卵巢颗粒细胞自噬与PI3K/AKT/FOXO3a信号通路的相关性 被引量：16

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作者 黄姗姗 刘慧萍 +4 位作者 张韫玉 陈镇 张楚洁 付慧兰 肖小芹 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第6期775-780,共6页

细胞自噬是哺乳动物细胞物质代谢的一个重要机制,与细胞凋亡共同参与卵巢卵泡的发育和闭锁,并发挥重要的作用。近年研究发现,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路参与卵巢疾... 细胞自噬是哺乳动物细胞物质代谢的一个重要机制,与细胞凋亡共同参与卵巢卵泡的发育和闭锁,并发挥重要的作用。近年研究发现,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路参与卵巢疾病的发生。PI3K和AKT的过度激活可使原始卵泡过早发育以及卵泡过快凋亡,卵巢颗粒细胞作为卵泡发育重要的支持细胞,其功能的减退或凋亡很可能引发一系列女性内分泌方面的疾病。FOXO3a转录因子是PI3K/AKT信号通路下游的重要靶蛋白之一,参与抗增殖和凋亡。本文就关于卵巢颗粒细胞自噬与PI3K/AKT/FOXO3a信号通路的相关进展加以综述。 展开更多

关键词 卵巢 卵泡 颗粒细胞 自噬 PI3K/AKT/FOXO3a信号通路

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左归丸对磷酰胺氮芥体外诱导损伤颗粒细胞自噬与凋亡的影响 被引量：15

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作者 孙晓峰 刘涛 +3 位作者 曾贵荣 陈勇超 伍参荣 乔江 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期22-26,共5页

目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组... 目的探讨磷酰胺氮芥(phosphoramide mustard,PM)诱导卵巢颗粒细胞损伤的机制及左归丸含药血清对受损颗粒细胞自噬与凋亡的影响。方法制备左归丸含药血清,体外培养原代大鼠卵巢颗粒细胞,待细胞生长至底壁的75%-80%时随机分为4组:①对照组(Control);②模型组(M);③左归丸含药血清组(10%ZGW);④模型+左归丸含药血清组(M+10%ZGW)、以PM处理②④组24 h建立化疗源性颗粒细胞损伤模型后,①②组中加入10%正常大鼠血清,③④组中加入10%左归丸含药血清,37℃,5%CO2条件下培养24 h。流式细胞术检测各组颗粒细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢自噬启动因子Beclin-1、微管结合蛋白轻链3(LC3B)、自噬受体蛋白P62、凋亡蛋白Bax、Caspase3的表达。结果与对照组相比:模型组细胞凋亡率明显上升,Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白表达量增高,P62蛋白表达量下降,差异均具有统计学意义(P<0.05)。10%左归丸含药血清可显著降低模型组颗粒细胞凋亡率,下调受损颗粒细胞中Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase3蛋白的表达,上调受损颗粒细胞中P62蛋白的表达,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 PM诱导了卵巢颗粒细胞损伤,促进了颗粒细胞凋亡,激活了颗粒细胞自噬/溶酶体降解途径;10%左归丸含药血清可降低化疗损伤性颗粒细胞凋亡率,与自噬相关蛋白的表达相关。 展开更多

关键词 左归丸含药血清 磷酰胺氮芥 颗粒细胞 自噬 凋亡

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桂枝茯苓丸对PCOS模型小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响 被引量：14

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作者 胡小丹 朱鸿秋 +2 位作者 朱影 刘敏 陈海燕 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第15期1-7,共7页

目的:探讨桂枝茯苓丸对多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠颗粒细胞自噬的影响。方法:20只SD小鼠中随机选取10只建立PCOS小鼠模型,并提取小鼠卵巢颗粒细胞进行体外培养。设置正常小鼠颗粒细胞为空白组,PCOS小鼠颗粒细胞为模型组,模型组颗粒... 目的:探讨桂枝茯苓丸对多囊卵巢综合征(PCOS)模型小鼠颗粒细胞自噬的影响。方法:20只SD小鼠中随机选取10只建立PCOS小鼠模型,并提取小鼠卵巢颗粒细胞进行体外培养。设置正常小鼠颗粒细胞为空白组,PCOS小鼠颗粒细胞为模型组,模型组颗粒细胞分别给予10%体积的17.6,35.1,70.2 mg·kg^(-1)桂枝茯苓丸含药血清,10%体积的25 mg·kg^(-1)二甲双胍含药血清作为培养基培养颗粒细胞,空白组颗粒细胞用10%体积的空白血清培养72 h。造模期间,测量小鼠体质量变化;造模结束后用显微镜观察小鼠卵巢形态,检测空腹血糖;使用放射免疫法检测空腹胰岛素水平和睾酮水平;细胞增殖与活性检测-8(CCK-8)检测卵巢颗粒细胞增殖情况,找到对于细胞活力无明显影响的最高含药血清剂量,用于后续实验;流式细胞仪检测颗粒细胞自噬情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞内微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ),LC3Ⅱ,Beclin1,p62蛋白的表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠体质量增加、空腹胰岛素及空腹血糖水平增加、睾酮水平增加(P<0.05,P<0.01),表明PCOS小鼠建模成功。与空白组比较,经10%桂枝茯苓丸含药血清培养基孵育后,各组细胞自噬率均有所下降(P<0.05);Western blot检测结果表明,与空白组比较,模型组中Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平明显升高,p62的蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,桂枝茯苓丸中、高剂量组中Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平明显下降,p62水平明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:桂枝茯苓丸可以通过下调Beclin1,LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白的表达,抑制卵巢颗粒细胞的自噬水平。 展开更多

