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用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达HIV-2外膜糖蛋白gp105和跨膜糖蛋白gp36 被引量：5
1
作者 张应玖 金宁一 +2 位作者 金善荣 王宏伟 沈家骢 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期13-16,共4页
目的用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2外膜糖蛋白 gp10 5和跨膜糖蛋白 gp36 ,为研制艾滋病疫苗和诊断试剂奠定基础。方法分别将 HIV- 2外膜蛋白 gp10 5和跨膜蛋白 gp36全基因序列克隆到杆状病毒转座载... 目的用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2外膜糖蛋白 gp10 5和跨膜糖蛋白 gp36 ,为研制艾滋病疫苗和诊断试剂奠定基础。方法分别将 HIV- 2外膜蛋白 gp10 5和跨膜蛋白 gp36全基因序列克隆到杆状病毒转座载体 p Fast Bac HTa和 p Fast Bac HTb中多角体启动子下游 ,构建成重组转座载体 p Fast Bac HTa- gp10 5和 p FastBac HTb- gp36 ,利用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统筛选重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2的 gp10 5和gp36。结果 SDS- PAGE分析结果表明 ,gp10 5基因表达产物为一 6 6 0 0 0 u糖蛋白 ,gp36基因则表达一 410 0 0 u糖蛋白 ,与天然产物一致。 Western blot结果显示 :两者均具有抗原特异性。结论 gp10 5和 gp36在昆虫细胞中得到了高效表达 ,并均被糖基化 ;gp10 5接近天然产物 。 展开更多
关键词 HIV-2 gp105 gp36 杆状病毒 昆虫细胞
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2018-2022年厦门市某三甲医院人类免疫缺陷病毒抗体确认试验结果调研
2
作者 赖小华 兰小英 王燕凤 《医疗装备》 2024年第6期23-27,32,共6页
目的了解2018-2022年厦门市某三甲医院人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体筛查试验阳性患者的确认试验结果和相关资料,为临床制定有效防控措施提供参考依据。方法回顾性分析2018-2022年医院就诊人群的HIV抗体筛查试验结果及经过厦门市疾病控制中... 目的了解2018-2022年厦门市某三甲医院人类免疫缺陷病毒(HIV)抗体筛查试验阳性患者的确认试验结果和相关资料,为临床制定有效防控措施提供参考依据。方法回顾性分析2018-2022年医院就诊人群的HIV抗体筛查试验结果及经过厦门市疾病控制中心(CDC)免疫印迹法(WB)确认HIV抗体阳性患者的检验结果和临床资料。统计HIV筛查试验和确认试验结果,统计HIV抗体阳性样本的人群分布和科室分布、WB条带分布及HIV-1抗体条带模式。结果1323例需送确认试验患者中882例送检,确认HIV抗体阴性339例,阳性466例(465例经WB检测阳性,1例经核酸RNA检测阳性),不确定结果77例中随访确认5例阳性;未送检的441例患者中,既往已确认HIV抗体阳性82例。最终可追踪到的HIV抗体阳性患者共553例,阳性率41.80%。首次确认试验阳性的466例患者中,男女占比差异有统计学意义(P<0.05),不同年龄占比差异有统计学意义(P<0.05);394例患者的首诊科室为内科相关科室,72例为外科相关科室。465例经WB检测阳性样本共检出9条HIV-1抗体条带,1条HIV-2抗体条带;检出率最高的是包膜蛋白抗体gp160(100.00%)、gp120(100.00%)和gp41(99.78%),HIV-2包膜蛋白抗体条带gp36检出12例(2.58%)。465例经WB检测阳性样本共检出21种HIV-1抗体条带模式,其中3种模式含有HIV-2包膜蛋白抗体条带gp36;最常见的3种HIV-1抗体条带模式分别为HIV-1抗体全条带(148例)、缺失HIV-1抗体条带p55(134例)及缺失HIV-1抗体条带p55和p17(102例),3种模式合计占比82.58%,其他条带模式较少见。结论HIV抗体确认试验阳性率较高,阳性患者首诊科室以内科为主。医疗机构应重视HIV筛查,尽量避免漏诊、误诊,并加强临床诊疗过程中有创医疗处置措施时的职业防护,减少职业暴露。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 抗体 艾滋病 免疫印迹法 化学发光微粒子免疫检测法 gp36
