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反基因锁核酸体外阻断乙肝病毒前S2基因表达 被引量:6
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作者 邓益斌 罗艳红 +2 位作者 邹佳峻 王春芳 温旺荣 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第19期3641-3644,共4页
目的:探讨针对乙肝病毒前S2基因同聚嘌呤区的锁核酸体外抑制细胞内病毒复制的作用。方法:针对乙肝病毒前S2基因同聚嘌呤区,分别设计合成锁核酸、硫代寡核苷酸、未修饰寡核苷酸及无关对照序列,以半乳糖配体介导转染HepG2.2.15细胞,采用... 目的:探讨针对乙肝病毒前S2基因同聚嘌呤区的锁核酸体外抑制细胞内病毒复制的作用。方法:针对乙肝病毒前S2基因同聚嘌呤区,分别设计合成锁核酸、硫代寡核苷酸、未修饰寡核苷酸及无关对照序列,以半乳糖配体介导转染HepG2.2.15细胞,采用荧光定量聚合酶链反应技术(FQ-PCR)、时间分辨免疫荧光技术(TRFIA)和酶联免疫法(ELISA)分别监测1、3、5和7 d细胞培养上清液中HBV DNA、HBsAg和前S2抗原的含量;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测锁核酸对细胞代谢的影响。结果:加入锁核酸后,对HBV DNA复制、HBsAg和前S2抗原表达均显示有较强的抑制作用,且抑制率随时间呈增高趋势,7 d后抑制率分别达61.56%、68.18%和72.82%。各实验组与对照组比较差异均具有统计学意义(均P<0.05)。LNA对细胞代谢无明显影响。结论:针对乙肝病毒前S2基因同聚嘌呤区的反基因锁核酸,体外能有效抑制乙肝病毒的复制,既为乙肝病毒治疗提供有效靶位,也为反基因治疗提供理论和实验依据。 展开更多
关键词 半乳糖配体 乙型肝炎病毒 锁核酸 反基因治疗
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反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断乙肝病毒C基因表达 被引量:4
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作者 邓益斌 温旺荣 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第7期854-858,共5页
目的探讨针对乙肝病毒C基因反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断病毒基因表达的效果。方法各实验组经尾静脉给药后,采用real-time PCR、时间分辨免疫荧光技术、免疫组织化学法等技术分别检测血清HBV DNA、HBeAg含量及肝细胞内HBcAg的表达情... 目的探讨针对乙肝病毒C基因反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断病毒基因表达的效果。方法各实验组经尾静脉给药后,采用real-time PCR、时间分辨免疫荧光技术、免疫组织化学法等技术分别检测血清HBV DNA、HBeAg含量及肝细胞内HBcAg的表达情况。结果注射锁核酸后,对乙肝病毒核酸的复制和乙肝病毒e抗原的合成均有较强的抑制作用,注射后1、3和5 d,HBV DNA的平均抑制率分别19.24%、39.20%和44.47%;HBeAg的平均抑制分别为30.71%、51.14%和63.46%;小鼠肝细胞的HBcAg阳性细胞数也较对照组明显减少。结论针对乙肝病毒C基因的反义锁核酸在转基因小鼠体内能有效抑制病毒基因的复制和表达,提示C基因可作核酸药物治疗的有效靶位。 展开更多
关键词 反义锁核酸 乙型肝炎病毒 转基因小鼠 半乳糖配体
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褐藻胶寡糖对D-半乳糖诱导小鼠骨质疏松的作用 被引量:1
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作者 王珊 冯文静 毛拥军 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2020年第3期261-264,共4页
