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以消散场成像和单微粒跟踪技术揭示GLUT4囊泡和分泌囊泡的不同动态过程
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作者 梁滔 李栋栋 +2 位作者 熊俊 朱丹 瞿安连 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期261-268,共8页
葡萄糖转运子蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)在维持体内葡萄糖动态平衡的过程中起着至关重要的作用。GLUT4贮存囊泡(GLUT4 storage vesicle,GSV)和神经内分泌细胞中的分泌囊泡含有许多相同的蛋白。研究证明这些蛋白调节了分泌囊泡... 葡萄糖转运子蛋白4(glucose transporter 4,GLUT4)在维持体内葡萄糖动态平衡的过程中起着至关重要的作用。GLUT4贮存囊泡(GLUT4 storage vesicle,GSV)和神经内分泌细胞中的分泌囊泡含有许多相同的蛋白。研究证明这些蛋白调节了分泌囊泡的胞内转运过程,但是GLUT4囊泡和分泌囊泡是否具有相同的胞内动态过程还未阐明。文章以3T3-L1纤维原细胞中的GSV和神经内分泌细胞PC12细胞中的分泌囊泡:致密核心大囊泡(large dense core vesicle,LDCV)为研究对象,使用消散场显微成像技术和单微粒跟踪技术直观观察了活体细胞内单个GSV和LDCV的三维运动轨迹。通过以适当方程拟合单个囊泡的均方位移曲线,发现两种囊泡都具有三种运动模式。定量分析显示作自由扩散运动和方向性扩散运动的GSV数量明显多于LDCV。对比GSV和LDCV的三维扩散系数,发现GSV的扩散系数中值为7.2×10-4μm2/s,而LDCV的扩散系数中值仅为1.94×10-4μm2/s。这一结果说明GSV的活动性远大于LDCV,提示GSV的胞内转运过程涉及不同的分子机制。 展开更多
关键词 glut4囊泡 分泌囊泡 消散场显微技术 单微粒跟踪技术 动态过程
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大鼠原代脂肪细胞中单个GLUT4囊泡的成像——全内反射荧光显微成像技术的应用 被引量:1
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作者 许迎科 李届悦 +1 位作者 许科帝 郑筱祥 《浙江大学学报(工学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期2112-2116,共5页
本研究采用高斯拟合算法与全内反射荧光显微技术(TIRFM),通过实时动态的单粒子追踪拍摄来分析原代培养大鼠脂肪细胞基础条件及胰岛素刺激下细胞膜附近绿色荧光蛋白(GFP)标记的GLUT4囊泡的运动变化.使用高斯拟合来消除光学成像系统中发... 本研究采用高斯拟合算法与全内反射荧光显微技术(TIRFM),通过实时动态的单粒子追踪拍摄来分析原代培养大鼠脂肪细胞基础条件及胰岛素刺激下细胞膜附近绿色荧光蛋白(GFP)标记的GLUT4囊泡的运动变化.使用高斯拟合来消除光学成像系统中发生的原始样品中单像素点荧光强度值的污染,重建出囊泡真实的中心点荧光强度值.通过对序列图像中的囊泡点应用高斯拟合和相应的搜索算法,得到所有囊泡的高斯中心点荧光强度值序列,继而描绘出囊泡的动态转运路径.结果表明,基础条件下膜附近的多数GLUT4囊泡处于沿同一路径的快速长距离转运状态;胰岛素刺激后,长距离转运的GLUT4囊泡数量减少,多数GLUT4囊泡固定成团或者在原地摆动呈限制性的运动.当GLUT4囊泡锚定至膜上后,即迅速与膜融合.说明高斯拟合算法及全内反射荧光显微技术的结合可以很好地实现囊泡纳米尺度的三维实时追踪. 展开更多
关键词 脂肪细胞 glut4囊泡 胞吐 单粒子追踪 全内反射荧光显微技术
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V-SNAREs在GLUT4转运中的作用 被引量:1
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作者 杨霞 任毅 杨静 《糖尿病新世界》 2016年第6期186-189,共4页
葡萄糖转运子4(GLUT4)是主要的葡萄糖转运蛋白,它在细胞内转运过程十分复杂,GLUT4转运障碍与肥胖、糖尿病等疾病相关,对其转运机制的探讨是一直以来的热点。大量的研究证实v-SNAREs为GLUT4转运中所必须,但其包括多种亚型,近年来多方面... 葡萄糖转运子4(GLUT4)是主要的葡萄糖转运蛋白,它在细胞内转运过程十分复杂,GLUT4转运障碍与肥胖、糖尿病等疾病相关,对其转运机制的探讨是一直以来的热点。大量的研究证实v-SNAREs为GLUT4转运中所必须,但其包括多种亚型,近年来多方面的探索取得了进展。该文主要对GLUT4转运机制和v-SNAREs的进展进行综述。 展开更多
关键词 glut4 glut4储存囊泡 v-SNAREs VAMPs
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