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人类免疫缺陷病毒Ⅱ型跨膜蛋白在大肠杆菌中的表达 被引量：2
3
作者 王自春 滕智平 +1 位作者 袁静明 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期188-191,共4页
人类免疫缺陷病毒Ⅱ型（ＨＩＶ－２）的跨膜蛋白ｇｐ３６，是从外膜蛋白前体中裂解的，它在诱导病毒与细胞膜的融合和合胞体的形成中起着重要的作用〔１〕。感染ＨＩＶ－１或ＨＩＶ－２的患者，可产生针对病毒结构蛋白（包括包膜表面糖... 人类免疫缺陷病毒Ⅱ型（ＨＩＶ－２）的跨膜蛋白ｇｐ３６，是从外膜蛋白前体中裂解的，它在诱导病毒与细胞膜的融合和合胞体的形成中起着重要的作用〔１〕。感染ＨＩＶ－１或ＨＩＶ－２的患者，可产生针对病毒结构蛋白（包括包膜表面糖蛋白和跨膜蛋白）的体液免疫〔２－４... 展开更多
关键词 外膜蛋白 原核表达 HIV-2
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同时检测HIV抗体及p24抗原快速诊断试剂的研制 被引量：8
4
作者 徐克沂 张永新 +1 位作者 王瑛 Innocent MBAWUIKE 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期377-379,共3页
目的　研制可同时检测HIV 1、HIV 2抗体及p2 4抗原的胶体金快速诊断试剂。方法　利用重组杆状病毒 昆虫细胞系统进行HIV 1gp4 1及HIV 2gp36抗原的高效表达 ,以免疫亲和层析法纯化抗原。抗 HIVp2 4单克隆抗体杂交瘤细胞株 ,并制备抗 HIV... 目的　研制可同时检测HIV 1、HIV 2抗体及p2 4抗原的胶体金快速诊断试剂。方法　利用重组杆状病毒 昆虫细胞系统进行HIV 1gp4 1及HIV 2gp36抗原的高效表达 ,以免疫亲和层析法纯化抗原。抗 HIVp2 4单克隆抗体杂交瘤细胞株 ,并制备抗 HIVp2 4单克隆抗体。以硝酸基纤维膜为载体 ,以纯化的HIV 1gp4 1、HIV 2gp36抗原及抗p2 4抗体点膜 ,2 0nm胶体金颗粒 抗人IgG和抗 HIVp2 4单克隆抗体进行标记 ,对 33份已知HIV感染者阳性血清及 6份阴性血清进行检测。结果　通过重组杆状病毒 昆虫细胞系统进行HIV 1gp4 1及HIV 2gp36抗原的表达 ,可获取浓度为 2 .0mg L的纯化抗原。从抗p2 4单克隆抗体杂交瘤细胞株中培养上清液 ,通过葡萄球菌蛋白A免疫亲和层析柱可得到 1.5mg L的纯化抗体。利用纯化的抗原抗体进行标记 ,对 39份已知血清进行检测 ,与荷兰Organon公司HIV1+2抗体、p2 4抗原、ELISA诊断试剂同时检测结果进行比较 ,证实有较强的特异性及敏感性。结论　同时检测HIV 1、HIV 2抗体及p2 4抗原快速诊断试剂的问世 ,可为HIV感染的诊断提供一个简便、可靠、敏感的方法。 展开更多
关键词 快速诊断试剂 HIV gp41抗原 gp36抗原 单克隆抗体 放射性胶体金 抗体检测 抗原检测 艾滋病 人类免疫缺陷病毒
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用杆状病毒表达系统表达的HIV-2 gp105和gp36的反应原性与抗原特异性分析 被引量：3
5
作者 张应玖 金宁一 +3 位作者 王宏伟 黄薇 张东威 沈家骢 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期105-107,共3页
用ELISA方法分析由杆状病毒 昆虫细胞表达系统表达的HIV 2外膜蛋白gp1 0 5和跨膜蛋白gp36的反应原性和特异性 .结果表明 ,二者均具有很好的反应原性和抗原特异性 。
关键词 人体免疫缺陷病毒Ⅱ型 外膜蛋白gp105 跨膜蛋白gp36 反应原性 抗原特性 基因表达 杆状病毒
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采用抗体包被金磁纳米微粒修饰电极的HIV p24/gp36安培联检芯片 被引量：4
6
作者 干宁 李榕生 +2 位作者 陈亚东 杨欣 李天华 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期115-119,共5页
