铁皮石斛多糖抗阿司匹林诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的保护作用机制研究 被引量：22

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作者 吴耽 江婷婷 +6 位作者 赵青 杨传玉 陈思颖 杨畅 孙佳 刘亭 兰燕宇 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1479-1480,共2页

细胞因子（cytokine,CK）是由免疫细胞和非免疫细胞合成分泌的,存在于细胞间的一类具有调节机体免疫功能、介导炎症反应、参与组织修复和提高机体抵抗力的一类高效的功能蛋白质,其能感受外界因素对机体的刺激,并将信息传递给体内,可分... 细胞因子（cytokine,CK）是由免疫细胞和非免疫细胞合成分泌的,存在于细胞间的一类具有调节机体免疫功能、介导炎症反应、参与组织修复和提高机体抵抗力的一类高效的功能蛋白质,其能感受外界因素对机体的刺激,并将信息传递给体内,可分为蛋白质、多肽或糖蛋白。大量文献报道,人胃黏膜上皮GES-1细胞受阿司匹林、乙醇、 展开更多

关键词 铁皮石斛 多糖 阿司匹林 ges-1细胞 NF-ΚB信号通路 机制

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幽门螺杆菌VacA N端片段通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡 被引量：10

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作者 杨卓 张艳 +3 位作者 黎村艳 于文 曹斌 余敏君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期251-255,260,共6页

目的:本研究初步探讨幽门螺杆菌(H.pylori)空泡毒素单一毒力决定簇对GES-1胃黏膜上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究H.pylori的致病机制奠定基础。方法:将本课题组已构建的pDsRed-Monomer-C1/VacA N端真核表达载体转染至GES-1细胞中,Weste... 目的:本研究初步探讨幽门螺杆菌(H.pylori)空泡毒素单一毒力决定簇对GES-1胃黏膜上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究H.pylori的致病机制奠定基础。方法:将本课题组已构建的pDsRed-Monomer-C1/VacA N端真核表达载体转染至GES-1细胞中,Western blot鉴定VacA蛋白在细胞中的表达;电子显微镜和中性红摄取试验检测GES-1细胞的空泡样变;Hoechst33342染色、Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒以及电镜观察细胞凋亡情况,同时采用分光光度法检测细胞Caspase-9、Caspase-3的活化程度,Rho123检测细胞跨膜电位的变化,ELISA法检测细胞色素C的释放。结果:重组质粒pDsRed-Monomer-C1/VacA转染GES-1细胞24小时后,电镜下可明显观察到空泡样变及核固缩、染色质边聚等凋亡特征,重组质粒组部分细胞发生空泡样变;Hoechst 33342染色后镜下可见明显的核染色质浓缩,Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒检测发现重组质粒组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);Caspase-9和Caspase-3活化程度呈时间依赖性增加,分别在12小时和24小时达到峰值;Rho123染色发现线粒体跨膜电位明显降低;重组质粒转染组释放细胞色素C的浓度呈时间依赖性正相关,与空质粒组及对照组相比差异显著(P<0.05)。结论:VacA N端片段可诱导GES-1细胞凋亡及空泡样变,VacA蛋白可激活Caspase-9和Caspase-3,且可能主要通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 VACA ges-1细胞 线粒体途径 细胞凋亡

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姜黄素对幽门螺杆菌及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响 被引量：10

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作者 任娇艳 苟娜 +3 位作者 高立 杨宜婷 李良 袁尔东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第23期151-156,共6页

对姜黄素抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也... 对姜黄素抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也有明显的抑制作用,半数抑制浓度为1.735 mmol/L。通过噻唑蓝实验分析姜黄素对人胃GES-1细胞和Hp感染人胃GES-1细胞的影响。结果显示,短时间内(12 h)较低浓度(68μmol/L)姜黄素对人胃GES-1细胞增殖无明显影响,但姜黄素浓度的增加和作用时间的延长可使细胞存活率明显下降。经68μmol/L姜黄素作用12 h后,损伤模型组细胞形态有一定程度的复原,细胞存活率略有升高,但不显著(P>0.05);高浓度(136、680μmol/L)姜黄素会导致细胞存活率明显下降。因此,姜黄素对Hp生长和脲酶活力有明显的抑制作用,但不足以缓解Hp对人胃GES-1细胞的损伤作用。 展开更多

关键词 姜黄素 幽门螺杆菌 脲酶 人胃ges-1细胞

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阿司匹林、氯吡格雷联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响 被引量：9

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作者 孙沂 樊宏伟 +1 位作者 王书奎 张振玉 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第6期520-523,共4页