关键词 桂枝茯苓丸 颗粒细胞 自噬 多囊卵巢综合征(PCOS)

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基于颗粒细胞自噬探讨补肾养精汤对卵巢储备功能降低模型大鼠卵巢储备功能的影响 被引量：12

4

作者 王昭 赵晓旻 +3 位作者 刘鹏飞 黄天娇 祖琦 刘金星 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期169-173,共5页

目的:探讨补肾养精汤对雷公藤多苷诱导的卵巢储备功能降低(DOR)模型大鼠卵巢储备功能及自噬水平的影响。方法:60只SD雌性大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、补肾养精汤10、20、40 g/kg组和补佳乐0.09 mg/kg组,以雷公藤多苷诱导DOR模... 目的:探讨补肾养精汤对雷公藤多苷诱导的卵巢储备功能降低(DOR)模型大鼠卵巢储备功能及自噬水平的影响。方法:60只SD雌性大鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、补肾养精汤10、20、40 g/kg组和补佳乐0.09 mg/kg组,以雷公藤多苷诱导DOR模型,造模成功后各组灌胃相应药物或生理盐水,连续灌胃14 d。Elisa法检测大鼠血清促卵泡生成素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E;)、抗苗勒管激素(AMH)含量;显微镜观察卵巢组织形态学变化;透射电镜观察颗粒细胞超微结构和自噬情况;实时荧光定量法(Real-time PCR)检测颗粒细胞自噬因子Beclin1、Lc3Ⅱ和p62 mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清FSH、LH含量显著升高(P<0.01),E;、AMH含量显著降低(P<0.01);卵巢体积缩小,各级卵泡数减少,黄体和血管不足;自噬溶酶体显著增多(P<0.01);Beclin1、Lc3ⅡmRNA表达明显上调(P<0.05或P<0.01),P62 mRNA表达明显下调(P<0.05);与模型对照组比较,补肾养精汤40 g/kg组和补佳乐0.09 mg/kg组血清FSH、LH含量显著下降(P<0.01),E;、AMH含量显著升高(P<0.01);各级卵泡数量明显增加(P<0.05或P<0.01),闭锁卵泡显著减少(P<0.01);补佳乐组自噬溶酶体数量明显减少(P<0.05);补肾养精汤20、40 g/kg组和补佳乐组Beclin1 mRNA表达明显下调、p62 mRNA表达明显上调(P<0.05或P<0.01),补肾养精汤40 g/kg组和补佳乐组Lc3ⅡmRNA表达明显下调(P<0.01)。结论:补肾养精汤可能通过抑制DOR模型大鼠颗粒细胞自噬改善卵巢储备功能。 展开更多

关键词 补肾养精汤 卵巢储备功能下降 颗粒细胞 自噬

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补肾活血法调控PI3K/AKT/mTOR通路修复卵巢颗粒细胞自噬损伤机制研究 被引量：7

5

作者 白俊 赵晓鹏 +6 位作者 王海静 王丽君 张辉 李楠 陈梅 贺丰杰 吴克明 《陕西中医》 CAS 2023年第5期547-551,共5页

目的:观察补肾活血法调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞(OGCs)自噬损伤的影响。方法:将原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞分为六组:空白对照组、模型组、中药低剂量组、... 目的:观察补肾活血法调控磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/AKT/mTOR)通路对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞(OGCs)自噬损伤的影响。方法:将原代培养的大鼠卵巢颗粒细胞分为六组:空白对照组、模型组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、果纳芬组。采用ELISA法检测各组中雌二醇(E_(2))、孕酮(P)分泌量;Western blot法和免疫荧光法分别检测各组OGCs中PI3K、AKT、mTOR及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin 1)、微管相关蛋1轻链3(LC3)、自噬受体蛋白p62的蛋白表达。结果:模型组E_(2)含量显著降低,中药各剂量组E_(2)含量均上升(均P<0.05),且中药高剂量组与果纳芬组E_(2)含量相当;各组对P的含量均没有影响(均P>0.05)。中药各剂量组及果纳芬组p-PI3K、p-AKT、p-mTOR水平和p62的表达上调,Beclin 1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达下调,且中药高剂量组效果优于果纳芬组(均P<0.05)。结论:补肾活血中药复方新加归肾丸可能是通过激活PI3K/AKT/mTOR通路,下调下游自噬效应分子Beclin 1及LC3的表达并减少p62的消耗来修复OGCs的自噬损伤。 展开更多

关键词 补肾活血法 卵巢颗粒细胞 自噬 雷公藤 PI3K/AKT/mTOR通路 卵泡发育障碍

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基于SIRT1/FoxO1通路探究小檗碱抑制卵巢颗粒细胞凋亡与自噬的调节机制 被引量：7

6

作者 刘姣 杨阳 +3 位作者 何悦双 尤凤鸣 石丹宁 赵丕文 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期79-87,共9页

