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一株与儿童腹泻相关的跨多种属的基因重配G3P[3]型轮状病毒 被引量:7
1
作者 董慧瑾 钱渊 +3 位作者 农艺 张又 莫兆军 李荣成 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期129-140,共12页
G3P[3]型别多见于猫/狗A组轮状病毒(Group A rotavirus,RVA)。本研究前期工作中从广西农村一名腹泻儿童粪便标本中检测到1例在人的感染中少见的G3P[3]型RVA(命名M2-102),但经初步基因分析提示其VP7和VP4基因均同猫/狗G3P[3]RVAs进化距... G3P[3]型别多见于猫/狗A组轮状病毒(Group A rotavirus,RVA)。本研究前期工作中从广西农村一名腹泻儿童粪便标本中检测到1例在人的感染中少见的G3P[3]型RVA(命名M2-102),但经初步基因分析提示其VP7和VP4基因均同猫/狗G3P[3]RVAs进化距离远。为了解M2-102的种属来源,本研究对其全基因组11条基因进行了RT-PCR扩增、测序和序列分析。使用RotaC分型工具对所获得的M2-102全基因组基因序列进行分型。结果显示RVA/Human-wt/CHN/M2-102/2014/G3P[3]具有G3-P[3]-I3-R3-C3-M3-A9-N3-T3-E3-H6基因组型。序列分析进一步显示M2-102基因组中有5条基因(VP7、VP1、VP2、NSP2和NSP3)同云南蝙蝠MYAS33株亲缘关系近,处于相同的进化树支;另有5条基因(VP4、VP3、NSP1、NSP4和NSP5)同猿猴RRV株进化距离近,位于相同的进化树支;仅有1条基因VP6同人AU-1样RVAs处在相同进化树支,并具有较高核苷酸同源性。推测M2-102是一例由人AU-1样病毒同蝙蝠株MYAS33及猿猴株RRV类似病毒经基因重配而产生的多种属来源的重配毒株。 展开更多
关键词 人轮状病毒 g3p[3] 基因组 基因重配
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中国罕见A组轮状病毒DS-1样G3P[8]的全基因组分子特征分析
2
作者 熊光萍 魏宇航 +6 位作者 彭蕊 范佳欣 唐晓苹 黄枝妙 董梦洁 车如意 李丹地 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期29-36,共8页
目的对2021年采集于我国福建的A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)G3P[8]毒株FJ21351116进行全基因组分子特征分析。方法使用高灵敏度A组轮状病毒全基因组测序方法对FJ21351116进行全基因组测序。用MEGA11.0、Geneious9.0.2和DNASTAR... 目的对2021年采集于我国福建的A组轮状病毒(group A rotavirus,RVA)G3P[8]毒株FJ21351116进行全基因组分子特征分析。方法使用高灵敏度A组轮状病毒全基因组测序方法对FJ21351116进行全基因组测序。用MEGA11.0、Geneious9.0.2和DNASTAR软件通过核酸序列分析评估病毒的基因组特征。使用BioEdit v.7.0.9.0和PyMOL v.2.5.2分析VP7和VP4(VP8*)的中和表位。结果我国福建RVA毒株FJ21351116基因型为G3-P[8]-I2-R2-C2-M2-A2-N2-T2-E2-H2,系统进化分析显示,FJ21351116株的VP7、VP4、VP3、NSP2-NSP5基因与近几年日本检测到的马样DS-1样G3P[8]基因存在亲缘关系。而VP6、VP1、VP2、NSP1基因与大部分国家G2P[4]的相应基因亲缘关系近,特别是新加坡,表明该毒株是马样G3P[8]毒株与G2P[4]毒株共感染过程中通过基因重配形成的。FJ21351116的VP7/VP4基因与Rotarix和RotaTeq疫苗的进化分析表明,VP7和VP4(VP8*)中和抗原表位与疫苗氨基酸位点均存在多个突变。推测Rotarix和RotaTeq疫苗针对马样DS-1样G3P[8]RVA的保护效果不佳,且与Rotarix的中和抗原表位氨基酸差异高于RotaTeq。结论本研究发现一例中国罕见的DS-1样G3P[8]型RVA毒株,且疫苗株可能对其保护效果差,强调了持续监测RVA毒株及研发高效覆盖面全的RVA疫苗的重要性。 展开更多
关键词 A组轮状病毒 全基因组 DS-1-like g3p[8] 分子特征
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一株蝙蝠轮状病毒的分离和基因组分析
3
作者 柴萨萨 马晓华 +5 位作者 赵静 宋敬东 李金松 李利利 裴银辉 段招军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期1-9,共9页
