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枳术通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠墨汁推进率、GDNF及NOS mRNA表达的影响 被引量：27
1
作者 范一宏 徐国萍 +1 位作者 冯雯 吕宾 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期486-489,共4页
目的研究枳术通便汤对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠肠神经系统、结肠神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)mRNA表达的影响。方法建立STC大... 目的研究枳术通便汤对慢传输型便秘(slow transit constipation,STC)大鼠肠神经系统、结肠神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)及一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)mRNA表达的影响。方法建立STC大鼠模型30只,随机分为模型组及中药高、低剂量组,每组10只,另选取10只大鼠作为空白对照组(空白组)。中药高、低剂量组分别予枳术通便汤[生药4.8g/(kg·d)、2.4g/(kg·d)]灌胃,空白组及模型组给予等量生理盐水灌胃。采用墨汁推进试验测定大鼠肠道墨汁推进率,采用RT-PCR法测定结肠GDNF及NOS mRNA表达,比较各组结果。结果与空白组比较,模型组墨汁推进率及GDNF mRNA表达降低,NOS mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,两个中药组墨汁推进率升高,中药高剂量组GDNF mRNA表达升高,NOS mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);中药两剂量组各指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高剂量枳术通便汤对STC大鼠肠道传输有明显改善作用,其作用机制可能是通过提高结肠GDNF mRNA表达,降低NOS mRNA的表达而促进肠道的动力。 展开更多
关键词 慢传输型便秘 枳术通便汤 墨汁推进率 结肠神经营养因子 一氧化氮合酶
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大鼠脊髓损伤后GDNFmRNA表达变化及意义 被引量：13
2
作者 宋海涛 贾连顺 +3 位作者 陈坚 陈哲宇 路长林 刘传云 《颈腰痛杂志》 2001年第2期107-110,共4页
目的　探讨 GDNFm RNA在大鼠脊髓损伤后表达变化及其意义。方法　改良 Allen’s脊髓撞击 (10 g× 7.5 cm)致伤大鼠 T1 段脊髓 ,以 β- Actin为内参照物 ,应用半定量 RT- PCR方法 ,观察大鼠脊髓损伤前及损伤后不同时间 GDNFm RNA表... 目的　探讨 GDNFm RNA在大鼠脊髓损伤后表达变化及其意义。方法　改良 Allen’s脊髓撞击 (10 g× 7.5 cm)致伤大鼠 T1 段脊髓 ,以 β- Actin为内参照物 ,应用半定量 RT- PCR方法 ,观察大鼠脊髓损伤前及损伤后不同时间 GDNFm RNA表达变化。结果　 GDNFm RNA在正常成年大鼠脊髓微量表达 ,脊髓损伤后 2 4h表达增加 5倍 ,72 h增加 2 0倍 ,7d增加 4倍 ,10 d仍高于正常水平。结论　脊髓损伤后早期 GDNFm RNA表达增加 ,是神经元自我保护作用的一种表现 ;损伤神经元修复需要大量 GDNF,应用 展开更多
关键词 脊髓 创伤 损伤 胶质细胞源性神经营养因子 基因表达
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解剖暴露喉返神经术在甲状腺叶切除术中的临床意义 被引量：14
3
作者 陈叶恒 范原铭 王强 《医学综述》 2016年第11期2271-2273,共3页
目的探讨解剖暴露喉返神经术在甲状腺叶切除术中的临床意义。方法将2010年3月至2013年3月重庆市长寿区人民医院收治的200例甲状腺病变患者依据随机数字表法分为对照组和观察组,各100例。对照组术中不暴露喉返神经,观察组术中解剖暴露喉... 目的探讨解剖暴露喉返神经术在甲状腺叶切除术中的临床意义。方法将2010年3月至2013年3月重庆市长寿区人民医院收治的200例甲状腺病变患者依据随机数字表法分为对照组和观察组,各100例。对照组术中不暴露喉返神经,观察组术中解剖暴露喉返神经,对两组患者进行为期6个月的随访。对比两组患者的首日引流量、术中出血量、手术时间、手术皮瓣的面积、甲状旁腺功能、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)水平。结果观察组甲状旁腺受损率低于对照组[0.0%(0/100)比5.0%(5/100)],观察组随访3个月和半年的喉返神经损伤率低于对照组[0.0%(0/100)比3.0%(3/100),8.0%(8/100)比12.0%(12/100)],差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后皮瓣面积、手术时间、术中出血量、住院时间、术后首日引流量均少于对照组[(123±11)cm2比(146±27)cm2,(64±7)min比(68±11)min,(8±3)m L比(56±13)m L,(8.4±1.3)d比(14.5±1.9)d,(130±5)m L比(180±7)m L],差异有统计学意义(P<0.01)。术前两组患者血清GDNF水平差异无统计学意义(P>0.05),术后出现喉返神经损伤患者GDNF水平下降,随访至3个月时观察组患者GDNF水平显著高于对照组(P<0.05),随访6个月后,观察组GDNF值基本恢复至术前水平,但对照组GDNF明显较低(P<0.05)。结论甲状腺术中解剖暴露喉返神经有利于保护喉返神经,GDNF可能成为甲状腺叶切除术后检测喉返神经功能的生物学指标,有望成为治疗喉返神经损伤的靶方向。 展开更多
