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GSDME as an executioner of chemotherapy-induced cell death 被引量:13
1
作者 Xiaoliang Yu Sudan He 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第11期1291-1294,共4页
Cell death is a crucial process required for development, tissue homeostasis, and pathological cell loss in multicellu- lar organisms. Cell death mainly occurs in two alternative modes: apoptosis or necrosis. Apoptos... Cell death is a crucial process required for development, tissue homeostasis, and pathological cell loss in multicellu- lar organisms. Cell death mainly occurs in two alternative modes: apoptosis or necrosis. Apoptosis is a form of pro- grammed cell death with typical morphological features, including cell shrinkage, chromatin condensation, and DNA fragmentation (Degterev and Yuan, 2008). The dying cell is eventually fragmented into membrane-bound apoptotic bodies that are engulfed by surrounding phagocytes. 展开更多
关键词 gsdme executioner chemotherapy-induced cell death
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雷公藤甲素对GSDME依赖性肝癌细胞焦亡的影响 被引量:10
2
作者 程希 周淑萍 何杰 《中医药导报》 2021年第2期8-11,共4页
目的:探究雷公藤甲素对肝癌细胞Bel-7402焦亡的影响及其分子机制。方法:体外培养肝癌细胞Bel-7402,CCK-8检测不同浓度的雷公藤甲素(2.5、5.0、10.0μg/mL)对肝癌细胞活力影响;PI/DAPI染色观察细胞焦亡形态变化;ELISA试剂盒检测IL-1β和I... 目的:探究雷公藤甲素对肝癌细胞Bel-7402焦亡的影响及其分子机制。方法:体外培养肝癌细胞Bel-7402,CCK-8检测不同浓度的雷公藤甲素(2.5、5.0、10.0μg/mL)对肝癌细胞活力影响;PI/DAPI染色观察细胞焦亡形态变化;ELISA试剂盒检测IL-1β和IL-18释放量;Western blotting检测Caspase-3、GSDME、IL-1β和IL-18表达;转染GSDME siRNA 24 h后PI/DAPI染色检测细胞焦亡形态变化。结果:CCK-8检测发现,随着雷公藤甲素浓度增加,Bel-7402细胞活力明显降低(P<0.01);给予雷公藤甲素(10.0μg/mL)能够明显促进细胞焦亡,升高细胞上清液中IL-1β和IL-18含量,促进Caspase-3、GSDME-N、IL-1β和IL-18表达(P<0.05或P<0.01);siGSDME能够明显抑制细胞焦亡形态变化,降低细胞焦亡数目。结论:雷公藤甲素能够促进GSDME依赖性细胞焦亡,抑制肝癌细胞增殖。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 肝癌 细胞焦亡 gsdme
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GSDME通过调控细胞焦亡影响乳腺癌MCF-7细胞对紫杉醇的敏感性 被引量:10
3
作者 石瑛 任静静 +3 位作者 梁晨 王芳 李伟 李肖甫 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期146-151,共6页
目的:探讨GSDME是否通过调控细胞焦亡影响乳腺癌MCF-7细胞对化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)的敏感性。方法:利用RNA干扰技术敲降GSDME在MCF-7细胞中的表达,采用CCK-8法、流式细胞术、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验及W... 目的:探讨GSDME是否通过调控细胞焦亡影响乳腺癌MCF-7细胞对化疗药物紫杉醇(paclitaxel,PTX)的敏感性。方法:利用RNA干扰技术敲降GSDME在MCF-7细胞中的表达,采用CCK-8法、流式细胞术、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验及Wb技术分别检测GSDME低表达前后,PTX对细胞增殖、焦亡、LDH释放、GSDME-N端蛋白及cleaved-caspase-3蛋白表达水平的变化情况。结果:与对照组比较,PTX处理组细胞的焦亡率、LDH释放量、GSDME-N端蛋白及cleaved-caspase-3蛋白的表达水平均显著升高(均P<0.01);与si-NC组比较,敲低GSDME可使si-GSDME组细胞对PTX的敏感性降低,其细胞焦亡率、LDH释放量及GSDME-N端蛋白表达水平均显著下降(均P<0.01)。结论:敲减MCF-7细胞中GSDME的表达量可显著抑制细胞焦亡并降低细胞对PTX的敏感性。 展开更多
