表达PRRSV GP5、GP3和猪IL-18的重组鸡痘病毒的构建及鉴定 被引量：7

1

作者 沈国顺 金宁一 +3 位作者 秦晓光 庄天中 尹荣兰 马鸣潇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期583-585,共3页

目的研制安全有效的预防猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组鸡痘病毒活载体疫苗。方法将PRRSV长春株的GP5和GP3基因插入到含有猪IL-18基因的鸡痘病毒转移载体pUTAL复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL-IL-18-GP5-GP3。将该重... 目的研制安全有效的预防猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组鸡痘病毒活载体疫苗。方法将PRRSV长春株的GP5和GP3基因插入到含有猪IL-18基因的鸡痘病毒转移载体pUTAL复合启动子下游,构建重组鸡痘病毒转移载体pUTAL-IL-18-GP5-GP3。将该重组质粒与鸡痘病毒(FPV)282-E4株共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),进行同源重组。通过3次BrdU加压筛选,经PCR、RT-PCR和IFA方法鉴定重组病毒。结果从重组鸡痘病毒基因组和总RNA中扩增出340bp的目的基因片段,感染重组病毒的CEF细胞与特异性荧光抗体发生阳性反应,表明目的基因在重组鸡痘病毒中得到表达。结论已成功构建1株重组鸡痘病毒,并可正确表达PRRSVORF5/ORF3基因。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp5 gp3 鸡痘病毒

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表达PRRSV GP3蛋白减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株的构建 被引量：8

2

作者 赵红妮 许信刚 +1 位作者 童德文 罗小毛 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期6-11,共6页

构建表达猪PRRSV GP3蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。将去信号肽序列的PRRSV ORF3基因插入到表达载体pYA3341(Asd+)中,构建重组质粒pYA3341-ORF3。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(Asd-、Cya-、Crp-),获得... 构建表达猪PRRSV GP3蛋白的口服重组减毒鼠伤寒沙门氏菌活载体疫苗株。将去信号肽序列的PRRSV ORF3基因插入到表达载体pYA3341(Asd+)中,构建重组质粒pYA3341-ORF3。将重组质粒电转入鼠伤寒沙门氏菌疫苗株X4550(Asd-、Cya-、Crp-),获得重组疫苗菌株X4550(pYA3341-ORF3)。体外鉴定重组菌表达的GP3蛋白、重组菌特性并进行小鼠免疫试验。酶切鉴定和序列测定证实重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳及Western blot检测有GP3特异性蛋白条带,小鼠免疫后可检测到GP3蛋白抗体。成功构建能稳定表达PRRSV GP3蛋白的口服减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株。 展开更多

关键词 PRRSV gp3 减毒鼠伤寒沙门氏菌 活疫苗

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猪繁殖与呼吸综合征病毒S1株GP3蛋白的原核表达与纯化 被引量：7

3

作者 蒋文明 姜平 李玉峰 《中国病毒学》 CSCD 2005年第5期519-521,共3页

利用限制性酶切从重组质粒pRSET-GP3中得到缺失N端疏水序列的基因片段tGP3(truncated GP3)。将tGP3克隆至原核高效表达载体pRSET,在E.coliBL21细胞中用IPTG诱导表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组蛋白(His)6-GP3,并用亲和层析法... 利用限制性酶切从重组质粒pRSET-GP3中得到缺失N端疏水序列的基因片段tGP3(truncated GP3)。将tGP3克隆至原核高效表达载体pRSET,在E.coliBL21细胞中用IPTG诱导表达了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组蛋白(His)6-GP3,并用亲和层析法获得了纯化蛋白。Western-Blotting结果表明重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别,从而为进一步研究PRRSV GP3结构蛋白的免疫特性和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp3 原核表达

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广西省猪繁殖与呼吸综合征病毒GP2、GP3、GP4蛋白遗传进化分析

