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GPC5基因表达水平与肺腺癌淋巴结转移 被引量:2
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作者 杨欣 张治 +6 位作者 胡静雯 邱满堂 徐磊 钱以淳 游庆军 尹荣 许林 《中华胸心血管外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第5期305-307,共3页
目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)在非小细胞肺腺癌中的表达水平及其临床意义。方法应用Real—timePCR的方法检测134例非小细胞肺腺癌组织及其对应的正常肺组织中的GPC5基因的表达情况。应用免疫组化方法验证GPC5蛋白在人肺腺癌组... 目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(GPC5)在非小细胞肺腺癌中的表达水平及其临床意义。方法应用Real—timePCR的方法检测134例非小细胞肺腺癌组织及其对应的正常肺组织中的GPC5基因的表达情况。应用免疫组化方法验证GPC5蛋白在人肺腺癌组织芯片(包含75对腺癌组织标本)中的表达情况。结果(1)GPC5mRNA表达水平在非小细胞肺腺癌组织中较正常肺组织显著下降(P〈0.001)。(2)有淋巴结转移组较无淋巴结转移组GPC5mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P〈0.05)。(3)Spearman相关性分析显示GPC5mRNA表达水平与淋巴结转移、病理分期和分化程度呈显著正相关(P〈0.05)。(4)Kaplan—Meier生存曲线分析示GPC5蛋白表达与肺腺癌患者长期预后相关(P=0.036)。结论GPC5的表达水平与非小细胞肺腺癌的淋巴结转移密切相关,可作为评估预后的辅助标志物。 展开更多
关键词 非小细胞腺癌 转移 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5 gpc5
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GPC5基因在肺腺癌组织中差异表达和突变分析 被引量:1
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作者 饶文 余祖滨 +5 位作者 向颖 吴龙 邬娜 吴亚楠 白莉 李亚斐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1153-1157,共5页
目的探讨GPC5基因在肺腺癌组织和正常肺组织中差异表达和突变情况。方法通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)的两个数据集分析肿瘤组织和相匹配正常组织GPC5表达量,对GPC5基因表达差异进行分析。运用肿瘤基因组图谱(the ca... 目的探讨GPC5基因在肺腺癌组织和正常肺组织中差异表达和突变情况。方法通过基因表达数据库(gene expression omnibus,GEO)的两个数据集分析肿瘤组织和相匹配正常组织GPC5表达量,对GPC5基因表达差异进行分析。运用肿瘤基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)公共数据库初步分析GPC5突变和拷贝数变异情况。运用实时定量PCR检测39例肺癌患者肿瘤组织和正常组织样本中GPC5基因的表达,对结果进一步验证。结果我们对GEO数据库中的两个数据集进行分析发现肺腺癌肿瘤组织中GPC5表达量明显低于配对的正常组织(P<0.05);实时定量PCR检测结果证实了GPC5基因在肿瘤组织中的相对表达量均显著低于相匹配的正常组织(P<0.01),而且与Ⅰ期肿瘤组织相比,Ⅱ期+Ⅲa期的肿瘤组织中GPC5表达水平明显较低(P<0.05)。结论 GPC5基因的拷贝数变异广泛存在,杂合子缺失可能是导致GPC5表达水平降低的原因。 展开更多
关键词 肺腺癌 gpc5 突变 分析
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GPC5基因在肺腺癌细胞系中的功能研究 被引量:1
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作者 聂欢 袁帅 +7 位作者 刘庆云 向颖 吴龙 邬娜 张梦轩 余祖滨 白莉 李亚斐 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期600-605,共6页
目的研究GPC5基因在肺腺癌细胞系中的表达情况及其对肺腺癌细胞系生物学行为的影响。方法采用逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(qRT-PCR)以及Western blot分析肺腺癌细胞系中GPC5基因mRNA及蛋白表达情况;构建GPC5过表达载体及干扰载体,... 目的研究GPC5基因在肺腺癌细胞系中的表达情况及其对肺腺癌细胞系生物学行为的影响。方法采用逆转录PCR(RT-PCR)、实时定量PCR(qRT-PCR)以及Western blot分析肺腺癌细胞系中GPC5基因mRNA及蛋白表达情况;构建GPC5过表达载体及干扰载体,通过转染构建GPC5过表达细胞系及GPC5沉默细胞系;利用CCK-8法分析肺腺癌细胞系生长情况;通过流式细胞术检测肺腺癌细胞系的周期及凋亡变化。结果检测了GPC5基因在4株肺腺癌细胞系(A549、H1299、H358和H1975)和1株肺正常上皮细胞系(HBE)中的mRNA表达情况,发现与HBE细胞系相比,GPC5基因在A549细胞系中呈低表达,在H1299细胞系中高表达,同时蛋白检测结果与mRNA水平一致;A549细胞中过表达GPC5基因可抑制细胞生长,引起细胞周期阻滞;在H1299细胞中干扰GPC5基因表达促进细胞生长,促进细胞周期;在过表达和干扰细胞模型中均未发现GPC5基因对细胞凋亡的显著影响。结论 GPC5基因可以对肺腺癌细胞系的生物学行为产生影响,可能是肺腺癌的抑癌基因。 展开更多