目的了解云南地区蝙蝠轮状病毒的基因组特征和进化关系,并分离病毒。方法采集84只云南地区蝙蝠,经解剖后收集肠道组织,混合为3个样本库后进行高通量测序。病毒全基因组扩增采用RT-PCR和RACE方法,使用RVA自动分型工具进行分型。采用MA10... 目的了解云南地区蝙蝠轮状病毒的基因组特征和进化关系,并分离病毒。方法采集84只云南地区蝙蝠,经解剖后收集肠道组织,混合为3个样本库后进行高通量测序。病毒全基因组扩增采用RT-PCR和RACE方法,使用RVA自动分型工具进行分型。采用MA104细胞分离培养病毒株。结果高通量测序结果显示1个样本库中存在A组轮状病毒相关的序列。随后成功分离该蝙蝠轮状病毒并扩增获得全长或接近全长的11条基因组序列。基因组分型结果显示该病毒株属于G3-P[3]-I8-R3-C3-M3-A9-N3-T3-E3-H6基因型,命名为CHYNC82。序列分析表明,CHYNC82的4条基因片段(VP1、NSP2、NSP3和NSP4)与蝙蝠病毒株MYAS33和MSLH14亲缘关系近且进化树聚为一支;VP2与人09US7118株和猿猴TUCH株进化距离最近,处于同一进化树枝;VP6和NSP1与已知病毒同源性较低,但与蝙蝠和人来源轮状病毒具有共同进化起源;而剩余4条基因片段(VP7、VP4、VP3和NSP5)与人类病毒株包括CMH222株和MS2015-1-0001株具有最高同源性,且处于同一进化树枝。结论推测CHYNC82是经人、猿猴和蝙蝠来源的病毒株跨种属传播产生的重配RVA株,有机会性跨种传播感染人类的可能。 展开更多
关键词 蝙蝠 轮状病毒 g3p[3] 基因重配
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Enhanced production of seed oil with improved fatty acid composition by overexpressing NAD^(+)-dependent glycerol-3-phosphate dehydrogenase in soybean 被引量:4
4
作者 Ying Zhao Pan Cao +18 位作者 Yifan Cui Dongxu Liu Jiapeng Li Yabin Zhao Siqi Yang Bo Zhang Runnan Zhou Minghao Sun Xuetian Guo Mingliang Yang Dawei Xin Zhanguo Zhang Xin Li Chen Lv Chunyan Liu Zhaoming Qi Jingyu Xu Xiaoxia Wu Qingshan Chen 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2021年第6期1036-1053,共18页
There is growing interest in expanding the production of soybean oils(mainly triacylglycerol, or TAG) to meet rising feed demand and address global energy concerns. We report that a plastidlocalized glycerol-3-phospha... There is growing interest in expanding the production of soybean oils(mainly triacylglycerol, or TAG) to meet rising feed demand and address global energy concerns. We report that a plastidlocalized glycerol-3-phosphate dehydrogenase(GPDH), encoded by GmGPDHp1 gene, catalyzes the formation of glycerol-3-phosphate(G3 P), an obligate substrate required for TAG biosynthesis.Overexpression of GmGPDHp1 increases soybean seed oil content with high levels of unsaturated fatty acids(FAs), especially oleic acid(C18:1), without detectably affecting growth or seed protein content or seed weight. Based on the lipidomic analyses, we found that the increase in G3 P content led to an elevated diacylglycerol(DAG) pool, in which the Kennedy pathwayderived DAG was mostly increased, followed by PC-derived DAG, thereby promoting the synthesis of TAG containing relatively high proportion of C18:1. The increased