4

作者 贺微 韦莹 +6 位作者 黄加滨 洪绍锋 林思远 姚静 陈樱 黄伟坚 韦祖樟 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2015年第6期13-20,共8页

研究表明,动脉炎病毒GP2、GP3和GP4形成的复合物决定病毒的细胞嗜性,猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP2和GP4能与细胞受体CD163进行相互作用。GP3和GP4也是刺激猪体产生中和抗... 研究表明,动脉炎病毒GP2、GP3和GP4形成的复合物决定病毒的细胞嗜性,猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）GP2和GP4能与细胞受体CD163进行相互作用。GP3和GP4也是刺激猪体产生中和抗体的病毒蛋白。本研究选用本实验室在2013～2014年分离到的11株PRRSV毒株进行ORF2、ORF3和ORF4基因的克隆和序列测定,并与国内外代表毒株进行比对分析。结果显示,11株PRRSV GP2、GP3、GP4核苷酸序列同源性分别为94.6%～99.6%、95.3%～100%、93.9%～100%;与美洲经典毒株VR-2332 GP2、GP3、GP4氨基酸同源性分别为91.4%～93.0%、85.1%～86.7%、89.4%～91.1%;与HP-PRRSV毒株对应氨基酸的同源性分别为96.1%～99.6%、95.3%～98.8%、95.0%～99.4%。序列比对表明：11株PRRSV GP2、GP3、GP4蛋白氨基酸序列未出现缺失和插入,但出现多处点变异。遗传进化分析表明：11株PRRSV均分布在美洲型分支上,且与HP-PRRSV亲缘关系较近。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp2 gp3 gp4 遗传进化

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuN4株GP3单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定 被引量：3

5

作者 孙艳 彭金美 +6 位作者 安同庆 陈家锃 冷超粮 赵鸿远 常丹 童光志 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期490-494,共5页

为制备抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(H P-PRRSV)G P3株的单克隆抗体(M A b),本研究将H P-PRRSV H uN 4株免疫BA LB/c小鼠,以该病毒感染的细胞及真核表达的G P3蛋白为检测抗原,经间接免疫荧光(IFA)筛选获得了一株稳定分泌M A b的细... 为制备抗高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(H P-PRRSV)G P3株的单克隆抗体(M A b),本研究将H P-PRRSV H uN 4株免疫BA LB/c小鼠,以该病毒感染的细胞及真核表达的G P3蛋白为检测抗原,经间接免疫荧光(IFA)筛选获得了一株稳定分泌M A b的细胞株,命名为4G 5。抗体亚类鉴定重链类型为IgG 1,轻链类型为κ。该M A b细胞培养上清及腹水IFA效价分别为1∶256和1∶1 280。IFA结果显示,MAb4G5能够识别CH-1R、JXA1-R、HP-PRRSVHuN4株及其疫苗株HuN4-F112,而不识别RespPRRS M LV病毒株。Western blot结果显示,4G5与HP-PRRSVHuN4株及原核表达的GP3蛋白均可以反应,表明其针对的抗原表位为线性表位,中和试验结果显示该M A b无中和活性。通过截短表达GP3蛋白鉴定该M A b抗原表位识别序列为74W CRIGHD RCS83。本研究获得的M A b为进一步研究HP-PRRSV GP3蛋白的结构及功能奠定了基础。 展开更多

