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盐地碱蓬GST基因的克隆、序列分析及其表达特征 被引量:19
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作者 王丽萍 戚元成 +1 位作者 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第2期133-136,共4页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)幼苗的cDNA文库中克隆到一个 0 .9kb的全长cDNA ,同源性分析表明该全长cDNA与已报告的大豆 (Glycinemax)GST基因相应序列的同源性达 5 5 % ,可能编码由 2 35个氨基酸组成的谷胱甘肽转移酶 (glutathioneS transf... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)幼苗的cDNA文库中克隆到一个 0 .9kb的全长cDNA ,同源性分析表明该全长cDNA与已报告的大豆 (Glycinemax)GST基因相应序列的同源性达 5 5 % ,可能编码由 2 35个氨基酸组成的谷胱甘肽转移酶 (glutathioneS transferase ,GST)。Southern杂交结果证明GST基因在碱蓬基因组中可能有至少两个以上的拷贝 ;Northern杂交结果表明 ,4 0 0mmol/L的NaCl处理 4 8h ,幼叶中GSTmRNA的表达量是对照的 2~ 3倍 。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 gst基因 克隆 序列分析 表达 CDNA文库 盐诱导
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植物的谷胱甘肽转移酶家族 被引量:4
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作者 胡廷章 《重庆三峡学院学报》 2004年第5期121-124,共4页
植物的谷胱甘肽转移酶(Glutathione transferases ,GSTs;EC 2.5.1.18)是一个大家族;根据蛋白同源性和基因组织结构,植物GST分为f、?、t、?、?五类;GST主要在胞液中表达,是由约26kDa亚基组成的同源二聚体或异源二聚体,形成疏水的50kDa的... 植物的谷胱甘肽转移酶(Glutathione transferases ,GSTs;EC 2.5.1.18)是一个大家族;根据蛋白同源性和基因组织结构,植物GST分为f、?、t、?、?五类;GST主要在胞液中表达,是由约26kDa亚基组成的同源二聚体或异源二聚体,形成疏水的50kDa的蛋白;在不同组织和不同的环境条件下,基因表达差异很大。GST在植物的初级代谢和二级代谢、胁迫耐受、细胞信号等方面行使功能。 展开更多
关键词 植物 谷胱甘肽转移酶 gst基因 基因表达 gst功能
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大丽轮枝菌毒素对棉花悬浮细胞NO和H_2O_2的产生和GST基因表达的影响 被引量:5
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作者 贾芝琪 袁海永 李颖章 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期911-917,共7页
一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)是重要的信号分子,参与调控植物的各种生理过程,特别是在诱导植物防卫基因表达中有重要作用.本文主要研究NO和H2O2是否参与棉花抗大丽轮枝菌毒素(VD-toxins)的抗性反应以及其对GST基因表达的调控作用.结果... 一氧化氮(NO)和过氧化氢(H2O2)是重要的信号分子,参与调控植物的各种生理过程,特别是在诱导植物防卫基因表达中有重要作用.本文主要研究NO和H2O2是否参与棉花抗大丽轮枝菌毒素(VD-toxins)的抗性反应以及其对GST基因表达的调控作用.结果表明,NO和H2O2信号参与棉花细胞抗大丽轮枝菌毒素的信号途径,从而诱导抗性反应.NO和H2O2信号可能协同作用,但不相互依赖.GST基因在棉花悬浮细胞抗大丽轮枝菌毒素抗性反应中起重要作用.NO对GST基因表达的调控不依赖H2O2,H2O2对GST基因表达的诱导作用更强. 展开更多
关键词 一氧化氮 过氧化氢 大丽轮枝菌毒素 棉花悬浮细胞 gst基因
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单宁酸对豌豆蚜谷胱甘肽-S-转移酶活性与基因表达的影响
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作者 王继祖 刘磊 +1 位作者 王森山 宋丽雯 《草业科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期459-467,共9页
