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基于质谱分析技术的科博肽中脱酰胺杂质测定方法研究 被引量：1
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作者 黄露 刘博 范慧红 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2352-2359,共8页
脱酰胺是蛋白多肽类药物中最为常见的降解杂质来源之一。蛋白序列中谷氨酰胺和天冬酰胺经脱酰胺降解后会导致蛋白化学与生物学性质的改变。质谱分析技术可用于定量蛋白及多肽中的脱酰胺杂质,然而传统的基于胰蛋白酶的bottom-up策略,酶... 脱酰胺是蛋白多肽类药物中最为常见的降解杂质来源之一。蛋白序列中谷氨酰胺和天冬酰胺经脱酰胺降解后会导致蛋白化学与生物学性质的改变。质谱分析技术可用于定量蛋白及多肽中的脱酰胺杂质,然而传统的基于胰蛋白酶的bottom-up策略,酶切过程中易人为引入脱酰胺,往往导致脱酰胺杂质的测定结果偏高。本研究通过对Glu-C酶酶解条件的优化,获得了在酸性条件下的最佳酶解条件,显著降低了酶切过程造成的人为引入脱酰胺的现象,鉴定了科博肽样品中的脱酰胺位点(N48)。并进一步通过方法学考察与不同方法的测定结果对比,验证了方法的专属性、重复性与准确性。本研究所建方法为科博肽及其相似蛋白多肽类生化药品中脱酰胺杂质的精准测定奠定了坚实的基础。 展开更多
关键词 科博肽 glu-c酶 脱酰胺 精准测定 生物质谱
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