关键词 乳腺癌 MCF-7细胞 焦亡 gsdme 紫杉醇
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GSDME介导的细胞焦亡在肿瘤发生发展中的作用及其临床意义 被引量:10
4
作者 张依格(综述) 高军 王建榜(审阅) 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期288-293,共6页
细胞焦亡(pyroptosis)是新近发现的一种依赖炎性半胱天冬酶(caspase)的促炎程序性细胞死亡方式(regulated cell death,RCD),主要通过gasdermin家族成员发生剪切活化,引起细胞膜穿孔和细胞内容物释放的过程。Gasdermin E(GSDME)是gasder... 细胞焦亡(pyroptosis)是新近发现的一种依赖炎性半胱天冬酶(caspase)的促炎程序性细胞死亡方式(regulated cell death,RCD),主要通过gasdermin家族成员发生剪切活化,引起细胞膜穿孔和细胞内容物释放的过程。Gasdermin E(GSDME)是gasdermin家族的主要成员之一,近来研究发现在几种常见的肿瘤中常因其启动子甲基化而低表达,进而增强了肿瘤的增殖和转移能力;分析其结构和功能显示,GSDME可被激活态的caspase-3切割并形成具有造孔活性的GSDME-N末端结构域,从而诱导肿瘤细胞发生焦亡,介导肿瘤细胞死亡。本文就GSDME介导焦亡的机制及其与肿瘤发生发展的关系作一综述,以期提出新的临床肿瘤诊疗方向。 展开更多
关键词 细胞焦亡 gsdme CASPASE-3 肿瘤
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雷公藤红素通过调控ATF4/caspase-3/GSDME信号通路促进肝癌细胞焦亡 被引量:1
5
作者 李端 王永辉 +2 位作者 周静 张乐 孔永红 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期299-307,共9页
目的探究雷公藤红素(tripterine,TRI)抑制肝癌细胞(hepatocellular carcinoma,HCC)进展的新机制。方法利用不同浓度(0、0.5、2和8μmol·L-1)TRI作用于肝癌细胞,然后利用CCK-8、细胞克隆、Transwell和蛋白免疫印迹等实验方法评估细... 目的探究雷公藤红素(tripterine,TRI)抑制肝癌细胞(hepatocellular carcinoma,HCC)进展的新机制。方法利用不同浓度(0、0.5、2和8μmol·L-1)TRI作用于肝癌细胞,然后利用CCK-8、细胞克隆、Transwell和蛋白免疫印迹等实验方法评估细胞表型和可能机制;再利用siRNA将靶基因GSDME进行干扰,确定GSDME的作用;最后使用移植肿瘤模型验证TRI在体内抑制HCC细胞的生长的机制。结果TRI可抑制HCC细胞增殖、克隆和侵袭,促进细胞焦亡。免疫印迹结果显示,TRI处理后肝细胞癌HepG2或Hepa1-6中GSDME表达均上调,同时cleaved caspase-3和PARP也明显升高。敲除GSDME后可部分逆转TRI诱导的细胞焦亡。同时GSDME敲低后的细胞具有更强的克隆和迁移能力,且与单独的TRI治疗组相比,细胞凋亡率降低。在体内实验中,TRI抑制可HCC肿瘤生长,TRI+siGSDME组小鼠肿瘤生长速度比单独TRI治疗组快。此外,TRI刺激后HepG2和Hepa1-6细胞中p-eIF2a、ATF4均升高。免疫荧光结果显示,TRI刺激后HepG2和Hepa1-6细胞中ATF4阳性细胞数呈剂量依赖性增加。结论TRI抑制肝癌细胞生长和侵袭可能与其调控ATF4/caspase-3/GSDME信号通路促进肝癌细胞焦亡有关。 展开更多
关键词 肝癌细胞 细胞焦亡 雷公藤红素 gsdme ATF4 CASPASE3
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PP1A与GSDME介导的结直肠癌细胞焦亡的临床意义
6
作者 司航 王娜娜 +3 位作者 常文丽 刘素素 石文雅 张骞 《临床与实验病理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期580-586,591,共8页
目的检测PP1A与GSDME在结直肠癌组织中的表达与CD8^(+)T淋巴细胞丰度,探讨PP1A与GSDME介导焦亡的相关性和临床意义。方法应用GEPIA数据库分析PP1A与GSDME在结直肠癌组织与正常组织中mRNA的表达。采用Western blot法检测结直肠癌组织与... 目的检测PP1A与GSDME在结直肠癌组织中的表达与CD8^(+)T淋巴细胞丰度,探讨PP1A与GSDME介导焦亡的相关性和临床意义。方法应用GEPIA数据库分析PP1A与GSDME在结直肠癌组织与正常组织中mRNA的表达。采用Western blot法检测结直肠癌组织与对应癌旁正常黏膜中PP1A蛋白表达水平,运用免疫组化法检测107例结直肠癌与癌旁正常黏膜中PP1A、GSDME蛋白的表达和CD8^(+)T淋巴细胞丰度。利用Spearman等级相关性分析PP1A、GSDME和CD8^(+)T淋巴细胞丰度的相关性。结果GEPIA数据库检索显示,PP1A与GSDME的mRNA在结直肠癌组织和正常组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot法检测结果显示,结直肠癌组织中PP1A相对表达量明显高于癌旁组织(0.937 vs 0.643,P<0.001)。