G3 P levels induced several transcriptional alterations of genes involved in the glycerolipid pathways. In particular, genes encoding the enzymes responsible for de novo glycerolipid synthesis were largely upregulated in the transgenic lines, in-line with the identified biochemical phenotype. These results reveal a key role for GmGPDHp1-mediated G3 P metabolism in enhancing TAG synthesis and demonstrate a strategy to modify the FA compositions of soybean oils for improved nutrition and biofuel. 展开更多
关键词 gmgpDHp1 g3p production LIpIDOMICS oil accumulation SOYBEAN TRANSCRIpTOMICS
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甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的体液免疫影响 被引量:2
5
作者 金晓 李晓红 +2 位作者 贾森泉 胡凝珠 胡云章 《实验动物科学》 2018年第2期21-26,共6页
目的研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)... 目的研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中的特异性的anti-HAV IgG水平。结果在小鼠免疫之后的第4、8、12、16、20周单纯抗原组、铝佐剂组和4组不同剂量甘油-3-磷酸组均能检测到特异性抗HAV抗体,并且趋势为先升高后降低,且在免疫后的第8周最高;第4周和第8周的甘油-3-磷酸实验组的结果均高于单纯抗原组,且差异均具有统计学意义(P<0.05),并且第4周甘油-3-磷酸组抗体水平均超过铝佐剂组,并具有统计学意义(P<0.05),其中甘油-3-磷酸2 mg为最佳剂量组,其抗体水平在免疫后的第4、8、12、16、20周均高于单纯抗原组,且在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.064±0.07851),铝佐剂的也是在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.150±0.1382)。结论甘油-3-磷酸有免疫佐剂的作用,能够有效、迅速地增强HAV诱导的体液免疫应答,是一种潜在、安全有效的新型疫苗佐剂。 展开更多
关键词 甘油-3-磷酸 甲肝疫苗 铝佐剂 体液免疫
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人CD20胞外区与噬菌体pⅢ融合基因在E.coli中的可溶性表达 被引量:1
6
作者 张效云 孙志伟 +1 位作者 王双 俞炜源 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2004年第4期347-349,共3页
目的 :克隆人CD2 0胞外区基因 (cdw)和丝状噬菌体 (M13K0 7)G3蛋白N端结构域 (pⅢN1)基因 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD2 0胞外区基因和pⅢN1基因 ,然后将二者融合克隆入pTIG Trx表达载体 ... 目的 :克隆人CD2 0胞外区基因 (cdw)和丝状噬菌体 (M13K0 7)G3蛋白N端结构域 (pⅢN1)基因 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用逆转录PCR和PCR方法分别克隆CD2 0胞外区基因和pⅢN1基因 ,然后将二者融合克隆入pTIG Trx表达载体 ,在大肠杆菌中进行可溶性表达。结果 :可溶性表达产物占细菌可溶性蛋白的约2 5 % ,表达产物可被抗CD2 0分子的单克隆抗体识别。结论 :成功地表达并鉴定了人CD2 0胞外区蛋白 ,为利用噬菌体抗体库进行抗CD2 0抗体的筛选奠定了基础。 展开更多
关键词 CD20抗原 g3p 基因表达 噬菌体抗体库
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人CD20跨膜区与g3pN端融合基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
7
作者 张效云 孙志伟 +1 位作者 俞炜源 程建贞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期481-483,共3页
