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黑酵母Hortaea werneckii GH10家族耐热木聚糖酶的异源表达及其降解桑皮特性 被引量：3
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作者 谢晨 游帅 +3 位作者 张温馨 白致远 吴福安 王俊 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期559-567,共9页
我国桑树种植面积广,桑园管理每年需要伐枝,其桑皮除了含有活性物质还含有丰富的木质纤维素,急需进行高值化开发利用,因此选用高比活耐热木聚糖酶是桑皮降解及其转化应用的关键酶。本文从黑酵母Hortaea werneckii中克隆得到糖苷水解酶Hw... 我国桑树种植面积广,桑园管理每年需要伐枝,其桑皮除了含有活性物质还含有丰富的木质纤维素,急需进行高值化开发利用,因此选用高比活耐热木聚糖酶是桑皮降解及其转化应用的关键酶。本文从黑酵母Hortaea werneckii中克隆得到糖苷水解酶HwXYL10A基因,在毕赤酵母中进行了异源表达,探究其酶学性质,为利用其降解桑皮木质纤维素提供可行性。该基因编码的蛋白与GH10家族高温木聚糖酶XYL10C_△N(GenBank:ACS96449.1)的同源性为60%。该酶的最适温度为75℃,最适pH为4.0,T_(50)值为76℃,在75℃和80℃下半衰期分别为70 min和11 min,表明HwXYL10A具有良好的热稳定性。在最适条件下,以榉木木聚糖、甘蔗木聚糖和玉米芯木聚糖为底物测定,其比活分别是3 260 U/mg、3 160 U/mg和3 870 U/mg,催化效率分别为2 970 mL/(s·mg)、2 320 mL/(s·mg)和975 mL/(s·mg)。采用该木聚糖酶与纤维素酶协同水解经氨水或氢氧化钙预处理的桑皮,协同处理组均在12 h产糖量达到最高,分别为20.38μmol/mL和22.13μmol/mL;最大协同率分别为1.59和1.47。这些优良的酶学性质使HwXYL10A在桑皮以及其他木质纤维素降解中具有潜在的应用价值,同时为耐热木聚糖酶的研究和应用提供了新的素材。 展开更多
关键词 gh10木聚糖酶 高比活 耐热 桑皮 协同降解
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由耐热木聚糖酶从硬木和谷物木聚糖中生成低聚木糖作为短乳杆菌和青春双歧杆菌的碳源
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作者 陶莉 南雪 +3 位作者 何闪 Peter Falck Suthsiri Precha-Atsawanan Carl Grey 《国外畜牧学（猪与禽）》 2014年第2期8-13,共6页
为了比较农业生产型林业中的木聚糖,使用木聚糖RmXyn10A的两种变体,只有源自海洋红嗜热盐菌的全长酶和催化模块,对硬木(桦木)木聚糖和谷物(黑麦)阿拉伯木聚糖进行水解。用含有水解产物的低聚木糖(XOS)作为碳源,培养4种精选的细菌菌种,... 为了比较农业生产型林业中的木聚糖,使用木聚糖RmXyn10A的两种变体,只有源自海洋红嗜热盐菌的全长酶和催化模块,对硬木(桦木)木聚糖和谷物(黑麦)阿拉伯木聚糖进行水解。用含有水解产物的低聚木糖(XOS)作为碳源,培养4种精选的细菌菌种,结果显示了短乳杆菌DSMZ 1264和青春双歧杆菌ATCC 15703出现选择性生长。这两种菌株被证实可利用低聚木糖组分(DP 2-5);而来自黑麦阿拉伯木聚糖水解产物的假定阿拉伯低聚木糖仅能被青春双歧杆菌利用。大肠杆菌不能生长,但能在单糖阿拉伯糖和木糖上生长。研究还表明,小片球菌(Pediococcus parvulus)2.6株既不能利用木糖,也不能利用低聚木糖进行生长。总之,RmXyn10A或其催化模块证实可用于硬木木聚糖和谷物阿拉伯木聚糖的高温水解,产生XOS,因此能在功能性食品中充当益生元。 展开更多
关键词 黑麦阿拉伯木聚糖 gh10木聚糖酶 短乳杆菌 青春双歧杆菌 低聚木糖
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黑曲霉木聚糖酶GH10 Xyn4配伍新丽鞭毛菌GH11 Xyn1B降解木聚糖的协同作用
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作者 姬慧鑫 付涵芬 +2 位作者 陈晓艺 陈红歌 刘新育 《饲料工业》 CAS 北大核心 2022年第23期29-32,共4页
为提高木聚糖的酶解效果,试验在筛选出最佳产木糖效率的GH11家族木聚糖酶Xyn1B基础上,分析瘤胃真菌新丽鞭毛菌来源GH11木聚糖酶Xyn1B和黑曲霉源GH10家族木聚糖酶Xyn4的酶解特性,探究木聚糖酶GH11 Xyn1B和木聚糖酶GH10 Xyn4配伍使用对糖... 为提高木聚糖的酶解效果,试验在筛选出最佳产木糖效率的GH11家族木聚糖酶Xyn1B基础上,分析瘤胃真菌新丽鞭毛菌来源GH11木聚糖酶Xyn1B和黑曲霉源GH10家族木聚糖酶Xyn4的酶解特性,探究木聚糖酶GH11 Xyn1B和木聚糖酶GH10 Xyn4配伍使用对糖产量及产物中寡糖组成的影响。试验中使用的GH10 Xyn4和GH11 Xyn1B单一木聚糖酶及其不同配伍混合木聚糖酶溶液的酶活力浓度均为0.879 IU/mL,然后测定木聚糖酶的种类、添加量以及GH10 Xyn4和GH11 Xyn1B木聚糖酶不同配伍比例对木聚糖酶解效果的影响。结果表明,在哈茨木霉GH11敏感木聚糖酶XynHar、瘤胃真菌新丽鞭毛菌GH11抗性木聚糖酶Q9U、瘤胃真菌新丽鞭毛菌GH11抗性木聚糖酶Xyn1B中,抗性木聚糖酶GH11 Xyn1B的催化效率最高,所得酶解产物的OD值最高;GH11 Xyn1B在酶用量为400μL时产糖量接近峰值;GH11木聚糖酶Xyn1B和GH10木聚糖酶Xyn4的复配酶液催化产糖量均高于单独酶液,反应时间2 h时、GH11 Xyn1B:GH10 Xyn4为5:5时产糖量可以达到最高,酶解产物中包含较高含量的木二糖、木三糖以及其他木寡糖。 展开更多
关键词 gh11木聚糖酶Xyn1B gh10木聚糖酶Xyn4 协同降解 糖产量 木寡糖
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