免疫组化结果显示,结直肠癌组织中PP1A的表达明显高于正常黏膜,而GSDME的表达明显低于正常黏膜(P<0.05),GSDME表达与结直肠癌患者年龄、临床分期和错配修复蛋白密切相关(P<0.05);CD8^(+)T细胞在癌浸润前沿的分布明显高于癌旁正常黏膜,且CD8^(+)T细胞在癌组织中的分布与pT分期、临床分期及淋巴结转移相关。Spearman相关性分析显示,PP1A与GSDME表达呈负相关(r=-0.196,P<0.05)。PP1A阳性结直肠癌患者的总生存期低于PP1A阴性患者(P<0.05),患者预后与分化程度、淋巴结转移、pT分期和临床分期相关。PP1A表达、肿瘤分化程度、临床分期、pT分期和淋巴结转移均是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素。结论PP1A在结直肠癌中高表达,与GSDME介导的细胞焦亡呈负相关,两者表达差异性与结直肠癌的发生、发展及预后均密切相关,可作为判断结直肠癌患者预后的潜在指标,CD8^(+)T细胞的差异性分布可能与GSDME介导的细胞焦亡及肿瘤的发展相关。 展开更多
关键词 结直肠癌 PP1A gsdme 细胞焦亡 CD8^(+)T淋巴细胞 预后
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小鼠GSDME对肿瘤进展的抑制作用及其机制
7
作者 陈德高 余忍忍 +4 位作者 吴玉翠 边阳萍 吕浩 袁婷 朱波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期19-25,共7页
目的 探究GSDME对小鼠肿瘤进展的影响及机制。方法 利用蛋白质免疫印迹检测蛋白表达;利用野生型和GSDME敲除小鼠构建肿瘤模型并监测肿瘤进展;利用CRISPR-Cas9技术敲除MC38细胞的GSDME并构建肿瘤模型。利用体外诱导骨髓细胞分化成为巨噬... 目的 探究GSDME对小鼠肿瘤进展的影响及机制。方法 利用蛋白质免疫印迹检测蛋白表达;利用野生型和GSDME敲除小鼠构建肿瘤模型并监测肿瘤进展;利用CRISPR-Cas9技术敲除MC38细胞的GSDME并构建肿瘤模型。利用体外诱导骨髓细胞分化成为巨噬细胞和树突状细胞,并分别进行尾静脉回输观察肿瘤生长;利用多通道流式细胞技术检测肿瘤中免疫细胞的浸润、CD8^(+)T细胞的功能分子、肿瘤相关巨噬细胞和树突状细胞的Cleaved Caspase-3及表型分子。结果 GSDME敲除促进肿瘤进展,减少肿瘤内CD8^(+)T细胞数量,减少IFN-γ和Perforin在CD8^(+)T细胞的表达。GSDME主要表达在巨噬和树突状细胞,分别回输GSDME敲除的巨噬和树突状细胞不显著影响肿瘤进展。GSDME敲除小鼠肿瘤内Cleaved Caspase-3阳性巨噬和树突状细胞减少,且Cleaved Caspase-3阳性巨噬细胞表达更多iNOS和MHCII,Cleaved Caspase-3阳性树突状细胞表达更多CD80和CD86。结论 GSDME增加具有促进CD8^(+)T细胞功能的Cleaved Caspase-3阳性巨噬和树突状细胞,进而抑制肿瘤进展。 展开更多
关键词 gsdme CD8^(+)T细胞 巨噬细胞 树突状细胞 CASPASE-3
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基于细胞焦亡机制的肿瘤免疫治疗新策略 被引量:5
8
作者 张俊文 苏延军 李西川 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期701-707,共7页
细胞焦亡是近年来发现的一种全新的调节性细胞死亡形式,在肿瘤免疫中发挥重要作用。肿瘤发生发展进程中的细胞焦亡包含免疫细胞焦亡(ICP)和肿瘤细胞焦亡(CCP)两种类型,并可能发挥促癌或抑癌作用。Caspase-1介导的经典途径和caspase-4/5... 细胞焦亡是近年来发现的一种全新的调节性细胞死亡形式,在肿瘤免疫中发挥重要作用。肿瘤发生发展进程中的细胞焦亡包含免疫细胞焦亡(ICP)和肿瘤细胞焦亡(CCP)两种类型,并可能发挥促癌或抑癌作用。Caspase-1介导的经典途径和caspase-4/5/11介导的非经典途径均可以介导ICP的发生,ICP参与的肿瘤免疫中,炎症小体和细胞因子IL-18、IL-1β发挥了重要作用。Caspase-3和颗粒酶B切割并激活GSDME途径介导了CCP的发生,在肿瘤发生过程中自发且持久的CCP促进肿瘤生长,而在化疗等过程中GSDME激活介导的CCP则具有显著的抑癌作用。细胞焦亡的发生可以刺激肿瘤微环境中的炎症反应,提高肿瘤细胞的免疫原性,促进抗肿瘤免疫的发生。因此,细胞焦亡及其引发的炎症反应在肿瘤免疫中发挥重要作用,对该领域的研究可能为抗肿瘤免疫治疗提供新思路。 展开更多
关键词 细胞焦亡 炎症反应 肿瘤免疫治疗 CASPASE gsdme
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GSDME在DADS诱导白血病K562细胞焦亡中的作用研究
9
作者 周灵艳 胡轩源 +1 位作者 刘银花 殷小成 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第15期2730-2737,共8页