本研究通过测定单宁酸(2 g·L^(-1))处理豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum) 48 h后体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性以及不同组织GST基因转录水平的变化,以明确单宁酸对GST活性以及基因表达的影响。结果表明:豌豆蚜取食单宁酸(2 g·L^... 本研究通过测定单宁酸(2 g·L^(-1))处理豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum) 48 h后体内谷胱甘肽-S-转移酶(GST)活性以及不同组织GST基因转录水平的变化,以明确单宁酸对GST活性以及基因表达的影响。结果表明:豌豆蚜取食单宁酸(2 g·L^(-1)) 48 h后,GST活性下降。相比不处理对照,经单宁酸处理后,豌豆蚜头部有7个GST基因上调表达,其中ApGST104、ApGSTX1上调表达3倍左右;胸部有10个GST基因上调表达,其中ApGSTD6上调表达6.4倍;腹部有10个GST基因上调表达,其中ApGST101、ApGST105上调5倍左右;中肠有9个GST基因上调表达,其中ApPGST105上调表达3.2倍。从结果可以看出,单宁酸对豌豆蚜GST基因的表达产生了影响,部分GST基因显著上调表达(P <0.05),表明GST基因可能在豌豆蚜对单宁酸的代谢中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 豌豆蚜 解毒酶 植物次生物质 中肠 gst基因 组织解剖 实时荧光定量PCR
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NO and H_2O_2 induced by Verticillium dahliae toxins and its influence on the expression of GST gene in cotton suspension cells 被引量:5
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作者 JIA ZhiQi YUAN HaiYong Li YingZhang 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2007年第10期1347-1354,共8页
Nitric oxide (NO) and hydrogen peroxide (H2O2) have been shown to be important signaling molecules that participate in the regulation of several physiological processes. In particular, they have significant role in pl... Nitric oxide (NO) and hydrogen peroxide (H2O2) have been shown to be important signaling molecules that participate in the regulation of several physiological processes. In particular, they have significant role in plant resistance to pathogens by contributing to induction defense genes. Here, whether NO and H2O2 participate in the resistance responses against Verticillium dahliae toxins (VD-toxins) and their effects on the expression of GST gene are studied. The results reveal that NO and H2O2 are produced as part of a complex network of signals that respond to VD-toxins and may converge to function both synergistically and independently by inducing resistant responses. GST gene is potentially involved in the resistance mechanism in the cotton suspension cells. NO induces the expression of GST gene independently of H2O2. H2O2 may be a more potent signal in the resistance responses against VD-toxins. 展开更多
关键词 棉花大丽轮枝菌毒素 诱导 NO H2O2 棉花悬浮培养细胞 gst基因 过表达
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割手密谷胱甘肽硫转移酶基因SsGST的克隆与生物信息学分析 被引量:4
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作者 徐磊 胡小文 +2 位作者 姚艳丽 邢淑莲 刘洋 《广东农业科学》 CAS 2015年第18期14-19,共6页
为克隆割手密谷胱甘肽硫转移酶基因,采用电子克隆和RT-PCR技术获得了1个割手密GST基因,命名为Ss GST,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,割手密Ss GST基因c DNA全长702 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子式为C1119H1756N300O327S5,预... 为克隆割手密谷胱甘肽硫转移酶基因,采用电子克隆和RT-PCR技术获得了1个割手密GST基因,命名为Ss GST,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,割手密Ss GST基因c DNA全长702 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子式为C1119H1756N300O327S5,预测蛋白质分子量为24.8 ku,等电点为6.21。蛋白疏水性分析表明Ss GST蛋白为亲水性蛋白。保守结构域预测表明Ss GST蛋白具有GST-N和GST-C结构域。Ss GST蛋白序列与玉米、高粱、谷子和甘蔗等植物的GST蛋白序列相似性较高,系统进化树分析表明,Ss GST蛋白与玉米GST蛋白亲缘关系最近。 展开更多