目的:通过观察小檗碱(BBR)对卵巢颗粒细胞衰老的影响,探究其保护作用及调节机制。方法:应用H_(2)O_(2)诱导建立人卵巢颗粒样肿瘤(KGN)细胞衰老模型;设置空白组、模型组、BBR高剂量(1μmol·L^(-1))组和BBR低剂量(0.5μmol·L^(-... 目的:通过观察小檗碱(BBR)对卵巢颗粒细胞衰老的影响,探究其保护作用及调节机制。方法:应用H_(2)O_(2)诱导建立人卵巢颗粒样肿瘤(KGN)细胞衰老模型;设置空白组、模型组、BBR高剂量(1μmol·L^(-1))组和BBR低剂量(0.5μmol·L^(-1))组,模型组与BBR组加入浓度为10μmol·L^(-1)H_(2)O_(2),孵育40 min。通过细胞增殖与活性检测(CCK-8)分析检测BBR对KGN细胞增殖的影响;通过β-半乳糖苷酶染色检测BBR对KGN细胞衰老状态的影响;应用流式细胞术检测BBR对KGN细胞凋亡和ROS含量的影响;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测BBR对KGN细胞抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)/促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)比值、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、叉头框转录因子O1(FoxO1)及过氧化氢酶(CAT)mRNA表达的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测BBR对KGN细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)、超氧化物歧化酶2(SOD2)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、FoxO1、自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ(LC3BⅡ)、自噬关键分子酵母Atg6(Beclin-1)及泛素结合蛋白p62蛋白表达的影响。结果:H_(2)O_(2)诱导40 min后,与空白组比较,模型组细胞增殖率显著下降(P<0.01);与模型组比较,BBR干预组细胞增殖率明显上升(P<0.05);β-半乳糖苷酶染色结果显示,与空白组比较,模型组细胞呈现明显的衰老状态(P<0.01),BBR干预组细胞衰老情况较模型组显著降低(P<0.01);流式细胞术检测显示,与空白组比较,模型组细胞凋亡率显著上升(P<0.01),BBR干预组细胞凋亡率较模型组明显降低(P<0.05);同时,与空白组比较,模型组ROS含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,BBR干预组细胞ROS含量显著降低(P<0.01);Real-time PCR结果显示,与空白组比较,模型组KGN细胞CAT、Bcl-2/Bax mRNA表达明显降低,Caspase-3与FoxO1 mRNA表达明显增加(P<0.05);与模型组比较,BBR干预后KGN细胞CAT与Bcl-2/Bax mRNA表达明显增加(P<0.05),Caspase-3与FoxO1 mRNA表达� 展开更多

关键词 小檗碱 卵巢颗粒细胞 氧化损伤 凋亡 自噬 细胞沉默信息调节因子1(SIRT1)/叉头框转录因子O1(FoxO1)信号通路

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基于氧感知通路探讨早发性卵巢功能不全发生机制的研究进展 被引量：6

7

作者 朱轶轩 董晓英 《中国医药导报》 2021年第22期55-58,共4页

早发性卵巢功能不全(POI)是造成女性卵巢功能下降的疑难疾病,与卵泡颗粒细胞凋亡密切相关。氧感知通路是人体的重要信号通路之一,缺氧诱导因子-1(HIF-1)α作为氧感知通路的核心元件,参与了一系列与POI相关的信号交联机制,并与其他分子... 早发性卵巢功能不全(POI)是造成女性卵巢功能下降的疑难疾病,与卵泡颗粒细胞凋亡密切相关。氧感知通路是人体的重要信号通路之一,缺氧诱导因子-1(HIF-1)α作为氧感知通路的核心元件,参与了一系列与POI相关的信号交联机制,并与其他分子和信号通路元件共同介导了颗粒细胞凋亡。过表达的HIF-1α可以上调BNIP3的表达,引发颗粒细胞凋亡;同时,HIF-1α可通过活化的PI3K/Akt/mTOR通路强化颗粒细胞自噬。颗粒细胞自噬和凋亡相互联系,可共同抑制卵母细胞及卵泡的发育,促进卵泡闭锁,引发POI。本文主要从HIF-1α诱导颗粒细胞凋亡和自噬的发生机制及信号通路探讨基于氧感知通路的POI发生机制,旨在为POI发生机制的研究及治疗提供新思路。 展开更多

关键词 氧感知通路 颗粒细胞 凋亡 自噬 早发性卵巢功能不全

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原花青素调控抑癌基因p53/AMP活化蛋白激酶通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的实验研究 被引量：6

8

作者 王漫丽 《安徽医药》 CAS 2021年第6期1104-1109,共6页

目的观察原花青素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的抑制作用,并探讨其对抑癌基因p53(p53)/AMP活化蛋白激酶(AMPK)通路的调控作用。方法60只成年雌性SD大鼠按照1~60自然数编号后以随机数字表法分为N组、M组、P组、LD组、MD组和H... 目的观察原花青素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的抑制作用,并探讨其对抑癌基因p53(p53)/AMP活化蛋白激酶(AMPK)通路的调控作用。方法60只成年雌性SD大鼠按照1~60自然数编号后以随机数字表法分为N组、M组、P组、LD组、MD组和HD组,每组各10只。除N组外均建立PCOS模型。P组于建模成功后给予枸橼酸氯米芬溶液5.21 mg/kg灌服;LD组、MD组和HD组分别给予25、50、100 mg/kg原花青素灌服,N组和M组均给予等量生理盐水灌服,连续24 d。对比治疗前后血清性激素水平;苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学变化;流式细胞术测定卵巢颗粒细胞自噬率;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)测定卵巢组织p53、AMPK mRNA表达;蛋白质印迹法(Western blotting)检测p53、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、AMPK蛋白表达及AMPK的磷酸化水平(p-AMPK)。结果治疗后N组血清性激素水平与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05),M组血清睾酮、促黄体生成素(FSH)水平均升高,雌二醇水平下降(P<0.05);治疗前M组、P组、LD组、MD组和HD组血清睾酮、FSH水平均高于N组,雌二醇水平均低于N组(P<0.05);治疗后P组、LD组、MD组和HD组颗粒细胞自噬率分别为(11.20±1.82)%、(13.45±2.10)%、(11.08±1.79)%和(9.86±1.05)%,每两组间血清睾酮、FSH水平和颗粒细胞自噬率对比,N组<HD组<MD组/P组<LD组<M组,除MD组与P组差异无统计学意义(P>0.05),余每两组间差异有统计学意义(P<0.05);治疗后每两组间血清雌二醇水平对比,N组>HD组>MD组/P组>LD组>M组,除MD组与P组差异无统计学意义(P>0.05),余每两组差异有统计学意义(P<0.05);N组卵泡排列整齐,大小均匀,结构清晰,颗粒细胞规整,可达8~9层,大多均可见卵丘,余五组均有不同程度改变,HD组与N组接近;各组卵巢组织p53 mRNA、p53、LC3Ⅱ蛋白表达及p-AMPK水平差异有统计学意义(P<0.001),每两组间对比,N组>HD组>MD组/P组>LD组>M� 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 原花青素 颗粒细胞 自噬 抑癌基因 AMP活化蛋白激酶 大鼠 Sprague-Dawley