研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次... 研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次性加入含有p24和gp36样品及HRP酶标记的p24和gp36二级抗体溶液,与电极表面的一级抗体生成夹心免疫复合物;接着在体系中加入H2O2,以方波溶出伏安法检测免疫复合物上HRP催化H2O2的还原电流.在pH为6.2的磷酸缓冲液中,对HIV p24和gp36的检测时间均少于2 min,线性范围为0.5-400μg/L,检测限为0.25μg/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统,检测时间短,灵敏度明显高于传统的酶联免疫吸附分析法,可应用于对艾滋病的早期诊断和大范围筛查. 展开更多
关键词 金磁纳米修饰电极 方波溶出伏安法 微流控芯片 HIVp24 HIVgp36
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HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究 被引量：2
7
作者 袁作为 帅光泽 +2 位作者 张君 胡接力 郑建 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期2281-2285,共5页
目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQ... 目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体,诱导表达HIV抗原,为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增,分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQE30、pET32a（＋）及pGST-MOLUC,重组质粒经异丙基硫代半乳糖苷（isopro-pyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG）诱导表达,并经Ni-NAT或谷胱甘肽-Sepharose-4B层析柱亲和纯化HIV跨膜糖蛋白抗原,对获得的纯化抗原进行Western blot检测,利用HIV抗原制备ELISA检测试剂盒,并分析HIV临床样本。结果成功构建了HIV包膜蛋白的原核表达载体,利用亲和层析纯化得到了纯度较高的HIV包膜蛋白;Western blot分析结果证实表达纯化的HIV跨膜蛋白gp41（aa.538~718）、gp36（aa.533~764）以及gp41-gp36均能和HIV阳性血清反应;ELISA试剂盒检测临床样本显示,特异性达95%以上,灵敏度达100%。结论获得了有生物学活性的HIV截短包膜蛋白,并可用于HIV快速检测试剂盒的研发。 展开更多
关键词 HIV-1包膜蛋白gp41 HIV-2包膜蛋白gp36 重组 抗原性
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HIV-2跨膜蛋白gp36的截短及表达 被引量：1
8
作者 张涛 彭祥兵 +1 位作者 端义坤 余模松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期140-142,共3页
目的 将HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中表达。方法 用PCR将gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用 BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T3上,导入宿主细胞BL21(DE3),用... 目的 将HIV-2跨膜蛋白gp36进行截短,并在大肠杆菌中表达。方法 用PCR将gp36的编码基因进行截短,回收的PCR产物纯化后克隆到连接载体pGEM-T上,然后用 BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ切下目的基因,并构建到表达载体pGEX-4T3上,导入宿主细胞BL21(DE3),用IPTG诱导表达。结果 成功地对gp36进行了截短,并且构建到表达载体上进行表达。结论 截短的HIV-Ⅱ跨膜蛋白gp36能直接在大肠杆菌内进行表达,为跨膜蛋白的进一步应用打下基础。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒2型 跨膜蛋白 截短 基因表达
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