关键词 甲状腺叶切除术 喉返神经 解剖暴露 胶质细胞源性神经营养因子
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石杉碱甲对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子的表达及氧化应激水平的影响 被引量：10
4
作者 刘忠锦 张海燕 +1 位作者 刘佳俊 刘子慧 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期43-46,50,共4页
目的探索石杉碱甲(huperzine A)对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的表达及氧化应激水平的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、石杉碱甲组,每组12只。模型组... 目的探索石杉碱甲(huperzine A)对血管性痴呆大鼠胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)的表达及氧化应激水平的影响。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、石杉碱甲组,每组12只。模型组和石杉碱甲组采用大脑中动脉永久性缺血模型,造模后7 d石杉碱甲组开始给药,0.1 mg/(kg·d),每天1次,连续灌胃给药30 d,正常对照组和模型组给予等容量蒸馏水。观察各组动物行为学变化、检测脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)、一氧化氮(nitric oxide,NO)含量;观察脑组织病理形态学变化;原位杂交法检测GDNF mRNA的含量。结果石杉碱甲可以缩短模型大鼠学习反应时间,延长记忆时间,减少错误次数(P<0.05);增强大鼠脑组织中SOD活性,降低胆碱酯酶活性,MDA和NO含量减少(P<0.05);形态学观察结果显示:石杉碱甲对血管痴呆大鼠海马区神经元有一定的改善作用;与模型组比较,石杉碱甲组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论石杉碱甲可显著改善血管性痴呆大鼠的学习记忆障碍,其机制可能与石杉碱甲能增强脑组织SOD活性,降低胆碱酯酶活性,减少MDA和NO含量,从而提高了脑组织的抗氧化水平,发挥其神经保护作用有关。 展开更多
关键词 石杉碱甲 血管性痴呆 胶质细胞源性神经营养因子
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GDNF基因体内转染对大鼠脊髓损伤后轴突再生的影响 被引量：8
5
作者 鲁凯伍 陈哲宇 +4 位作者 曹莉 侯铁胜 傅强 李明 路长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期648-650,F003,共4页
目的 :研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达 ,观察外源性 GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用。方法 :利用 Nystrom法制备大鼠胸髓压迫损伤模型。以直接注射法将脂质体 DC- Chol和重组质粒p EGFP- ... 目的 :研究脂质体介导的胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)基因在大鼠损伤脊髓内的表达 ,观察外源性 GDNF对损伤脊髓轴突再生的作用。方法 :利用 Nystrom法制备大鼠胸髓压迫损伤模型。以直接注射法将脂质体 DC- Chol和重组质粒p EGFP- GDNF c DNA混合后注入大鼠损伤脊髓。采用 RT- PCR技术和荧光显微镜检测 GDNF基因转染后的体内表达 ,并通过辣根过氧化酶 (HRP)顺行追踪技术和神经微丝 (NF)、胶质原纤维酸性蛋白 (GFAP)免疫组化活性的变化来评价 GDNF基因转染对轴突再生的影响。结果 :经脂质体 DC- Chol介导 GDNF基因可有效地转染脊髓组织并得到表达。GDNF转基因 4周后可明显增加 NF阳性轴突数目 ,促进皮质脊髓束再生并通过损伤区。结论 :外源性 GDNF在损伤区局部高表达具有神经损伤保护作用 ,提示阳离子脂质体介导 GDNF体内转基因治疗创伤性脊髓损伤的方法是可行的。 展开更多
关键词 脊髓损伤 胶质细胞源性 神经营养因子 脂质体 基因治疗法 神经再生 SCI
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复方地黄对老年痴呆大鼠学习记忆及海马GDNF mRNA表达的影响 被引量：9
6
作者 张海燕 刘忠锦 +1 位作者 廉洁 孙丽慧 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第10期280-283,共4页
目的:探讨复方地黄对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马GDNF mRNA表达的影响。方法:通过Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分出正常组10只(常规饮水和饲料,不给予任何处理),其余3组大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)致A... 目的:探讨复方地黄对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠海马GDNF mRNA表达的影响。方法:通过Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分出正常组10只(常规饮水和饲料,不给予任何处理),其余3组大鼠均采用链脲佐菌素(STZ)致AD模型,模型组10只造模后不进行治疗。造模后第6天开始治疗,安理申组(0.4 g.kg-1.d-1)和复方地黄组(含生药10 g.kg-1.d-1),每组10只,疗程4周。用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,用原位杂交法和RT-PCR检测大鼠海马胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)GDNF mRNA的表达。结果:模型组大鼠学习能力比正常组降低(P<0.05),复方地黄大鼠上述变化明显改善,与模型组差异显著(P<0.05)。与正常组大鼠比较,模型组大鼠海马GDNF mRNA表达降低明显(P<0.05);与模型组比较,复方地黄组大鼠海马GDNF mRNA表达明显增加(P<0.05)。结论:复方地黄可能通过增强AD大鼠海马GDNF mRNA表达而起到对神经保护作用。 展开更多