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电针对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响 被引量：2

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作者 张怡 黄思丹 +3 位作者 师旭亮 张丹妮 李欣悦 佘延芬 《中国针灸》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期676-684,共9页

目的:观察电针对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响,探讨电针改善POI的作用机制。方法:从32只雌性SD大鼠中随机选取8只作为空白组,剩余大鼠作为造模组腹腔注射环磷酰胺15d(第1天剂量为50 mg/kg,第2天到第15天剂量... 目的:观察电针对早发性卵巢功能不全(POI)模型大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响,探讨电针改善POI的作用机制。方法:从32只雌性SD大鼠中随机选取8只作为空白组,剩余大鼠作为造模组腹腔注射环磷酰胺15d(第1天剂量为50 mg/kg,第2天到第15天剂量为8 mg/kg)建立POI模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、电针组和雌二醇组,每组8只。电针组大鼠予电针双侧“公孙”,连续波,频率2 Hz,电流强度0.1~1 mA,每日1次,每次20 min,共14 d。雌二醇组大鼠予戊酸雌二醇溶液(0.01 mg/mL)灌胃(10 mL/kg),每日1次,共14d。造模前后采用快速革兰氏染色观察大鼠动情周期变化。干预后,采用HE染色法观察大鼠卵巢组织形态;ELISA法检测大鼠血清卵泡刺激素(FSH)、雌二醇(E2)、抗苗勒管激素(AMH)、抑制素B(INHB)含量;免疫荧光染色法观察大鼠卵巢颗粒细胞p62阳性表达;透射电镜观察大鼠卵巢颗粒细胞结构,并比较自噬小体和自噬溶酶体数量;Westernblot法和实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织p62、Beclin-1、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白和mRNA表达。结果:空白组大鼠阴道涂片结果呈规律的周期变化;造模组大鼠阴道涂片表现为动情周期延长或周期停滞,多处于动情前期或动情间期,卵巢整体萎缩,整体结构紊乱,颗粒细胞减少。与空白组比较,模型组大鼠血清FSH含量升高(P<0.01),E2、AMH和INHB含量降低(P<0.01);卵巢颗粒细胞p62阳性表达减少(P<0.01);卵巢颗粒细胞明显肿胀,线粒体轻中度肿胀,粗面内质网略显扩张,高尔基体肥大,卵巢自噬小体和自噬溶酶体数量增加(P<0.01);卵巢组织p62蛋白及mRNA表达降低(P<0.01),Beclin-1、LC3蛋白表达及mRNA表达升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组和雌二醇组大鼠血清FSH含量下降(P<0.01),E2、AMH和INHB含量升高(P<0.01);卵巢颗粒细胞p62阳性表达增加(P<0.01);卵巢颗粒细胞损伤程度有所缓解,细胞器形态较为� 展开更多

关键词 早发性卵巢功能不全 电针 公孙 卵巢颗粒细胞 自噬

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桂枝茯苓丸含药血清对多囊卵巢综合征小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响 被引量：5

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作者 陈海燕 朱鸿秋 +3 位作者 朱影 胡小丹 吴沛娟 吴晗雪 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期3137-3144,共8页

目的 探讨桂枝茯苓丸含药血清通过调控基因靶点H19/miR-29b-3p对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法 分离及培养PCOS小鼠卵巢颗粒细胞,转染oe-H19或miR-29b-3p-inhibitor,使用桂枝茯苓丸含药血清进行干预,采用流式... 目的 探讨桂枝茯苓丸含药血清通过调控基因靶点H19/miR-29b-3p对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响。方法 分离及培养PCOS小鼠卵巢颗粒细胞,转染oe-H19或miR-29b-3p-inhibitor,使用桂枝茯苓丸含药血清进行干预,采用流式细胞仪和Western blot法分别检测卵巢颗粒细胞自噬率及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达,RT-qPCR法检测卵巢颗粒细胞H19、miR-29b-3p mRNA表达。结果 与对照组比较,模型组小鼠卵巢颗粒细胞自噬率、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白和H19 mRNA表达升高(P<0.01),miR-29b-3p mRNA表达降低(P<0.01);与模型组比较,桂枝茯苓丸含药血清组卵巢颗粒细胞自噬率及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达均降低(P<0.01),H19、miR-29b-3p mRNA表达均发生逆转(P<0.01);过表达H19或抑制miR-29b-3p表达可减弱桂枝茯苓丸含药血清对卵巢颗粒细胞过度自噬的抑制作用(P<0.01)。结论 桂枝茯苓丸含药血清可以通过H19/miR-29b-3p途径抑制PCOS小鼠卵巢颗粒细胞的自噬水平。 展开更多

