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不同冷冻温度储存后皮片匀浆上清蛋白的生化分析
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作者 贾晓明 朱兆明 李成文 《中华整形烧伤外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期297-300,共4页
人(尸体皮),豚鼠及小鼠皮片经4C、-20C、-80C、-196C 储存后,应用紫外分光光度计及聚丙烯胺凝胶电泳技术,对其匀浆上清液中的蛋白质成份含量,进行了紫外光吸收能力及酯酶同工酶分析。结果显示:皮片经不同温度储存后其匀浆上清中的蛋白... 人(尸体皮),豚鼠及小鼠皮片经4C、-20C、-80C、-196C 储存后,应用紫外分光光度计及聚丙烯胺凝胶电泳技术,对其匀浆上清液中的蛋白质成份含量,进行了紫外光吸收能力及酯酶同工酶分析。结果显示:皮片经不同温度储存后其匀浆上清中的蛋白质成份及含量与新鲜皮相比,有不同程度的变化。 展开更多
关键词 紫外吸收 凝胶电泳 皮片匀浆
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红芪多糖3促进小鼠脾淋巴细胞增殖的差异蛋白质点分析 被引量:11
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作者 李磊强 徐静文 +1 位作者 寇宁 程卫东 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期2449-2453,共5页
目的:分析红芪多糖3(HPS-3)作用于小鼠脾淋巴细胞后的差异蛋白质点,探讨红芪多糖3调节免疫的分子生物学机制。方法:提取正常小鼠脾淋巴细胞进行体外培养,用MTT法检测红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激增殖作用,ELISA试剂盒测定培养上清中... 目的:分析红芪多糖3(HPS-3)作用于小鼠脾淋巴细胞后的差异蛋白质点,探讨红芪多糖3调节免疫的分子生物学机制。方法:提取正常小鼠脾淋巴细胞进行体外培养,用MTT法检测红芪多糖对小鼠脾淋巴细胞的刺激增殖作用,ELISA试剂盒测定培养上清中的IL-2含量,并运用双向电泳技术对脾淋巴细胞总蛋白进行分离,银染显色,PDQuest软件对凝胶图谱进行差异点分析,找出差异明显的蛋白质点。结果:HPS-3能够提高T淋巴细胞增殖能力和IL-2的分泌,实验所得2-DE凝胶图谱经PDQuest软件分析得出以下结果:HPS-3组中共有16个蛋白点发生明显改变,其中11个蛋白质点高表达,4个蛋白质点消失,1个蛋白质点低表达。结论:HPS-3能促进脾淋巴细胞增殖,显著影响小鼠脾淋巴细胞蛋白质表达。 展开更多
关键词 红芪多糖 蛋白质组学 小鼠脾T淋巴细胞 差异蛋白质
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抗人白血病细胞单克隆抗体C_3H_6的产生及初步鉴定 被引量:11
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作者 张毅 张澜生 徐兴娣 《苏州大学学报(医学版)》 CAS 1989年第2期100-105,168-174,共8页
本文报告了抗人白血病细胞单克隆抗体C_3H_6的产生.运用间接免疫荧光技术、ELISA、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术对其特征作了初步分析.结果表明:单抗C_3H_6与白血病细胞S_(7811)(免疫原)和K_(562)细胞有强阳性反应,与Raji 细胞... 本文报告了抗人白血病细胞单克隆抗体C_3H_6的产生.运用间接免疫荧光技术、ELISA、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术对其特征作了初步分析.结果表明:单抗C_3H_6与白血病细胞S_(7811)(免疫原)和K_(562)细胞有强阳性反应,与Raji 细胞和U_(937)细胞反应较弱.单抗C_3H_6主要与髓性白血病细胞有阳性反应.对鉴别AML 与ALL 有显著意义.并与AML-m_5的反应有非常显著意义,从而有助于鉴别AML-M_5与其他AML 的亚类(M_(1~4)).免疫印迹结果显示C_3H_6抗原为单一的肽链结构.其分子量为57kd.C_3H_6抗原很可能为一新的髓性白细胞分化抗原. 展开更多
关键词 杂交瘤 单克隆抗体 白细胞分化抗原 间接免疫荧光技术 SDS-聚丙烯酰胺凝 胶电泳 免疫印迹技术
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聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳技术动态分析不同分娩方式对新生儿早期肠道菌群的影响 被引量:11
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作者 刘彩霞 胡燕 +1 位作者 周东蕊 蒋犁 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期1491-1494,共4页