关键词 复方地黄 阿尔茨海默病大鼠 胶质细胞源性神经营养因子
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注意缺陷多动障碍模型大鼠脑内BDNF和GDNF的表达 被引量：7
7
作者 唐彦 王渝评 景晓玉 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1063-1067,共5页
目的观察注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型大鼠前额叶皮质、海马和纹状体脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neuro... 目的观察注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)模型大鼠前额叶皮质、海马和纹状体脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)的蛋白和mRNA表达水平的变化,探讨BDNF、GDNF与ADHD之间的关系。方法以幼年自发性高血压大鼠(spontsneously hyoertensive rat,SHR)大鼠为ADHD模型组、Wistar京都大鼠(wistar kyoto,WKY)为对照组,采用Westernblot和RT-PCR法分别检测大鼠前额叶皮质、海马和纹状体BDNF和GDNF的蛋白和mRNA表达水平。结果SHR大鼠前额叶皮质、海马和纹状体BDNF及GDNF蛋白表达分别为[前额叶皮质:(0.561±0.095),(0.507±0.155);海马:(0.606±0.054),(0.457±0.198);纹状体:(0.558±0.191),(0.554±0.267)],WKY大鼠以上脑区BDNF和GDNF蛋白表达分别为[前额叶皮质:(0.855±0.211),(0.891±0.244);海马:(0.827±0.163),(0.898±0.207);纹状体:(0.998±0.220),(0.955±0.146)],SHR大鼠前额叶皮质、海马和纹状体BDNFmRNA及GDNFmRNA表达分别为[前额叶皮质:(0.636±0.141),(0.544±0.161);海马:(0.996±0.196),(0.563±0.302);纹状体:(0.664±0.145),(0.689±0.049)],WKY大鼠以上脑区BDNFmRNA和GDNFmRNA表达分别为[前额叶皮质:(0.861±0.232),(0.840±0.124);海马:(1.372±0.423),(1.180±0.441);纹状体:(1.107±0.185),(0.950±0.247)]。SHR大鼠前额叶皮层、海马和纹状体BDNF和GDNF的蛋白和mRNA表达水平均显著低于WKY大鼠(均P<0.05)。结论BDNF、GDNF在SHR大鼠前额叶皮层、海马和纹状体的低表达可能与ADHD的病理生理有关。 展开更多
关键词 注意缺陷多动障碍 幼年自发性高血压大鼠 脑源性神经营养因子 胶质细胞源性神经营养因子
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胶质细胞系源性神经营养因子/胶质细胞系源性神经营养因子受体信号通路在乳鼠先天性巨结肠相关性小肠结肠炎中的作用实验研究 被引量：1
8
作者 牛志新 何峰 +1 位作者 宋春光 肖玉清 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第1期19-22,共4页
目的:探讨胶质细胞系源性神经营养因子/胶质细胞系源性神经营养因子受体(GDNF/GFRα1)通路在乳鼠先天性巨结肠(HD)相关性小肠结肠炎(HAEC)中的作用研究。方法:21日龄内皮素受体(Ednrb)基因敲除乳鼠为HD模型组(实验组),同日龄野生型乳鼠... 目的:探讨胶质细胞系源性神经营养因子/胶质细胞系源性神经营养因子受体(GDNF/GFRα1)通路在乳鼠先天性巨结肠(HD)相关性小肠结肠炎(HAEC)中的作用研究。方法:21日龄内皮素受体(Ednrb)基因敲除乳鼠为HD模型组(实验组),同日龄野生型乳鼠为对照组,8只/组。取结肠组织,按照形态将实验组乳鼠结肠组织分为狭窄段、扩张段,对照组乳鼠结肠组织分为远段、近段。采用苏木精-伊红(HE)染色法评判两组肠管炎症程度;酶联免疫吸附法(ELISA)法检测两组结肠组织白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫印迹法(WB)分别检测GDNF/GFRα1信号通路相关基因[GDNF、GFRα1、酪氨酸酶受体(RET)、核转录因子kappaBp65(NF-κBp65)、TNF-α]蛋白水平。结果:HE染色结果显示HAEC主要发生在结肠扩张段;ELISA法结果显示,与实验组乳鼠狭窄段肠管比较,扩张段肠管IL-10水平显著降低、TNF-α水平显著升高(均P<0.05);WB法结果显示,与实验组乳鼠狭窄段肠管比较,扩张段肠管GDNF、GFRα1、RET蛋白水平显著降低,NF-κBp65、TNF-α蛋白水平显著升高(均P<0.05)。结论:HD模型乳鼠结肠扩张段炎症程度较为严重,机制可能与GDNF/GFRα1信号通路受抑制,肠神经免疫调节系统异常有关。 展开更多
关键词 胶质细胞系源性神经营养因子 胶质细胞系源性神经营养因子受体通路 先天性巨结肠 相关性小肠结肠炎 肿瘤坏死因子-α 核转录因子κBp65
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羧甲基壳聚糖对氧化应激诱导雪旺细胞凋亡及BDNF与GDNF表达的影响 被引量：6
9