目的:研究DADS(Diallyl disulfide, DADS)诱导K562细胞焦亡(pyroptosis)及其分子机制。方法:Western Blot检测Kasumi、K562、THP-1、HL-60、NB4细胞的Gasdermin家族蛋白E(Gasdermin E, GSDME)、Gasdermin家族蛋白D(Gasdermin D,GSDMD);... 目的:研究DADS(Diallyl disulfide, DADS)诱导K562细胞焦亡(pyroptosis)及其分子机制。方法:Western Blot检测Kasumi、K562、THP-1、HL-60、NB4细胞的Gasdermin家族蛋白E(Gasdermin E, GSDME)、Gasdermin家族蛋白D(Gasdermin D,GSDMD);甲基特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)法检测K562及NB4细胞GSDME基因启动子检测区甲基化情况;CCK-8检测DADS对K562细胞增殖活力的影响;Western Blot、LDH释放实验检测DADS处理K562细胞后GSDME、GSDME-N、IL-1β、Cleaved IL-1β蛋白表达水平及乳酸脱氢酶(Lactic dehydrogenase, LDH)释放量变化;慢病毒转染技术构建GSDME敲低的稳转K562细胞株;Western Blot检测下调GSDME对DADS处理K562细胞GSDME-N端蛋白表达水平的影响。结果:Kasumi、K562、THP-1、HL-60、NB4中GSDME、GSDMD的蛋白表达水平存在差异;NB4细胞的GSDME基因启动子检测区甲基化扩增出阳性条带,而非甲基化扩增为阴性;K562细胞GSDME基因启动子检测区甲基化未能扩增出阳性条带,而非甲基化扩增为阳性;DADS处理后K562细胞的LDH释放量、GSDME-N、Cleaved-IL-1β蛋白均显著升高(P<0.01);与NC组相比,敲低组的K562细胞中mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);DADS处理后,NC组的GSDME-N蛋白水平明显上升(P<0.001),QD组GSDME-N蛋白的水平无显著差异(P>0.05);与NC-DADS组相比,经过DADS处理的QD组GSDME-N蛋白水平明显下降(P<0.001)。结论:DADS诱导K562细胞发生细胞焦亡,其分子机制可能与GSDME介导的焦亡通路有关。 展开更多
关键词 DADS K562 细胞焦亡 gsdme
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细胞焦亡与溃疡性结肠炎研究的最新进展 被引量:8
10
作者 唐立 陆岩 欧阳满照 《广东医学》 CAS 2021年第11期1393-1399,共7页
细胞焦亡是一种新发现的由Gasdermin蛋白家族成员介导的程序性细胞死亡方式,特征为细胞质膜孔径形成和炎性因子的活化,表现为细胞肿胀、质膜大泡形成,破裂后细胞内容物释出,使炎症发生级联扩大反应。在受外界刺激后,炎性小体活化进而激... 细胞焦亡是一种新发现的由Gasdermin蛋白家族成员介导的程序性细胞死亡方式,特征为细胞质膜孔径形成和炎性因子的活化,表现为细胞肿胀、质膜大泡形成,破裂后细胞内容物释出,使炎症发生级联扩大反应。在受外界刺激后,炎性小体活化进而激活依赖半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)的经典细胞焦亡通路和依赖Caspase-4/5/11的非经典细胞焦亡通路,活化的炎性Caspase激活白细胞介素(IL)-1β、IL-18,并将底物蛋白GSDMD切割为有成孔活性的N末端,GSDMD-N通过在质膜和线粒体上聚合成孔介导细胞焦亡。另有研究证明在GSDME可被Caspase-3切割成GSDME-N片段介导细胞焦亡。研究表明,由微生物感染和危险信号引起的焦亡常与免疫失调有关,过度的炎症反应可导致多种炎症性疾病的发生。大量研究表明焦亡在炎症性肠病等炎症性疾病的发生中起着重要作用。本文旨在阐述细胞焦亡的信号通路及分子机制,并探讨细胞焦亡与溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)关系的研究进展,为进一步阐明UC的发病机制提供新思路,获得有效的防治措施提供可能。 展开更多
关键词 细胞焦亡 溃疡性结肠炎 炎性小体 GSDMD gsdme
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FBW7基因通过GSDME介导的焦亡增强紫杉醇对胰腺癌的抗肿瘤作用研究 被引量:1
11
作者 贾聿明 叶增 +6 位作者 邓艳丽 李胜超 张志磊 王超 徐晓武 秦毅 彭利 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期889-897,共9页
背景与目的:胰腺癌是恶性程度极高的肿瘤,多数患者在就诊时已处于晚期,全身化疗是重要的治疗手段,但是化疗耐药给临床治疗带来很多困扰。紫杉醇作为常用的化疗药物可以诱导肿瘤细胞发生凋亡,含F-框WD重复域蛋白7(F-box and WD repeat do... 背景与目的:胰腺癌是恶性程度极高的肿瘤,多数患者在就诊时已处于晚期,全身化疗是重要的治疗手段,但是化疗耐药给临床治疗带来很多困扰。紫杉醇作为常用的化疗药物可以诱导肿瘤细胞发生凋亡,含F-框WD重复域蛋白7(F-box and WD repeat domain containing 7,FBW7)基因是一种抑癌基因,该基因的功能丧失会导致肿瘤发生、发展。研究表明,FBW7基因具有促进肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤增殖的作用。此外,该基因还被证实可以促进凋亡和通过铁死亡方式增加化疗药物的效果。焦亡是一种由焦孔素(gasdermin,GSDM)蛋白介导的细胞程序性死亡模式,这种细胞死亡往往还伴有炎症反应。本研究旨在探讨FBW7基因是否可以通过焦亡促进紫杉醇发挥抗肿瘤作用。方法:采用慢病毒转染构建FBW7过表达的PANC-1细胞株,采用免疫组织化学法检测临床标本中FBW7和GSDME基因表达的相关性,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测mRNA表达和蛋白质水平。光镜下观察细胞经紫杉醇处理后的形态变化,采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测紫杉醇对细胞活力的影响,采用流式细胞术、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放实验检测紫杉醇对肿瘤细胞的影响。Western blot检测经紫杉醇处理后肿瘤细胞中caspase-3和GSDME的活化情况。结果:RTFQPCR和Western blot检测结果表明,FBW7基因过表达可增加GSDME的表达。免疫组织化学检测结果表明,在体内FBW7和GSDME基因表达呈正相关。流式细胞术和LDH释放实验检测结果显示,FBW7过表达的胰腺癌细胞系PANC-1系经过紫杉醇药物刺激后,细胞死亡的水平较空载体(empty vector,EV)组显著增加。光镜下可观察到具有焦亡表现的FBW7过表达的PANC-1细胞株显著多于EV组细胞。CCK-8实验结果显示,FBW7过表达的细� 展开更多