目的探讨褐藻胶寡糖(AOS)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠骨质疏松的作用及其可能的机制。方法将45只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(D-gal组)、D-gal+AOS低剂量组(D-gal+AOS-L组)、D-gal+AOS中剂量组(D-gal+... 目的探讨褐藻胶寡糖(AOS)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老小鼠骨质疏松的作用及其可能的机制。方法将45只8周龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(D-gal组)、D-gal+AOS低剂量组(D-gal+AOS-L组)、D-gal+AOS中剂量组(D-gal+AOS-M组)和D-gal+AOS高剂量组(D-gal+AOS-H组)。除Control组外,其余组小鼠颈背部注射D-gal 8周建立小鼠骨质疏松模型。D-gal+AOS-L、D-gal+AOS-M和D-gal+AOS-H组从第5周开始分别给予50、100、150 mg/(kg·d)的AOS灌胃4周,Control组和D-gal组给予蒸馏水灌胃。药物干预完成后,应用骨密度仪测量各组小鼠股骨骨密度,采用Western Blot检测小鼠股骨组织中衰老相关蛋白P16及氧化应激相关蛋白P67 phox的表达,RT-PCR检测氧化应激相关基因p47 phox和gp91 phox mRNA的表达及破骨细胞活化相关基因核因子κB受体活化因子配体(RANKL)mRNA的表达。结果D-gal组小鼠骨密度较Control组降低,AOS干预各组小鼠骨密度较D-gal组均增加,差异有统计学意义(F=46.853,P<0.05)。D-gal组小鼠股骨组织中P16和P67 phox蛋白表达较Control组增加,AOS干预各组P16和P67 phox蛋白表达较D-gal组降低,差异均有统计学意义(F=50.862、156.943,P<0.05)。D-gal组小鼠股骨组织中p47 phox、gp91 phox和RANKL mRNA相对表达量较Control组增加,AOS干预各组小鼠p47 phox、gp91 phox和RANKL mRNA相对表达量较D-gal组均降低,差异有统计学意义(F=17.373~112.311,P<0.05)。结论AOS对D-gal诱导的小鼠骨质疏松具有保护作用,其机制可能与氧化应激和破骨细胞活化的抑制有关。 展开更多
关键词 海藻酸 寡糖类 半乳糖 骨质疏松 衰老 氧化性应激 RANK配体
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新型糖-金属配合物的合成
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作者 张炜 武侠 《合成化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期641-644,共4页
以N,N′-二苄基乙二胺桥联两个半乳糖合成了新型糖配体N,N′-双-[2-O-(β-D-吡喃半乳糖基)苄基]乙二胺(L);L与金属盐反应制得4个新型糖-金属配合物——[ML]2+.2Cl-(1a^1d,M=Ni,Cu,Co,Zn),其结构经1HNMR,UV,IR和元素分析表征,1a和1c为八... 以N,N′-二苄基乙二胺桥联两个半乳糖合成了新型糖配体N,N′-双-[2-O-(β-D-吡喃半乳糖基)苄基]乙二胺(L);L与金属盐反应制得4个新型糖-金属配合物——[ML]2+.2Cl-(1a^1d,M=Ni,Cu,Co,Zn),其结构经1HNMR,UV,IR和元素分析表征,1a和1c为八面体构型,1b和1d为四面体构型。 展开更多
关键词 乙二胺 半乳糖 糖配体 糖-金属配合物 合成
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半乳糖上调内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平抑制巨噬细胞活性
5
作者 吴妮婷 摄渊婷 +2 位作者 刘红梅 李瑾 贾乙 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第13期1502-1511,共10页
目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该... 目的探究半乳糖对人原代肺动脉内皮细胞上唾液酸特异性Ig样凝集素-9(sialic-acid-binding immunoglobulin-like lectin 9,Siglec-9)聚糖配体表达的影响及作用机制。方法采用流式细胞术确定内皮细胞表面Siglec-9聚糖配体的表达并鉴定该聚糖配体末端糖苷键类型;分别用左旋葡萄糖、葡萄糖、N-乙酰基葡萄糖、甘露糖、N-乙酰基甘露糖、半乳糖、唾液酸、蔗糖处理内皮细胞48 h,采用流式细胞术检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体的表达;将内皮细胞分为对照组和半乳糖组(n=3),Western blot、流式细胞术、免疫荧光分析半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体表达的影响;α2-3,6,8唾液酸酶处理内皮细胞后,Western blot检测半乳糖对内皮细胞Siglec-9聚糖配体恢复时间的影响;半乳糖处理内皮细胞后,Western blot检测分析细胞内唾液酸合成关键酶(GNE、NANS、NANP、CMAS、NPL以及ST3Gals)表达水平,并用RT-qPCR验证相关蛋白的mRNA表达;siRNA敲低NANP、CMAS及ST3Gal-Ⅲ,Western blot检测内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平变化;巨噬细胞与内皮细胞共培养实验分析Siglec-9聚糖配体的增加对巨噬细胞的凋亡与吞噬能力的影响。