关键词 HP-PRRSV gp3 单克隆抗体 抗原表位

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3与GP5蛋白在杆状病毒表面的展示

6

作者 李勇 梁莉 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第12期80-86,共7页

选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5和GP3蛋白作为免疫原,将杆状病毒的表面展示系统作为载体,成功构建了重组转座载体pBacSC-GP5与pBacSC-GP3,通过转化DH10Bac,筛选蓝白斑,转染昆虫Sf-9细胞,获得重组杆状病毒BacSC-GP5、BacSC-GP3... 选择猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GP5和GP3蛋白作为免疫原,将杆状病毒的表面展示系统作为载体,成功构建了重组转座载体pBacSC-GP5与pBacSC-GP3,通过转化DH10Bac,筛选蓝白斑,转染昆虫Sf-9细胞,获得重组杆状病毒BacSC-GP5、BacSC-GP3。重组病毒感染Sf-9细胞后,经Western blot和激光共聚焦显微镜观察,目的蛋白在感染细胞中获得表达,并且成功展示在了感染细胞的质膜上。将重组病毒经蔗糖梯度超速离心纯化后,经Western blot和免疫透射电镜观察,目的蛋白在重组病毒上获得表达,展示在重组病毒的囊膜上。研究为开发PRRSV新型疫苗奠定基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp3 gp5 杆状病毒 表面展示

原文传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒HH08株GP3蛋白的原核表达及其多抗血清的制备与检测

7

作者 任晓峰 刘和 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1-5,共5页

GP3蛋白是猪繁殖与呼吸综合征病毒次要结构蛋白之一,是由ORF3基因编码一种高度糖基化糖蛋白,在病毒致病性、复制、装配、变异和保护性反应等方面具有重要意义。目前对GP3蛋白研究仍不透彻,在病毒感染细胞过程中所起作用也不清楚。试验扩... GP3蛋白是猪繁殖与呼吸综合征病毒次要结构蛋白之一,是由ORF3基因编码一种高度糖基化糖蛋白,在病毒致病性、复制、装配、变异和保护性反应等方面具有重要意义。目前对GP3蛋白研究仍不透彻,在病毒感染细胞过程中所起作用也不清楚。试验扩增PRRSV-HH08株ORF3,连接至PGEX-6P-1载体,导入大肠杆菌内诱导表达,获得以包涵体存在GP3蛋白,纯化后作为抗原制备兔抗GP3多抗血清,Western-blotting结果表明,该蛋白与多抗血清有免疫反应,鉴于ORF3与ORF5基因保守度极低,可用于与其他蓝耳病毒株GP3或GP5蛋白为抗原制作多抗血清比较敏感性及特异性。 展开更多

关键词 PRRSV gp3 抗血清

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月售上千卷 复产GP3值不值得买？

8

作者 柴仁缘 吴吞吞 义天天 《摄影之友》 2019年第9期26-27,共2页

对于'胶片回暖'的现象来说,这种小众化的消费行为中,摄影师、冲扫店和胶片供应商都起着各自的推动作用。而在不久前低调上市的新版上海GP3黑白胶卷,让国产胶片重新回归人们的视线。作为硕果仅存的国产胶卷品牌,上海牌依然为摄... 对于'胶片回暖'的现象来说,这种小众化的消费行为中,摄影师、冲扫店和胶片供应商都起着各自的推动作用。而在不久前低调上市的新版上海GP3黑白胶卷,让国产胶片重新回归人们的视线。作为硕果仅存的国产胶卷品牌,上海牌依然为摄影爱好者们提供黑白大画幅胶片。2018年,由上海剑诚重新生产发售的经典120胶卷GP3重新回归人们的视线。复产的GP3胶卷品质更佳,价格更低,给胶片用户提供了一个实惠的选择。2019年,135规格的GP3胶卷如约而至。我们杂志的三位编辑也使用了这款胶卷,来听听他们的看法。 展开更多

关键词 黑白胶卷 gp3

原文传递

三维图形系统GP3D

9

作者 杨晓东 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1993年第4期17-21,共5页

本文介绍作者研制的一套交互式三维图形系统GP3D,该系统具有完全消隐功能,它以面造型为主,提供了立体造型的功能,也可以按照用户要求产生简明的线模型图,为了便于进行交互式操作,以及完成图例的增、删、调用和各类变换,系统设计了灵活... 本文介绍作者研制的一套交互式三维图形系统GP3D,该系统具有完全消隐功能,它以面造型为主,提供了立体造型的功能,也可以按照用户要求产生简明的线模型图,为了便于进行交互式操作,以及完成图例的增、删、调用和各类变换,系统设计了灵活的数据结构。系统具有丰富的图形编辑功能和文件管理功能,用户以简单命令定义构造体素,用以组建复杂形体。系统具有良好的实用性、通用性和用户界面性能。 展开更多