目的探讨阿司匹林、氯吡格雷及二者联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1,分别将不同浓度阿司匹林(2.5、5、10和20mmol/L)及氯吡格雷(0.01、0.1、0.5和1mmol/L)与GES-1细胞共同培养24、48、7... 目的探讨阿司匹林、氯吡格雷及二者联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1,分别将不同浓度阿司匹林(2.5、5、10和20mmol/L)及氯吡格雷(0.01、0.1、0.5和1mmol/L)与GES-1细胞共同培养24、48、72h,采用MTT比色法计算细胞生长抑制率。分别以药物的不同浓度对GES-1细胞生长抑制率作图,得到剂量反应曲线。根据Bliss法,分别求出阿司匹林和氯吡格雷的半数抑制浓度(IC50),倒置相差显微镜下观察IC50剂量阿司匹林和IC50剂量氯吡格雷单独和联合与GES-1细胞共同培养24h后,细胞形态学变化。MTT比色法检测药物联合作用对GES-1细胞增殖率的影响。结果阿司匹林对GES-1细胞的损害呈剂量和时间依赖性。阿司匹林作用24h的IC50为18.32mmol/L(95%CI=2.66～26.98)。氯吡格雷对GES-1细胞的损害呈剂量依赖性,但无时间依赖性。氯吡格雷作用24h的IC50为0.36mmol/L(95%CI=0.26～0.46)。光镜下可见药物作用后贴壁细胞数量减少,细胞变圆,悬浮,部分细胞核浓缩;药物联合作用组悬浮细胞数明显增多,细胞损害明显增大。氯吡格雷和阿司匹林联合使用对GES-1细胞的生长抑制率明显高于单独使用阿司匹林或氯吡格雷(P<0.01)。结论阿司匹林和氯吡格雷均可抑制人胃黏膜上皮细胞的增殖,二者联合使用对细胞的损害具有协同作用。 展开更多

关键词 阿司匹林 氯吡格雷 ges-1细胞 MTT法 半数抑制浓度

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康复新液对非甾体抗炎药诱导的人胃黏膜上皮细胞 GES-1细胞损伤的影响 被引量：8

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作者 胡婷婷 饶朝龙 +2 位作者 谢晓芳 唐欣 彭成 《成都中医药大学学报》 2019年第4期29-33,共5页

目的:观察康复新液对非甾体抗炎药引起的GES-1细胞形态损伤和凋亡相关蛋白变化的影响,为其临床治疗胃溃疡提供科学依据。方法:采用非甾体抗炎药制备胃黏膜上皮细胞损伤模型,MTT法测定不同浓度康复新液对其增殖和形态变化影响;Hoechst/P... 目的:观察康复新液对非甾体抗炎药引起的GES-1细胞形态损伤和凋亡相关蛋白变化的影响,为其临床治疗胃溃疡提供科学依据。方法:采用非甾体抗炎药制备胃黏膜上皮细胞损伤模型,MTT法测定不同浓度康复新液对其增殖和形态变化影响;Hoechst/PI染色检测凋亡发生情况;Western blot测定细胞中凋亡相关蛋白表达水平。结果:浓度过高或过低的康复新液均会对GES-1细胞的生长有一定的抑制作用,适当浓度的康复新液能一定程度减轻非甾体抗炎药引起的细胞损伤,减少凋亡细胞和死细胞数量;与非甾体抗炎药组相比较,康复新液组和非甾体抗炎药+康复新液组Bcl-2和Bax水平比值升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:康复新液能抑制非甾体抗炎药引起的GES-1细胞损伤,其作用机制可能与减轻非甾体抗炎药引起的GES-1细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 康复新液 人胃黏膜上皮细胞ges-1 非甾体抗炎药 细胞调亡 BCL-2 BAX

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酱头抗胃溃疡的作用及机制研究 被引量：7

6

作者 邹玉林 崔秀明 +4 位作者 向巧 郭敏 梁应忠 曲媛 杨晓艳 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期561-567,共7页

目的:研究酱头对乙醇诱导的人胃上皮细胞(GES-1)的保护作用及其抗大鼠胃溃疡的作用和机制。方法:将细胞分为正常对照组、模型对照组、酱头95%醇提物组、酱头50%醇提物组、酱头水煎提取物组,采用1%乙醇建模,MTT法检测GES-1细胞增殖情况... 目的:研究酱头对乙醇诱导的人胃上皮细胞(GES-1)的保护作用及其抗大鼠胃溃疡的作用和机制。方法:将细胞分为正常对照组、模型对照组、酱头95%醇提物组、酱头50%醇提物组、酱头水煎提取物组,采用1%乙醇建模,MTT法检测GES-1细胞增殖情况。60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、雷尼替丁组,酱头95%醇提物小、中、大剂量组(150、300、600 mg/kg),连续灌胃14 do采用无水乙醇建模,比较各组大鼠胃溃疡面积及溃疡抑制率;扫描电镜观察胃黏膜损伤程度;酶联免疫吸附测定法检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6,IL-1β水平,胃组织中丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果:三种酱头提取物中,酱头95%醇提物对于GES-1细胞的保护作用最强。动物实验中,与正常对照组比较,模型对照组胃黏膜上出现大量溃疡,而酱头95%醇提物各剂量组及雷尼替丁组溃疡面积较模型对照组明显减小(均P<0.05)。与模型对照组比较,酱头95%醇提物各剂量组及雷尼替丁组均可明显降低大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平及胃组织中MDA含量,提高胃组织中SOD、CAT、GSH活性(均P<0.05).结论:酱头95%醇提物可通过降低血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平及胃组织中MDA含量,提高胃组织中SOD、CAT、GSH活性,起到治疗乙醇诱导胃溃疡的作用。 展开更多