关键词 桂枝茯苓丸 多囊卵巢综合征(PCOS) 卵巢颗粒细胞 自噬 H19/miR-29b-3p

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LncRNA MALAT1对PCOS颗粒细胞凋亡、自噬和PI3K/Akt/mTOR通路的影响 被引量：1

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作者 乔娜 田英 +1 位作者 陈杨 郝静 《天津医药》 CAS 2024年第10期1020-1024,共5页

目的探讨长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录子1(LncRNA MALAT1)对多囊卵巢综合征(PCOS)颗粒细胞的凋亡、自噬和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的影响。方法qRT-PCR检测PCOS卵巢组织、正常卵... 目的探讨长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录子1(LncRNA MALAT1)对多囊卵巢综合征(PCOS)颗粒细胞的凋亡、自噬和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路的影响。方法qRT-PCR检测PCOS卵巢组织、正常卵巢组织、人卵巢颗粒细胞KGN及正常卵巢上皮细胞IOSE80中LncRNA MALAT1的表达水平。体外培养KGN细胞,将KGN细胞分为control组、si-NC组、si-MALAT1组、pc-NC组、pc-MALAT1组、pc-MALAT1+740Y-P(PI3K激活剂)组。q RT-PCR检测各转染组细胞MALAT1 mRNA的表达水平;CCK-8检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;透射电镜观察KGN细胞中自噬小体;Western blot检测细胞B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、微管相关蛋白Ⅱ轻链3(LC3Ⅱ)、微管相关蛋白Ⅰ轻链3(LC3Ⅰ)、Beclin1、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达水平。结果PCOS卵巢组织MALAT1 mRNA表达水平低于正常卵巢组织,KGN细胞中MALAT1 mRNA表达水平低于正常卵巢上皮IOSE80细胞;control组KGN细胞中可见少量的自噬小体;干扰MALAT1表达后KGN细胞OD_(450)值(24、48、72 h)、Bcl-2蛋白表达降低,细胞凋亡率、Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR增高(P<0.05),自噬小体数量增多;过表达MALAT1后上述指标变化均逆转(P<0.05);与pc-MALAT1组相比,pc-MALAT1+740Y-P组OD_(450)(24、48、72 h)值、Bcl-2蛋白表达降低,凋亡率、Bax、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR升高(P<0.05),自噬小体数量增多。结论过表达MALAT1可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,进而抑制PCOS颗粒细胞凋亡和自噬。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 RNA 长链非编码 粒层细胞 细胞凋亡 自噬 LncRNA MALAT1 PI3K/Akt/mTOR通路

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苍附导痰丸含药血清调控大鼠卵巢颗粒细胞自噬的作用 被引量：5

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作者 谢蓬蓬 刘佳玥 曾蕾 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第5期547-551,共5页

目的:研究苍附导痰丸含药血清调控大鼠卵巢颗粒细胞(GCs)自噬的作用。方法:将3月龄SD大鼠分为生理盐水组(生理盐水,灌胃)、卵巢刺激素(FSH)注射组(10.71 IU/kg,皮下注射)和苍附导痰丸高、中、低剂量灌胃组[0.5、1、2 mg/g(以生药量计),... 目的:研究苍附导痰丸含药血清调控大鼠卵巢颗粒细胞(GCs)自噬的作用。方法:将3月龄SD大鼠分为生理盐水组(生理盐水,灌胃)、卵巢刺激素(FSH)注射组(10.71 IU/kg,皮下注射)和苍附导痰丸高、中、低剂量灌胃组[0.5、1、2 mg/g(以生药量计),灌胃],每组6只,每天皮下注射/灌胃给药1次,连续3天;末次给药后,于腹主动脉采血,获取各组大鼠的含药血清。将大鼠GCs分为空白对照组、模型组、FSH组(阳性对照)和苍附导痰丸高、中、低剂量组,除空白对照组直接加入生理盐水组大鼠血清100μL外,其余各组均先给予丙酸睾丸酮诱导以复制自噬模型,然后模型组加入生理盐水组大鼠血清100μL,各给药组分别加入对应药物组含药血清100μL。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液中雌二醇(E2)、孕激素(P)的含量,采用Western blot法检测各组GCs中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)蛋白的相对表达量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测各组细胞中PI3K、Akt、mTOR和自噬相关因子Beclin 1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62 mRNA的相对表达量。结果:与空白对照组比较,模型组细胞上清液中E2含量以及细胞中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.01),Beclin 1、LC3Ⅰ、LC3ⅡmRNA的相对表达量均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,FSH组和苍附导痰丸中、高剂量组细胞上清液中E2含量显著升高,细胞中Beclin 1、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62 mRNA的相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01);各给药组细胞中PI3K、Akt、mTOR mRNA和蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:苍附导痰丸可能是通过激活PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白及其mRNA的表达,从而抑制GCs的自噬。 展开更多

关键词 苍附导痰丸 卵巢颗粒细胞 自噬 PI3K/Akt/mTOR通路

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左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响 被引量：3

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作者 黄欣怡 曾文卓 +1 位作者 徐数理 孙晓峰 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第2期147-153,235,共8页

