。方法以克隆质粒pUC18-Strep4为模板,PCR法扩增四价重组蛋白基因,克隆至表达载体pQE30中,构建重组表达质粒,转化E.coilM15,筛选阳性克隆,IPTG诱导表达。采用Ni... 目的原核表达并纯化A群链球菌M1、3、6、18型四价重组蛋白,并检测其免疫原性。方法以克隆质粒pUC18-Strep4为模板,PCR法扩增四价重组蛋白基因,克隆至表达载体pQE30中,构建重组表达质粒,转化E.coilM15,筛选阳性克隆,IPTG诱导表达。采用Ni2+-NTA凝胶亲和层析纯化重组蛋白。以该蛋白免疫家兔,ELISA法检测血清抗体滴度;间接免疫荧光法(IFA)检测A群链球菌型特异性抗体;体外杀菌试验检测杀菌抗体活性。结果四价重组蛋白表达质粒pQE30-Strep4经双酶切和测序,证明构建正确。重组蛋白相对分子质量与预期相符,表达量约占菌体总蛋白的30%,为可溶性表达。纯化后蛋白纯度可达90%以上,并可诱导家兔产生高滴度的M1、3、6型特异性杀菌抗体。结论已成功表达了A群链球菌四价重组蛋白,纯化后的蛋白可诱导家兔产生针对A群链球菌M1、3、6三个血清型菌株的特异性杀菌抗体。 展开更多
关键词 A群链球菌 重组蛋白 原核表达 免疫原性
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A族链球菌诱导巨噬细胞坏死而非凋亡
10
作者 马翠卿 胡光磊 +5 位作者 杨建岭 胡洁 张玲 冯惠东 杨丽娟 魏林 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2010年第6期850-854,共5页
为了研究A族链球菌(GAS)作用巨噬细胞系RAW264.7后,RAW264.7细胞增殖变化的情况,以进一步研究GAS的致病机制。将RAW264.7接种于96孔板,采用低菌量、中菌量和高菌量分别作用于该细胞,培养三天后行MTT检测;用TUNEL及ANNEXIN V-FITC法检测... 为了研究A族链球菌(GAS)作用巨噬细胞系RAW264.7后,RAW264.7细胞增殖变化的情况,以进一步研究GAS的致病机制。将RAW264.7接种于96孔板,采用低菌量、中菌量和高菌量分别作用于该细胞,培养三天后行MTT检测;用TUNEL及ANNEXIN V-FITC法检测高菌量GAS作用后巨噬细胞是否发生凋亡;透射电子显微镜观察低、中、高菌量GAS作用RAW264.7后细胞超微结构的变化。结果显示低、中菌量GAS对RAW264.7细胞增殖有促进作用;高菌量GAS对细胞增殖有抑制作用,且高菌量GAS作用RAW264.7后诱导大部分细胞发生了坏死而非凋亡。结果表明高菌量GAS引起RAW264.7细胞发生坏死而非凋亡。 展开更多
关键词 A族链球菌(gas) 巨噬细胞 细胞坏死 细胞凋亡
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StrepA快速诊断试剂在A族溶血性链球菌感染疾病快速诊断中的应用评价 被引量:4
11
作者 陈荷英 刘钢 +1 位作者 袁林 沈叙庄 《北京医学》 CAS 2009年第12期717-719,共3页
目的探讨StrepA快速诊断试剂在A族(乙型)溶血性链球菌(group A streptococcus,GAS)急性咽扁桃体炎、猩红热早期诊断中的价值。方法于2005年12月至2006年7月选取临床确诊猩红热患儿56例,记录临床资料及抗生素应用史,留取咽拭子同时进行... 目的探讨StrepA快速诊断试剂在A族(乙型)溶血性链球菌(group A streptococcus,GAS)急性咽扁桃体炎、猩红热早期诊断中的价值。方法于2005年12月至2006年7月选取临床确诊猩红热患儿56例,记录临床资料及抗生素应用史,留取咽拭子同时进行细菌培养和快速抗原检测。于2006年11月至2007年5月选取临床疑似急性A族链球菌咽扁桃体炎患儿104例、病毒性上呼吸道感染患儿35例,记录临床资料及抗生素应用病史,进行A族链球菌链快速抗原检测。结果56例猩红热患儿咽拭子Quick Vue StrepA快速诊断试剂检测发现阳性51例(91.07%),细菌培养发现阳性30例(53.57%),两种检测方法有显著性差异(P<0.01)。30例细菌培养阳性标本,经Quick Vue StrepA快速诊断试剂检测阳性29例,符合率为96.67%;而51例经Quick Vue StrepA快速诊断试剂检测阳性标本,细菌培养阳性仅29例,符合率为56.86%。应用抗生素组细菌培养阳性率低于未应用抗生素组。104例临床疑似急性A链咽扁桃体患儿StrepA快速抗原检测阳性49例,阳性率为47.12%;35例诊断为病毒性上呼吸道感染患儿阳性1例,阳性率为2.86%。结论Quick Vue StrepA快速诊断试剂检测GAS急性咽扁桃体炎和猩红热敏感性高、特异性好,抗生素应用不影响快速抗原检测阳性率,适于临床快速病原学诊断。 展开更多
关键词 StrepA快速诊断试剂 A族溶血性链球菌 急性咽扁桃体炎 猩红热 快速诊断
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肿瘤细胞裂解物联合化脓性链球菌裂解物的抗肿瘤作用 被引量:1
12
