DAS-ELISA、RT-PCR和IC-RT-PCR检测葡萄卷叶病毒Ⅲ的比较研究 被引量：16

1

作者 陈建军 2刘崇怀 +2 位作者 古勤生 潘兴 曹孜义 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期173-177,共5页

在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA... 在生长季节分3次对部分葡萄品种枝条上部、中部和下部叶片及韧皮部,进行双抗体夹心法(DAS-ELISA)、反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫捕捉反转录聚合酶链式反应(IC-RT-PCR)3种方法检测卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)的比较。结果表明:DAS-ELISA的检出率明显低于RT-PCR和IC-RT-PCR方法。RT-PCR可以检测出RNA提取液为1:10-4的GLRaV-3病毒,但它受到了提取RNA难以及其它物质(如蛋白质、DNA等)干扰的影响,检测难度增加。从检测的灵敏度来看,RT-PCR和IC-RT-PCR比DAS-ELISA灵敏;并且,IC-RT-PCR比其它两种方法较快,整个过程仅需8h。 展开更多

关键词 DAS-ELISA RT-PCR IC-RT-PCR 葡萄 卷叶病毒Ⅲ 比较研究 检测 检出率

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4种葡萄卷叶伴随病毒多重RT-PCR检测 被引量：20

2

作者 裴光前 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 李丽丽 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期21-26,共6页

葡萄受卷叶伴随病毒侵染后,树势减弱,抗逆性变差,果穗着色不良,成熟期推迟,含糖量降低。目前已报道11种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)。为提高检测效率,降低检测费用,本文在研究单个卷叶伴随病毒RT-PCR... 葡萄受卷叶伴随病毒侵染后,树势减弱,抗逆性变差,果穗着色不良,成熟期推迟,含糖量降低。目前已报道11种葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaV)。为提高检测效率,降低检测费用,本文在研究单个卷叶伴随病毒RT-PCR检测技术基础上,对4种葡萄卷叶伴随病毒的多重RT-PCR模板浓度、引物浓度和退火温度进行优化,建立了同时检测葡萄卷叶伴随病毒-1(GLRaV-1)、葡萄卷叶伴随病毒-3(GLRaV-3)、葡萄卷叶伴随病毒-4(GLRaV-4)和葡萄卷叶伴随病毒-5(GLRaV-5)的多重RT-PCR技术体系。模板浓度、引物浓度、TaqDNA聚合酶浓度、退火温度和循环次数对多重RT-PCR检测结果均有较大影响,而在一定范围内改变延伸时间和dNTP浓度对检测结果影响较小。对4种葡萄卷叶伴随病毒的PCR产物进行克隆和测序,扩增基因片段与GenBank中登录的基因序列同源性为95%～99%。所建立的多重RT-PCR技术检测田间样品效果良好。 展开更多

关键词 葡萄卷叶伴随病毒 多重RT-PCR 检测技术

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我国葡萄主栽区卷叶病相关病毒种类的检测分析 被引量：11

3

作者 裴光前 董雅凤 +2 位作者 张尊平 范旭东 任芳 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期463-468,I0001,共7页

田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡... 田间调查200个葡萄品种,结果82个品种表现葡萄卷叶病症状,其中欧亚种群表现葡萄卷叶病症状的品种最多,发病率最高,发病症状最重;欧美杂种发病率和严重度均比欧亚种群低;未发现美洲种群的品种表现葡萄卷叶病症状。从58株表现卷叶病的葡萄上采集休眠枝条进行卷叶病毒ELISA和RT-PCR检测,葡萄卷叶病毒-1,2,3,4,5和7(GLRaV-1,2,3,4,5和7)等6种葡萄卷叶病毒的检出率分别为20.7%,17.2%,62.1%,3.4%,5.2%和15.5%。回收PCR产物进行克隆和序列分析,并将测序结果提交至GeneBank。以葡萄卷叶病毒HSP70基因序列构建系统进化树分析其进化关系,GLRaV-1、3和7,GLRaV-2、4和5分别聚为2大类,其中GLRaV-1和3,GLRaV-4和5在各自的聚类中关系更近。 展开更多

关键词 葡萄卷叶病毒 田间调查 ELISA RT-PCR 进化树

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宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄病毒病田间自然发病率调查及检测 被引量：5