关键词 图形变换 三维图形系统 gp3D

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猪繁殖与呼吸综合征病毒Hn-1/06株GP3蛋白的原核表达与纯化 被引量：7

10

作者 王中明 李素平 +6 位作者 夏平安 尹彦涛 李伟娟 邱璜 刘明莉 刘玉松 崔保安 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期103-107,共5页

根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为765 bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF3的阳性克隆pTG19-... 根据GenBank中PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成了1对特异性引物,经RT-PCR从河南分离株Hn-1/06株扩增得到了大小为765 bp的片段,并将扩增的片段插入pTG19-T载体进行测序而获得含有ORF3的阳性克隆pTG19-T-GP3。将此基因亚克隆到原核表达载体pET-32a,经筛选获得了阳性重组质粒pET-GP3,进而在IPTG的诱导下成功表达,获得了大小约为45 kDa的融合蛋白GP3-His,纯化后经Western blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性。从而为进一步研究PRRSV次要结构蛋白GP3的免疫特性和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 PRRSV gp3蛋白 原核表达

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猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3/GP5/M真核表达载体的构建及其体液免疫应答 被引量：4

11

作者 王凡 刘建斌 +5 位作者 祝秀梅 吕志慧 马全英 杜平 刘学荣 牟克斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期1266-1272,共7页

本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3、GP5和M蛋白的真核重组质粒。以PRRSV LN株为模板,采用PCR方法扩增出GP3、GP5、M基因片段,将扩增的GP5、M通过Linker序列串联成GP5-M,然后将GP3与GP5-M双酶切后插入pcDNA3.1(+)构... 本试验旨在构建表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3、GP5和M蛋白的真核重组质粒。以PRRSV LN株为模板,采用PCR方法扩增出GP3、GP5、M基因片段,将扩增的GP5、M通过Linker序列串联成GP5-M,然后将GP3与GP5-M双酶切后插入pcDNA3.1(+)构建重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,将其转染COS7细胞。PCR鉴定表明重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M含有PRRSV GP3、GP5-M基因,间接免疫荧光检测表明GP3、GP5-M蛋白在COS7细胞内获得表达。Western blotting检测证实GP3、GP5、M蛋白获得正确表达,并且所表达的GP3、GP5、M蛋白是融合蛋白。将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫BALB/c小鼠,首免后2周可检测到特异性PRRSV中和抗体,首免后8周中和抗体效价最高可达1∶32。进一步将pcDNA3.1-GP3-GP5-M免疫断奶仔猪,首免后4周即可产生1∶4～1∶8的中和抗体。本试验成功构建了表达PRRSV GP3、GP5和M融合蛋白的真核重组质粒pcDNA3.1-GP3-GP5-M,中和抗体检测表明pcDNA3.1-GP3-GP5-M具有良好的免疫原性,从而为PRRSV基因工程疫苗的研制奠定基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) gp3蛋白 gp5蛋白 M蛋白

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PRRSV NC株ORF3基因的克隆、序列分析及表达 被引量：4

12

作者 罗军荣 胡国良 +1 位作者 余群英 兰旅涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期322-324,共3页

为原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF3基因,本研究根据GenBank登录PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 6.0软件设计合成一对特异性引物,经RT-PCR扩增得到了大小为765bp的片段。将扩增的ORF3基因截短为495bp和75... 为原核表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF3基因,本研究根据GenBank登录PRRSV美洲株ATCC VR2332的ORF3基因序列,利用Primer 6.0软件设计合成一对特异性引物,经RT-PCR扩增得到了大小为765bp的片段。将扩增的ORF3基因截短为495bp和750bp片段分别克隆于原核表达载体pGEX-KG中,在IPTG的诱导下进行Gp3重组蛋白的截短表达,经western blot检测证实表达的2种截短重组蛋白均具有良好的与抗体的反应活性,从而为进一步研制新型疫苗提供了实验依据。 展开更多