关键词 割手密 gst基因 电子克隆 RT-PCR 生物信息学
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响应槲皮素诱导的美国白蛾GST基因鉴定及表达分析
7
作者 孟香 潘忠玉 陈敏 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期110-118,共9页
【目的】谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)是昆虫体内一种重要的解毒酶,在植食性昆虫对植物次生物质的解毒适应中发挥重要作用。本研究筛选和鉴定了美国白蛾中肠响应槲皮素诱导的GST基因,分析了槲皮素对GST基因的诱导表达模式,为阐明美国白蛾GST... 【目的】谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)是昆虫体内一种重要的解毒酶,在植食性昆虫对植物次生物质的解毒适应中发挥重要作用。本研究筛选和鉴定了美国白蛾中肠响应槲皮素诱导的GST基因,分析了槲皮素对GST基因的诱导表达模式,为阐明美国白蛾GST基因在解毒代谢槲皮素中的功能奠定基础。【方法】基于槲皮素诱导的美国白蛾中肠转录组,筛选和鉴定响应槲皮素诱导的GST基因;通过构建系统发育树分析GST基因的家族类别;采用实时荧光定量PCR技术研究槲皮素对GST基因诱导的剂量效应和时间效应。【结果】鉴定了美国白蛾响应槲皮素诱导的6个GST基因;系统发育分析显示HcGST-E1、HcGST-E2、HcGST-E3属于GSTEpsilon家族,HcGST-S1、HcGST-S2属于GSTSigma家族,HcGST-O1属于GST Omega家族。不同质量分数槲皮素对GST基因的诱导作用不同,本实验质量分数(0.5%、1.0%、2.0%、4.0%)的槲皮素均能诱导HcGST-E1表达水平显著上调,0.5%、1.0%和2.0%的槲皮素诱导HcGST-E3表达水平显著升高;0.5%的槲皮素诱导HcGST-O1的表达水平显著增加。本实验质量分数的槲皮素均诱导HcGST-S1显著下调表达;0.5%和1.0%的槲皮素诱导HcGST-S2的表达水平显著下调。3个上调GST基因均在24 h或36 h内显著上调表达响应槲皮素的诱导。【结论】槲皮素能显著诱导美国白蛾中肠6个GST基因的表达水平,但对不同基因诱导的表达模式不同。HcGST-E1、HcGST-E3和HcGST-O1显著上调表达响应不同质量分数槲皮素的诱导,推测这3个基因是参与美国白蛾解毒代谢槲皮素的关键基因。 展开更多
关键词 美国白蛾 gst基因 槲皮素 诱导 转录表达
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核桃抗逆基因JrGSTU23的克隆及表达分析 被引量:3
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作者 高向倩 李忆林 +3 位作者 贾彩霞 李大培 杨玉婷 杨桂燕 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期589-595,共7页
谷胱甘肽转移酶GST基因在植物逆境响应中具有重要作用。核桃Juglans regia是重要的经济林木,其生长和产量受环境因子的影响。为探索核桃抗逆生理机制,筛选抗逆基因,以品种‘香玲’‘Xiangling’为试材,克隆获得核桃JrGSTU23基因,并进行... 谷胱甘肽转移酶GST基因在植物逆境响应中具有重要作用。核桃Juglans regia是重要的经济林木,其生长和产量受环境因子的影响。为探索核桃抗逆生理机制,筛选抗逆基因,以品种‘香玲’‘Xiangling’为试材,克隆获得核桃JrGSTU23基因,并进行生物信息学和基因表达分析,预测JrGSTU23的基本生物功能。结果显示:JrGSTU23基因的开放阅读框(ORF)为684 bp,编码多肽为25.89 kDa,包含氨基酸227,理论等电点为5.20。与碧桃Prunus persica,毛果杨Populus trichocarpa等同源蛋白进行多序列比对,发现均有GST-Tau保守结构域,且与香蕉Musa acuminata和毛果杨等的Tau家族GST蛋白具有较近的进化关系;其上游2 000 bp启动子中含有多种与逆境响应相关的顺式作用元件。实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)发现,JrGSTU23在植物激素脱落酸(ABA),茉莉酸(MeJA),水杨酸(SA)和非生物胁迫氯化钠,聚乙二醇(PEG 6000),6℃等胁迫下能不同程度地被诱导表达,且在根和叶中的表达趋势不同。表明JrGSTU23受不同植物激素和非生物胁迫诱导,且具有组织表达特异性,推测其在核桃逆境响应中起到一定作用。 展开更多
关键词 林木育种学 核桃 gst基因 基因表达 胁迫 启动子
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脱落酸和赤霉素对核桃JrGSTU8基因响应炭疽病的表达调控 被引量:3