作者 卫红飞 吴秀丽 +1 位作者 王丽颖 房明丽 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1204-1207,1212,共5页
目的:研究化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用,抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。方法:自行制备了化脓性链球菌裂解物制剂,通过体外及动物实验测定其抗肿瘤效应。以BALB/c小鼠EMT6乳腺癌为模型,观察了链球菌制剂联合肿瘤细胞裂解物对荷瘤... 目的:研究化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用,抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。方法:自行制备了化脓性链球菌裂解物制剂,通过体外及动物实验测定其抗肿瘤效应。以BALB/c小鼠EMT6乳腺癌为模型,观察了链球菌制剂联合肿瘤细胞裂解物对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响。结果:自行制备的化脓性链球菌在体外可以刺激小鼠脾细胞的增殖,且能抑制多种肿瘤细胞(EMT6、B16、A549)的增殖,二者联用对每只荷瘤小鼠的肿瘤体积都有较强的抑制作用(P<0.05)。结论:化脓性链球菌裂解物与肿瘤细胞裂解物联用可以抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。 展开更多
关键词 化脓性链球菌 肿瘤细胞裂解物 抗肿瘤
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沙培林在原发性肝癌介入治疗(TACE)中的初步应用研究
13
作者 王南 胡道予 +1 位作者 黄艳荣 张玉琴 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第10期637-638,共2页
目的 探讨沙培林替代化疗药物对原发性肝癌进行介入治疗的可行性。方法  4 0例原发性肝癌患者分沙培林组及对照组 ,分别进行沙培林TACE治疗及常规TACE治疗 ,对术后反应及近期疗效进行对比分析。结果 实验组与对照组的术后反应指标有... 目的 探讨沙培林替代化疗药物对原发性肝癌进行介入治疗的可行性。方法  4 0例原发性肝癌患者分沙培林组及对照组 ,分别进行沙培林TACE治疗及常规TACE治疗 ,对术后反应及近期疗效进行对比分析。结果 实验组与对照组的术后反应指标有比较明显的差异 ,主要反映在白细胞下降的程度及术后发热情况 ,两组的肝功能变化情况则较为相近。在近期疗效方面 ,实验组与对照组没有显示明显的差异。结论 沙培林部分替代化疗药物对原发性肝癌进行介入治疗 ,就术后反应及近期疗效而言是可行的 ,其详细作用机制。 展开更多
关键词 沙培林 原发性肝癌 介入治疗
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2011年-2013年北京市西城区儿童A组溶血性链球菌的emm基因分型 被引量:9
14
作者 崔京辉 苗元 +3 位作者 胡晓芬 靳博 吉彦丽 李达 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第14期2048-2050,2056,共4页
目的了解2011年-2013年北京市西城区儿童携带A组溶血性链球菌(GAS)的M蛋白基因(emm)各基因型别分布情况。方法于2011年-2013年每年5月-7月,从北京市西城区辖区内两家医院采集猩红热或咽峡炎及扁桃体炎儿童患者的咽拭子,培养分离获得121... 目的了解2011年-2013年北京市西城区儿童携带A组溶血性链球菌(GAS)的M蛋白基因(emm)各基因型别分布情况。方法于2011年-2013年每年5月-7月,从北京市西城区辖区内两家医院采集猩红热或咽峡炎及扁桃体炎儿童患者的咽拭子,培养分离获得121株GAS,提取DNA,应用PCR扩增emm基因,进行测序,确定GAS的emm基因型别,并比较不同年度、不同人群、不同诊断病例来源标本基因型别的差异。结果 3年间121份GAS标本中共检测出了3个基因型分别为emm1、emm12、emm75,emm1为24株,emm12为96株,emm75为1株。检出了10个基因亚型,分别为emm12.0、emm12.1、emm12.19、emm12.29、emm12.30、emm12.38、emm1.0、emm1.33、emm1.76、emm75.0。结论2011年-2013年间北京市西城区儿童携带GAS的emm基因型别中,主要流行的基因型是emm12和emm1,主要流行的基因亚型是emm12.0和emm1.0,且emm1.0有逐年增多的趋势。emm基因型目前在北京西城区人群分布上在性别、年龄、病例诊断类型上无差异。仅在北京市和外省市人群中emm12和emm1的分布有差异(P<0.05)。 展开更多
关键词 猩红热 A组溶血性链球菌(gas) emm基因
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