关键词 胃溃疡 酱头 抗炎 抗氧化 ges-1细胞 大鼠

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肠三叶因子介导PI3K/Akt信号通路保护胃黏膜上皮细胞紧密连接 被引量：7

7

作者 孙兆瑞 刘红梅 +7 位作者 杨志洲 邵旦兵 林金锋 徐敏 张炜 任艺 陈鑫 聂时南 《临床急诊杂志》 CAS 2014年第7期379-382,386,共5页

目的:探讨肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞紧密连接的保护作用,并研究PI3K/Akt信号通路在其中的作用机制。方法:体外培养GES-1细胞,分别设正常对照组,LPS组,ITF组,LPS+ITF组,LPS+ITF+LY294002组,ITF+LY294002组。正常对照组:正常培养;LPS组... 目的:探讨肠三叶因子对胃黏膜上皮细胞紧密连接的保护作用,并研究PI3K/Akt信号通路在其中的作用机制。方法:体外培养GES-1细胞,分别设正常对照组,LPS组,ITF组,LPS+ITF组,LPS+ITF+LY294002组,ITF+LY294002组。正常对照组:正常培养;LPS组:加入浓度为10mg/L的LPS;ITF组:加入浓度为100μg/L的ITF;LPS+ITF组:加入浓度为10mg/L的LPS,同时加入100μg/L的ITF;LPS+ITF+LY294002组:加入浓度为10mg/L的LPS、100μg/L的ITF,同时加入PI3K/Akt信号通路的抑制剂LY294002(15μM);ITF+LY294002组:加入100μg/L的ITF,同时加入15μM的LY294002。培养48h,采用Western blot检测ITF对PI3K/Akt信号通路的作用,采用免疫荧光和Western blot检测细胞紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的变化情况。结果:Western blot检测结果说明,与对照组相比,ITF提高了pAkt蛋白的表达水平,而LY294002抑制了ITF激活的pAkt蛋白的表达,说明ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来调控GES-1细胞的生理活动。免疫荧光和Western blot结果显示LPS导致GES-1细胞的紧密连接遭到破坏,降低紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达水平,而ITF可以通过激活PI3K/Akt信号通路来保护GES-1细胞的紧密连接的完整性。结论:ITF保护胃黏膜上皮细胞紧密连接的完整性,提高紧密连接蛋白的表达水平,其发挥作用的主要分子机制是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。 展开更多

关键词 ges-1细胞 肠三叶因子 紧密连接 PI3K AKT信号通路

原文传递

高良姜、红豆蔻及大高良姜的挥发油对乙醇致GES-1细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量：6

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作者 何瑞坤 黄焕迪 +6 位作者 戴庆玲 钟贵 牛新迈 黄少敏 谢旭格 柳俊辉 秦华珍 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第6期81-85,I0031,共6页

目的利用乙醇造成胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,探讨高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药的挥发油对GES-1细胞损伤的保护作用及作用机制。方法分别以含0~9%乙醇浓度的培养液作用于GES-1细胞,作用时间分别为2、3、4、5、6 h,筛... 目的利用乙醇造成胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,探讨高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药的挥发油对GES-1细胞损伤的保护作用及作用机制。方法分别以含0~9%乙醇浓度的培养液作用于GES-1细胞,作用时间分别为2、3、4、5、6 h,筛选最佳造模条件;利用乙醇造成GES-1细胞损伤模型,测定经3味山姜属中药挥发油含药培养基处理后的细胞存活率;ELISA法测定细胞上清液中的白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)水平;Western-blot法检测各实验组中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白的表达量。结果6%乙醇溶液处理3 h为造成GES-1细胞损伤的最佳造模条件;与模型组比较,3味山姜属中药的挥发油低、中、高剂量组均能显著升高GES-1细胞存活率(P<0.01);经各药挥发油处理后,细胞上清液的IL-8和TNF-α水平明显降低,VEGF水平显著升高,bFGF蛋白表达量升高(P<0.01或P<0.05)。结论高良姜、红豆蔻、大高良姜3味山姜属中药挥发油均能保护乙醇损伤的GES-1细胞,减轻细胞的受损程度,其作用机制可能与其降低IL-8和TNF-α水平,升高VEGF水平,上调bFGF蛋白表达水平有关。 展开更多

关键词 山姜属中药 挥发油 ges-1细胞 保护 机制

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黄芪甲苷调控JAK2/STAT3/CXCL12信号通路抑制炎症细胞浸润改善小鼠胃炎的机制研究 被引量：1