关键词 胰腺癌 FBW7基因 gsdme 焦亡 敏感性
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奥沙利铂促进过表达GSDME的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡 被引量:5
12
作者 陈婧 王策 +2 位作者 张伟华 张春泽 任君旭 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期884-888,共5页
目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E,GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象。方法:通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GS... 目的:观察过表达Gasdermin蛋白E(gasdermin E,GSDME)基因的结直肠癌Lovo细胞经奥沙利铂处理后发生细胞焦亡的现象。方法:通过qPCR检测结直肠癌细胞株Lovo、正常结直肠上皮细胞HCOEPIC中GSDME基因的表达水平,构建过表达野生型和突变型GSDME的GSDME-WT和GSDME-D270A重组质粒,包装为相应慢病毒后感染Lovo细胞构建GSDME稳定高表达细胞株,Western blotting检测WT、D270A和空载体组中GSDME表达水平。用不同浓度奥沙利铂(0、4、8、16、32、64µg/ml)作用于WT、D270A组Lovo细胞和HCOEPIC细胞,显微镜下观察细胞的形态变化。结果:GSDME在HCOEPIC细胞中表达显著高于Lovo细胞(P<0.01)。成功构建GSDME-WT和GSDME-D270A高表达重组质粒和相应的Lovo细胞株,与空载体组相比,WT和D270A组Lovo细胞中GSDME表达水平明显升高(均P<0.05)。镜下观察发现,64µg/ml奥沙利铂处理各组细胞9和12 h时,WT组的Lovo细胞和HCOEPIC细胞体积逐渐增大并向一侧“吹泡”,表现出明显的细胞焦亡现象,细胞焦亡率显著高于无奥沙利铂处理的对照组[Lovo细胞:(7.405±1.010)%vs(3.441±0.401)%,P<0.05;HCOEPIC细胞:(7.203±1.020)%vs(4.201±0.302)%,P<0.05]。结论:奥沙利铂促进过表达GSDME基因的结直肠癌Lovo细胞发生细胞焦亡。 展开更多
关键词 细胞焦亡 gsdme 奥沙利铂 结直肠癌 生物标志物
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多西他赛对头颈鳞癌细胞焦亡的影响及作用机制探讨 被引量:1
13
作者 高嘉敏 姚艳丽 +2 位作者 王玉珏 张志愿 孙树洋 《中国口腔颌面外科杂志》 CAS 2023年第2期105-111,共7页
目的:探讨多西他赛对头颈鳞癌细胞焦亡的影响及分子机制。方法:用对照组(0μmol/L)和不同浓度多西他赛(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)处理头颈鳞癌细胞CAL33及SCC154,采用活细胞工作站监测细胞焦亡形态变化。利用蛋白免疫印迹法(West... 目的:探讨多西他赛对头颈鳞癌细胞焦亡的影响及分子机制。方法:用对照组(0μmol/L)和不同浓度多西他赛(0.625、1.25、2.5、5、10μmol/L)处理头颈鳞癌细胞CAL33及SCC154,采用活细胞工作站监测细胞焦亡形态变化。利用蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测Gasdermin-E(GSDME)、GSDME-N端、Caspase-3及Caspase-3剪切蛋白的蛋白表达;借助活细胞Caspase-3活性与Annexin V细胞凋亡检测试剂盒检测活细胞中Caspase-3活性;采用活性氧(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞内ROS水平。使用ROS抑制剂乙酰半胱氨酸抑制细胞ROS的产生,进一步利用WB检测对照组(0μmol/L)、2.5μmol/L多西他赛添加5 mmol/L乙酰半胱氨酸处理组、2.5μmol/L多西他赛不添加乙酰半胱氨酸处理组及5 mmol/L乙酰半胱氨酸不添加多西他赛组处理组内GSDME及GSDME-N端剪切蛋白的蛋白表达,观察ROS抑制对焦亡通路的影响。采用SAS 9.4软件包对数据进行统计学分析。结果:与对照组相比,多西他赛诱导CAL33及SCC154产生细胞溶胀崩解,胞膜表面出现气泡样凸起的焦亡表型;促进Caspase-3活性;显著上调GSDME-N端及Caspase-3剪切蛋白的蛋白表达量(P<0.05);诱导ROS水平增加。乙酰半胱氨酸显著降低多西他赛诱导后头颈鳞癌细胞的GSDME-N端蛋白表达量(P<0.05)。结论:多西他赛可能激活ROS/Caspase-3/GSDME通路,诱导头颈鳞癌细胞焦亡。 展开更多