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作者 马凯恒 谢牧洪 +4 位作者 郑欣悦 贾彩霞 洪心悦 孙宇栋 杨桂燕 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期121-129,共9页
【目的】谷胱甘肽转移酶(GST)是植物应对外界刺激的重要酶类,其表达可有效改善植株抗逆能力。核桃是重要的经济木本油料植物,其产量和品质受不同环境因子影响,其中主要由胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides引起的核桃炭疽病是导... 【目的】谷胱甘肽转移酶(GST)是植物应对外界刺激的重要酶类,其表达可有效改善植株抗逆能力。核桃是重要的经济木本油料植物,其产量和品质受不同环境因子影响,其中主要由胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides引起的核桃炭疽病是导致我国核桃严重落果、枯梢的主要病害,近年来呈逐渐严重趋势,已成为限制我国核桃产业可持续发展的一个重要因素。为更好的防治核桃炭疽病,必须掌握核桃响应炭疽病的调控机制。由于植株响应逆境通常涉及不同激素信号通路,特别是在病害响应中脱落酸(ABA)和赤霉素(GA)具有重要调节作用。因此,本研究鉴定GST家族成员基因JrGSTU8,对其在ABA和GA介导下的炭疽病响应进行分析,为揭示核桃逆境适应机制和科学的田间管理提供依据。【方法】以‘香玲’核桃cDNA为模板克隆获得一个Tau类GST基因,命名为JrGSTU8。通过分析JrGSTU8的基本信息、保守结构域、进化、启动子及其包含的顺式作用元件,预测JrGSTU8与逆境响应的潜力。对核桃进行炭疽病、ABA、GA、炭疽病+ABA、炭疽病+GA等不同处理,提取RNA反转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对JrGSTU8的表达进行分析,明确JrGSTU8响应ABA、GA和炭疽病的能力。【结果】JrGSTU8基因开放阅读框长612 bp,推导的多肽分子量为23145.57 Da,包含氨基酸203 aa,理论等电点为6.61,与杨梅Morella rubra GSTU8等蛋白的亲缘关系较近。JrGSTU8上游1443 bp启动子包含307个顺式作用元件位点,属于80类不同元件,包括赤霉素(GA)(如WRKY71OS、TATCCAOSAMY、PYRIMIDINEBOXOSRAMY1A),脱落酸(ABA)(如MYB2CONSENSUSAT、BOXLCOREDCPAL、CAREOSREP1)等激素响应相关,热(CCAATBOX1)、低温(MYCCONSENSUSAT)等非生物胁迫以及病害(BIHD1OS、WBOXATNPR1、WRKY71OS、WRKY71OS)响应相关元件。qRT-PCR发现,JrGSTU8基因能被ABA、GA和核桃炭疽病不同程度地诱导表达,且ABA和GA均可有效提高JrGSTU8响应� 展开更多
关键词 核桃 gst基因 启动子 生物胁迫 表达活性
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肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析 被引量:3
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作者 冉旭华 闻晓波 +4 位作者 王春仁 刘娣 孙中武 李晓娟 王密 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1005-1007,共3页
目的构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染... 目的构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究。 展开更多
关键词 肝片吸虫 gst基因 真核表达 活性分析
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逆境对GST基因过表达库德毕赤酵母G43生长及脱镉能力的影响 被引量:1
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作者 徐婉莹 戚晓雪 +1 位作者 何晓霞 徐莹 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2022年第11期3620-3626,共7页
目的探究逆境对谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因过表达库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G43生长及脱镉能力的影响。方法以一株高镉抗性和高镉脱除率的GST基因过表达的重组P.kudriavzevii G43为研究对象,从生物... 目的探究逆境对谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)基因过表达库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)G43生长及脱镉能力的影响。方法以一株高镉抗性和高镉脱除率的GST基因过表达的重组P.kudriavzevii G43为研究对象,从生物量和脱镉率两方面评价盐、低pH、乙醇及高温逆境条件对其生长和脱镉能力的影响。结果逆境培养条件对G43的生长和脱镉能力影响较大。与原始菌株P.kudriavzevii A16(CK)相比,G43对盐、酸、乙醇及热的耐受力均有显著提升:可耐受质量浓度为120 g/L的NaCl,pH 2.5时仍可正常生长,培养基乙醇体积分数10%时仍可生长,可耐受43℃高温。在不同逆境条件下,G43的脱镉能力与原始菌株相当或者有明显提升。结论重组菌株G43具有优异的耐受性,不同培养条件对其脱镉效果有很大影响,此为后续P.kudriavzevii等微生物的镉抗性和脱镉机制研究提供基础数据,也为其在食品体系镉脱除领域的应用奠定理论基础。 展开更多