目的 :构建g3pN1 hCD2 0跨膜及胞外区基因表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用反转录PCR和PCR方法 ,分别从Daudi细胞和M13K0 7噬菌体中扩增hCD2 0基因和编码g3pN1蛋白N1端的基因 ,并重组到pTIG Trx表达载体中 ,在大... 目的 :构建g3pN1 hCD2 0跨膜及胞外区基因表达载体 ,并在大肠杆菌中进行高效融合表达。方法 :利用反转录PCR和PCR方法 ,分别从Daudi细胞和M13K0 7噬菌体中扩增hCD2 0基因和编码g3pN1蛋白N1端的基因 ,并重组到pTIG Trx表达载体中 ,在大肠杆菌中融合表达。结果 :表达产物可被抗CD2 0分子的单克隆抗体 (mAb)识别。结论 :成功地表达并鉴定了目的蛋白。 展开更多
关键词 CD20基因 DAUDI细胞 g3p 噬菌体抗体库
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杂交水稻开花结实期间叶片衰老 被引量:103
8
作者 段俊 梁承邺 黄毓文 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1997年第2期139-144,共6页
在杂交水稻开花期间,通过剪去穗部部分枝梗和叶片等处理,形成不同的库源比,叶片衰老的生理生化指标变化和结实率的测定表明,杂交水稻组合的库源矛盾大,叶片衰老快;但谷粒数与旗叶面积比不一定高,降低库源比,能明显减缓杂交水稻... 在杂交水稻开花期间,通过剪去穗部部分枝梗和叶片等处理,形成不同的库源比,叶片衰老的生理生化指标变化和结实率的测定表明,杂交水稻组合的库源矛盾大,叶片衰老快;但谷粒数与旗叶面积比不一定高,降低库源比,能明显减缓杂交水稻叶片中蛋白质、叶绿素含量及倒3、4、5片叶叶绿素含量的平均值与旗叶叶绿素含量的比率的下降和丙二醇含量的升高。这些都说明杂交水稻叶片功能早衰与其库源矛盾较大有关。 展开更多
关键词 水稻 杂交水稻 叶片 衰老 开花 结实期
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重组G3P[13]型A群猪轮状病毒全基因组测序分析 被引量:3
9
作者 王一丹 向华 +4 位作者 张斌 向萌 任玉鹏 邱文英 付利芝 《动物医学进展》 北大核心 2022年第4期1-7,共7页
为了解引发四川某猪场腹泻疫情的猪轮状病毒(PoRV)基因组特征和遗传变异规律,采用RT-PCR分别扩增PoRV 11个基因节段,并克隆测序,通过生物信息学分析软件研究病毒基因组特征、变异性及遗传进化规律。结果显示,SCMY-1株基因合型为G3-P[13]... 为了解引发四川某猪场腹泻疫情的猪轮状病毒(PoRV)基因组特征和遗传变异规律,采用RT-PCR分别扩增PoRV 11个基因节段,并克隆测序,通过生物信息学分析软件研究病毒基因组特征、变异性及遗传进化规律。结果显示,SCMY-1株基因合型为G3-P[13]-I5-R1-C1-M1-A8-N1-T1-E1-H1,即G3P[13]型毒株。该毒株VP2、NSP2和NSP4基因与人源毒株同源性最高,分别与3株人源轮状病毒RVA/Human-wt/LKA/R1207/2009株、RVA/Human-wt/ZAF/UFS-NGS-MRC-DPRU2291/2009和RVA/Human/CU331-NR/08株单独聚为一小支,推测这可能增加SCMY-1株跨种传播到人的风险。此外,SCMY-1株VP4基因与美国3个猪源毒株同处一个小分支;VP7基因与RVA/Pig/China/LNCY/2016株遗传进化距离最近。上述结果提示,PoRV可能在国际和国内生猪贸易过程中被广泛传播。与NCBI上已登录毒株相比,SCMY-1株VP4、VP7蛋白氨基酸分别存在13个和2个独有氨基酸位点的突变,可能对VP4和VP7两个主要抗原毒力及抗原性产生影响。重组分析显示,SCMY-1株VP3基因由两个猪源亲本株重组而来,推测这可能增强病毒毒力和宿主适应性。研究结果丰富了PoRV基因组学和分子流行病学相关研究资料,为PoRV预防控制提供理论参考,也为深入研究PoRV跨物种传播的分子基础提供科学依据。 展开更多
关键词 型A群猪轮状病毒 基因组 遗传变异 基因重组
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索尼25、29英寸大屏幕彩电保护电路
10
作者 苏伟 《无线电与电视》 2004年第3期52-54,共3页
索尼25、29英寸大屏幕彩电内部电路十分相似,其中有齐全的功能保护电路,在检修中可起到举一反三的作用。这种机型出现大故障的机会不太多,而保护电路却易出故障,下面举4例加以说明。
关键词 索尼公司 大屏幕彩电 保护电路 KV—F25MF1 g3p机芯保护电路 故障维修
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氯化胆碱对冬小麦增产的光合作用机理 被引量:1
11
作者 冯福生 马力耕 +1 位作者 傅娟 葛东侠 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1991年第S1期1-8,共8页