作者 贺斌 陶海鹰 刘世清 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1530-1535,共6页
目的研究羧甲基壳聚糖（carboxymethylated chitosan,CMCS）对氧化应激诱导大鼠雪旺细胞（Schwann cells,SCs）凋亡的保护作用及对SCs内脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）和胶质细胞源性神经营养因子（glia... 目的研究羧甲基壳聚糖（carboxymethylated chitosan,CMCS）对氧化应激诱导大鼠雪旺细胞（Schwann cells,SCs）凋亡的保护作用及对SCs内脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）和胶质细胞源性神经营养因子（glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF）表达的影响。方法取24只3-5日龄SD大鼠（体重25-30 g,雌雄不限）双侧坐骨神经,体外分离培养SCs,S-100免疫荧光染色鉴定。于SCs培养基中加入0.01、0.10、1.00 mmol/L H2O2溶液进行诱导,作用3、6、12、24 h后采用CCK-8检测细胞增殖以及流式细胞术检测细胞凋亡,筛选H2O2诱导氧化应激SCs凋亡模型的最佳作用浓度及时间。取第2代SCs,根据不同处理方法分成5组：空白对照组（PBS处理）、1.00 mmol/L H2O2诱导组、1.00 mmol/L H2O2＋50μg/m L CMCS处理组、1.00 mmol/L H2O2＋100μg/m L CMCS处理组、1.00 mmol/L H2O2＋200μg/m L CMCS处理组。培养24 h后,采用CCK-8检测SCs增殖,流式细胞术检测SCs早期凋亡,实时定量PCR及Western blot检测SCs内BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达。结果分离培养的细胞经S-100免疫荧光染色鉴定阳性率达95%以上。CCK-8及流式细胞术检测示,H2O2可明显抑制SCs增殖并诱发早期凋亡,且呈浓度依赖性,1.00 mmol/L H2O2溶液作用24 h效果最明显,为模型制备最佳作用浓度及时间。当加入50-200μg/m L CMCS后,SCs增殖活性增加、细胞凋亡率降低,且随CMCS浓度增加上述效应增强。实时定量PCR及Western blot检测示,与空白对照组比较,1.00 mmol/L H2O2诱导组BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达明显降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;加入50、100、200μg/m L CMCS作用后,随CMCS浓度增加,BDNF、GDNF m RNA及蛋白表达逐渐增加,与空白对照组及1.00 mmol/L H2O2诱导组比较以及各CMCS处理组间比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 CMCS对氧化应激诱导大鼠SCs凋亡具有保护作用,并促进凋亡SCs分泌BDNF与GDNF。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 雪旺细胞 氧化损伤 细胞凋亡 脑源性神经营养因子 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠
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人脐带血间充质干细胞和神经干细胞移植对帕金森模型大鼠神经营养作用的比较 被引量：5
10
作者 张君 李娜 +7 位作者 刘俊骞 张永志 董慈 王文婷 张帆 刘惠苗 周靖 顾平 《解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期692-697,共6页
目的:比较人脐带血间充质干细胞(hUCB-MSCs)和中脑神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病大鼠的神经营养作用。方法:6-羟基多巴胺所致偏侧帕金森病SD大鼠模型随机分为3组,分别为中脑NSCs组、hUCB-MSCs组、生理盐水组。造模成功后3周,将磷酸... 目的:比较人脐带血间充质干细胞(hUCB-MSCs)和中脑神经干细胞(NSCs)移植治疗帕金森病大鼠的神经营养作用。方法:6-羟基多巴胺所致偏侧帕金森病SD大鼠模型随机分为3组,分别为中脑NSCs组、hUCB-MSCs组、生理盐水组。造模成功后3周,将磷酸缓冲液(PBS)和溴尿嘧啶(BrdU)标记的NSCs及hUCB-MSCs立体定向注入模型鼠右侧纹状体,检测大鼠旋转行为。在移植后8周对3组大鼠进行Morris水迷宫实验,并对大鼠脑纹状体区进行免疫组织化学显色检测纹状体移植区脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化。结果:移植4、8周后,NSCs组、hUCB-MSCs组大鼠的旋转次数比生理盐水组均减少。移植8周后,水迷宫实验显示NSCs组和hUCB-MSCs组第1~5天平均潜伏期均短于生理盐水组,NSCs组、hUCB-MSCs组穿越平台次数均高于生理盐水组。但在大鼠旋转次数和水迷宫实验中,NSCs组和hUCB-MSCs组之间均无统计学差异。移植治疗8周后,纹状体移植区NSCs组、hUCB-MSCs组的BDNF和GDNF表达较生理盐水组显著增多;hUCB-MSCs组的BDNF和GDNF表达较NSCs组增多更明显。结论:NSCs、BMSCs的移植明显增加帕金森病大鼠纹状体移植区BDNF、GDNF的表达水平,并改善大鼠运动及认知功能;hUCB-MSCs移植在纹状体移植区BDNF、GDNF表达水平多于NSCs移植组,hUCB-MSCs神经营养效应可能更强,更适合应用于临床治疗。 展开更多
关键词 神经干细胞 人脐带血间充质干细胞 移植 帕金森病 胶质细胞源性神经营养因子 脑源性神经营养因子
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胶质细胞源性神经营养因子对大鼠脊髓损伤后前角神经元的保护作用 被引量：5