关键词 多西他赛 头颈鳞癌 细胞焦亡 CASPASE-3 gsdme
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GSDME在恶性肿瘤中的研究现状
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作者 张渊 冯勤梅 +2 位作者 马梅杰 白芷玉 李琪 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2023年第5期285-289,共5页
细胞焦亡是一种区别于凋亡和坏死的细胞程序性死亡,其发生过程伴随着细胞膜的裂解和细胞内容物的释放。细胞焦亡由Gasdermin蛋白家族介导发生,并且依赖于caspase的活性。GSDME是Gasdermin蛋白超家族的重要成员之一,在其介导的细胞焦亡... 细胞焦亡是一种区别于凋亡和坏死的细胞程序性死亡,其发生过程伴随着细胞膜的裂解和细胞内容物的释放。细胞焦亡由Gasdermin蛋白家族介导发生,并且依赖于caspase的活性。GSDME是Gasdermin蛋白超家族的重要成员之一,在其介导的细胞焦亡中依赖于caspase-3的活性。近年来,随着对细胞焦亡的进一步研究,GSDME诱导细胞焦亡的机制逐渐明确。众多研究表明GSDME介导的细胞焦亡在肿瘤的发生发展及化疗耐药中起重要作用。然而GSDME介导的细胞焦亡没有特异性,在诱导肿瘤细胞焦亡的同时,可诱导机体的正常细胞发生焦亡,从而对机体的各个器官造成不同程度的损伤。深入研究GSDME诱导细胞焦亡的机制、GSDME在恶性肿瘤中的作用及其化疗不良反应,可为肿瘤的监测、治疗及判断预后提供新的思路。 展开更多
关键词 肿瘤 gsdme 细胞焦亡
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芦荟大黄素通过激活Caspase-3/GSDME焦亡通路发挥抗胶质瘤作用
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作者 方兴刚 汪嫚 +2 位作者 陈卓 张思思 罗杰 《中南药学》 CAS 2023年第2期291-297,共7页
目的 探讨芦荟大黄素(AE)抗脑胶质母细胞瘤(GBM)的作用及机制。方法 梯度浓度AE处理体外培养的GBM细胞,MTT实验检查GBM细胞活力,倒置显微镜及LDH释放实验检测AE对GBM细胞的焦亡诱导作用;Western blot实验检测AE对Caspase-3、GSDME蛋白... 目的 探讨芦荟大黄素(AE)抗脑胶质母细胞瘤(GBM)的作用及机制。方法 梯度浓度AE处理体外培养的GBM细胞,MTT实验检查GBM细胞活力,倒置显微镜及LDH释放实验检测AE对GBM细胞的焦亡诱导作用;Western blot实验检测AE对Caspase-3、GSDME蛋白的活化作用,qPCR检测AE对GBM细胞GSDME在m RNA水平的调控作用;DCFH-DA标识GBM细胞活性氧,荧光显微镜及流式细胞术检测AE处理的GBM细胞活性氧产生水平,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位。结果 与对照组相比,AE能显著降低GBM细胞活性(P <0.05),诱导GBM细胞出现焦亡特异性外观和LDH释放,剪切活化Caspase-3和GSDME蛋白,在mRNA水平升高GSDME的表达,诱导GBM细胞活性氧产生及线粒体膜电位降低。结论 芦荟大黄素通过激活Caspase-3/GSDME焦亡通路诱导GBM焦亡发挥抗胶质瘤作用。 展开更多
关键词 芦荟大黄素 胶质母细胞瘤 CASPASE-3 gsdme 焦亡
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新补骨脂异黄酮通过caspase-3/GSDME通路诱导肝细胞癌Huh-7细胞焦亡
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作者 李雅茹 杨霞 +6 位作者 赵仁双 修志儒 朱羿龙 韩继成 李善智 李一权 金宁一 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期318-323,共6页
目的:探讨新补骨脂异黄酮(NBIF)对肝细胞癌(HCC)Huh-7细胞焦亡的影响及其分子机制。方法:体外培养Huh-7细胞,用CCK-8法检测不同浓度的NBIF处理48 h时对细胞存活率的影响,光学显微镜下观察NBIF处理后Huh-7细胞的形态变化,乳酸脱氢酶(LDH... 目的:探讨新补骨脂异黄酮(NBIF)对肝细胞癌(HCC)Huh-7细胞焦亡的影响及其分子机制。方法:体外培养Huh-7细胞,用CCK-8法检测不同浓度的NBIF处理48 h时对细胞存活率的影响,光学显微镜下观察NBIF处理后Huh-7细胞的形态变化,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞的LDH释放量,WB实验检测细胞中GSDME、caspase-3的蛋白水平变化。采用si RNA干扰Huh-7细胞中caspase-3、GSDME表达后,CCK-8法检测NBIF处理对细胞存活率的影响,WB实验检测GSDME蛋白表达水平,观察NBIF处理对细胞形态的影响,并检测细胞LDH释放量。结果:60μmol/L以上的NBIF均能显著抑制Huh-7细胞的增殖(均P<0.01),光学显微镜下观察到NBIF处理后的细胞出现肿胀、吐泡现象,且LDH释放增加(P<0.01);WB实验结果表明,NBIF能够激活caspase-3蛋白并切割GSDME蛋白,增加GSDME-N的表达(均P<0.01)。干扰caspase-3、GSDME表达后,NBIF对细胞的抑制作用减弱(均P<0.01),GSDME-N蛋白表达受到抑制(P<0.01),显微镜下细胞肿胀、吐泡现象几乎消失,LDH释放明显减少(P<0.05)。结论:NBIF能够通过caspase-3/GSDME途径诱导Huh-7细胞发生焦亡,从而抑制HCC细胞的增殖,为HCC的治疗提供一种新思路。 展开更多