目的应用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术动态分析分娩方式对新生儿早期肠道菌群结构的影响。方法选择32例同期出生的健康足月儿为研究对象,按分娩方式分为自然分娩组和剖宫产组(每组各16例),分别于出生后第1天(>12 h)、第3天及... 目的应用PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术动态分析分娩方式对新生儿早期肠道菌群结构的影响。方法选择32例同期出生的健康足月儿为研究对象,按分娩方式分为自然分娩组和剖宫产组(每组各16例),分别于出生后第1天(>12 h)、第3天及第5天采集粪便样本,抽提样本中细菌基因组总DNA,并对其16S rDNA V3可变区进行PCR扩增和DGGE测定,获得肠道菌群指纹图谱,进行多样性和相似性等特征分析。结果 1.新生儿出生第1天肠道菌群定植较少,生命早期肠道菌群定植具有个体特异性,并呈动态变化。2.多样性分析显示:出生第3天2组间多样性比较差异无统计学意义;第5天剖宫产组多样性指数H'和优势度指数D均显著低于自然分娩组(Pa<0.05)。3.成对相似性分析:出生第3天,剖宫产组内成对相似性系数Cs高于自然分娩组;剖宫产组内Cs值<0.30的占该组总Cs值个数的百分比(21.4%)显著低于自然分娩组(76.0%)(Pa<0.01)。第5天,2组Cs值及分布情况比较无明显差异。结论出生第3天,剖宫产个体间较自然分娩儿表现出更高的菌群结构相似性,第5天剖宫产儿肠道菌群种类及数量均落后于自然分娩儿,分娩方式影响了生命早期肠道菌群结构的建立。PCR-DGGE法在新生儿肠道菌群结构多态性及演进变化方面提供了更详尽的资料。 展开更多
关键词 新生儿 肠道菌群 分娩方式 变性梯度凝胶电泳
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两种全血基因组DNA提取方法的比较 被引量:7
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作者 史艳萍 钟晓红 《第一军医大学分校学报》 2005年第2期130-131,165,共3页
目的比较两种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA,对DNA提取率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法分别用传统的酚、氯抽提法和改良法两种不同的方法,提取人全血基因组DNA。结果两种方法提取的DNA纯度用光吸收比值为指标检测A280/A26... 目的比较两种不同的DNA提取方法提取人全血基因组DNA,对DNA提取率、纯度以及PCR扩增的效果影响。方法分别用传统的酚、氯抽提法和改良法两种不同的方法,提取人全血基因组DNA。结果两种方法提取的DNA纯度用光吸收比值为指标检测A280/A260值为:1.45和1.82,提取DNA总量分别为187μg/m l和260μg/m l。用0.8%琼脂糖凝胶电泳鉴定改良法制备的DNA效果较好,PCR扩增效果有差异。结论用改良法提取的DNA总量明显较高,提取效率高,PCR扩增的效果好,是全血基因组DNA提取中首选考虑的方法。 展开更多
关键词 基因组DNA 琼脂糖凝胶电泳 PCR
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顿河红豆草浓缩单宁生物合成相关蛋白鉴定 被引量:7
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作者 王玉萍 杨茁萌 张博 《草地学报》 CAS CSCD 2000年第2期126-131,共6页
以二倍体顿河红豆草为实验材料 ,运用组织培养法和香草醛 -盐酸法筛选优良浓缩单宁高表达的细胞系。用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS- PAGE)技术 ,对同一细胞系不含浓缩单宁 ( CT- )愈伤组织和含有浓缩单宁 ( CT+ )愈伤组织... 以二倍体顿河红豆草为实验材料 ,运用组织培养法和香草醛 -盐酸法筛选优良浓缩单宁高表达的细胞系。用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS- PAGE)技术 ,对同一细胞系不含浓缩单宁 ( CT- )愈伤组织和含有浓缩单宁 ( CT+ )愈伤组织蛋白质进行鉴定。用制备型SDS-双向电泳对目标蛋白进行纯度分析 ,以及用 SDS- PAGE法和 IEF(等电聚焦 )法测定该目标蛋白质分子量和等电点。最后经电印渍技术 ,将目标蛋白质转移至固相膜上进行氮端氨基酸序列分析。结果表明 ,筛先出 1 0个优良浓缩单宁合成细胞系和相同基因型愈伤组织增殖细胞系。同一细胞系含有浓缩单宁愈伤组织比不含者多一条蛋白带 ,该蛋白分子量为 2 8k D,等电点为 5.7。该电印渍法将蛋白印渍至 PVDF(聚偏二氟乙烯 )膜上的效率较高。 展开更多
关键词 顿河红豆草 蛋白质 氮端氨基酸序列
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变形梯度胶电泳分析喂养方式对早产新生儿肠道菌群的影响 被引量:6
7
作者 兰和魁 符薇 +4 位作者 陈丽珊 李秀云 王霞 严奇 任大明 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期5-7,共3页