11
作者 鲁凯伍 陈哲宇 +3 位作者 侯铁胜 傅强 曹莉 金大地 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期225-228,共4页
目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ... 目的　研究胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF)对大鼠脊髓损伤后前角运动神经元的保护作用。　方法　雄性SD大鼠 4 5只随机分为等渗盐水组、GDNF组、神经生长因子 (NGF)组 ,每组 15只 ,采用改良Nystr¨om法后路压迫大鼠胸段脊髓模型 ,经蛛网膜下腔局部注射GDNF(1μg μl,10 μg d) 1周。伤后 1,2 ,4周应用尼氏染色、酶组织化学染色方法观察前角运动神经元存活数目及胆碱酯酶 (CHE)和酸性磷酸酶 (ACP)的变化。　结果　脊髓损伤后第 1,2周 ,GDNF组前角运动神经元存活数目 [(2 1.4± 3.8,2 0 .7± 3.6 )个 前角视野 ]明显多于等渗盐水对照组的 (17.3± 2 .8,16 .5± 3.0 )个 前角视野 (P <0 .0 1) ;GDNF组前角运动神经元中CHE灰度值 (6 5 .2± 2 3.8,98.7±31.6 )低于等渗盐水组 (94 .5± 35 .2 ,12 5 .6± 4 1.6 ) (P <0 .0 1) ;ACP灰度值 (74 .2± 2 5 .7,6 8.6±30 .6 )高于等渗盐水组 (5 8.5± 18.2 ,4 9.6± 2 1.6 ) (P <0 .0 1)。　结论　外源性GDNF能保护脊髓不完全性损伤后引起的运动神经元损害。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 大鼠 脊髓损伤 前角神经元 保护作用
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过表达胶质细胞神经营养因子基因转染骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤 被引量：5
12
作者 黄成 刘元兵 +3 位作者 戴永平 王亮亮 崔益华 杨建东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第7期1037-1045,共9页
背景:胶质细胞神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)在诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外定向分化及促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复过程中起到重要作用。目的:观察过表达G... 背景:胶质细胞神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)在诱导骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)体外定向分化及促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复过程中起到重要作用。目的:观察过表达GDNF基因的BMSCs分化情况及其促进脊髓损伤大鼠神经功能恢复的潜在分子机制。方法:①以重组目的基因腺病毒转染BMSCs并分为Ad-GDNF-GFP转染组、Ad-GFP转染组、未转染组,免疫荧光鉴定各组细胞神经元特异性烯醇化酶及微管相关蛋白2的表达,Western blot检测各组细胞GDNF、Wnt3a、Wnt7a蛋白表达。②以改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型,将造模成功的45只SD大鼠随机分为3组,分别以过表达GDNF基因BMSCs(GDNF-BMSCs)、BMSCs、PBS移植至脊髓损伤局部。移植后4周采用BBB评分法评估大鼠运动功能恢复情况,苏木精-伊红染色观察脊髓形态变化,免疫组化检测损伤局部神经元特异性烯醇化酶、突触素Ⅰ及胶质纤维酸性蛋白表达,Western blot检测损伤局部Bcl-2、肿瘤坏死因子α蛋白表达。结果与结论:①Ad-GDNF-GFP转染组BMSCs可向神经元样细胞形态转变并表达神经元特异性烯醇化酶、微管相关蛋白2;Wnt3a、Wnt7a蛋白表达量显著高于Ad-GFP转染组、未转染组;②移植后4周,GDNF-BMSCs移植组大鼠BBB评分明显提高、脊髓空洞面积显著缩小。GDNF-BMSCs移植组脊髓损伤局部胶质纤维酸性蛋白、肿瘤坏死因子α表达量显著低于BMSCs移植组及PBS移植组,而神经元特异性烯醇化酶、突触素Ⅰ及Bcl-2表达量显著高于BMSCs移植组、PBS移植组;③结果表明,Wnt信号通路参与过表达GDNF基因BMSCs向成熟神经元分化过程,移植后通过降低脊髓损伤局部炎症反应、减少细胞凋亡及胶质瘢痕形成、促进轴突再生,提高BMSCs移植治疗脊髓损伤的疗效。 展开更多
关键词 胶质细胞源性神经营养因子 骨髓间充质干细胞 细胞分化 WNT信号通路 脊髓损伤
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大鼠坐骨神经切断后GDNF mRNA在其向心端及脊髓表达的变化 被引量：3
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作者 宋海涛 贾连顺 +3 位作者 陈哲宇 陈坚 刘传云 路长林 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期602-604,共3页