关键词 gpc5 肺腺癌 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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高通量转录组测序技术研究过表达GPC5对A549细胞基因表达影响 被引量:1
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作者 张海天 王国祥 +2 位作者 杨欣 邱满堂 许林 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期545-549,共5页
背景与目的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(glypican-5,GPC5)是一个重要的抑癌基因,然而GPC5对肺腺癌细胞增殖能力和基因表达的影响目前研究甚少。本研究拟在肺腺癌A549细胞中过表达GPC5以研究细胞增殖能力和基因表达变化情况。方法通过慢病毒载... 背景与目的磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5(glypican-5,GPC5)是一个重要的抑癌基因,然而GPC5对肺腺癌细胞增殖能力和基因表达的影响目前研究甚少。本研究拟在肺腺癌A549细胞中过表达GPC5以研究细胞增殖能力和基因表达变化情况。方法通过慢病毒载体构建稳定过表达GPC5的A549细胞株,通过Cell Counter Kit 8(CCK8)、平板克隆和Ed U实验检测细胞增殖能力;通过高通量转录组测序研究基因表达变化。结果相对于空白载体组,CCK8实验发现过表达GPC5可以明显抑制A549细胞的增殖速率;平板克隆实验结果显示,过表达GPC5之后A549细胞克隆形成能力下降(181±17 vs 278±23);Ed U染色结果显示过表达GPC5后阳性染色细胞比例下降。转录组测序结果提示过表达GPC5之后,2,108个基因表达发生明显变化,其中具有正性调节细胞增殖作用的基因明显下调。结论过表达GPC5可以明显抑制肺腺癌细A549的增殖能力,而且过表达GPC5后具有正性调节细胞增殖作用的基因表达下调。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇蛋白聚糖-5 A549 增殖 基因表达
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启动子区域甲基化对肺腺癌GPC_5表达的调控作用及意义 被引量:2
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作者 李燕 苗立云 +2 位作者 肖永龙 蔡后荣 张德平 《临床肺科杂志》 2012年第5期873-876,共4页
目的研究启动子区域CpG岛的甲基化对肺腺癌细胞GPC5表达的调节作用。方法在线预测GPC5启动子区域CpG岛的分布,合成甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)引物,甲基化酶特异性抑制剂5-氮杂-2’... 目的研究启动子区域CpG岛的甲基化对肺腺癌细胞GPC5表达的调节作用。方法在线预测GPC5启动子区域CpG岛的分布,合成甲基化特异性聚合酶链反应(Methylation specific polymerase chain reaction,MSP)引物,甲基化酶特异性抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞嘧啶核苷(5-AZA)处理肺腺癌细胞系A549、SPC-A1及永生化支气管上皮细胞HBE,检测处理前后GPC5表达的变化。同时用MSP方法检测肺腺癌组织标本中GPC5基因启动子区域CpG岛甲基化情况,以探讨其可能的临床意义。结果 GPC5在正常的支气管上皮中不表达,而在肺腺癌细胞系中均有明显表达。5-AZA处理后,GPC5在A549及SPC-A1中的表达均上调,提示启动子区域CpG岛的甲基化参与了GPC5基因表达的调节。但肺腺癌组织标本中GPC5基因启动子区域CpG岛呈现低甲基化状态,提示这种低甲基化状态参与了肺腺癌细胞中GPC5表达的上调。结论 GPC5基因启动子区域的甲基化参与了其表达的调控,可能是导致肺腺癌中GPC5上调的一个重要因素。 展开更多
关键词 肺腺癌 gpc5基因 甲基化 聚合酶链反应
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pcDNA3.1(+)gpc-5真核表达载体的构建及鉴定
6
作者 李彩艳 王凡 王崎 《包头医学院学报》 CAS 2011年第3期6-7,10,共3页
目的:构建pcDNA3.1(+)磷脂酞肌醇蛋白5(gpc-5)基因真核表达载体。方法:根据gpc-5基因序列设计一对引物,利用RT-PCR法扩增出gpc-5基因的编码区(CDS),连接在PGM-T载体上,并进行pcDNA3.1(+)gpc-5真核表达载体的构建、酶切鉴定以及测序。结... 目的:构建pcDNA3.1(+)磷脂酞肌醇蛋白5(gpc-5)基因真核表达载体。方法:根据gpc-5基因序列设计一对引物,利用RT-PCR法扩增出gpc-5基因的编码区(CDS),连接在PGM-T载体上,并进行pcDNA3.1(+)gpc-5真核表达载体的构建、酶切鉴定以及测序。结果:gpc-5基因的体外扩增目的片段为2 083 bp。所构建的重组体pcDNA3.1(+)gpc-5经双酶切鉴定,与预期片段大小一致,测序结果与NCB I收录gpc-5基因的CDS序列一致。结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)gpc-5,为研究gpc-5基因在原发性肺癌的发生发展中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 gpc-5 真核表达载体 肺癌
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