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靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定
被引量:
5
1
作者
黄锦
林菊生
+1 位作者
常莹
周秀敏
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期86-88,共3页
目的构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体。方法根据PEG10基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入H1启动子下游,克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。结果酶切鉴定及DNA测...
目的构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体。方法根据PEG10基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入H1启动子下游,克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。结果酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。结论本研究成功构建针对PEG10的真核表达载体,可能成为肝癌基因治疗中的一种新型、高效的治疗载体。
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关键词
遗传印记基因
PEG10
SIRNA
真核表达载体
鉴定
下载PDF
职称材料
肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定
被引量:
1
2
作者
刘瑶
林菊生
+4 位作者
熊杰
谭锦泉
张强
常莹
任精华
《胃肠病学和肝病学杂志》
CAS
2008年第12期982-986,共5页
目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基...
目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结果酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的L02表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆。结论重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。
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关键词
遗传印记基因
PEG10
白蛋白启动子
转基因载体
鉴定
下载PDF
职称材料
题名
靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定
被引量:
5
1
作者
黄锦
林菊生
常莹
周秀敏
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所
出处
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期86-88,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30471983)
文摘
目的构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体。方法根据PEG10基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入H1启动子下游,克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。结果酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。结论本研究成功构建针对PEG10的真核表达载体,可能成为肝癌基因治疗中的一种新型、高效的治疗载体。
关键词
遗传印记基因
PEG10
SIRNA
真核表达载体
鉴定
Keywords
genetic
imprinted
gene
PEG10
siRNA
Eukaryotic
expression
vector
Identification
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
R73-354 [医药卫生—临床医学]
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职称材料
题名
肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定
被引量:
1
2
作者
刘瑶
林菊生
熊杰
谭锦泉
张强
常莹
任精华
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所
武汉大学基础医学院免疫学系
华中科技大学同济医学院附属协和医院肿瘤中心
出处
《胃肠病学和肝病学杂志》
CAS
2008年第12期982-986,共5页
文摘
目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结果酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的L02表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆。结论重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。
关键词
遗传印记基因
PEG10
白蛋白启动子
转基因载体
鉴定
Keywords
genetic
imprinted
gene
PEG10
Albumin
promoter
Transgenic
vector
Identification
分类号
R735.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定
黄锦
林菊生
常莹
周秀敏
《肿瘤防治研究》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
下载PDF
职称材料
2
肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定
刘瑶
林菊生
熊杰
谭锦泉
张强
常莹
任精华
《胃肠病学和肝病学杂志》
CAS
2008
1
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职称材料
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