目的 :探讨大鼠坐骨神经切断后胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF) m RNA在其向心端及脊髓表达的变化及其意义。 方法 :在切断 SD大鼠双侧坐骨神经后的不同时间采用半定量 RT- PCR方法 ,观察坐骨神经向心端及 T1 2 ～ L1 段脊髓GDNF m RN... 目的 :探讨大鼠坐骨神经切断后胶质细胞源性神经营养因子 (GDNF) m RNA在其向心端及脊髓表达的变化及其意义。 方法 :在切断 SD大鼠双侧坐骨神经后的不同时间采用半定量 RT- PCR方法 ,观察坐骨神经向心端及 T1 2 ～ L1 段脊髓GDNF m RNA表达的变化。 结果 :坐骨神经切断前 ,GDNF m RNA在坐骨神经及 T1 2 ～ L1 段脊髓微量表达 ,切断后其向心端及 T1 2 ～ L1 段脊髓表达逐渐减少 ,伤后 1、7、14、2 8d分别减少 10 %、38%、4 5 %、5 2 %及 2 0 %、6 8%、80 %、85 %。 结论 :坐骨神经切断后其向心端及 T1 2 ～ L1 脊髓 GDNF m RNA表达减少 ,推测是由于失去靶组织转运 GDNF m RNA所造成 ,为外源性GDNF应用于治疗脊髓损伤提供了实验依据。 展开更多
关键词 大鼠 GDNF MRNA 向心端 胶质细胞源性神经营养因子 坐骨神经切断术 脊髓损伤 运动神经元 基因表达
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鹿茸多肽联合GDNF基因修饰的雪旺细胞对Aβ_(25-35)诱导脊髓神经元凋亡的保护作用 被引量：5
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作者 张鹏程 冷向阳 +3 位作者 路博丞 张远超 王英 王旭凯 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1190-1193,共4页
目的:探讨鹿茸多肽(VAP)联合胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的雪旺细胞(SCs)对β淀粉样蛋白_(25-35) (Aβ_(25-35))诱导的脊髓神经元凋亡的保护作用,阐明其作用机制。方法:制备胎鼠脊髓细胞,取对数生长期的脊髓神经元,采用Aβ_... 目的:探讨鹿茸多肽(VAP)联合胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因修饰的雪旺细胞(SCs)对β淀粉样蛋白_(25-35) (Aβ_(25-35))诱导的脊髓神经元凋亡的保护作用,阐明其作用机制。方法:制备胎鼠脊髓细胞,取对数生长期的脊髓神经元,采用Aβ_(25-35)诱导脊髓神经元凋亡,将脊髓神经元分为正常细胞组(正常脊髓神经元)、诱导凋亡组(Aβ_(25-35)诱导凋亡后的脊髓神经元)、SCs组(Aβ_(25-35)诱导凋亡后的脊髓神经元+SCs)、GDNF组(Aβ_(25-35)诱导凋亡后的脊髓神经元+GDNF)、SCs+GDNF组(Aβ_(25-35)诱导凋亡后的脊髓神经元+GDNF转染的SCs)和VAP联合组(Aβ_(25-35)诱导凋亡后的脊髓神经元+VAP联合GDNF转染的SCs)。流式细胞术检测各组脊髓神经元凋亡率,免疫组织化学染色检测各组脊髓神经元中caspase-3阳性细胞数。结果:胎鼠脊髓神经元悬液接种后初始脊髓神经元大多为圆形。流式细胞术检测,与诱导凋亡组比较,SCs组、GDNF组、SCs+GDNF组和VAP联合组脊髓神经元凋亡率降低(P<0.05);与SCs+GDNF组比较,VAP联合组脊髓神经元凋亡率明显降低(P<0.05)。免疫组织化学检测,各组脊髓神经元中均有caspase-3表达,SCs组、GDNF组和SCs+GDNF组细胞着色差异不明显,脊髓神经元中caspase-3阳性细胞数差异不大,但与诱导凋亡组比较明显减少(P<0.05)。结论:VAP联合GDNF转染的SCs对脊髓神经元凋亡有保护作用,该作用通过下调脊髓神经元中caspase-3表达来实现。 展开更多
关键词 鹿茸多肽 胶质细胞源性神经营养因子 雪旺细胞 脊髓神经元
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胶质细胞源性神经营养因子对股骨头缺血坏死的保护作用 被引量：4
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作者 喻钧伦 唐曦 +3 位作者 肖文 黄雨 罗天友 吴少平 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期701-706,共6页
目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的保护作用。方法采用改良技术建立早期激素性股骨头坏... 目的探究胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)对早期激素性股骨头坏死(steroid-induced avascular necrosis of the femoral head,SANFH)的保护作用。方法采用改良技术建立早期激素性股骨头坏死兔模型,随机分成实验组(n=12)和对照组(n=12)。实验组给予髋周臀大肌注射GDNF(8.0μg/只),对照组相同部位注射等体积生理盐水,干预1周。分别于第5、10、15、20天进行股骨头多排螺旋CT、显微CT及苏木素-伊红(H&E)染色检测。结果影像学观察示,GDNF注射后第15天开始,实验组股骨头骨小梁逐渐丰富、密集,间距变窄,骨皮质厚度及密度增加;对照组股骨头骨小梁分布稀疏,间距增宽,部分断裂,骨质密度减低。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨矿物质密度、组织骨矿物质密度及骨体积分数,比较差异具有统计学意义(P<0.05)。组织学观察示,实验组股骨头内骨小梁粗大,骨细胞分布广泛,细胞核着色深,脂肪细胞分布较少;对照组骨小梁分布稀疏,形态不完整,部分断裂,骨细胞空陷窝和脂肪细胞增多,骨细胞和造血细胞减少。第15、20天,实验组与对照组股骨头骨细胞空陷窝率分别为:13.3±3.2%、10.6±2.4%和71.0±7.5%、78.6±5.3%,两组比较,实验组骨细胞空陷窝率显著减低(P<0.05)。结论 GDNF可通过抑制骨细胞坏死,保持骨小梁的完整性。 展开更多
关键词 激素性股骨头坏死 胶质细胞源性神经营养因子 显微CT 骨密度
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重组胶质细胞源性神经营养因子腺病毒保护小鼠中脑多巴胺能神经元 被引量：1