关键词 新补骨脂异黄酮 肝细胞癌 HUH-7细胞 细胞焦亡 gsdme
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鼻咽癌组织中高表达的GSDME对TME免疫浸润和患者预后的影响
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作者 丁一 李昆芳 +5 位作者 王然 张隽宁 苑珀涢 毕馨曼 余继霜 屈艳琳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期489-496,共8页
目的:探究细胞焦亡相关基因GSDME在鼻咽癌组织中的表达及其对肿瘤微环境(TME)和患者预后的影响。方法:从TCGA数据库获得548例鼻咽癌患者的基因表达数据及临床资料,运用R语言对GSDME进行差异表达分析、GO-KEGG富集分析;从人类蛋白质图谱(... 目的:探究细胞焦亡相关基因GSDME在鼻咽癌组织中的表达及其对肿瘤微环境(TME)和患者预后的影响。方法:从TCGA数据库获得548例鼻咽癌患者的基因表达数据及临床资料,运用R语言对GSDME进行差异表达分析、GO-KEGG富集分析;从人类蛋白质图谱(HPA)数据库中获取GSDME蛋白在鼻咽癌组织和相应癌旁组织中的表达数据,通过STRING数据库探究与GSDME相互作用的蛋白质网络;应用ss GSEA算法分析GSDME在鼻咽癌组织中的表达及其与24种免疫细胞浸润的相关性,运用Spearman法分析GSDME与免疫检查点分子的相关性,通过TISIDB数据库分析GSDME表达与细胞因子基因表达的相关性。单因素和多因素COX回归分析筛选预后风险因素,基于风险因素GSDME绘制预后预测列线图和校准图,根据GSDME的表达水平对鼻咽癌患者进行生存分析和风险分析。qPCR法验证中国人鼻咽癌组织中GSDME及4种趋化因子mRNA的表达。结果:数据库数据分析显示,与癌旁组织相比,鼻咽癌组织中GSDME呈高表达(P<0.01),GO-KEGG富集分析显示GSDME参与免疫反应、细胞焦亡相关信号通路,GSDME表达与免疫细胞浸润、细胞因子及免疫检查点分子表达等相关,q PCR检查结果验证了中国人鼻咽癌组织中GSDME呈高表达。GSDME表达量、N分期和M分期是鼻咽癌患者预后的风险因素,基于风险因素建立的列线图和校正图能较好地预测鼻咽癌患者OS,鼻咽癌组织中GSDME高表达的患者预后差。结论:GSDME在鼻咽癌癌组织中呈高表达且是患者预后风险因素,基于GSDME建立的列线图预测预后效能良好;GSDME高表达与TME免疫浸润有关,其可能是免疫治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 鼻咽癌 细胞焦亡 gsdme 预后 免疫细胞浸润
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结肠癌SW620和SW480 GSDME过表达对顺铂敏感性的研究 被引量:4
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作者 肖波 张虹 +2 位作者 笪宇蓉 李智伟 苏延军 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2021年第7期494-501,共8页
目的探讨消化道皮肤素E(GSDME)蛋白过表达对结肠癌顺铂(DDP)敏感性的影响及其可能的分子机制。方法包装过表达GSDME的慢病毒,筛选过表达GSDME的SW620和SW480稳转株后并检测过表达效果;不同浓度的DDP处理结肠癌细胞24 h后,通过MTT法检测... 目的探讨消化道皮肤素E(GSDME)蛋白过表达对结肠癌顺铂(DDP)敏感性的影响及其可能的分子机制。方法包装过表达GSDME的慢病毒,筛选过表达GSDME的SW620和SW480稳转株后并检测过表达效果;不同浓度的DDP处理结肠癌细胞24 h后,通过MTT法检测细胞活力并计算半数抑制浓度(IC50)值,显微镜观察细胞死亡形态,相关试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)和白细胞介素-1β(IL-1β)的释放水平,蛋白质印迹法检测裂解形式的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cl-Caspase-3)和GSDME-N端蛋白。随机数字表法将24只裸鼠平均分为4组,即2对照组(GSDME+Vehicle和WT-SW620+Vehicle)和2实验组(GSDME+DDP和WT-SW620+DDP),建立裸鼠皮下结肠癌模型,测量各组瘤体质量和体积,并比较用药处理前后各组动物体质量的变化。采用SPSS 22.0对数据进行统计学分析。结果结肠癌中筛选出成功过表达GSDME的SW620和SW480稳转株;MTT实验求得2细胞株对DDP处理24 h的IC50值分别为4.91和10.78μg/mL。在小鼠结肠癌模型中:与对照组相比,DDP处理后瘤体积(F=26.67)和瘤体质量(F=38.82)均减小,差异均有统计学意义,均P<0.05;而DDP处理前后各组小鼠体质量变化差异无统计学意义,P>0.05。体外培养经DDP处理后,SW620对照组中Vector活力为56.89%,而实验组GSDME活力为30.24%(t=11.29),SW480细胞组中Vector活力为66.23%而过表达组活力为28.67%(t=6.89),差异均有统计学意义(均P<0.001),且细胞死亡形态呈现细胞肿胀、细胞膜破裂等。与对照组相比,SW620和SW4802细胞株中过表达组的LDH和IL-1β释放量增加且可以被半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3抑制剂(z-VAD)所抑制,差异均有统计学意义,均P<0.001;蛋白质印迹法显示,过表达GSDME后,DDP上调cl-Caspase-3和GSDME-N端蛋白表达且可以被z-VAD所抑制,差异均有统计学意义,均P<0.01。结论过表达GSDME影响结肠癌细胞对DDP的敏感性,这个过程可能是通过Caspase-3/GSDME介导的细胞焦亡实现 展开更多