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作者 江晓涛 杨泽虹 +5 位作者 王姝烨 安金琪 黄远程 邹雨杉 文艺 李培武 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第2期447-456,共10页

【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·... 【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·mL-1浓度的黄芪甲苷分别干预24 h,明确黄芪甲苷最佳的干预浓度。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法测定黄芪甲苷对细胞活性的影响;采用AutoDock软件对黄芪甲苷和信号传导和转录激活因子3(STAT3)进行分子对接,验证两者的相互作用;采用Western Blot法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和CXCL12蛋白表达水平。(2)体内实验:采用LPS法诱导胃炎小鼠模型,应用黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂干预1周后,免疫组织化学法和Western Blot法检测胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血浆中CXCL12的含量。【结果】(1)体外实验结果显示:10μg·mL-1是LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度,选用黄芪甲苷10μg·mL-1开展后续实验。分子对接结果显示,黄芪甲苷与STAT3具有较高的亲和力。与空白对照组比较,LPS诱导组GES-1细胞p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平显著升高(P<0.001);黄芪甲苷组和p-STAT3抑制剂组p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平较LPS诱导组显著降低(P<0.01)。(2)体内实验结果显示:与空白对照组比较,模型组小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白水平和血浆中CXCL12含量显著上调(P<0.01或P<0.001);黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂组胃炎小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平和血浆中CXCL12含量显著下调(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】黄芪甲苷通过抑制JAK2/STAT3信号通路降低CXCL12的表达,抑制炎症细胞浸润,达到改善胃炎小鼠胃黏膜炎症的作用。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 胃炎 抑炎作用 STAT3信号通路 CXCL12 ges-1细胞 小鼠

原文传递

平胃胶囊对恶变后GES-1细胞氧化应激的抑制作用及机制研究 被引量：1

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作者 王丽娟 汪龙德 +4 位作者 牛小英 汪霞 张瑞婷 吴毓谦 樊泽坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期58-67,共10页

目的:观察平胃胶囊对亚硝酸胺类化合物N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:制备空白... 目的:观察平胃胶囊对亚硝酸胺类化合物N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:制备空白血清和平胃胶囊含药血清备用;MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系GES-1制备PLGC细胞模型,采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光法检测增殖细胞相关抗原Ki67的表达水平,进行模型评价。CCK-8法筛选含药血清最佳干预浓度及时间;采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;ELISA检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用相关试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用新型荧光探针JC-10检测细胞线粒体膜电位的变化;采用实时荧光定量PCR检测Ki67和黑色素瘤分化相关基因7(melanoma differentiation-associated gene-7,MDA-7)的mRNA表达水平;采用Western blot法测定Ki67、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和MDA-7的蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组和空白血清组ROS和MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著下降(P<0.01),Ki67和IL-6蛋白表达显著升高(P<0.01),MDA-7蛋白表达显著下降(P<0.01);与空白血清组相比,模型组ROS和MDA含量,SOD和GSH-Px活性,Ki67和MDA-7 mRNA表达水平,Ki67、IL-6和MDA-7蛋白表达水平,以及线粒体膜电位均无显著差异(P>0.05);与空白血清组相比,平胃胶囊含药血清组中ROS和MDA含量显著降低(P<0.01),SOD和GSH-Px活性显著上升(P<0.05),线粒体膜电位显著升高(P<0.01),Ki67和IL-6蛋白表达水平显著下降(P<0.01),MDA-7的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:平胃胶囊可显著减轻MNNG诱导的胃黏膜上皮细胞氧化应激损伤和炎症反应,调控促癌基因和抑癌基因的表达,从而发挥防治PLGC的作用。 展开更多

关键词 平胃胶囊 胃癌前病变 ges-1细胞 氧化应激

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基于Gln/GLS1/α-KG代谢轴和线粒体凋亡信号通路探讨木瓜总三萜抗D-半乳糖诱导GES-1细胞衰老的作用机制

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作者 贺君宇 杨家鑫 +3 位作者 覃诗颖 郑婧琪 国怡然 马天行 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2230-2246,共17页