关键词 PRRSV ORF3 克隆 gp3蛋白 原核表达

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PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白在杆状病毒囊膜表面的共展示及展示蛋白的小鼠免疫试验 被引量：3

13

作者 许信刚 张宽 +1 位作者 王志昇 童德文 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期53-59,共7页

为了研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病双价基因工程亚单位疫苗,利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-OR... 为了研制以杆状病毒表面展示系统为基础的猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病双价基因工程亚单位疫苗,利用杆状病毒表面展示技术构建展示猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白和猪圆环病毒2型(PCV-2)Cap蛋白的重组杆状病毒BacSC-Dual-ORF3-ORF2,并对该重组病毒进行Western-blot分析、激光共聚焦显微镜观察、免疫金电子显微镜检测、动物免疫试验、血清中和试验以及淋巴细胞增殖试验。结果显示,重组杆状病毒表达了重组GP3蛋白和Cap蛋白;该重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf-9后在细胞膜上展示了重组GP3蛋白和Cap蛋白,并且重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。动物免疫试验表明,重组杆状病毒免疫小鼠产生了抗PRRSV和抗PCV-2的特异性抗体,免疫小鼠血清中抗PRRSV和抗PCV-2的中和抗体效价分别达到1∶9.6和1∶13.6。淋巴细胞增殖试验表明,该重组杆状病毒能诱发较强的细胞免疫应答。结果表明,表面展示PRRSV GP3蛋白和PCV-2Cap蛋白的重组杆状病毒已构建成功,这为下一步应用该重组杆状病毒作为双价亚单位疫苗预防PRRSV和PCV-2的共感染奠定了基础。 展开更多

关键词 杆状病毒表面展示系统 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪圆环病毒2型 gp3蛋白 CAP蛋白

原文传递

PRRSV中和表位串联Fc分子的表达与免疫原性鉴定

14

作者 班今朝 雷昕诺 +3 位作者 王安平 吴植 朱善元 范红结 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期691-699,共9页

为融合表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和表位和Fc分子,首先合成PRRSVGP3和GP5的串联B细胞中和表位与鼠IgG1-Fc的mFc-GP35-Bp基因片段,将其克隆到pFastBac载体上,构建重组质粒pFastBac-mFc-GP35-Bp,经蓝白斑筛选出重组杆粒Bacmid-m... 为融合表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)中和表位和Fc分子,首先合成PRRSVGP3和GP5的串联B细胞中和表位与鼠IgG1-Fc的mFc-GP35-Bp基因片段,将其克隆到pFastBac载体上,构建重组质粒pFastBac-mFc-GP35-Bp,经蓝白斑筛选出重组杆粒Bacmid-mFc-GP35-Bp,并转染昆虫Sf9细胞,获得重组杆状病毒rBV-mFc-GP35-Bp。通过Western-blot分析重组蛋白的反应原性,免疫小鼠后,通过间接ELISA检验其免疫原性,病毒中和试验检测中和抗体水平。结果显示,mFc-GP35-Bp蛋白在昆虫Sf9细胞中获得表达,且可分泌至上清;用mFc-GP35-Bp蛋白免疫小鼠后,ELISA测定抗体效价可达1∶100000,三免后第4周仍可检测到较高抗体水平;中和抗体效价介于1∶40和1∶80之间。结果表明,表达的重组mFc-GP35-Bp蛋白具有良好的反应原性和免疫原性,可刺激机体产生中和抗体,与Fc分子融合表达延长了抗体在血清中存在的时间,本试验为PRRSV中和表位疫苗的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp3蛋白 gp5蛋白 B细胞表位 鼠IgG1-Fc

原文传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒GP3蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定