氯化胆碱(choline chloride)促进冬小麦(Triticum aestivum)离休叶绿体的希尔反应及ATP酶的活性,同时还促进RuBP羧化酶(核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶)(E.C.4.1.1.39)和G-3-P脱氢酶(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)(E.C.1.2.1.13)的酶活性.用真空渗入... 氯化胆碱(choline chloride)促进冬小麦(Triticum aestivum)离休叶绿体的希尔反应及ATP酶的活性,同时还促进RuBP羧化酶(核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶)(E.C.4.1.1.39)和G-3-P脱氢酶(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)(E.C.1.2.1.13)的酶活性.用真空渗入法将氯化胆碱溶液浸入叶子细胞质中,ATP酶活性比对照增高0.9倍;RuBP羧化酶活性比对照增高0.7倍多.在小麦不同生育期喷施浓度适当的氯化胆碱溶液,RuBP羧化酶和G-3-P脱氢酶均比对照的增高,说明氯化胆碱对上述三种酶均有增加酶活性的作用;在较低浓度的氯化胆碱影响下,酶活性较高;高浓度的氯化胆碱对酶活性趋于抑制;同时,喷施氯化胆碱叶片蛋白质含量和叶绿含量也均比对照增高,并且这些变化与处理后光合速率的增高相一致.因而证明了氯化胆碱处理使小麦增产是因为促进了光合作用的光反应和暗反应.万亩小麦喷施200ppm氯化胆碱试验,平均每亩增产25kg,比对照增高10.1%,共增产小麦373 120kg,经济效益22.4万元. 展开更多
关键词 氯化胆碱 光合速率 希尔反应 ATp RUBp羧化酶 冬小麦
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切口漏缝致产后大出血1例
12
作者 张鸿艳 邵元平 《中国现代医药杂志》 2005年第2期7-7,共1页
关键词 产后大出血 切口漏 子宫下段剖宫产术 入院诊断 宫内妊娠 头盆不称 疤痕子宫 剖腹产史 子宫前壁 广泛粘连 子宫切口 常规缝合 血压正常 阴道流血 子宫收缩 面色苍白 恶心呕吐 患者 30岁 胎方位 g3p 第一胎 入院后 左侧壁
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子宫浆膜下囊肿1例
13
作者 秦峰 《现代医药卫生》 2009年第1期77-77,共1页
1病例介绍 患者,51岁,G3P.,因不规则阴道出血1月,B超发现盆腔包块1月,于2008年6月26日入院。既往无肝炎、结核病史,无外伤手术史。入院时查体:T37.0℃,P80次,分,R20次,分,BP135/85mmHg.心肺无异常。腹软,无压痛及反跳... 1病例介绍 患者,51岁,G3P.,因不规则阴道出血1月,B超发现盆腔包块1月,于2008年6月26日入院。既往无肝炎、结核病史,无外伤手术史。入院时查体:T37.0℃,P80次,分,R20次,分,BP135/85mmHg.心肺无异常。腹软,无压痛及反跳痛。妇科检查:外阴已婚式,会阴一度陈旧性裂伤,阴道畅,前后壁稍膨出,阴道右侧穹窿及后穹窿变浅,宫颈肥大,轻度糜烂, 展开更多
关键词 子宫浆膜下囊肿 不规则阴道出血 陈旧性裂伤 盆腔包块 妇科检查 宫颈肥大 后穹窿 g3p
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miR-1273g-3p调控TGF-β/Smad4信号通路影响结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭
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作者 夏添明 李朝辉 +4 位作者 王云帅 王皇建 刘大威 武会斌 韩保卫 《实用肿瘤杂志》 CAS 2024年第3期219-227,共9页
目的 探讨miR-1273g-3p调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/mothers against decapentaplegic homolog 4(Smad4)信号通路对结直肠癌细胞生物学功能的影响。方法 采用人结肠上皮细胞株NCM460为对照,对人结直肠癌... 目的 探讨miR-1273g-3p调控转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)/mothers against decapentaplegic homolog 4(Smad4)信号通路对结直肠癌细胞生物学功能的影响。方法 采用人结肠上皮细胞株NCM460为对照,对人结直肠癌细胞株HCT116和SW480采用qRT-PCR检测细胞的miR-1273g-3p表达。采用Western blot检测TGF-β和Smad4蛋白的表达。将miR-1273g-3p抑制剂转染至HCT116和SW480细胞中(miR-1273g-3p抑制剂组),并设立转染抑制剂对照剂的空载对照(抑制剂对照组)。