4

作者 吕苗苗 纳莹 +2 位作者 孙牧笛 徐全智 顾沛雯 《北方园艺》 CAS 北大核心 2017年第13期55-62,共8页

对宁夏贺兰山东麓8个酿酒葡萄种植地区8个葡萄品种的病毒病田间自然发病情况进行调查,采用RT-PCR方法,检测了40份样品中GLRaV-1~5这5种葡萄卷叶伴随病毒的感染率。结果表明:宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄主要病毒病有葡萄卷叶病、扇叶病和栓皮... 对宁夏贺兰山东麓8个酿酒葡萄种植地区8个葡萄品种的病毒病田间自然发病情况进行调查,采用RT-PCR方法,检测了40份样品中GLRaV-1~5这5种葡萄卷叶伴随病毒的感染率。结果表明:宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄主要病毒病有葡萄卷叶病、扇叶病和栓皮病,其中葡萄卷叶病尤为严重;不同酿酒葡萄种植区和品种间葡萄卷叶病的感染存在着差异,老葡萄种植区中品种间葡萄卷叶病发病率明显高于新葡萄种植区的品种;"蛇龙珠"和"黑比诺"是感染葡萄卷叶病毒的主要品种,发病率高达85.1%和52.7%;利用5种葡萄卷叶伴随病毒引物进行RT-PCR检测,检出3种病毒类型,且GLRaV-3的检出率最高,为87.5%。 展开更多

关键词 宁夏贺兰山东麓 酿酒葡萄病毒病 田间自然发病率 葡萄卷叶伴随病毒(glravs) RT-PCR检测

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宁夏地区葡萄卷叶伴随病毒遗传变异的PCR-SSCP分析 被引量：5

5

作者 李文学 吕苗苗 +3 位作者 胡丽杰 闫思远 孙牧笛 顾沛雯 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1-10,共10页

宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶病病株率较高,严重影响了酿酒葡萄产业的健康发展,但有关其病原葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaVs)的遗传变异情况则鲜有报道.利用RT-PCR技术对宁夏酿酒葡萄不同种植区的7个主栽... 宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄卷叶病病株率较高,严重影响了酿酒葡萄产业的健康发展,但有关其病原葡萄卷叶伴随病毒(Grapevine leafroll-associated virus,GLRaVs)的遗传变异情况则鲜有报道.利用RT-PCR技术对宁夏酿酒葡萄不同种植区的7个主栽品种的GLRaV-1和GLRaV-3进行分子检测,利用SSCP技术对扩增片段进行遗传变异分析.试验结果共获得8个GLRaV-1和13个GLRaV-3的阳性样本.8个GLRaV-1分离物基于CP基因分析差异明显,可分为3类;13个GLRaV-3分离物基于RdRp基因分析差异明显,可分为3类,而基于CP和HSP70基因分析可分为2类.说明宁夏酿酒葡萄不同种植区、不同品种的GLRaV-1和GLRaV-3种群分子特性存在差异且遗传变异明显.这有助于宁夏地区酿酒葡萄GLRaVs流行学调查和分子诊断分析,为该病害的防控提供理论依据. 展开更多

关键词 葡萄卷叶伴随病毒 遗传变异 RT-PCR检测 SSCP 宁夏贺兰山东麓

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葡萄卷叶伴随病毒1号和3号宁夏分离物部分基因序列分析 被引量：3

6

作者 吕苗苗 李文学 +2 位作者 孙牧笛 胡丽杰 顾沛雯 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期74-80,共7页

为明确葡萄卷叶伴随病毒(GLRaVs)在宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄上的侵染状况,采用RT-PCR技术对40份酿酒葡萄样品中的GLRaV-1~GLRaV-5进行了外壳蛋白(CP)、复制酶(RdRp)和热激蛋白(HSP70)基因序列的克隆和分析。检测结果表明,在所检测的5种... 为明确葡萄卷叶伴随病毒(GLRaVs)在宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄上的侵染状况,采用RT-PCR技术对40份酿酒葡萄样品中的GLRaV-1~GLRaV-5进行了外壳蛋白(CP)、复制酶(RdRp)和热激蛋白(HSP70)基因序列的克隆和分析。检测结果表明,在所检测的5种病毒中,除GLRaV-2和GLRaV-4未检测到外,GLRaV-1和GLRaV-3的检出率最高,分别为20.0%和32.5%,GLRaV-5的检出率仅为5.0%;有6个样品存在GLRaV-1和GLRaV-3两种病毒复合侵染。序列分析表明,GLRaV-1宁夏分离物的部分CP基因序列长度为232nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为90%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的CP基因序列长度为942nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为40%,与已报道的国内外其他分离物CP基因序列相比,其同源率为40%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的RdRp基因序列长度为683nt,其各分离物间的核苷酸序列同源率为90%以上,与已报道的国内外其他分离物RdRp基因序列相比,其同源率为90%~99%;GLRaV-3宁夏分离物的HSP70基因序列长度为546nt,其两种分离物间的核苷酸序列同源率为96%,与已报道的国内外其他分离物HSP70基因序列相比,其同源率为96%~99%。 展开更多