关键词 库德毕赤酵母菌 gst基因 重组菌株 培养条件 耐受性 脱镉率
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棉铃虫核型多角体病毒感染对宿主昆虫GST活性及其表达水平的影响 被引量:1
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作者 黄诗迪 黄彩萍 +1 位作者 于欢 王敦 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2015年第11期129-133,共5页
【目的】研究棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)感染宿主昆虫后对宿主谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性与基因表达水平的影响,明确病毒在侵染宿主过程中对宿主昆虫GST的调控作用。【方法】采用50和100PIB/只2种剂量的HearNPV病毒感染3龄棉铃虫,... 【目的】研究棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)感染宿主昆虫后对宿主谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性与基因表达水平的影响,明确病毒在侵染宿主过程中对宿主昆虫GST的调控作用。【方法】采用50和100PIB/只2种剂量的HearNPV病毒感染3龄棉铃虫,测定感染后不同时间试虫中肠GST活性与其编码基因的表达水平,对比分析病毒感染与未感染健康试虫的GST活性及其编码基因表达水平的差异。【结果】棉铃虫在HearNPV感染初期,GST活性显著提高,同时GST表达水平显著上调;随着感染时间的推移,GST活性与其编码基因的表达水平均显著下降,表明病毒感染后对宿主昆虫GST活性的影响与其对GST表达水平的调控相关。【结论】HearNPV感染棉铃虫过程中,病毒入侵能够激活宿主GST基因的表达,但病毒的持续感染最终会抑制GST编码基因的表达水平。 展开更多
关键词 棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV) 谷胱甘肽S-转移酶(gst) gst基因 表达水平
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SPO11基因和GST基因多态性与汉族人群原发性不育的相关性研究 被引量:2
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作者 冯战启 景治安 +6 位作者 刘红彦 廖世秀 郭梁洁 毛长青 刘彦军 吴辉 高江涛 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期866-870,共5页
目的探讨SPOjj基因及谷胱甘肽硫转移酶(glutathionine S-transferase,GST)基因家族多态性与汉族人群原发性不育的相关性。方法采用多重PCR及测序技术检测216例汉族原发性不育男性和198名正常生育男性的SP011基因rs28368082位点(C.5... 目的探讨SPOjj基因及谷胱甘肽硫转移酶(glutathionine S-transferase,GST)基因家族多态性与汉族人群原发性不育的相关性。方法采用多重PCR及测序技术检测216例汉族原发性不育男性和198名正常生育男性的SP011基因rs28368082位点(C.517C〉T)和GST基因家族多态性。结果SP011基因CC和TT基因型在病例组中基因型频率分别为87.5%(189/216)和12.5%(27/216),在对照组中分别为97.5%(193/198)和2.5%(5/198),两种基因型频率在两组中分布差异有统计学意义(P〈0.05)GSTP1第5外显子(c.313A〉G)多态性在病例和对照组中频率分布差异有统计学意义(P〈0.05);GSTMI(-/-)、GSTT1(+/+)、GSTP1(AA)基因型与SPO11(CT)基因型组合频率分布在病例和对照组中差异有统计学意义(P〈0.05)。结论SP011基因rs28368082位点C〉T及GSTP1第5外显子c.313A〉G多态性可能是汉族人群原发性不育患者的遗传易感因素。 展开更多
关键词 原发性不育 SPO11基因 gst基因 多态性
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捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析 被引量:1
14
作者 赵学亮 孙柯 +2 位作者 苏倩 呼和巴特尔 王文龙 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期123-130,共8页