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作者 高红 王建军 +3 位作者 张蔚 蒋玉辉 牛东滨 王晓民 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期256-260,共5页
目的 :观察携带大鼠来源的胶质细胞源性神经营养因子 (rGDNF)的重组腺病毒在小鼠帕金森模型中有无保护中脑多巴胺 (DA)能神经元对抗神经毒素甲基 苯基 四氢吡啶 (MPTP)损伤的作用。方法 :将LacZ重组腺病毒 (Ad LacZ)通过脑立体定位仪... 目的 :观察携带大鼠来源的胶质细胞源性神经营养因子 (rGDNF)的重组腺病毒在小鼠帕金森模型中有无保护中脑多巴胺 (DA)能神经元对抗神经毒素甲基 苯基 四氢吡啶 (MPTP)损伤的作用。方法 :将LacZ重组腺病毒 (Ad LacZ)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体 ,分别于注射后 2 4h、72h、10d和 30d灌流取脑做X Gal染色 ,观察报告基因在小鼠脑内的表达情况 ;将rGDNF重组腺病毒 (Ad rGDNF)通过脑立体定位仪注入小鼠单侧纹状体。两者均于 72h后给予MPTP损伤中脑DA能神经元 ,1周后用高压液相色谱分析纹状体中DA、3,4 二羟基苯乙酸 (DOPAC)和高香草酸 (HVA)的含量。结果 :Ad LacZ注射后 2 4h表达较弱 ,72h逐渐增强 ,10d仍可见到较强表达 ,30d则逐渐减弱。LacZ基因的表达范围比较局限 ,胶质细胞和神经元都能被感染 ,并且未见明显的腺病毒载体引起的细胞毒性作用。注射Ad rGDNF侧纹状体DA含量较MPTP损伤组和MPTP +Ad LacZ组显著升高 ,而未注射侧无明显升高。此外 ,DA主要代谢产物DOPAC和HVA的含量也明显升高 ,而DOPAC/DA、HVA/DA比值则明显降低。结论 :Ad rGDNF能显著保护中脑DA能神经元对抗MPTP的损伤。 展开更多
关键词 帕金森病 胶质细胞源性神经营养因子 重组腺病毒 多巴胺 甲基-苯基-四氢吡啶 动物实验
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GDNF基因修饰的NSCs移植对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用研究 被引量：4
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作者 刘芳 毛志蓉 +3 位作者 邓莉 陈波 袁琼兰 高小青 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第4期408-413,共6页
目的探讨移植胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)基因修饰的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护。方法用GDNF重组腺病毒载体转染新生大鼠NSCs(GDNF/NSCs)... 目的探讨移植胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line derived neurotrophic factor,GDNF)基因修饰的神经干细胞(neural stem cells,NSCs)对暂时性缺血性脑卒中大鼠的神经保护。方法用GDNF重组腺病毒载体转染新生大鼠NSCs(GDNF/NSCs),分化培养7 d后,行免疫细胞化学染色检测微管相关蛋白2(MAP2)。采用改良的插线法制作暂时性脑缺血再灌注模型,3 d后经脑室分别移植生理盐水、NSCs和GDNF/NSCs。于再灌注后1、2、3、5、7周末处死大鼠,行免疫组织化学染色观察移植细胞在脑内的神经元分化及星形胶质细胞在缺血区形成胶质界膜情况,行Luxol fast blue(LFB)染色显示神经纤维损伤情况。结果GDNF/NSCs体外分化为MAP2^+细胞的比例显著高于NSCs的分化。移植细胞在脑内分化为MAP2^+细胞,于再灌注第5周分化达高峰,GDNF/NSCs组于再灌注第3~7周,其MAP2^+细胞显著高于NSCs组。各组缺血区由星形胶质细胞形成的血管胶质界膜存在不同程度的破坏,其连续性中断。对照组在各个时间点,血管胶质界膜损伤严重,完整性差,两细胞移植组,其胶质界膜随时间延长逐渐完整,GDNF/NSCs组早于NSCs组完善对胶质界膜的修复。此外,GDNF/NSCs组的神经纤维损伤修复优于NSCs组。结论GDNF/NSCs比NSCs对暂时性缺血性脑卒中大鼠模型有更好的神经保护作用,可能是与GDNF提高了NSCs在脑内的神经元分化,增强了NSCs对胶质界膜及神经纤维修复有关。 展开更多
关键词 神经干细胞 基因治疗 胶质细胞源性神经营养因子 脑卒中 胶质界膜
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大鼠GDNF基因的克隆表达及对PC12工程细胞的影响 被引量：3
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作者 王丽梅 魏传垠 +4 位作者 陈雪红 张磬 陈哲宇 丁达夫 路长林 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2003年第3期263-268,共6页
克隆与表达大鼠胶质细胞源性神经营养因子 (glialcellline derivedneurotrophicfactor,GDNF)并观察其对PC12工程细胞的影响。从新生 4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA ,通过RT PCR方法 ,扩增出GDNFcDNA。构建表达质粒pET GDNF ,转化大肠... 克隆与表达大鼠胶质细胞源性神经营养因子 (glialcellline derivedneurotrophicfactor,GDNF)并观察其对PC12工程细胞的影响。从新生 4天的SD大鼠海马组织中提取总RNA ,通过RT PCR方法 ,扩增出GDNFcDNA。构建表达质粒pET GDNF ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,IPTG诱导GDNF表达并在Ni2 + NTA柱上用一步复性法纯化和复性。把PCDNA3 0 GFRα1和pcDNA3 0 RET质粒双转染入PC12细胞 ,G4 18筛选稳定克隆 ,构建PC12工程细胞。用GDNF刺激工程细胞 ,3天后观察其存活和分化。大鼠GDNFcDNA的克隆与表达获得成功 ,纯化和复性的重组GDNF蛋白可显著增强PC12 GFRα1 RET工程细胞的存活和分化。初步明确GDNF诱导PC12工程细胞存活和分化是通过RET 依赖途径。 展开更多