关键词 葡萄卷叶伴随病毒(glravs) RT-PCR检测 克隆 序列分析

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葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术 被引量：6

7

作者 侯义龙 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期305-308,共4页

为调查葡萄植株携带葡萄卷叶病毒(GLRaV)的情况,以带毒和非带毒指示植物“品丽珠”为试验材料提取总RNA,并以此总RNA为模板进行RT-PCR扩增,建立了GLRaV的RT-PCR检测体系,并对GLRaV cDNA序列进行测定,结果成功地检测到了GLRaV。经多次试... 为调查葡萄植株携带葡萄卷叶病毒(GLRaV)的情况,以带毒和非带毒指示植物“品丽珠”为试验材料提取总RNA,并以此总RNA为模板进行RT-PCR扩增,建立了GLRaV的RT-PCR检测体系,并对GLRaV cDNA序列进行测定,结果成功地检测到了GLRaV。经多次试验证明,该检测结果准确可靠,可以用于GLRaV的检测。 展开更多

关键词 葡萄 卷叶病毒 RT-PCR检测技术 逆转录-聚合酶链式反应

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葡萄病毒病多重RT-PCR检测技术体系优化分析 被引量：16

8

作者 牛建新 陈萍 马兵钢 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期120-123,共4页

在确立葡萄卷叶病毒Ⅲ和扇叶病毒RT-PCR优化体系基础上,研究了多重PCR的主要成分:dNTPS、TaqDNA聚合酶、MgCl2对PCR反应的影响,从而确立了GLRaVⅢ、GFLV的多重RT-PCR检测体系。研究结果表明,多重PCR反应体系中TaqDNA聚合酶的用量较单重... 在确立葡萄卷叶病毒Ⅲ和扇叶病毒RT-PCR优化体系基础上,研究了多重PCR的主要成分:dNTPS、TaqDNA聚合酶、MgCl2对PCR反应的影响,从而确立了GLRaVⅢ、GFLV的多重RT-PCR检测体系。研究结果表明,多重PCR反应体系中TaqDNA聚合酶的用量较单重PCR反应体系要低,而且可降低成本和缩短检测时间。 展开更多

关键词 葡萄卷叶病毒Ⅲ(glrav Ⅲ) 葡萄扇叶病毒(GFLV) 多重RT-PCR检测体系

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长线形病毒科成员编码蛋白的功能 被引量：12

9

作者 洪雪玉 陈剑平 《浙江农业学报》 CSCD 2004年第1期47-52,共6页

长线形病毒科病毒危害甜菜、柑桔、番茄、马铃薯、樱桃、莴苣等重要的经济作物,是正链RNA病毒中基因组最大,且最复杂的植物病毒科。目前包括长线形病毒属,Ampelo病毒属和毛形病毒属,其代表种分别为甜菜黄化病毒(BYV),葡萄卷叶伴随病毒3(... 长线形病毒科病毒危害甜菜、柑桔、番茄、马铃薯、樱桃、莴苣等重要的经济作物,是正链RNA病毒中基因组最大,且最复杂的植物病毒科。目前包括长线形病毒属,Ampelo病毒属和毛形病毒属,其代表种分别为甜菜黄化病毒(BYV),葡萄卷叶伴随病毒3(GLRaV 3)和莴苣传染性黄化病毒(LIYV)。最近随着研究的拓展和深入,有关该科病毒的新种类不断增加,部分种类的基因组全序列已被测定。病毒基因编码的重要蛋白如热激蛋白70,外壳蛋白和重复的外壳蛋白,病毒复制所需的蛋白以及疏水性蛋白的功能也得到深入研究。本文就这些蛋白的功能作一个简要的综述。 展开更多

关键词 长线形病毒科 长线形病毒属 毛形病毒属 Ampelo病毒属 BYV glrav-3 LIYV 蛋白质

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葡萄卷叶病毒RT-PCR检测技术研究 被引量：9

10

作者 牛建新 陈萍 +2 位作者 李西平 马兵钢 鲁晓燕 《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第1期28-32,共5页