目的观察左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响。方法取60只ICR小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺方式建立卵巢早衰模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组及左归丸低、中、高剂量组各12只,另选取12只ICR小鼠... 目的观察左归丸对卵巢早衰小鼠卵巢超微结构及自噬相关基因表达的影响。方法取60只ICR小鼠,采用腹腔注射环磷酰胺方式建立卵巢早衰模型,将造模成功小鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组及左归丸低、中、高剂量组各12只,另选取12只ICR小鼠作为正常组。左归丸低、中、高剂量组分别给予13.65 g/kg、40.95 g/kg、122.85 g/kg左归丸浸膏灌胃,戊酸雌二醇组给予0.13 mg/kg戊酸雌二醇溶液灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均连续灌胃30 d。观察各组小鼠动情周期情况;ELISA法检测灌胃10 d、20 d血清抗苗勒管激素(AMH)水平和灌胃结束后血清AMH、雌二醇(E_(2))、促卵泡激素(FSH)水平;透射电镜观察卵巢颗粒细胞超微结构;Western blot及qRT-PCR法分别检测卵巢组织中自噬相关基因Beclin-1、LC3B、p62蛋白和mRNA表达情况,并通过激光共聚焦显微镜对以上基因进行定位和定量分析。结果与正常组比较,模型组小鼠动情周期紊乱;血清AMH水平呈持续下降趋势(P<0.05),血清E_(2)水平明显降低(P<0.05),血清FSH水平明显升高(P<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体增多;卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度明显减弱(P<0.05)。与模型组比较,左归丸高剂量组及戊酸雌二醇组小鼠动情周期均明显改善;血清AMH、E_(2)水平均明显升高(P均<0.05),血清FSH水平均明显降低(P均<0.05);卵巢颗粒细胞内自噬小体减少;卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白和mRNA表达量均明显降低(P均<0.05),p62蛋白和mRNA表达量均明显升高(P均<0.05);卵巢组织中Beclin-1、LC3B蛋白平均免疫荧光强度均明显减弱(P均<0.05),p62蛋白平均免疫荧光强度均明显增强(P均<0.05)。结论左归丸可以改善卵巢早衰小鼠动情周� 展开更多

关键词 卵巢早衰 左归丸 卵巢颗粒细胞 超微结构 自噬

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抑制NLRP3炎症小体激活可调节自噬改善多囊卵巢综合征颗粒细胞凋亡

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作者 符山花 包利利 +3 位作者 赵达 李俊 林芳婷 胡荣 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1646-1652,共7页

目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL... 目的:在多囊卵巢综合征(PCOS)患者中探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体的表达及其与颗粒细胞凋亡的关系。方法:收集17例PCOS患者(PCOS组)和20例非PCOS患者(对照组)的卵泡液与卵巢颗粒细胞,ELISA检测卵泡液中促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-18等表达水平,RT-PCR和Western blot检测颗粒细胞中NLRP3 mRNA和NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、含CARD的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)及裂解型天冬氨酸蛋白水解酶1(cleaved caspase-1)和自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ与p62的表达水平;TUNEL法检测两组受试者颗粒细胞的凋亡水平;体外培养人卵巢癌颗粒细胞系KGN细胞,siRNA干扰技术将沉默NLRP3的siRNA(si-NLRP3)和阴性对照序列(si-NC)转染入细胞中,并采用TNF-α进行刺激以模拟PCOS相关的细胞损伤;将KGN细胞按处理方式的不同分为4组:Ctrl组、TNF-α组、TNF-α+si-NLRP3组和TNF-α+si-NC组;ELISA检测各组细胞上清液中脱氢表雄酮(DHEA)、睾酮和IL-1β与IL-18水平;TUNEL法检测各组KGN细胞的凋亡水平;Western blot检测各组KGN细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p62、NLRP3、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达水平和NF-κB信号通路中NF-κB p-p65的水平(NF-κB p-p65/NF-κB p65)。结果:与对照组相比,PCOS患者卵泡液中TNF-α、IL-1β和IL-18的表达和颗粒细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、NLRP3的mRNA与NLRP3、ASC和cleaved caspase-1的蛋白表达和细胞的凋亡水平均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62的蛋白表达显著降低(P<0.01);与Ctrl组相比,TNF-α组、TNF-α+si-NC组和TNF-α+si-NLRP3组细胞上清液中DHEA、睾酮和IL-1β与IL-18水平和细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、ASC与cleaved caspase-1蛋白表达及NF-κB p-p65的水平和细胞凋亡率均明显升高(P<0.05或P<0.01),而p62蛋白却显著降低(P<0.01),NLRP3除在TNF-α+si-NLRP3组明显降低外(P<0.01),在TNF-α组、TNF-α+si-NC组中的表达均明显升高(P<0.01);但与TNF-α组相比,TNF-α+si-NLRP3组的上述检测指标变化趋势均明显降低(P<0.05),TNF-α+si 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体 颗粒细胞 自噬 凋亡

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加味芍药甘草汤对卵巢颗粒细胞凋亡自噬及p38 AMPK信号通路的影响 被引量：3

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作者 朱洁 蔡文玺 +2 位作者 马静 刘德福 李浩 《中国妇幼保健》 CAS 2022年第24期4722-4726,共5页