目的采用变性梯度胶电泳(DGGE)方法研究喂养方式对早产新生儿肠道菌群的影响。方法收集同期6对新生儿1~21d粪便,直接提取细菌总DNA,扩增16SrDNAV6~V8区后DGGE分离,测序并与EMBL核苷序列数据库进行比较。结果喂养前肠道菌群类似,以梭... 目的采用变性梯度胶电泳(DGGE)方法研究喂养方式对早产新生儿肠道菌群的影响。方法收集同期6对新生儿1~21d粪便,直接提取细菌总DNA,扩增16SrDNAV6~V8区后DGGE分离,测序并与EMBL核苷序列数据库进行比较。结果喂养前肠道菌群类似,以梭状芽胞杆菌、链球菌和克雷伯菌为主;开奶后母乳喂养儿以双歧杆菌为主,奶粉喂养儿肠道菌群显示其明显的多态性,有双歧杆菌、梭状芽胞杆菌、链球菌、大肠埃希菌、克雷伯菌、韦荣菌、沙雷菌以及不经培养细菌。结论喂养方式对早产新生儿菌群的形成及演替有明显影响,PCRDGGE在多态性,动力性,菌群的演进变化方面提供了更加准确的数据和补充资料。 展开更多
关键词 早产新生儿 喂养方式 肠道菌群 克雷伯菌 梭状芽胞杆菌 影响 多态性 电泳分析 链球菌 总DNA
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甲型副伤寒沙门菌株的脉冲电场凝胶电泳分型研究 被引量:7
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作者 陈忠妙 徐景野 +9 位作者 郑官增 江夏明 金春光 王琳娜 何宏明 刘令初 裘丹红 郑伟 王满琴 何浙生 《国外医学(流行病学.传染病学分册)》 2005年第3期140-142,共3页
目的探讨台州地区甲型副伤寒沙门菌株的流行病学特征及分型情况。方法用脉冲电场凝胶电泳(PFGE)方法进行分型。结果根据细菌染色体DNA的XbaⅠ酶切图谱,可将台州地区患者中分离的65株甲型副伤寒沙门菌分成9个PFGE型别(X1~X9)。来自温岭... 目的探讨台州地区甲型副伤寒沙门菌株的流行病学特征及分型情况。方法用脉冲电场凝胶电泳(PFGE)方法进行分型。结果根据细菌染色体DNA的XbaⅠ酶切图谱,可将台州地区患者中分离的65株甲型副伤寒沙门菌分成9个PFGE型别(X1~X9)。来自温岭菌株有6个PFGE型,三门菌株有4个PFGE型,玉环菌株仅有2个PFGE型,其中X2为优势菌型。结论分型研究表明,甲型副伤寒沙门菌核型上虽在台州地区存在着县区性差异,但均以X2为主要流行菌型,从而提示了同一个克隆群内的菌株广泛传播可能是造成台州地区甲型副伤寒流行的主要原因。 展开更多
关键词 脉冲电场凝胶电泳 分型研究 沙门菌株 甲型副伤寒沙门菌 台州地区 流行病学特征 染色体DNA 酶切图谱 XbaⅠ PFGE 流行菌型 E型 性差异
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中枢神经系统脱髓鞘疾病脑脊液蛋白质组学研究 被引量:4
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作者 秦延江 刘师莲 +3 位作者 杨银荣 柏淑美 张旭华 邓小梅 《山东大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2008年第1期9-14,共6页
目的建立中枢神经系统脱髓鞘疾病蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与中枢神经系统脱髓鞘疾病发生有关的生物标识物。方法以中枢神经系统脱髓鞘疾病患者的脑脊液为研究对象,分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,... 目的建立中枢神经系统脱髓鞘疾病蛋白质组学技术体系,寻找并鉴定与中枢神经系统脱髓鞘疾病发生有关的生物标识物。方法以中枢神经系统脱髓鞘疾病患者的脑脊液为研究对象,分别采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,用图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,离线应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱得到相应的肽指纹图谱;同时用超高压液相色谱分离酶解肽段,在线采用电喷雾四极杆飞行时间质谱鉴定肽段氨基酸序列;搜索数据库鉴定部分蛋白质。结果分别获得中枢神经系统脱髓鞘疾病患者组和对照组的脑脊液双向电泳蛋白质组表达图谱,筛选并鉴定出表达有明显差异的蛋白质10个,其中在疾病组中血红蛋白有明显上调而前列腺素H2表达下调明显。结论这些差异蛋白可能成为具有临床诊断意义的中枢神经系统脱髓鞘疾病潜在标识物,从而为中枢神经系统脱髓鞘疾病的早期诊断和治疗提供理论和实验依据。 展开更多
关键词 蛋白质组学 双向电泳 脑脊液 脱髓鞘疾病
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老年慢性阻塞性肺疾病患者鲍氏不动杆菌的分子流行特征 被引量:4
10
作者 丁志平 邢玉斌 +4 位作者 徐雅萍 董喆 闫中强 龚美亮 刘运喜 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期2979-2981,共3页