为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至E.coil BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAG... 为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至E.coil BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE分析蛋白表达的特征,并利用在线软件对GST蛋白进行生物信息学分析。结果表明:捻转血矛线虫GST基因大小为618 bp;诱导后的pET30a(+)-GST重组菌最佳诱导条件为0.05 mmol/L的IPTG在37℃时诱导6 h,以包涵体的形式存在,大小约为29 ku。生物信息学分析表明:GST分子式为C1083H1657N277O294S6,属于不含信号肽和跨膜区的亲水性蛋白;二级结构主要由α螺旋形成;潜在的抗原表位主要位于25~48、55~63、92~106、113~124、139~147、170~189和195~205位氨基酸附近。本试验成功构建GST基因原核表达系统,优化表达条件下能稳定纯化GST重组蛋白,为进一步探索捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制及GST蛋白的生物学特性提供研究基础。 展开更多
关键词 捻转血矛线虫 gst基因 原核表达 生物信息学
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葱蝇谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 夏洁 陈斌 +1 位作者 郝友进 司风铃 《重庆师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2012年第4期24-28,共5页
谷胱苷肽S-转移酶(GST)是昆虫体内广泛存在的一类解毒酶,可以保护机体免受内源性或氧化物的损害。昆虫对一些杀虫剂的抗性与GST表达水平增高有关。GST的研究主要集中在杀虫剂抗性上,可将其作为昆虫的药物靶标,设计和开发新型的杀虫剂。... 谷胱苷肽S-转移酶(GST)是昆虫体内广泛存在的一类解毒酶,可以保护机体免受内源性或氧化物的损害。昆虫对一些杀虫剂的抗性与GST表达水平增高有关。GST的研究主要集中在杀虫剂抗性上,可将其作为昆虫的药物靶标,设计和开发新型的杀虫剂。采用RACE的方法,克隆了葱蝇(Delia antiqua)GST基因cDNA的全长序列(GenBank登录号:JQ625502),获得的cDNA全长874bp,其中阅读框ORF 627bp,编码208个氨基酸,推测其相对分子质量为23.9kD,等电点为5.83。通过该基因推导的氨基酸序列与其它物种的GST蛋白进行相似性比较和系统发育分析,发现葱蝇与丝光绿蝇(Lucilia cuprina)的谷胱甘肽转移酶氨基酸序列同源性最高。该结果进一步丰富了GST基因的基础数据,有助于葱蝇的杀虫剂抗性机理和发育机理的相关研究。 展开更多
关键词 葱蝇 谷胱甘肽S-转移酶 gst基因 序列分析 系统发育树
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鲤GST基因超家族的识别及进化研究
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作者 吕红皂 胡宇 张江凡 《河南水产》 2018年第4期25-28,共4页
谷胱甘肽转移酶(Clutathion S-transferases,GSTs)是生物体内的一类同工酶,其主要功能是催化有害物质的亲电子团与还原型谷胱甘肽的巯基耦联,从而达到分解有害物质的目的。由于鲤经历了多次基因组复制,其体内GST基因数目发生了变化。本... 谷胱甘肽转移酶(Clutathion S-transferases,GSTs)是生物体内的一类同工酶,其主要功能是催化有害物质的亲电子团与还原型谷胱甘肽的巯基耦联,从而达到分解有害物质的目的。由于鲤经历了多次基因组复制,其体内GST基因数目发生了变化。本文在NCBI下载了小鼠(Mus musculus)、人(Homo sapiens)、斑马鱼(Danio rerio)、鲢鱼(Hypophthalmichthys molitrix)、鲫鱼(Carassius auratus)、草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)和尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的GST基因序列,使用MEGA6软件构建系统发育树,并对鲤GST基因进行命名。结果表明GST基因家族在进化上具有一定的保守性。物种聚类越近,亲缘关系越近,GST基因的相似度越高。鲤部分GST基因数目是斑马鱼的两倍,证实鲤在进化过程中比斑马鱼多一轮全基因组复制,但一些GST基因数目与斑马鱼相同甚至更少,说明存在部分基因丢失的现象。本文为鲤的基因进化研究提供了一定的借鉴,对鲤优良品种选育具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 gst基因 基因复制和保留 基因丢失
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日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶原核表达载体的构建及序列分析 被引量:1
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作者 方桂杰 乔宪凤 《江西农业学报》 CAS 2010年第11期8-10,14,共4页
为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因... 为构建带有组氨酸标签(his-tag)的日本血吸虫谷胱甘肽硫转移酶(sjGST)表达载体。以载有sjGST基因的载体PGEX-KG为模板,PCR扩增sjGST基因,并在进行酶切和基因测序后将其克隆到pET28a载体上。运用生物学软件与具有代表性的血吸虫GST基因进行比对并对可能的表达产物进行分析。结果表明,PCR产物与3种sjGST基因有99%的同源性。重组载体构建成功。 展开更多
