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题名植物乳杆菌谷氨酸脱羧酶基因的克隆及原核表达
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作者
时粲
刘昭明
黎娅
易弋
伍时华
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机构
广西科技大学生物与化学工程学院
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出处
《湖北农业科学》
2015年第17期4328-4331,共4页
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基金
广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019081
2014GXNSFAA118086)
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文摘
根据Gen Bank中植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)基因组序列设计引物,利用PCR技术扩增了植物乳杆菌QL-14的谷氨酸脱羧酶编码基因gad B,克隆至表达载体p GEX-4T-3,转化大肠杆菌(Escherichia coli)后进行原核表达,对表达条件进行了优化并对表达蛋白质进了纯化。结果表明,扩增目的gad B基因的开放阅读框(ORF)全长1 407 bp,编码469个氨基酸,氨基酸序列与植物乳杆菌WCFS1同源性为99.6%。通过优化诱导表达条件,得到纯化蛋白质GAD大小为53.6 ku,等电点为5.58,比活力为9.9 U/mg。
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关键词
植物乳杆菌(Lactobacillus
plantarum)
Γ-氨基丁酸
谷氨酸脱羧酶
原核表达
gst标签蛋白质
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Keywords
Lactobacillus plantarum
γ-aminobutyric acid
glutamate decarboxylase
prokaryotic expression
gst tag protein
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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