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miR-874-3p靶向GALNT4调控宫颈癌细胞增殖与凋亡的分子机制研究 被引量：2
1
作者 李娜 李焱 +2 位作者 高雪梅 朱一麟 贺漪(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第16期1983-1987,共5页
目的:研究miR-874-3p是否通过靶向GALNT4影响宫颈癌细胞增殖和凋亡。方法:qRT-PCR和Western blot检测宫颈癌细胞系miR-874-3p、GALNT4 mRNA和GALNT4蛋白表达。HeLa细胞转染miR-874-3p或si-GALNT4,Western blot检测GALNT4、细胞周期蛋白D... 目的:研究miR-874-3p是否通过靶向GALNT4影响宫颈癌细胞增殖和凋亡。方法:qRT-PCR和Western blot检测宫颈癌细胞系miR-874-3p、GALNT4 mRNA和GALNT4蛋白表达。HeLa细胞转染miR-874-3p或si-GALNT4,Western blot检测GALNT4、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、Cleaved-Caspase-3、β-catenin表达,CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡。starBase预测与双荧光素酶活性检测分析miR-874-3p和GALNT4的靶向关系。共转染miR-874-3p和pcDNA-GALNT4,观察过表达GALNT4对miR-874-3p过表达诱导的HeLa细胞增殖和凋亡的影响。结果:与宫颈上皮永生化细胞H8相比,宫颈癌SiHa、HeLa、Caski细胞miR-874-3p表达降低,GALNT4 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)。过表达miR-874-3p降低HeLa细胞CyclinD1、β-catenin蛋白表达及细胞增殖率,提高Cleaved-Caspase-3蛋白表达和凋亡率(P<0.05)。抑制GALNT4表达降低HeLa细胞CyclinD1蛋白表达及增殖率,提高Cleaved-Caspase-3蛋白表达和细胞凋亡率(P<0.05)。miR-874-3p靶向调控GALNT4表达。过表达GALNT4可部分反转miR-874-3p过表达对宫颈癌HeLa细胞增殖、CyclinD1、β-catenin蛋白表达的抑制作用,及对细胞凋亡、Cleaved-Caspase-3蛋白表达的促进作用。结论:miR-874-3p通过靶基因GALNT4调控Wnt/β-catenin信号通路,抑制宫颈癌细胞增殖,并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 miR-874-3p galnt4 增殖 凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路
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miR-519a-3p通过靶向GALNT4基因调控肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的分子机制 被引量：1
2
作者 梁青松 贾军 胡欣 《河北医药》 CAS 2022年第14期2090-2095,共6页
目的探讨miR-519a-3p对肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。方法培养正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H_(2)170和PNCI-H1975,RT-qPCR检测细胞中miR-519a-3p和多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)mRNA表达水... 目的探讨miR-519a-3p对肺癌细胞迁移、侵袭和凋亡的影响及分子机制。方法培养正常肺上皮细胞BEAS-2B及肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H_(2)170和PNCI-H1975,RT-qPCR检测细胞中miR-519a-3p和多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)mRNA表达水平,Western Blot法检测GALNT4蛋白表达水平。以NCI-H1299细胞为研究对象,分别构建高表达miR-519a-3p或低表达GALNT4的NCI-H1299细胞,Transwell检测细胞迁移和侵袭,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western Blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、活化的半胱天冬酶-3(Cleaved-caspase-3)、磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-519a-3p与GALNT4调控关系。结果肺癌细胞系NCI-H1299、NCI-H_(2)170和PNCI-H1975中miR-519a-3p的表达显著低于肺上皮细胞BEAS-2B(P<0.05),而GALNT4 mRNA和蛋白的表达显著高于BEAS-2B细胞(P<0.05)。高表达miR-519a-3p或低表达GALNT4降低了NCI-H1299细胞迁移和侵袭数及MMP-2、MMP-9蛋白表达(P<0.05),而提高了细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达(P<0.05)。miR-519a-3p靶向负调控GALNT4表达。高表达miR-519a-3p后,NCI-H1299细胞中p-PI3K和p-AKT蛋白表达显著降低(P<0.05)。与仅高表达miR-519a-3的NCI-H1299比较,同时高表达miR-519a-3p和GALNT4的NCI-H1299细胞迁移和侵袭数及MMP-2、MMP-9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达升高(P<0.05),而凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白表达降低(P<0.05)。结论miR-519a-3p在肺癌细胞系中呈低表达,高表达miR-519a-3p可能通过靶向抑制GALNT4表达及PI3K/AKT信号通路的激活减弱肺癌细胞的迁移和侵袭性,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺癌 miR-519a-3p galnt4 细胞迁移 侵袭 凋亡
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miR-4698介导GALNT4表达对肝癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：1
3
作者 江忍 张茂娜 +2 位作者 张弘 江悦 张军 《中国医师杂志》 CAS 2021年第4期558-562,共5页
目的检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法... 目的检测miR-4698在肝癌组织及细胞系中的相对表达,分析其对肝癌细胞增殖和迁移的影响及分子作用机制。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肝癌组织和肝癌细胞系中miR-4698的相对表达。在表达最低的肝癌细胞系中,采用脂质体转染法分别转染miR-4698模拟物和对照模拟物,命名为实验组和对照组。qRT-PCR检测转染效率。细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell迁移实验分别检测过表达miR-4698对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因实验预测并验证miR-4698与靶基因的结合。qRT-PCR和Western blot分别检测靶基因在mRNA水平和蛋白水平的相对表达。结果与癌旁组织相比,miR-4698在肝癌组织的表达明显降低(P<0.01)。与正常肝细胞系相比,miR-4698在肝癌细胞系的表达明显降低(P<0.05),在Huh7细胞的表达最低(P<0.01)。转染后,与对照组相比,实验组Huh7细胞中miR-4698的表达明显增加(P<0.01)。过表达miR-4698可抑制肝癌Huh7细胞的增殖能力(P<0.05)和迁移能力(P<0.05)。生物信息学显示miR-4698的靶基因是多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4),双荧光素酶报告基因证实miR-4698可互补结合GALNT4(P<0.01)。qRT-PCR结果显示,过表达miR-4698可抑制GALNT4基因的表达(P<0.01)。Western blot实验显示,miR-4698过表达后,Huh7细胞中GALNT4蛋白表达降低,细胞增殖相关蛋白Cyclin B和CDK1表达降低,细胞转移相关蛋白N-cadherin和ZEB-2表达降低。结论miR-4698在肝癌组织和细胞系中表达明显下降,过表达miR-4698可通过抑制GALNT4基因的表达,降低肝癌Huh7细胞的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 微RNAS 多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶4 细胞增殖 细胞迁移分析
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