结果内皮细胞上表达有Siglec-9聚糖配体且该配体为末端结构为α2-3连接的唾液酸糖蛋白;与对照组比较,半乳糖组内皮细胞上该聚糖配体表达水平显著增加(P<0.01),但半乳糖的添加对该配体的自我恢复时间无影响;与对照组比较,半乳糖处理的内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ表达水平升高(P<0.05,P<0.01),且RT-qPCR验证结果与其一致;抑制内皮细胞中NANP、CMAS、ST3Gal-Ⅲ的表达后,内皮细胞Siglec-9聚糖配体水平下降(P<0.01)。共培养实验中,与未处理组比较,半乳糖处理的内皮细胞促进巨噬细胞凋亡增加(P<0.01),并导致其吞噬能力减弱(P<0.05)。结论半乳糖通过NANP-CMAS-ST3Gal-Ⅲ通路上调内皮细胞上Siglec-9聚糖配体水平,从而抑制巨噬细胞� 展开更多
关键词 半乳糖 内皮细胞 唾液酸特异性Ig样凝集素-9聚糖配体 唾液酸合成关键酶 巨噬细胞
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替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗心律失常的疗效及其对血清Gal-3与CD40L水平的影响
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作者 王成 陈振岭 张翠翠 《川北医学院学报》 CAS 2024年第6期834-838,共5页
目的:探讨替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗心律失常的疗效及其对患者血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、白细胞分化抗原40配体(CD40L)水平的影响。方法:将104例心律失常患者按照治疗方式不同分为对照组和研究组,每组各52例。对照组患者采用... 目的:探讨替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗心律失常的疗效及其对患者血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、白细胞分化抗原40配体(CD40L)水平的影响。方法:将104例心律失常患者按照治疗方式不同分为对照组和研究组,每组各52例。对照组患者采用二丁酰环磷腺苷钙治疗;研究组采用替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗,两组均治疗2个月。比较两组患者治疗前后心功能[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期直径(LVEDD)]、心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)]、炎症因子[肿瘤坏死因子ɑ(TNF-ɑ)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)]、半乳糖凝集素3(Gal-3)、肿瘤坏死因子相关激活蛋白(CD40L)、血管内皮功能[一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)]及临床疗效。结果:治疗后,两组LVEF、NO水平均升高,且研究组高于对照组(P<0.05);两组LVESD、LVEDD、cTnT、CK-MB、NT-proBNP、TNF-ɑ、hs-CRP、IL-6、Gal-3、CD40L、ET-1水平均降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。研究组临床疗效高于对照组(P<0.05)。结论:替格瑞洛与二丁酰环磷腺苷钙联合治疗,可改善心律失常患者心功能,减轻心肌损伤程度,提高临床疗效,加速恢复,疗效较显著。 展开更多
关键词 心律失常 替格瑞洛 二丁酰环磷腺苷钙 半乳糖凝集素3 白细胞分化抗原40配体
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葡萄糖及半乳糖衍生的手性双膦-铑(Ⅰ)配合物催化苯乙烯不对称氢甲酰化反应 被引量:3
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作者 贾小静 王来来 +1 位作者 陈新滋 李月明 《催化学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期492-494,共3页