木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS... 木瓜总三萜(total triterpenoids from the fruits of Chaenomeles speciosa,TCS)是防治胃黏膜损伤的活性组分,具有潜在的抗衰老作用。然而,TCS是否改善胃衰老,尤其是对于其抗胃衰老的分子机制目前仍不清楚。基于此,该研究旨在探讨TCS对D-半乳糖(D-galactose,D-gal)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1衰老的影响及作用机制,为TCS在临床上用于预防胃衰老提供科学数据。将体外培养的GES-1细胞和转染谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)过表达(overexpression GLS1,GLS1-OE)质粒的GES-1细胞用D-gal诱导衰老后,给予TCS和谷氨酰胺酶1(glutaminase 1,GLS1)抑制剂bis-2-(5-phenylacetamido-1,2,4-thiadiazol-2-yl)ethyl sulfide(BPTES),考察各组细胞存活率、衰老标志物β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性细胞比例、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化;采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)法和比色法检测各组细胞上清液和细胞内GLS1活性、谷氨酰胺(glutamine,Gln)、谷氨酸(glutamate,Glu)、α-酮戊二酸(α-ketoglutarate,α-KG)、尿素和氨水平;采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组细胞中GLS1、线粒体凋亡信号通路相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果显示,与D-gal模型组和GLS1-OE D-gal模型组相比,TCS可显著降低D-gal诱导衰老GES-1细胞和GLS1-OE衰老GES-1细胞SA-β-gal染色阳性细胞率和MMP,抑制衰老细胞存活,促进其细胞凋亡(P<0.01),降低上清液和细胞内GLS1活性和Gln、Glu、α-KG、尿素、氨含量(P<0.01),降低线粒体中细胞色素C(cytochrome C,Cyto C)浓度以及细胞中GLS1、增殖细胞核抗原mRNA和蛋白表达(P<0.01),降低细胞中Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达和前体半胱氨酸蛋白酶(pro-caspase)-9、pro-caspase-3蛋白表达以及Bcl-2/Bax和Bcl-xl/Bad比值(P<0.01),升高胞质中Cyto C浓度和细胞中Bax、Bad、凋亡蛋白酶激活因子1(apoptosis protease activating factor 1,Apaf-1)mR 展开更多

关键词 木瓜总三萜 ges-1细胞 D-半乳糖 衰老 谷氨酰胺/谷氨酰胺酶1/α-酮戊二酸代谢轴 线粒体凋亡通路

原文传递

安胃汤含药血清对胃黏膜肠上皮化生模型细胞自噬及凋亡的影响

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作者 胡鑫 唐友明 +3 位作者 郑景辉 莫云秋 梁柳观 莫少丹 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期469-476,共8页

目的探讨安胃汤(半夏、黄连、干姜、乌药、百合等)含药血清对胃黏膜肠上皮化生(Gastric intestinalmetaplasia,GIM)模型细胞自噬及凋亡的影响。方法采用鹅去氧胆酸(CDCA)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1,制备GIM细胞模型。实验分为正常组(正... 目的探讨安胃汤(半夏、黄连、干姜、乌药、百合等)含药血清对胃黏膜肠上皮化生(Gastric intestinalmetaplasia,GIM)模型细胞自噬及凋亡的影响。方法采用鹅去氧胆酸(CDCA)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1,制备GIM细胞模型。实验分为正常组(正常胃黏膜上皮细胞GES-1常规培养)、模型组(经CDCA复制成GIM模型后常规培养)、空白对照组(GIM模型细胞以等量空白血清培养)、安胃汤组(GIM模型细胞+7%安胃汤含药血清),各组细胞干预24 h后检测。采用流式细胞术(Annexin V-PE/7-AAD双染法)检测细胞凋亡;免疫荧光双标法检测肠上皮化生相关蛋白SOX2、CDX2的表达情况;透射电镜观察细胞超微结构及自噬情况;qRT-PCR法检测细胞LC3、Bax mRNA表达情况;Western Blot法检测细胞MUC2、KLF4、LC3、Bax蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组细胞的MUC2、KLF4蛋白表达显著上调(P<0.01),细胞的凋亡率明显降低(P<0.05);SOX2荧光强度明显降低(P<0.05),CDX2荧光强度显著增高(P<0.01);细胞结构紊乱,细胞核萎缩畸形,内质网和线粒体等细胞器肿胀破裂及空泡化严重,自噬小体及自噬溶酶体明显增多;Bax mRNA及蛋白表达明显下调(P<0.05),LC3 mRNA表达显著上调(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显著升高(P<0.01)。与空白对照组比较,安胃汤组细胞的凋亡率显著增高(P<0.01);SOX2荧光强度显著增高(P<0.01),CDX2荧光强度明显降低(P<0.05);细胞结构较完整,镜下可见自噬小体和自噬溶酶体略有减少;Bax mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.01),LC3 mRNA表达显著下调(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达比值显著降低(P<0.01)。结论安胃汤可能通过调节GIM模型细胞自噬,并促进其凋亡,从而改善胃黏膜上皮细胞的肠上皮化生情况。 展开更多

关键词 安胃汤含药血清 胃黏膜肠上皮化生 ges-1细胞 自噬 凋亡 慢性萎缩性胃炎 胃癌前病变

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委陵菜酸对幽门螺杆菌诱导GES-1细胞损伤的保护作用 被引量：4

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作者 贺海波 朱丽金 +7 位作者 贺君宇 江伟杰 王晓 彭校 陈烨韬 宋利华 张继红 邹坤 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期4892-4903,共12页