目的探究加味芍药甘草汤对卵巢颗粒细胞凋亡、自噬及p38 AMPK信号通路的影响。方法培养SD雌性大鼠,分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组,除对照组外其余各组均使用来曲唑灌胃大鼠用于制备大鼠模型,造模成功后灌胃加味芍... 目的探究加味芍药甘草汤对卵巢颗粒细胞凋亡、自噬及p38 AMPK信号通路的影响。方法培养SD雌性大鼠,分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组及高剂量组,除对照组外其余各组均使用来曲唑灌胃大鼠用于制备大鼠模型,造模成功后灌胃加味芍药甘草汤12.5、25.0、50.0 g/kg,连续14 d,对照组、模型组灌胃等体积蒸馏水。处死大鼠,体外培养卵巢颗粒细胞,采用MTT检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡;Western Blot检测Bcl-2、Bax、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ、p-p38 AMPK及p38 AMPK蛋白表达。将通路抑制剂SB203580处理高剂量组的卵巢颗粒细胞,按照上述方法检测卵巢颗粒细胞增殖活性、凋亡及自噬的作用。结果与对照组[48 h(102.23±6.45)%,72 h(98.24±8.71)%,(0.72±0.05)]相比,模型组细胞增殖活性[48 h(56.87±4.22)%,72 h(47.62±4.16)%]、Bcl-2蛋白表达(0.25±0.04)降低,差异均有统计学意义(t=10.220、9.080及12.170,均P<0.05);凋亡率、Bax、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及p-p38 AMPK蛋白表达增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组相比,低剂量组、中剂量组及高剂量组细胞增殖活性、Bcl-2蛋白表达增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);凋亡率、Bax、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ及p-p38 AMPK蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。加入通路抑制剂SB203580增加细胞活性、Bcl-2蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.05),降低凋亡率、Bax、Beclin-1及LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论加味芍药甘草汤可能通过抑制p38 AMPK信号通路抑制多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞凋亡、自噬,促进细胞增殖。 展开更多

关键词 加味芍药甘草汤 卵巢颗粒细胞 凋亡 自噬 AMPK信号通路

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基于月经周期阴阳消长转化探讨自噬在多囊卵巢综合征中的作用

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作者 马桦 费玉叶 +3 位作者 司雨 吴汶恩 陈雯玥 任青玲 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期5280-5283,共4页

月经周期阴阳消长转化是月经周而复始的本质,多囊卵巢综合征(PCOS)多因阴阳消长不利而致排卵障碍,表现为月经后期及闭经。细胞自噬是调控机体应激反应的一种稳态机制,对卵泡发育与闭锁具有双重调节作用,与中医阴阳理论相对应,并伴随月... 月经周期阴阳消长转化是月经周而复始的本质,多囊卵巢综合征(PCOS)多因阴阳消长不利而致排卵障碍,表现为月经后期及闭经。细胞自噬是调控机体应激反应的一种稳态机制,对卵泡发育与闭锁具有双重调节作用,与中医阴阳理论相对应,并伴随月经周期阴阳消长而变化。文章试从月经周期阴阳消长转化出发,探求细胞自噬在PCOS排卵障碍的作用,为中医药治疗PCOS及其基础研究提供更多启示。 展开更多

关键词 多囊卵巢综合征 细胞自噬 月经 阴阳消长转化 颗粒细胞自噬 排卵障碍

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基于PI3K/Akt信号通路探讨归肾育宫汤对早发性卵巢功能不全大鼠卵巢颗粒细胞自噬的影响

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作者 卢苑蓉 王强 +3 位作者 刘隽阳 许欢 杨鉴冰 符小航 《现代中西医结合杂志》 CAS 2023年第24期3359-3363,3370,共6页

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路探讨归肾育宫汤对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠调控卵巢颗粒细胞自噬的机制。方法取清洁级成年健康雌性SD大鼠32只,随机选择8只大鼠作为空白组,其余大鼠给予皮下注射透明... 目的基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路探讨归肾育宫汤对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠调控卵巢颗粒细胞自噬的机制。方法取清洁级成年健康雌性SD大鼠32只,随机选择8只大鼠作为空白组,其余大鼠给予皮下注射透明带多肽3(pZP3)建立POI模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组、归肾育宫汤组,每组8只。戊酸雌二醇组给予戊酸雌二醇0.09 mg/kg灌胃,归肾育宫汤组给予归肾育宫汤35 g/kg灌胃,模型组和空白组给予等体积生理盐水灌胃,均1次/d。连续灌胃4周后,腹主动脉取血,ELISA法检测血清促卵泡激素(FSH)、雌二醇(E 2)水平;取双侧卵巢称重,计算卵巢指数;取卵巢组织,Western blot法检测卵巢组织中PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达情况,免疫组化法观察卵巢颗粒细胞中糖原合酶激酶3(GSK-3)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)阳性表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠血清E 2水平、卵巢指数及卵巢组织中Akt、PI3K、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)蛋白相对表达量和卵巢颗粒细胞中GSK-3、Bcl-2平均光密度值均明显降低(P均<0.05),血清FSH水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,戊酸雌二醇组和归肾育宫汤组大鼠血清E 2水平、卵巢指数及卵巢组织中Akt、PI3K、PDK1蛋白相对表达量和卵巢颗粒细胞中GSK-3、Bcl-2平均光密度值均明显升高(P均<0.05),血清FSH水平均明显降低(P均<0.05),戊酸雌二醇组和归肾育宫汤组各指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论归肾育宫汤可通过调控PI3K/Akt信号通路及其下游相关因子GSK-3、Bcl-2表达,促进卵巢颗粒细胞增殖分化,抑制颗粒细胞过度自噬,调节性激素释放,调控卵泡发育,对POI大鼠卵巢功能起到一定保护作用。 展开更多