以葡萄叶片和皮层为材料,对植物总RNA和dsRNA提取方法进行了研究,从中筛选出了提取葡萄总RNA和dsRNA的适合方法。建立了GLRaV RT-PCR的有效体系,在有效体系基础上,通过研究RT-PCR主要成分对RT-PCR的影响,确立了GLRaVRT-PCR的优化体系。

关键词 葡萄卷叶病毒Ⅲ RT-PCR检测

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葡萄卷叶伴随病毒-3外壳蛋白的原核表达及其特异性抗血清的制备 被引量：8

11

作者 徐章逸 王国平 +2 位作者 刘亚萍 王彩霞 洪霓 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期129-134,共6页

利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因。序列分析结果表明,cp基因的长度为942bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%... 利用RT-PCR技术扩增得到了葡萄卷叶伴随病毒-3(Grapevine leafroll associated virus-3,GLRaV-3)中国分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)基因。序列分析结果表明,cp基因的长度为942bp,与已报道的其它GLRaV-3分离物的cp核苷酸相似性为91%～99%,编码的氨基酸相似性为95%～100%。将此基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS后用终浓度为1mmol/L的IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,cp在大肠杆菌中可表达出分子量约为35kDa的蛋白。纯化表达产物后免疫家兔制备抗血清。A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)及斑点免疫结合测定(DBIA)结果显示,制备的特异抗血清可用于检测田间感病葡萄样品中的GLRaV-3。 展开更多

关键词 glrav-3 CP 基因克隆 原核表达 PAS—ELISA DBIA

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葡萄卷叶病毒外壳蛋白基因的克隆、序列分析及其在大肠杆菌中的表达 被引量：6

12

作者 张玉满 李云 +2 位作者 田砚亭 腊平 蔡文启 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期232-236,共5页

从我国感染 GL Ra V的葡萄韧皮部组织中提取到约 18kb的 GL Ra V- ds RNA。以此为模板 ,采用 RT- PCR方法 ,扩增到约 1.0 kb的 GL Ra V CP基因 c DNA片段 ,并将其克隆到p Bluescript IISK载体。序列分析表明 ,GL Ra V(中国分离物 ) CP... 从我国感染 GL Ra V的葡萄韧皮部组织中提取到约 18kb的 GL Ra V- ds RNA。以此为模板 ,采用 RT- PCR方法 ,扩增到约 1.0 kb的 GL Ra V CP基因 c DNA片段 ,并将其克隆到p Bluescript IISK载体。序列分析表明 ,GL Ra V(中国分离物 ) CP基因与美国 GL Ra V- 3CP基因核苷酸序列同源性达 99.15% ,推导的氨基酸序列同源性为 98.0 9%。通过大肠杆菌表达载体p BV2 2 1构建了 GLRa V- CP基因的大肠杆菌蛋白表达克隆 ,SDS- PAGE电泳分析及 Western-Blot结果表明 ,有一条约 35k Da的特异表达蛋白带 ,与 GL Ra V- 展开更多

关键词 葡萄卷叶病毒 外壳蛋白基因 克隆 序列分析 表达

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葡萄卷叶病毒的脱毒技术研究 被引量：9

13

作者 顾沛雯 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第5期85-91,共7页

【目的】建立葡萄离体培养快繁体系,探索葡萄组培苗的脱毒技术,以防治葡萄卷叶病的发生。【方法】依据葡萄茎尖分化、伸长和生根3阶段中所需激素比例的不同,以1/2 MS、B5和GS为基础培养基,并适当调节激素之间的比例,筛选适合不同时期的... 【目的】建立葡萄离体培养快繁体系,探索葡萄组培苗的脱毒技术,以防治葡萄卷叶病的发生。【方法】依据葡萄茎尖分化、伸长和生根3阶段中所需激素比例的不同,以1/2 MS、B5和GS为基础培养基,并适当调节激素之间的比例,筛选适合不同时期的最佳培养基;同时研究了葡萄微茎尖大小、热处理方式和时间、不同病毒钝化剂处理等对葡萄组培苗的脱毒效果。【结果】筛选出从葡萄茎尖分化到生根的最佳激素配比,其培养时间比常规微茎尖培养缩短12-19 d;在脱毒处理中,将热处理与茎尖培养相结合,使成活率和脱毒率较单纯茎尖培养提高7.5%和8.5%,其中变温比恒温处理成活率提高15.6%,而脱毒率相差不大;病毒钝化剂处理与微茎尖相结合培养结果表明,病毒钝化剂对葡萄病毒具有良好的抑制作用,但对茎尖的生长发育有影响。【结论】葡萄微茎尖培养与热处理及病毒钝化剂处理相结合,是葡萄组培苗较好的脱毒方法。 展开更多