采用qRT-PCR验证转染效果。将转染后的HCT116细胞皮下注射至BALB/c裸鼠体内。采用qRT-PCR和Western blot检测转染后细胞中TGF-β和Smad4 mRNA和蛋白的表达。采用细胞增殖和细胞毒性分析(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、划痕实验和transwell小室侵袭实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过BiBiServ及TargetScan网站预测mi R-1273g-3p与TGF-β的相关性,并用双荧光素酶报告基因实验验证miR-1273g-3p与TGF-β的结合情况。结果 与人结肠上皮细胞NCM460比较,人结直肠癌细胞HCT116和SW480中miR-1273g-3p、TGF-β蛋白和Smad4蛋白均高表达(均P<0.01)。瞬时转染48 h后,与抑制剂对照组比较,miR-1273g-3p抑制剂组miR-1273g-3p表达降低(P<0.01),TGF-β和Smad4的mRNA和蛋白表达均减少(均P<0.01),细胞的增殖、迁移和侵袭能力均降低(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果表明,miR-1273g-3p可以靶向结合TGF-β;SW480细胞中,miR-1273g-3p抑制野生型TGF-β-3’ untranslated region(UTR)质粒转染的荧光素酶活性(P<0.01),而对突变型TGF-β-3’UTR质粒转染的荧光素酶活性无影响(P>0.05)。结论 抑制miR-1273g-3p的表达可抑制结直肠癌细胞HCT116和SW480的增殖、迁移和侵袭能力。此作用可能与TGF-β/Smad4信号通路有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 miR-1273g-3p TgF-β/Smad4信号通路 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究 被引量:5
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作者 张学武 刘承宪 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第3期290-295,共6页
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(E... 利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(EC1.1.1.8),得到比活为12.6U/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4%~20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDSPAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮(DHAP)还原的最适pH值为7.5,催化G3P脱氢的最适pH值为10。该酶对4个底物还原型辅酶Ⅰ(NADH),二磷酸吡啶核苷酸(DHAP),辅酶Ⅰ(NAD),G3P的表观Km值分别为63μmol/L,272μmol/L,1.53mmol/L,6.52mmol/L。该酶在保存过程中易失活。NADH能降低酶失活的速度,而NAD则不然。低浓度NaCl对酶略有保护作用,但高浓度NaCl加快酶的失活,且浓度越高效应越明显。 展开更多
关键词 杜氏藻 纯化 动力学特性 g-3-p脱氢酶
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SIK1和miR-1273g-3p在结直肠癌细胞SW480中的表达及临床意义
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作者 刘大威 夏添明 +3 位作者 武会斌 王云帅 孙生安 李朝辉 《淮海医药》 CAS 2023年第3期239-243,248,共6页
目的:探讨SIK1与miR-1273g-3p在结直肠癌细胞SW480中表达的相关性,分析其与临床预后的关系。方法:分别通过qRT-PCR和Western blot方法检测miR-1273g-3p和SIK1在人结肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞SW480中的表达情况,将miR-1273g-3p抑... 目的:探讨SIK1与miR-1273g-3p在结直肠癌细胞SW480中表达的相关性,分析其与临床预后的关系。方法:分别通过qRT-PCR和Western blot方法检测miR-1273g-3p和SIK1在人结肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞SW480中的表达情况,将miR-1273g-3p抑制剂转染SW480(抑制剂组),并设立空载对照(抑制剂对照组)。采用免疫印迹实验验证SIK1与miR-1273g-3p的相关性。