目的揭示医院老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中鲍氏不动杆菌分子流行的主要特征。方法筛选2009-2011年老年COPD患者中分离的57株鲍氏不动杆菌为试验菌株;使用Whonet5.6软件分析其药敏结果;应用基于序列分型的多重PCR方法鉴定鲍氏不动... 目的揭示医院老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中鲍氏不动杆菌分子流行的主要特征。方法筛选2009-2011年老年COPD患者中分离的57株鲍氏不动杆菌为试验菌株;使用Whonet5.6软件分析其药敏结果;应用基于序列分型的多重PCR方法鉴定鲍氏不动杆菌的主要流行克隆谱系;利用限制性内切酶ApaI对试验菌株基因组DNA进行酶切和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析;应用PCR及测序方法检测10种耐药相关基因,分析并命名相应的耐药基因谱。结果鲍氏不动杆菌除了对多黏菌素B的耐药率为8.8%外,对其他15种抗菌药物均具有较高的耐药率,为70.2%~98.2%;主要克隆谱系以RGP1序列型为主,所占的比例高达59.6%;在87.0%的相似性水平上,可大致分为18种PFGE图谱,其中主要型别为A型;共发现存在有15种耐药基因谱,其中多药耐药谱RGP1所占的比例高达52.63%。结论在老年COPD患者中分离的鲍氏不动杆菌主要的流行克隆谱系与欧洲克隆谱系Ⅱ具有高度的同源性;多药耐药相关基因的携带率较高,在具有不同遗传背景的鲍氏不动杆菌中存在有水平转移。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 鲍氏不动杆菌 脉冲场凝胶电泳
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灭囊灵对体外培养的猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响 被引量:3
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作者 陈治水 贾丹兵 +4 位作者 邓伟哲 李春杰 王宇恒 王炎焱 阎红 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第4期83-86,共4页
目的 探讨灭囊灵杀灭猪囊尾蚴的作用机理。方法 应用PAGE和薄层扫描技术 ,观察灭囊灵对体外培养猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响。结果 灭囊灵组囊尾蚴蛋白经PAGE可分离出 17~ 2 5条蛋白带。经薄层扫描分析 :灭囊灵 0 6ml、1 ... 目的 探讨灭囊灵杀灭猪囊尾蚴的作用机理。方法 应用PAGE和薄层扫描技术 ,观察灭囊灵对体外培养猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响。结果 灭囊灵组囊尾蚴蛋白经PAGE可分离出 17~ 2 5条蛋白带。经薄层扫描分析 :灭囊灵 0 6ml、1 2ml和 2 4ml三个剂量组在 70~ 75区段蛋白扫描无峰 ;0 6ml组在 10 5~ 110区段峰值最高 ,1 2ml和 2 4ml剂量组在 110~ 115区段峰值最高。峰面积积分值占 8%以上者为高峰带 ,0 6ml和 2 4ml组可见 6个高峰 ,1 2ml组可见 5个高峰。以上三项指标与原囊尾蚴和空白对照组均有明显差别。 展开更多
关键词 灭囊灵 猪囊尾蚴 聚丙烯酰胺凝胶电泳 薄层扫描 蛋白组分 蛋白含量 PAGE
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脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法的建立与应用 被引量:1
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作者 王绪明 罗侃 +3 位作者 崔有宏 吴育凌 王琦 夏茹 《西北国防医学杂志》 CAS 2001年第1期32-34,共3页
目的 :建立脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法用于测定脲酶分子量和纯度鉴定。方法 :建立十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PACE)梯度凝胶体系和电泳条件等 ,根据不同来源脲酶活性染色区带位置 ,鉴定出PAGE蛋白区带中脲... 目的 :建立脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法用于测定脲酶分子量和纯度鉴定。方法 :建立十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PACE)梯度凝胶体系和电泳条件等 ,根据不同来源脲酶活性染色区带位置 ,鉴定出PAGE蛋白区带中脲酶区带位置 ,进一步测出脲酶的相对分子量。结果 :用新建立的SDS -PAGE脲酶活性区带染色方法 ,应用于不同来源的脲酶相对分子量测定和纯度鉴定 ,结果准确 ,重复性好 ,与凝胶过滤法测定分子量的结果相关性好。结论 :我们建立的SDS -PACE脲酶活性区带染色方法 ,应用效果良好 ,有推广价值。 展开更多
关键词 实验室诊断 脲酶 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 活性染色
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硅胶柱层析粗提尿激酶的方法与分析