关键词 葡萄卷叶病毒 微茎尖培养 热处理 病毒钝化剂 脱毒技术

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葡萄卷叶伴随病毒基因的克隆及序列分析 被引量：5

14

作者 张满良 朱水芳 赵冬兰 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第5期70-75,共6页

根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆... 根据葡萄卷叶伴随病毒 美国分离物的 GLRa V- 3CP基因序列 ,设计并合成了 1对该病毒的 PCR引物 ,利用 IC- RT- PCR成功地检查到合适大小的 PCR产物 ;同时将PCR产物克隆到中间载体 PGEM- 3Zf上 ,转化大肠杆菌 DH5α菌株 ,筛选阳性克隆。通过双酶切以及序列分析表明 ,扩增样品与美国分离物的同源性为 94.1 %。 展开更多

关键词 CP基因 克隆 序列分析 葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ 葡萄卷叶病

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红地球葡萄GLRaV-3的茎尖培养脱毒及RT-PCR检测 被引量：8

15

作者 韩艳婷 石雪晖 +4 位作者 杨国顺 王先荣 刘昆玉 徐丰 倪建军 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第4期198-202,共5页

笔者以带GLRaV-3病毒的红地球为试材,研究了6-BA、NAA、IBA、KT不同配组及茎尖大小对茎尖培养的影响,并利用RT-PCR技术对部分红地球组培苗进行了GLRaV-3病毒检测。研究结果表明:红地球葡萄茎尖培养脱毒最佳茎尖初始培养基为:1/2MS+6-BA0... 笔者以带GLRaV-3病毒的红地球为试材,研究了6-BA、NAA、IBA、KT不同配组及茎尖大小对茎尖培养的影响,并利用RT-PCR技术对部分红地球组培苗进行了GLRaV-3病毒检测。研究结果表明:红地球葡萄茎尖培养脱毒最佳茎尖初始培养基为:1/2MS+6-BA0.5mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L,最佳茎尖分化培养基为:B5+KT1.0mg/L+NAA0.2mg/L;茎尖大小与成活率成正比,与脱毒率成反比;运用RT-PCR检测技术进行了脱毒后组培苗的检测,得到了GLRaV-3的特异片段为300bp,获得了28株脱毒苗,平均脱毒率为43%。 展开更多

关键词 红地球葡萄 茎尖培养 脱毒 葡萄卷叶病 RT-PCR

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葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ宁夏分离物外壳蛋白基因的克隆及序列分析 被引量：5

16

作者 顾沛雯 《宁夏大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2009年第4期383-386,共4页

用酶联免疫吸附法对宁夏贺兰山东麓地区不同葡萄品种进行卷叶伴随病毒Ⅲ(GLRaVⅢ)的测定,检测率为37.1%,与田间自然发病率调查结果基本一致.设计GLRaVⅢ外壳蛋白(CP)基因序列引物对,进行RT-PCR扩增,获得1.1 kb的特异片段.其中,CP基因长9... 用酶联免疫吸附法对宁夏贺兰山东麓地区不同葡萄品种进行卷叶伴随病毒Ⅲ(GLRaVⅢ)的测定,检测率为37.1%,与田间自然发病率调查结果基本一致.设计GLRaVⅢ外壳蛋白(CP)基因序列引物对,进行RT-PCR扩增,获得1.1 kb的特异片段.其中,CP基因长942 bp,推导的编码蛋白含有313个氨基酸.通过对GLRaVⅢCP基因同源性比较,结果表明,GLRaVⅢ宁夏分离物的CP基因与四川分离物SL-10 CP基因的亲缘关系最近,核苷酸和所编码的氨基酸序列同源性分别为98.8%和98.1%;与巴西分离物PET-4和智利分离物C1-817 CP基因亲缘关系较远,核苷酸序列同源性低于95.0%,所编码的氨基酸序列同源性低于97.0%,认为GLRaVⅢ株系间的CP基因存在差异. 展开更多

