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GAPB基因原核表达载体的构建
1
作者
田霞
代其林
+4 位作者
龚元亚
孙英坤
谢琳
杨娟
王劲
《南方农业》
2011年第3期1-4,共4页
以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功...
以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
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关键词
gapb
大肠杆菌BL21
PET28a(+)
融合蛋白
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职称材料
题名
GAPB基因原核表达载体的构建
1
作者
田霞
代其林
龚元亚
孙英坤
谢琳
杨娟
王劲
机构
西南科技大学植物生物技术研究中心
中国农业科学院生物技术研究所
出处
《南方农业》
2011年第3期1-4,共4页
基金
国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08009-091B)
国家自然科学基金(30871555)
+1 种基金
教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-08-0940)
四川省教育厅科技项目(09ZA034)
文摘
以拟南芥cDNA为模板,用PCR扩增出GAPB的基因全长,然后将GAPB基因片段连接到PET28a(+)载体上,构建重组质粒并转化大肠杆菌DH5α,经菌落PCR和酶切鉴定筛选出阳性克隆,测序正确后,再将阳性克隆的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。结果表明:成功构建了原核表达载体PET28a(+)-GAPB,为后续的GAPB融合蛋白的表达以及纯化奠定了基础。
关键词
gapb
大肠杆菌BL21
PET28a(+)
融合蛋白
Keywords
gapb
E.coli BL21
PET28a(+)
The fusion protein
分类号
Q946 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
GAPB基因原核表达载体的构建
田霞
代其林
龚元亚
孙英坤
谢琳
杨娟
王劲
《南方农业》
2011
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参考文献
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