15

作者 袁丽 孙杨杨 +4 位作者 张路捷 张杰 孙海凤 白娟 姜平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3424-3434,共11页

旨在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白单克隆抗体及解析其抗原表位。本研究构建了PRRSV类NADC30毒株FJ1402的GP3大肠杆菌表达质粒,制备获得重组GP3蛋白。经过免疫BALB/c小鼠和间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。利用间接... 旨在制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP3蛋白单克隆抗体及解析其抗原表位。本研究构建了PRRSV类NADC30毒株FJ1402的GP3大肠杆菌表达质粒,制备获得重组GP3蛋白。经过免疫BALB/c小鼠和间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。利用间接免疫荧光试验和蛋白印迹鉴定单克隆抗体特异性。通过构建GP3蛋白基因截短体和合成多肽ELISA鉴定单克隆抗体识别的表位区域。结果显示,成功筛选了7株稳定分泌GP3蛋白抗体的杂交瘤细胞株,7株单克隆抗体均可与PRRSV FJ1402产生特异性反应。鉴定出GP3蛋白4个抗原表位,分别为^(55)PLCPTRQAAAEILE^(68)、^(69)PGKSFWCRI^(77)、^(78)GHDRCSESDH^(87)和^(88)DELGFMVPPGLSS^(100)。2E12单抗与FJ1402、BB0907和S1三个谱系毒株均可发生IFA和Western blot特异反应,4H9、9F3和6B3单抗只与FJ1402毒株反应,而不与BB0907和S1毒株反应。本研究研制成功7株GP3蛋白单克隆抗体,并鉴定出4个GP3蛋白抗原表位,为PRRSV检测和GP3蛋白功能研究提供了重要工具。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp3蛋白 单克隆抗体 抗原表位

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猪繁殖和呼吸综合征病毒GP3蛋白糖基化位点突变株的构建及其生物学特性分析

16

作者 刘欢欢 周艳君 +2 位作者 姜一峰 张善瑞 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 2011年第3期1-8,共8页

为研究猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3蛋白糖基化位点的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性克隆的基础上,采用点突变的方法对GP3蛋白N29、N42、N50、N131位进行单点或多点... 为研究猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)GP3蛋白糖基化位点的作用,在弱毒疫苗株HuN4-F112感染性克隆的基础上,采用点突变的方法对GP3蛋白N29、N42、N50、N131位进行单点或多点组合突变去糖基化,构建了不同糖基化位点的单点和多点突变的PRRSV全长cDNA克隆,最终成功救获N29Q、N42Q、N50Q、N131Q、N29Q/N50Q、N29Q/N195Q六株含糖基化位点突变的病毒,而其余几种糖基化位点突变组合的全长cDNA未能拯救出病毒。对拯救毒株进行滴度测定及多步生长曲线绘制等特性分析,结果显示N29Q、N42Q、N50Q、N131Q位单个糖基化位点的缺失虽不影响子代病毒的产生但会不同程度地降低PRRSV感染细胞的能力,其中N50Q突变体较亲本下降6个滴度且生长明显延迟。多个糖基化位点同时缺失则会影响病毒的拯救,推测这些糖基化位点可能是产生具有感染性病毒粒子所不可或缺的。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸系统综合征病毒 gp3蛋白 糖基化位点 定点突变

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光学蛋白芯片技术在噬菌体M13KO7检测中的应用

17

作者 齐财 冯静 +3 位作者 王战会 孟永宏 阎锡蕴 靳刚 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期856-860,共5页