关键词 日本血吸虫 谷胱甘肽硫转移酶 原核 表达载体的构建 序列分析 SCHISTOSOMA JAPONICUM Sequence Analysis 基因测序 重组载体构建 组氨酸标签 生物学软件 表达产物 PCR产物 HIS-TAG gst基因 同源性 代表性 pET28a 模板 酶切
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CYP和GST基因的遗传多态性与化疗个体化研究进展 被引量:1
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作者 袁晓军 顾龙君 《国外医学(儿科学分册)》 2002年第5期231-233,共3页
化疗极大地改变了白血病等恶性肿瘤患者的预后,但仍有部分患者不能获得缓解或缓解后复发。近年研究发现,药物代谢酶的遗传多态性可导致患者对药物出现不同的治疗效应。细胞色素P450和谷胱甘肽S-转移酶是两类重要的药物代谢酶,参与体内... 化疗极大地改变了白血病等恶性肿瘤患者的预后,但仍有部分患者不能获得缓解或缓解后复发。近年研究发现,药物代谢酶的遗传多态性可导致患者对药物出现不同的治疗效应。细胞色素P450和谷胱甘肽S-转移酶是两类重要的药物代谢酶,参与体内多种药物代谢,在人群中具有广泛的遗传多态性,它们与化疗个体化的关系已引起人们的关注。 展开更多
关键词 CYP gst基因 遗传多态性 化疗个体化 研究进展 恶性肿瘤
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HSP70基因上游调控序列对GST基因在耻垢分枝杆菌中表达效率的影响
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作者 程继忠 皇甫永穆 +2 位作者 海涛 梁驹卿 肖红 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期100-107,共8页
将外源基因———日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)基因克隆到大肠杆菌分枝杆菌穿梭质粒中,构建成四个不同的表达截体,研究它们在耻垢后分枝杆菌(Mycobacteriumsmegmatis)中的表达效率。首先将... 将外源基因———日本血吸虫26kD抗原(Sj26GST)基因克隆到大肠杆菌分枝杆菌穿梭质粒中,构建成四个不同的表达截体,研究它们在耻垢后分枝杆菌(Mycobacteriumsmegmatis)中的表达效率。首先将含有结核杆菌热休克蛋白70(HeatShockProtein,HSP70)的启动子的质粒pMT70用NcoI切,进行两种不同的修饰后,得到不同的SD序列;将Sj26GST基因克隆进去。再将含HSP70启动子和Sj26GST基因的片段切下,克隆到分枝杆菌大肠杆菌穿梭质粒pBCG2000中,筛选出不同SD序列、不同方向和不同拷贝数的分枝杆菌表达载体四个。所表达的重组天然Sj26GST(rSj26GST)为可溶性蛋白,在SDSPAGE上分子量为26kD处可见明显的表达蛋白带。通过薄层扫描分析,发现表达质粒中双拷贝启动子外源基因组合,表达效率最高,是单拷贝组合的16倍,占分枝杆菌菌体总蛋白的28%。而不同的克隆方向和不同的SD序列(两者相差3个碱基)对表达效率的影响不明显。 展开更多
关键词 上游调控序列 表达效率 分枝杆菌 gst基因
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猪蛔虫GST蛋白编码基因克隆及序列分析
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作者 吴飞 边青青 +7 位作者 王丹 邹勇 胡雄峰 任世斌 芮聪 李坤 杨莹 林青 《动物医学进展》 北大核心 2017年第11期42-47,共6页
为预测并分析猪蛔虫(Ascaris suum)谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)蛋白编码基因的结构特征及其B细胞抗原表位,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增猪蛔虫GST蛋白编码序列(coding sequence,CDS),将纯化的DNA与pMD19-... 为预测并分析猪蛔虫(Ascaris suum)谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)蛋白编码基因的结构特征及其B细胞抗原表位,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增猪蛔虫GST蛋白编码序列(coding sequence,CDS),将纯化的DNA与pMD19-T载体连接并转化入JM109感受态细胞,并将阳性菌液测序后进行序列分析、结构预测和抗原表位预测。结果表明,获得的猪蛔虫GST蛋白CDS序列与参考基因(Y10613.1)相比,在第243和248位核苷酸处发生变异,并导致第83位氨基酸由甲硫氨酸(Met)变异为苏氨酸(Thr);其优势B细胞抗原表位可能位于肽段29-38、43-47、80-87、114-120、129-131、143-145、190-194、201-204区域内或附近,其中最可能位于肽段43-46和201-204区域内或附近。研究结果为猪蛔虫基因工程疫苗的研发奠定了理论基础,同时为后续猪蛔虫GST基因功能和耐药相关性研究提供了基础资料。 展开更多
关键词 猪蛔虫 gst基因 克隆 序列分析
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