合成了四个从葡萄糖及半乳糖衍生的手性芳基双膦配体,制备了手性双膦-铑(Ⅰ)配合物催化剂,并将其用于苯乙烯不对称氢甲酰化反应中.结果表明,葡萄糖骨架手性中心与联萘基之间有协同作用,对映体过量值和转化率受配体C-4骨架立体中心的绝... 合成了四个从葡萄糖及半乳糖衍生的手性芳基双膦配体,制备了手性双膦-铑(Ⅰ)配合物催化剂,并将其用于苯乙烯不对称氢甲酰化反应中.结果表明,葡萄糖骨架手性中心与联萘基之间有协同作用,对映体过量值和转化率受配体C-4骨架立体中心的绝对构型影响,而产物的绝对构型则主要由联萘单元控制;配体4-双{[(S)-1,1′-联萘基-2,2′-双基]-磷}-苯基-3,6-脱水-β-D-葡萄糖的吡喃糖苷基和联萘基的匹配组合,给出41%的对映体选择性和74∶26(异构/正构)区域选择性. 展开更多
关键词 葡萄糖 半乳糖 手性芳基双膦配体 铑配合物 苯乙烯 不对称氢甲酰化
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胆固醇-半乳糖配体介导多烯紫杉醇脂质体大鼠体内药动学和小鼠组织分布研究
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作者 仝一丹 罗利华 +5 位作者 程怡 聂华 陈宇潮 郑品劲 陈静 李朝 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1285-1289,1294,共6页
目的:考察胆固醇-半乳糖配体介导的多烯紫杉醇脂质体大鼠体内药动学及小鼠组织分布学特征。方法:大、小鼠分别尾静脉注射多烯紫杉醇配体脂质体(docetaxel liposomes modified with galactose ligand,G-DOC-L)、多烯紫杉醇普通脂质体(doc... 目的:考察胆固醇-半乳糖配体介导的多烯紫杉醇脂质体大鼠体内药动学及小鼠组织分布学特征。方法:大、小鼠分别尾静脉注射多烯紫杉醇配体脂质体(docetaxel liposomes modified with galactose ligand,G-DOC-L)、多烯紫杉醇普通脂质体(docetaxel conventional liposomes,DOC-L)、多烯紫杉醇注射液(docetaxel injection,DOC-i),大鼠于不同时间点眼内眦取血,小鼠于不同时间点解剖,取组织匀浆液,建立LC-MS/MS法测定生物样品中多烯紫杉醇的浓度,运用DAS 2.0软件计算药动学参数。结果:研究结果显示,DOC-i,DOC-L,G-DOC-L血浆半衰期(t1/2z)分别为4.35,2.97和3.39 h;清除率分别为1.52,1.09,4.19 L·kg-1·h-1。小鼠组织分布,DOC-i,DOC-L,G-DOC-L肝摄取率分别为6.54%,4.06%,55.01%,肾摄取率分别为21.64%,10.74%,7.66%。结论:与DOC-i及DOC-L相比,G-DOC-L可较快在血液中消除,肝脏摄取率较高,而肾脏摄取率较低,对肝脏具有特异的靶向性。 展开更多
关键词 胆固醇-半乳糖配体脂质体 体内药动学 LC—MS/MS 多烯紫杉醇 组织分布
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高效液相色谱-蒸发光散射法检测酶促催化反应中底物D-半乳糖
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作者 余秋强 赵菊香 +3 位作者 程怡 聂华 罗利华 郑品劲 《北方药学》 2014年第2期2-4,共3页
目的:建立酶促催化反应中底物D-半乳糖的测定方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD法)测定酶促催化反应中底物D-半乳糖的含量,色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(2)柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,... 目的:建立酶促催化反应中底物D-半乳糖的测定方法。方法:采用高效液相色谱-蒸发光散射法(HPLC-ELSD法)测定酶促催化反应中底物D-半乳糖的含量,色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(2)柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水,流速为1.0ml·min-1,柱温为35℃,检测器为SEDEX-75型蒸发光散射检测器(漂移管温度为45℃,载气压力为3.0bar)。结果:D-半乳糖在0.5~10.0mg·ml-1范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),平均回收率分别为100.3%,RSD为1.6%。结论:该方法准确、重复性好,适用于酶促催化反应中底物D-半乳糖的测定。 展开更多
关键词 HPLC-ELSD法 脂质体 底物 D-半乳糖 配体 酶促反应
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