目的探索委陵菜酸对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响。方法GES-1细胞与Hp共培养,给予委陵菜酸和NOD样受体家族3(NOD-like receptor family 3,NLRP3)抑制剂MCC950,考察各组细胞存活率、乳酸脱氢... 目的探索委陵菜酸对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导人胃黏膜上皮细胞GES-1损伤的影响。方法GES-1细胞与Hp共培养,给予委陵菜酸和NOD样受体家族3(NOD-like receptor family 3,NLRP3)抑制剂MCC950,考察各组细胞存活率、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率、集落形成、凋亡率、线粒体膜电位和活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)变化;采用ELISA法检测各组细胞上清液中单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、角质细胞趋化因子(keratinocyte chemokines,KC)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-Iβ(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-18、IL-4和IL-10水平;采用试剂盒检测各组细胞谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用qRT-PCR检测各组细胞Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)、Bcl-2、Bcl-xl、Bax和BadmRNA表达情况;采用Western blotting法检测各组细胞TLR4/NLRP3/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和线粒体凋亡信号通路相关蛋白表达情况。结果委陵菜酸显著抑制Hp诱导的GES-1细胞LDH释放率(P<0.05、0.01),促进细胞集落形成(P<0.05、0.01),抑制细胞凋亡(P<0.05、0.01);升高细胞线粒体膜电位(P<0.01),降低ROS水平(P<0.01);降低上清液中MCP-1、KC、TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-18水平(P<0.01),升高IL-4和IL-10水平(P<0.01);升高细胞GSH-Px、SOD和CAT活性(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01);降低细胞TLR4、MyD88、Bax、Bad mRNA表达水平(P<0.01),升高Bcl-2、Bcl-xl mRNA表达水平和Bcl-2/Bax、Bcl-xl/Bad(P<0.01);下调细胞TLR4、MyD88、磷酸化IκB激酶β(phosphorylated inhibitor kappa B kinaseβ,p-IKKβ)、p-IκBα、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein,ASC)、半胱氨酸蛋白酶-1前体(pro-Caspase- 展开更多

关键词 委陵菜酸 ges-1细胞 幽门螺杆菌 炎性反应 NLRP3炎症小体激活 线粒体功能

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山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对乙酸致GES-1细胞损伤的保护作用及机制

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作者 李文博 任伟宏 孙孝亚 《中国现代医药杂志》 2024年第5期1-8,共8页

目的利用乙酸建立胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,研究山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对GES-1细胞损伤的保护作用及机制。方法通过MTT细胞增殖/毒性实验确定Laetanine、Launobine的最佳给药浓度。分别以浓度为0.01%~0.2%... 目的利用乙酸建立胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,研究山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对GES-1细胞损伤的保护作用及机制。方法通过MTT细胞增殖/毒性实验确定Laetanine、Launobine的最佳给药浓度。分别以浓度为0.01%~0.2%的乙酸培养液作用于GES-1细胞,作用时间分别为3、4、5h,筛选最佳造模条件。利用乙酸建立GES-1细胞损伤模型,测定Laetanine、Launobine含药培养基处理后的细胞存活率;Griess法测定细胞上清液中NO的浓度;ELISA法测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)水平;WST-1法检测各实验组超氧化物歧化酶(SOD)抑制率,计算SOD活力值。结果0.1%乙酸溶液处理3h为GES-1细胞损伤的最佳造模条件;与模型组比较,Laetanine、Launobine给药组均能显著升高GES-1细胞存活率(P<0.01);经Laetanine、Launobine处理后,细胞上清液中的NO、TNF-α、IL-6和PGE2水平显著降低,SOD活力显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论山橿中生物碱类成分Laetanine和Launobine均能保护乙酸损伤的GES-1细胞,减轻GES-1细胞的受损程度,其作用机制可能与其降低NO、TNF-α、IL-6和PGE2水平,升高SOD水平有关,表明Laetanine和Launobine可能为山橿发挥抗胃溃疡作用的有效成分。 展开更多

关键词 山橿 生物碱 Laetanine Launobine 胃溃疡 ges-1细胞 保护 机制

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Bmi-1基因过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响 被引量：3

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作者 练国达 邓辉 +4 位作者 陈茵婷 曾林涓 张秋波 钱辰琛 黄开红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期807-810,共4页

目的:探讨原癌基因B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(Bmi-1)过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法:采用逆转录病毒介导转染方法将携带原癌基因Bmi-1的质粒或空质粒稳定转染GES-1细胞,通过real-time PCR及Western blott... 目的:探讨原癌基因B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(Bmi-1)过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法:采用逆转录病毒介导转染方法将携带原癌基因Bmi-1的质粒或空质粒稳定转染GES-1细胞,通过real-time PCR及Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染效果。流式细胞术检测过表达Bmi-1对GES-1细胞周期的影响。应用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测稳定转染Bmi-1对GES-1细胞增殖的影响。结果:Real-time PCR及Western blotting结果均表明成功建立稳定转染Bmi-1基因的GES-1细胞株。流式细胞术结果表明,过表达Bmi-1基因使GES-1细胞G0/G1期减少,G2/M期和S期细胞增多。生长曲线显示,过表达Bmi-1基因使GES-1细胞增殖速度明显提高。结论:过表达Bmi-1基因能调控GES-1细胞的细胞周期,促进GES-1细胞的增殖。 展开更多