关键词 葡萄卷叶伴随病毒Ⅲ(glravⅢ) 宁夏分离物 CP基因 克隆和序列分析

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葡萄卷叶病毒主要检测技术比较 被引量：4

17

作者 王升吉 尚佑芬 +3 位作者 赵玖华 杨崇良 路兴波 孙红炜 《山东农业科学》 2008年第3期95-98,共4页

葡萄卷叶病(GLRaV)是葡萄上的一种重要病毒病害。本文主要阐述了该病的病原、分布及近些年来各种检测技术在该病检测中的应用情况,分析了各种检测技术的优势和不足及如何在该病检测中对各种方法做合理的搭配应用,优势互补,提高效率。

关键词 葡萄 葡萄卷叶病毒(glrav) 检测技术 检测方法

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山东省葡萄几种主要病毒病调查及检测研究 被引量：4

18

作者 王升吉 赵玖华 +4 位作者 尚佑芬 吕志华 张加魁 赵亚 戴争 《北方园艺》 CAS 北大核心 2011年第7期20-23,共4页

对采自山东省不同葡萄园类别的葡萄样品,采用PTA-ELISA法和Dot-ELISA法对葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)进行了检测,采用DAS-ELISA法对葡萄卷叶病的3个毒原(GL-RaV-1-、2-、3)进行了检测。GRSPaV检测结果表明:检测的61个品种518个样品,阳性... 对采自山东省不同葡萄园类别的葡萄样品,采用PTA-ELISA法和Dot-ELISA法对葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)进行了检测,采用DAS-ELISA法对葡萄卷叶病的3个毒原(GL-RaV-1-、2-、3)进行了检测。GRSPaV检测结果表明:检测的61个品种518个样品,阳性样品率33.6%,阳性品种率73.8%,其中资源圃样品阳性率32.7%,生产园样品阳性率34.0%。对检测到阳性样品辅以RT-PCR法验证,2对引物均扩增出了预期片段,分别为解旋酶基因340 bp片段、CP基因842 bp片段。GLRaV-1-、2-、3的检测结果表明:鲜食品种3种病原的阳性样品率分别为33.7%、7.1%、62.2%,酿酒品种阳性样品率分别为35.1%、16.2%、54.1%,综合3种病毒的阳性样品率为76.3%,品种感染率87.7%。通过该类研究对推动国内葡萄无毒化生产有重要意义。 展开更多

关键词 葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV) 葡萄卷叶病毒-1■2■3(glrav-1■2■3) 检测 山东

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葡萄卷叶相关病毒13在我国葡萄上的首次报道 被引量：7

19

作者 范旭东 张尊平 +2 位作者 任芳 胡国君 董雅凤 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期141-144,共4页

我国葡萄品种资源丰富,栽培面积逐年增加。葡萄感染病毒后,便终生带毒,持续危害,造成生长发育迟缓,树势衰退,严重影响葡萄的产量和品质。山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)是我国重要的野生果树资源,其抗病能力较强,是培育抗病、抗寒优良... 我国葡萄品种资源丰富,栽培面积逐年增加。葡萄感染病毒后,便终生带毒,持续危害,造成生长发育迟缓,树势衰退,严重影响葡萄的产量和品质。山葡萄(Vitis amurensis Rupr.)是我国重要的野生果树资源,其抗病能力较强,是培育抗病、抗寒优良品种的珍贵种质。 展开更多

关键词 病毒 葡萄 卷叶 抗病 资源 树势 种质

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PAS-ELISA检测GFLV和GLRaV-3技术的研究 被引量：1

20

作者 陈建军 曹香林 +2 位作者 李学梅 刘崇怀 古勤生 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2007年第2期50-53,共4页

以中国农业科学院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材,对葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)的检测技术的研究。从阴、阳性对照及抗血清或抗体浓度的选择,到不同时期、检... 以中国农业科学院郑州果树研究所国家葡萄资源圃的葡萄品种为试材,对葡萄扇叶病毒(GFLV)和葡萄卷叶病毒Ⅲ(GLRaV-3)进行了A蛋白酶联免疫吸附测定(PAS-ELISA)的检测技术的研究。从阴、阳性对照及抗血清或抗体浓度的选择,到不同时期、检测部位对结果的影响,建立了一套完整的ELISA检测GFLV和GLRaV-3程序;通过试验分析,该方法快速,简便,经济且灵敏度高,不失为葡萄病毒检测的一种新方法。通过检测,还了解到GFLV的发病高峰在春季,主要发病部位在上部叶片,而GLRaV-3的发病高峰在秋季,重要发病部位在下部叶片。 展开更多

关键词 葡萄 病毒检测 PAS-ELISA 灵敏度 GFLV glrav-3

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