采用免疫组化法检测SIK1在结直肠癌组织及癌旁组织中的表达水平,分析SIK1与结直肠癌(CRC)患者临床病理特征间的关系,采用Kaplan-Meier曲线分析生存预后,采用Cox比例风险回归模型进行单因素及多因素分析。结果:与NCM460细胞相比,SW480细胞中miR-1273g-3p呈高表达(P<0.01),SIK1呈低表达(P<0.0001)。与抑制剂对照组相比,抑制剂组中miR-1273g-3p的表达降低(P<0.01);抑制miR-1273g-3p的表达后,SIK1的表达升高,差异有统计学意义(P<0.0001)。免疫组化结果显示,SIK1在结直肠癌组织中的表达水平低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.026)。SIK1的表达与肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期密切相关(P<0.05);SIK1阳性和阴性表达患者5年生存率分别为53.7%和33.1%,差异有统计学意义(P=0.021)。SIK1表达情况(P=0.027)、肿瘤大小(P=0.019)、淋巴结转移(P<0.001)、TNM分期(P<0.001)与CRC患者的OS存在相关性;SIK1的低表达(P=0.030)和TNM的高分期(P<0.001)是影响OS的独立危险因素。结论:miR-1273g-3p可能通过调控SIK1的表达来促进结直肠癌的发生发展,可为CRC的诊治提供参考。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 SIK1 miR-1273g-3p
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微小RNA Let-7g-3p在直肠癌中的表达水平及临床意义
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作者 罗庆元 闫军 +2 位作者 周高晋 孙国徽 代琴祺 《临床和实验医学杂志》 2023年第15期1602-1605,共4页
目的评估微小RNA Let-7g-3p在直肠癌中的表达水平及临床意义。方法回顾性收取新疆医科大学第七附属医院34例直肠癌患者的肿瘤及邻近非癌组织样本,通过RT-qPCR检测组织中Let-7g-3p的表达水平。再从癌症基因图谱(TCGA)数据库中检索直肠癌... 目的评估微小RNA Let-7g-3p在直肠癌中的表达水平及临床意义。方法回顾性收取新疆医科大学第七附属医院34例直肠癌患者的肿瘤及邻近非癌组织样本,通过RT-qPCR检测组织中Let-7g-3p的表达水平。再从癌症基因图谱(TCGA)数据库中检索直肠癌患者的注册数据,收集人口统计信息,例如年龄、性别和癌症特征。用Kaplan-Meier法分析总生存率,用Cox比例风险回归模型分析独立预后。结果Let-7g-3p在直肠癌组织中表达降低,且与患者的临床病理学特征相关联。此外,低Let-7g-3p表达与不良预后和直肠癌的侵袭性进展有关。单因素分析结果显示,Let-7g-3p表达水平是直肠癌患者总生存率的重要预后标志物:Let-7g-3p(HR=1.782;95%CI:1.173~2.707;P=0.007);TNM分期(HR=0.305;95%CI:0.200~0.465;P<0.001);转移(HR=0.093;95%CI:0.048~0.180;P<0.001)。多变量分析表明,低表达Let-7g-3p是直肠癌中重要的独立预后标志物:Let-7g-3p(HR=0.518;95%CI:0.339~0.792;P=0.012);TNM分期(HR=2.199;95%CI:1.323~3.656;P=0.002),转移(HR=2.886;95%CI:1.739~4.790;P<0.001)。结论下调Let-7g-3p表达与直肠癌的进展有关,可能作为直肠癌的独立预后标志物。 展开更多
关键词 直肠癌 微小RNA Let-7g-3p 预后
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MiR-let-7g-3p靶向HMGB2调控膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和和凋亡 被引量:2
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作者 邹震海 程琪 +5 位作者 李中 高五岳 孙巍 刘贝贝 郭园园 刘建民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1335-1343,共9页