关键词 ges-1细胞 胃肿瘤 B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1 细胞周期

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沉默MYCT-1基因表达对人胃粘膜细胞系GES-1增殖凋亡的影响 被引量：2

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作者 刘凤云 王金柱 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期4846-4851,共6页

为了探讨沉默MYCT-1基因表达对人胃粘膜细胞系GES-1细胞增殖和凋亡的影响，本研究将人胃粘膜GES-1细胞系分为空白组（GES-1细胞系培养）、沉默组（加入2μL 2μmol／LMYCT-1特异性RNA与GES-1细胞系共培养）和对照组（加入2μL 2μmol／L... 为了探讨沉默MYCT-1基因表达对人胃粘膜细胞系GES-1细胞增殖和凋亡的影响，本研究将人胃粘膜GES-1细胞系分为空白组（GES-1细胞系培养）、沉默组（加入2μL 2μmol／LMYCT-1特异性RNA与GES-1细胞系共培养）和对照组（加入2μL 2μmol／LsiRNANC与GES-1细胞系共培养）。采用RT-PCR技术于培养48h后测量各组MYCT-1mRNA的表达水平；采用Westernblotting技术检测各组MYCT-1蛋白的表达水平；采用流式细胞仪技术检测各组细胞分期构成、MTT法测定细胞增殖、AnnexinV-FITC双染法检测细胞凋亡情况。研究显示：沉默组G0／G1期和G2／M期细胞所占比例显著低于对照组和空白组（p〈0．05），沉默组S期细胞所占比例显著高于对照组和空白组（p〈0.05）；对照组和空白组的G0／G1期、G2／M期和S期细胞所占比例差异均不显著（p〉0.05）；沉默组细胞凋亡率显著高于对照组和空白组（p〈0．05），沉默组细胞增殖率显著低于对照组和空白组（p〈0.05）；对照组和空白组的细胞凋亡率和增值率差异均不显著（p〉0．05）；沉默组MYCT-1 mRNA、MYCT-1蛋白显著低于对照组和空白组（p〈0．05）；对照组和空白组的MYCT-1 mRNA和MYCT-1蛋白差异均无统计学意义（p〉0．05）。沉默MYCT-1基因表达可显著促进GES-1细胞凋亡，抑制GES-1细胞增殖作用。 展开更多

关键词 沉默 MYCT-I基因 ges-1细胞 增殖 凋亡

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葛根中黄嘌呤氧化酶抑制剂对GES-1细胞诱导的氧化应激保护作用 被引量：2

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作者 冯航 方一帆 +1 位作者 刘心越 汤小胜 《湖北理工学院学报》 2021年第3期44-50,共7页

采用超滤与液相色谱-质谱联用(UF-LC-MS)方法成功地从葛根提取液中筛选并识别出4种黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂,即葛根素、黄豆苷、黄豆苷元和染料木黄酮,其对XO的半数抑制浓度(IC_(50))分别为30.8,5.31,14.5和3.02μg/mL。此外,采用过氧化... 采用超滤与液相色谱-质谱联用(UF-LC-MS)方法成功地从葛根提取液中筛选并识别出4种黄嘌呤氧化酶(XO)抑制剂,即葛根素、黄豆苷、黄豆苷元和染料木黄酮,其对XO的半数抑制浓度(IC_(50))分别为30.8,5.31,14.5和3.02μg/mL。此外,采用过氧化氢诱导人胃上皮细胞(GES-1)氧化应激模型,研究了XO抑制剂对损伤细胞的保护作用。结果表明,4种XO抑制剂均表现出保护作用,且无细胞毒性。随着4种抑制剂浓度的增加,过氧化氢诱导的细胞内超氧物歧化酶(SOD)活性降低得到恢复,乳酸脱氢酶的释放和细胞内超氧阴离子生成的增加均受到抑制。4种XO抑制剂能显著地提高GES-1细胞的活性,减少氧化应激对GES-1细胞的损伤。 展开更多

关键词 葛根 黄嘌呤氧化酶抑制剂 氧化应激 ges-1细胞

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自主研发复合低聚肽对乙醇损伤的GES-1细胞修复作用的研究 被引量：2

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作者 朱艳 李明亮 +5 位作者 张瑞雪 陈亮 凌空 蔡木易 谷瑞增 魏颖 《食品科技》 CAS 北大核心 2020年第5期24-30,共7页