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作者 王金富 高剑峰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 1993年第1期66-69,共4页
采用40—60目氧化硅胶作吸附剂,通过色谱层析和硫酸铵盐析分离提取了尿激酶(UK),并对粗品中酶的活力进行了测定,为45IU/ml,同时对蛋白质组分进行了SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析。电泳结果显示11条区带,其中1~2条着色较深的区带... 采用40—60目氧化硅胶作吸附剂,通过色谱层析和硫酸铵盐析分离提取了尿激酶(UK),并对粗品中酶的活力进行了测定,为45IU/ml,同时对蛋白质组分进行了SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析。电泳结果显示11条区带,其中1~2条着色较深的区带与标准尿激酶(比活13万/mg蛋白)的区带的迁移率基本相同。表明选用40—60目硅胶粗提尿激酶具有较好的吸附和分离效果。 展开更多
关键词 尿激酶 硅胶柱层析 相对迁移率 盐析 聚丙烯酸胺凝胶电泳
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辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对受照人肝癌细胞DNA双链断裂与修复的影响
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作者 任东青 张绍章 王克为 《第四军医大学学报》 1995年第4期266-268,共3页
目的:探讨辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对肝癌细胞DNA损伤与修复的影响.方法:用脉冲交变电泳法(PFGE)和 ̄3H-TdR掺入法,测定上述两药物对受照人肝癌细胞DNA双链断裂(dsb)与修复及DNA... 目的:探讨辐射增敏剂AK2123和辐射防护剂WR2721对肝癌细胞DNA损伤与修复的影响.方法:用脉冲交变电泳法(PFGE)和 ̄3H-TdR掺入法,测定上述两药物对受照人肝癌细胞DNA双链断裂(dsb)与修复及DNA合成的影响.结果:在0~80Gy剂量范围内,随着照射剂量增加,肝癌细胞DNA残留率逐渐降低(100%~57.0%),DNAdsb量亦逐渐增多,照前给AK2123或WR2721,均能显著地降低DNA残留率,使DNAdsb量增多,加重DNA损伤(P<0.05);20Gy受照细胞保温0~120min,在60min时DNAdsb开始被修复(P<0.05),而AK2123组为120min(P<0.05),WR2721在30min后有修复的趋势;AK2123在62.5~500μg/ml内其参入率显著升高(P<0.05),呈促进DNA合成作用,WR2721则随药物浓度增加其参入率降低(P<0.05),抑制DNA合成.结论:AK2123和WR2721显著加重受照肝癌细胞的辐射损伤,促进DNAdsb量增加,抑制其修复过程. 展开更多
关键词 肝脏肿瘤 放射疗法 辐射增敏剂 辐射防护剂 DNA
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聚丙烯酰胺凝胶上SDH的活染
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作者 夏玉凤 王友爱 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 1999年第4期546-548,共3页
精心选择了电泳系统及活染条件,得到较清晰的活染结果.从活染胶板上发现玉米叶SDH 存在两种形式,而根部只有一种形式.可能在叶及根部都存在的那种SDH
关键词 天然电泳 活染 聚丙烯酰胺 膜结合酶 凝胶 SDH
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激光照射对中华大蟾蜍原肠胚蛋白质表达的影响(英文)
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作者 张楠 时永香 +2 位作者 白增亮 张少军 李丽莉 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第1期6-11,共6页
用YAG倍频激光器选择不同能量密度对中华大蟾蜍原肠胚进行照射,对各组样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析,结果表明:激光照射对蛋白质点数及其分布影响显著,影响程度与照射激光密度有关。各激光照射组与对照组相比,有些... 用YAG倍频激光器选择不同能量密度对中华大蟾蜍原肠胚进行照射,对各组样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析,结果表明:激光照射对蛋白质点数及其分布影响显著,影响程度与照射激光密度有关。各激光照射组与对照组相比,有些蛋白质点变化明显,有些蛋白质点在对照组未发现,而在各激光照射组皆新出现。结论:激光照射可对原肠胚一些蛋白质的表达产生明显的影响。 展开更多
关键词 激光 蛋白质谱 双向电泳 十二烷基硫酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳 胚胎 中华大蟾蜍
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