关键词 早发性卵巢功能不全 卵巢颗粒细胞 磷脂酰肌醇3-激酶 丝苏氨酸蛋白激酶 自噬

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基于网络药理学和实验验证探究红景天调控颗粒细胞自噬的作用机制

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作者 李灵巧 楼毅云 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第21期2926-2935,共10页

目的基于网络药理学和实验验证探究红景天调控颗粒细胞自噬的潜在作用靶点和作用机制。方法借助数据库获取红景天的活性成分、作用靶点以及自噬相关靶点,建立成分-靶点网络图,蛋白质互作网络图,对关键靶点进行基因和信号通路的富集分析... 目的基于网络药理学和实验验证探究红景天调控颗粒细胞自噬的潜在作用靶点和作用机制。方法借助数据库获取红景天的活性成分、作用靶点以及自噬相关靶点,建立成分-靶点网络图,蛋白质互作网络图,对关键靶点进行基因和信号通路的富集分析并且对活性成分和核心靶点进行分析对接,探究红景天调控颗粒细胞自噬的可能作用机制;使用Western blotting、RT-PCR、透射电镜以及双标腺病毒检测红景天重要活性成分对颗粒细胞自噬的作用。结果获取红景天有效成分7个,作用靶点441个,细胞自噬相关靶点796个,富集分析得到生物过程834个,细胞成分60个,分子功能69个,以及信号通路150条;分子对接结果表明红景天活性成分与核心作用靶点AKT1、ERBB2、PIK3CA、PIK3R1均能形成稳定靶向结合作用。实验结果表明红景天重要活性成分红景天苷具有促进自噬小体和自噬溶酶体形成的作用,并且抑制了Pl3K/AKT信号通路的活动。结论红景天调控颗粒细胞自噬具有多成分-多靶点-多通路的作用特点,其机制与红景天苷调控PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 红景天 网络药理学 颗粒细胞 红景天苷 自噬 PI3K/AKT信号通路

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姜黄素通过抑制HMGB1介导的自噬对棕榈酸诱导的卵巢颗粒细胞凋亡和类固醇生成能力的影响 被引量：1

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作者 廖源 王开举 +2 位作者 李浩僡 陈惠萍 李选逸 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第9期1639-1646,共8页

目的:探究姜黄素对棕榈酸(PA)诱导的卵巢颗粒细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人卵巢颗粒细胞,CCK-8法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液雌二醇(E2)含量,RT-q PCR法检测细胞HMGB1、CYP19A和CYP11A m RNA表达,流式细... 目的:探究姜黄素对棕榈酸(PA)诱导的卵巢颗粒细胞损伤的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人卵巢颗粒细胞,CCK-8法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液雌二醇(E2)含量,RT-q PCR法检测细胞HMGB1、CYP19A和CYP11A m RNA表达,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测细胞HMGB1、Beclin1、LC3B和P62蛋白表达。结果:200μmol/L和400μmol/L PA均能显著降低细胞活力、E2含量及CYP19A和CYP11A m RNA表达,并升高细胞凋亡率(均P<0.05)。与对照组相比,PA组细胞活力、E2含量及CYP19A、CYP11A、P62表达均明显降低,而细胞凋亡率、HMGB1和Beclin1表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显升高(P<0.05)。与PA组相比,PA+姜黄素(2.5μmol/L或5μmol/L)组细胞活力、E2含量、CYP19A、CYP11A、P62表达均明显升高,细胞凋亡率、HMGB1和Beclin1表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均明显降低(P<0.05)。过表达HMGB1可逆转姜黄素对PA诱导的卵巢颗粒细胞损伤的保护作用,并显著升高自噬相关蛋白的表达(P<0.05)。结论:姜黄素通过抑制HMGB1介导的自噬减轻PA诱导的卵巢颗粒细胞损伤。 展开更多

关键词 卵巢颗粒细胞 棕榈酸 姜黄素 高迁移率族盒蛋白1 自噬

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膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响及左归丸含药血清干预作用

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作者 孙晓峰 黄欣怡 +4 位作者 曾贵荣 龚力民 乔江 阳松威 周琳 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第2期16-21,共6页

目的探讨膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响以及左归丸含药血清的干预作用。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,分8组,分别是(1)空白对照组;(2)共培养组;(3)ZGW血清组;(4)ZGW血清+共培养组;(5)模型组;(6)模型+共培养... 目的探讨膜细胞对化疗损伤性颗粒细胞的影响以及左归丸含药血清的干预作用。方法制备左归丸含药血清,培养大鼠卵巢颗粒细胞和膜细胞,分8组,分别是(1)空白对照组;(2)共培养组;(3)ZGW血清组;(4)ZGW血清+共培养组;(5)模型组;(6)模型+共培养组;(7)模型+ZGW血清组;(8)模型+ZGW血清+共培养组。实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测Bax、Caspase-3、Beclin-1、p62、LC3B在转录水平和翻译水平上的表达。结果模型组的Beclin-1、LC3B、Bax及Caspase-3基因在转录水平及翻译水平上均有高表达,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可下调上述基因的表达;p62基因的表达较对照组降低,加入10%左归丸含药血清处理或与膜细胞共培养可上调模型组p62基因表达。当实验组与膜细胞共培养时加入10%左归丸含药血清后,5种基因表达的变化程度更明显。结论膜细胞能缓解体外颗粒细胞的化疗性损伤,且与左归丸含药血清有协同作用,与抑制颗粒细胞自噬和减少其凋亡有关。 展开更多

关键词 左归丸 化疗损伤 颗粒细胞 膜细胞 自噬 凋亡

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