目的:探讨实验室自主研发复合低聚肽对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的修复作用。用4%的乙醇诱导人胃黏膜上皮细胞(GES-1)3 h建立胃黏膜损伤模型。方法:将细胞分为空白组,模型组,阳性对照组(奥美拉唑),复合低聚肽的低、中、高剂量... 目的:探讨实验室自主研发复合低聚肽对乙醇损伤的人胃黏膜上皮细胞(GES-1)的修复作用。用4%的乙醇诱导人胃黏膜上皮细胞(GES-1)3 h建立胃黏膜损伤模型。方法:将细胞分为空白组,模型组,阳性对照组(奥美拉唑),复合低聚肽的低、中、高剂量组,小麦低聚肽组,考察各组分对乙醇损伤的GES-1细胞的治疗作用。结果:复合低聚肽粉对损伤细胞的增殖、抗氧化、ADH酶活力均有增强效果,并呈现浓度依赖性,高剂量组的效果最好。其促进细胞增殖,降低细胞内氧化应激水平、增强ADH酶活力的能力强于小麦低聚肽的单独作用。因此,实验室自主研发复合低聚肽粉具有一定的治疗胃黏膜损伤的作用。 展开更多

关键词 复合低聚肽 小麦低聚肽 ges-1细胞 乙醇

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ROS在幽门螺杆菌对胃上皮细胞DNA损伤中的作用 被引量：2

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作者 易健 舒徐 +3 位作者 吕静 张亮 黄美芳 吕农华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第35期5393-5399,共7页

目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化与DNA损伤之间的关系.方法:将H.pylori ACTC43504(Cag A+,Vac A+)感染正常胃黏膜系GES-1细胞,分别通过活细胞工作站观察细胞内... 目的:探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染过程中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的变化与DNA损伤之间的关系.方法:将H.pylori ACTC43504(Cag A+,Vac A+)感染正常胃黏膜系GES-1细胞,分别通过活细胞工作站观察细胞内ROS变化和多功能酶标仪定量检测细胞内ROS含量.采用凯基彗星实验法(单细胞凝胶电泳)检测DNA损伤.结果:ROS的水平和H.pylori的作用浓度呈正比,至MOI 300∶1时ROS荧光最强.不同浓度的N-乙酰半胱氨酸(N-acety-L-cysteine,NAC)均可抑制H.pylori感染所引起的ROS的生成.H.pylori可导致DNA损伤,NAC预处理后,GES-1细胞的尾长、彗星长、尾矩及Olive尾矩数值均较H.pylori组有明显下降趋势.结论:H.pylori作用GES-1细胞后,可使ROS生成增多,损伤DNA.抑制ROS的生成可减轻H.pylori感染导致的DNA损伤. 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 ges-1细胞 活性氧 DNA损伤

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氯喹对正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞HGC-27凋亡的不同影响 被引量：1

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作者 曹丽 苏强 +3 位作者 张亚萍 张鑫艳 程凯 张晓延 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期810-814,共5页

目的:比较氯喹对正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞HGC-27凋亡的不同影响。方法:使用倒置显微镜观察CQ处理后这两种细胞形态学变化;采用DAPI核染色检测CQ对HGC-27细胞凋亡的作用;运用氯喹和雷帕霉素作用这两种细胞72 h后,用CCK-8检测这两... 目的:比较氯喹对正常胃上皮细胞GES-1和胃癌细胞HGC-27凋亡的不同影响。方法:使用倒置显微镜观察CQ处理后这两种细胞形态学变化;采用DAPI核染色检测CQ对HGC-27细胞凋亡的作用;运用氯喹和雷帕霉素作用这两种细胞72 h后,用CCK-8检测这两种药物对两种细胞的增殖活性;JC-1检测氯喹处理后细胞线粒体膜电位的变化;用免疫印迹法检测凋亡效应酶Caspase-3和底物PARP的改变。结果:10μmol/L的CQ作用于GES-1细胞和HGC-27细胞72 h后,在镜下可见,氯喹对GES-1细胞的形态无明显影响,却能使HGC-27细胞间隙增宽,悬浮细胞数目逐渐增多,细胞密度明显减少,细胞逐渐萎缩变圆,胞质减少,失去正常细胞形态;通过DAPI核染色发现,氯喹作用两种细胞72 h后,GES-1细胞核浅染、核大小形态均未发生变化,HGC-27细胞核呈浓缩致密的固缩形态或颗粒状荧光;CQ和RAP作用于正常胃上皮细胞和胃癌细胞HGC-27 72 h后,CCK-8结果显示相对于正常胃上皮GES-1细胞而言,氯喹能抑制胃癌HGC-27细胞的增殖活性;JC-1结果显示氯喹作用于HGC-27细胞后发生了红色荧光向绿色荧光的转变;Western blot显示胃癌细胞HGC-27的凋亡蛋白Caspase-3和PARP表达显著减少。结论:相比正常胃上皮细胞GES-1,CQ可以明显抑制人胃癌细胞HGC-27细胞活力并诱导凋亡。 展开更多

关键词 氯喹 凋亡 ges-1细胞 HGC-27细胞

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