将亲和素共价固定在表面改性后的硅片上,通过亲和素与生物素相互作用将生物素标记的噬菌体抗体GP3固定在亲和素膜层表面,当含有M13KO7噬菌体的样品经过抗体表面时,通过噬菌体与抗体之间的相互作用噬菌体就会被抗体捕获,生物学信号可以... 将亲和素共价固定在表面改性后的硅片上,通过亲和素与生物素相互作用将生物素标记的噬菌体抗体GP3固定在亲和素膜层表面,当含有M13KO7噬菌体的样品经过抗体表面时,通过噬菌体与抗体之间的相互作用噬菌体就会被抗体捕获,生物学信号可以通过芯片上的膜层厚度变化表现出来,这种膜层厚度变化可以被椭偏生物传感器技术识别。结果表明,GP3抗体在芯片表面形成了饱和的抗体膜层,厚度为6.9nm;M13KO7噬菌体与芯片上固定的抗体会发生特异性相互作用,噬菌体被抗体捕获后形成的复合物膜层厚度为17.5nm,并且随着噬菌体浓度升高膜层厚度增加,检测含有M13KO7噬菌体的样品灵敏度为109pfu/mL。与其它研究病毒与抗体相互作用方法相比光学蛋白芯片技术具有简便快捷、无需标记待检样品和结果直观等优点,为研究病毒与其抗体相互作用以及疾病早期临床诊断提供了一个新的方法。 展开更多

关键词 蛋白质芯片 生物传感器 噬菌体 gp3抗体

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PRRSV分离株GP3蛋白ORF3基因克隆及序列分析

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作者 李勇 李生虎 贺林芝 《畜牧与饲料科学》 2020年第1期7-12,共6页

为研究宁夏地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行规律,应用RT-PCR的方法从PRRSV分离株GP3蛋白中扩增出ORF3基因cDNA片段。结果显示,ORF3基因全长765 bp,编码254个氨基酸,与北美型毒株VR-2332的同源性达到85%以上,与欧洲型毒株LV的同源性... 为研究宁夏地区猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的流行规律,应用RT-PCR的方法从PRRSV分离株GP3蛋白中扩增出ORF3基因cDNA片段。结果显示,ORF3基因全长765 bp,编码254个氨基酸,与北美型毒株VR-2332的同源性达到85%以上,与欧洲型毒株LV的同源性低于60%,与国内近3年主要流行毒株JXA1、HEB1、HUB2亲缘性较近。对PRRSV分离株的亲水性分析表明,GP3蛋白的前57位氨基酸为疏水性信号肽序列;对PRRSV分离株GP3蛋白抗原表位分析表明,与国内外其他毒株抗原表位预测的结果基本一致,说明PRRSV分离株GP3蛋白具有与其他毒株相近的抗原特性。 展开更多

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 gp3蛋白 克隆 序列分析

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警惕NOVELL网上的病毒

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作者 龙爱兵 《计算机世界月刊》 1995年第12期64-66,共3页

最近发现了一种新病毒,用KILL73、MSAV等解毒软件均无法检测。该病毒的最大特点在于仅当在Novell的DOS工作站上加载了IPX/SPX服务程序后才会进行传染,并同时接管DOS扩展服务的注册功能,因此应属于针对NetWare环境编写的病毒之列。笔者... 最近发现了一种新病毒,用KILL73、MSAV等解毒软件均无法检测。该病毒的最大特点在于仅当在Novell的DOS工作站上加载了IPX/SPX服务程序后才会进行传染,并同时接管DOS扩展服务的注册功能,因此应属于针对NetWare环境编写的病毒之列。笔者在跟踪其执行过程的基础上编写了相应的解毒程序,现将结果作一小结。鉴于VSAFE指认其为GP3病毒,本文将沿用这一名称。 GP3是一种文件型病毒。 展开更多

关键词 计算机病毒 gp3病毒 局域网络

原文传递

上海牌GP3 100型黑白照相胶卷

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作者 汪永明 丁振忠 《影像技术》 CAS 2003年第1期27-29,共3页

本文详细介绍了上海感光材料厂生产的新一代的上海牌GP3100型黑白照相胶卷的性能特点和使用方法。该产品具有乳剂涂层薄、清晰度高、宽容度大等优点;经测试,照相性能接近国际先进水平。

关键词 上海牌gp3 100型黑白照相胶卷 性能 使用 规格 结构

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