关键词 大鼠 GDNF基因 胶质细胞源 神经营养因子 PC12工程细胞 影响 基因表达 反转录—聚合酶链反应
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静脉移植骨髓间充质干细胞促进脊髓损伤后GDNF基因的表达 被引量：3
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作者 李国良 陈俊 杨松巍 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期284-286,共3页
[目的]探讨经静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。[方法]MSCs提取自成年Wistar大鼠的股骨干骨髓,经原代培养、鉴定及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)核标记。以改良Allen′s打击... [目的]探讨经静脉移植骨髓间充质干细胞(MSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)后胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的影响。[方法]MSCs提取自成年Wistar大鼠的股骨干骨髓,经原代培养、鉴定及5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)核标记。以改良Allen′s打击装置制作大鼠T10节段脊髓损伤(SCl)模型,于伤后立即缝合切口并经尾静脉注射移植MSCs。实验共分为3组MSCs尾静脉移植组(A组)、生理盐水注射组(B组)、正常对照组(C组)。术后不同时间点应用免疫组化法和逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)观察MSCs移植后的存活状态以及不同时间点GDNF基因的表达变化。[结果]免疫组化结果MSCs经尾静脉移植后在损伤脊髓平面可以检测到迁移及存活,标记细胞呈棕黄色的核标记,以损伤区域为多并向周围迁移,移植术后第14d,A组Brdu阳性细胞较多,最远于距离损伤区2.5cm处可检测到。B及C组则均未检测到阳性细胞。RT-PCR结果移植术后第1、3、5d,A组表达量呈逐渐升高趋势,B组呈一过性表达升高,C组无变化。各时间点A组GDNFmRNA的表达量明显高于B组,P<0.05。免疫组化结果移植术后第7、14、28dGDNF的表达量明显高于B组,P<0.05。[结论]骨髓间充质干细胞经尾静脉移植后可迁移至脊髓损伤区域,并上调胶质细胞源性神经营养因子基因的表达,是该移植方式修复大鼠脊髓损伤的机制之一。 展开更多
关键词 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 胶质细胞源性神经营养因子
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舒肝解郁胶囊联合齐拉西酮治疗精神分裂症临床研究 被引量：2
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作者 尹秋静 田晓满 《新中医》 CAS 2022年第10期87-91,共5页
目的:观察舒肝解郁胶囊联合齐拉西酮治疗精神分裂症的临床疗效,以及对患者认知功能及血管内皮生长因子(VEGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、表皮生长因子(EGF)水平的影响。方法:选取80例精神分裂症患者,按照随机数字表法分为对照... 目的:观察舒肝解郁胶囊联合齐拉西酮治疗精神分裂症的临床疗效,以及对患者认知功能及血管内皮生长因子(VEGF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、表皮生长因子(EGF)水平的影响。方法:选取80例精神分裂症患者,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组40例。对照组给予齐拉西酮治疗,观察组在对照组基础上加服舒肝解郁胶囊治疗,2组均治疗8周。比较2组临床疗效、不良反应发生率;比较2组治疗前后认知功能及VEGF、GDNF、EGF水平。结果:观察组总有效率95.00%,高于对照组77.50%(P<0.05)。治疗后,2组阴性症状、阳性症状、一般精神病理症状评分及总分均较治疗前降低(P<0.05),观察组阴性症状、阳性症状、一般精神病理症状评分及总分均低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组认知功能成套测验系统(MCCB)各维度评分均较治疗前升高(P<0.05),观察组MCCB各维度评分均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组VEGF、GDNF水平均较治疗前升高(P<0.05),EGF水平均较治疗前降低(P<0.05);观察组VEGF、GDNF水平均高于对照组(P<0.05),EGF水平低于对照组(P<0.05)。观察组不良反应发生率15.00%,与对照组12.50%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舒肝解郁胶囊联合齐拉西酮治疗精神分裂症可提高临床疗效,改善患者的认知功能,调节VEGF、GDNF、EGF水平,安全性较好。 展开更多
关键词 精神分裂症 舒肝解郁胶囊 齐拉西酮 认知功能 血管内皮生长因子 胶质细胞源性神经营养因子 表皮生长因子 不良反应
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