关键词 细胞焦亡 DDP 结肠癌 gsdme cl-Caspase-3
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白藜芦醇改善高糖引起肾小球系膜细胞损伤的作用研究 被引量:4
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作者 王琳 刘亚珊 +3 位作者 刘瑞卿 高爱娇 唐慧欣 申艳娜 《天津医科大学学报》 2021年第4期338-342,共5页
目的:探讨白藜芦醇(RSV)对体外高糖刺激引起大鼠肾小球系膜细胞(RGMCs)损伤的影响及其潜在分子保护机制。方法:取处于对数生长期的RGMCs,分为甘露醇高渗透压对照组(OC)、正常对照组(NG)、高糖组(HG)以及高糖RSV处理组,分别处理24、48 h... 目的:探讨白藜芦醇(RSV)对体外高糖刺激引起大鼠肾小球系膜细胞(RGMCs)损伤的影响及其潜在分子保护机制。方法:取处于对数生长期的RGMCs,分为甘露醇高渗透压对照组(OC)、正常对照组(NG)、高糖组(HG)以及高糖RSV处理组,分别处理24、48 h。试剂盒检测不同时间各组细胞上清液中LDH的水平;Western印迹法检测不同时间各组凋亡相关B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、Caspase-1活性片段(p20)、Gasdermin E(GSDME)、GSDME活性片段(GSDME-N)、Caspase-3、Caspase-3活性片段(p17)、炎性相关细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)及其活化形式(mIL-1β)的表达;ELISA检测不同时间各组细胞培养上清IL-1β的水平。结果:LDH结果显示,RSV可降低高糖刺激48 h后细胞的死亡率(F=31.48,P<0.05)。Western印迹法结果显示,仅在RSV处理24 h后,Bax表达较HG组显著降低,同时伴随Bcl-2表达升高(F=143.1,P<0.05);RSV处理24 h后HG组p20、mIL-1β表达降低(F=26.74、25.76,均P<0.05);此外,RSV处理48 h后p17、GSDME-N的表达较HG组明显下降(F=25.84、18.49,均P<0.05)。ELISA结果显示,与HG组相比,RSV处理48 h后上清中IL-1β的水平显著降低(F=80.22,P<0.01)。上述指标在OC组及NG组间的变化均无统计学意义(均P>0.05)。结论:RSV可通过减少炎症因子的产生及抑制细胞早期凋亡、晚期焦亡过程来改善高糖引起的RGMCs损伤。 展开更多
关键词 白藜芦醇 糖尿病肾病 细胞死亡 gsdme
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骨髓增生异常综合征CD34+细胞焦亡相关分子焦孔素E研究
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作者 任晓彤 余顺杰 +4 位作者 郭欣雨 刘召云 邵宗鸿 付蓉 李丽娟 《中国实用内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期68-74,共7页
目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓CD34+细胞中焦孔素E(GSDME)与胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。方法选取2020年9月至2021年12月在天津医科大学总医院血液科收治的32例初治MDS患者与20例正常者对照,利用流式细胞术、qRT-PCR... 目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓CD34+细胞中焦孔素E(GSDME)与胱天蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平。方法选取2020年9月至2021年12月在天津医科大学总医院血液科收治的32例初治MDS患者与20例正常者对照,利用流式细胞术、qRT-PCR技术检测骨髓CD34+细胞中GSDME与Caspase-3表达水平。结果流式细胞术结果显示:初治低危组骨髓CD34+细胞中GSDME与活化Caspase-3的表达水平[(64.90±15.74)%与(31.83±17.99)%]显著高于对照组[(41.39±14.07)%与(24.11±16.28)%,P<0.05]。初治高危组GSDME与活化Caspase-3的表达水平[(30.69±14.62)%与(15.42±13.34)%]显著低于对照组与初治低危组(P<0.05)。qRT-PCR结果显示:高危MDS患者骨髓CD34+细胞GSDME基因相对表达量低于对照组(0.20±0.19比1.00±0.53,P<0.05),但Caspase-3基因相对表达量无明显差别。结论低危MDS患者骨髓CD34+细胞内GSDME表达水平升高,细胞焦亡水平可能升高,导致骨髓造血衰竭;高危MDS患者骨髓CD34+细胞内GSDME表达水平降低,细胞焦亡水平可能降低,细胞过度增殖,向白血病转化的风险更大。 展开更多
关键词 骨髓增生异常综合征 细胞焦亡 焦孔素E 胱天蛋白酶-3
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