目的探讨MiR-let-7g-3p靶向HMGB2对膀胱癌细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法通过qRT-PCR检测膀胱癌组织和癌旁组织以及正常尿路上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞(T24、5637和EJ)中let-7g-3p的表达水平;通过转染过表达或敲低T24细胞le... 目的探讨MiR-let-7g-3p靶向HMGB2对膀胱癌细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法通过qRT-PCR检测膀胱癌组织和癌旁组织以及正常尿路上皮细胞SV-HUC-1和膀胱癌细胞(T24、5637和EJ)中let-7g-3p的表达水平;通过转染过表达或敲低T24细胞let-7g-3p表达,检测细胞增殖、迁移和侵袭、和凋亡等变化;对过表达let-7g-3p的细胞进行转录组测序,结合生物信息学分析,通过双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和Western-blot分析let-7g-3p靶向负性调控HMGB2基因;qRT-PCR检测正常尿路上细胞和膀胱癌细胞(T24、5637和EJ)中HMGB2的表达水平,并且在敲低HMGB2的细胞株中,敲低let-7g-3p,检测细胞生物学行为改变。结果qRT-qPCR证实let-7g-3p在膀胱癌组织和细胞表达明显下调(P<0.01);过表达let-7g-3p可抑制细胞增殖、迁移和侵袭,促进细胞凋亡(P<0.01);相反,敲减let-7g-3p表达可促进细胞增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡(P<0.01)。生物信息学和转录组测序结果显示,HMGB2是let-7g-3p作用于膀胱癌细胞的关键分子;双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和Western blot显示,HMGB2受let-7g-3p的负性调控;HMGB2膀胱癌细胞中表达水平均明显上调(P<0.01),敲低HMGB2可部分逆转敲低let-7g-3p对膀胱癌细胞生长的促进作用。结论MiRNA-let-7g-3p通过靶向负性调控HMGB2基因抑制膀胱癌细胞的生物行为。 展开更多
关键词 let-7g-3p HMgB2基因 膀胱肿瘤
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微小RNA-1273g-3p对人结直肠癌HCT116和SW480细胞增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 李朝辉 刘大威 +2 位作者 夏添明 孙生安 王云帅 《四川生理科学杂志》 2021年第8期1285-1288,共4页
目的:探讨微小RNA(MicroRNA,miR)-1273g-3p对结直肠癌细胞增殖和迁移的调控作用.方法:将miR-1273g-3p模拟物分别转染人结肠癌细胞(Human colon cancer cell,HCT116)和人结肠腺癌细胞(Human colon adenocarcinoma,SW480)细胞株,通过聚合... 目的:探讨微小RNA(MicroRNA,miR)-1273g-3p对结直肠癌细胞增殖和迁移的调控作用.方法:将miR-1273g-3p模拟物分别转染人结肠癌细胞(Human colon cancer cell,HCT116)和人结肠腺癌细胞(Human colon adenocarcinoma,SW480)细胞株,通过聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR)测定miR1273g-3p的表达情况;四唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法检测miR-1273g-3p对细胞增殖的作用;Transwell实验检测细胞的迁移能力.结果:转染miR-1273g-3p模拟物后,结直肠癌HCT116和SW480细胞miR-1273g-3p相对表达量明显上调;MTT和Transell实验结果显示,过表达miR-1273g-3p能明显促进HCT116和SW480细胞的增殖和迁移(P<0.01).结论:miR-1273g-3p具有促进结直肠癌HCT116和SW480细胞株增殖和迁移的作用. 展开更多
关键词 miR-1273g-3p 结直肠癌 增殖 迁移
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血清miR-1273g-3p在慢性丙型肝炎肝纤维化诊疗中的作用研究
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作者 贾英杰 张晓博 +2 位作者 张新元 杨红霞 郭争荣 《河北中医》 2022年第10期1624-1628,共5页
目的探讨血清微小RNA(miR)-1273g-3p在慢性丙型肝炎(CHC)肝纤维化诊疗中的作用。方法选取2018年1月至2020年1月就诊于河北省石家庄市人民医院消化内科的CHC患者60例作为研究组,另选取同期健康体检人员60例作为健康对照组,其中研究组患... 目的探讨血清微小RNA(miR)-1273g-3p在慢性丙型肝炎(CHC)肝纤维化诊疗中的作用。方法选取2018年1月至2020年1月就诊于河北省石家庄市人民医院消化内科的CHC患者60例作为研究组,另选取同期健康体检人员60例作为健康对照组,其中研究组患者予利巴韦林片联合强肝胶囊治疗,共治疗24周。研究组患者治疗前首先通过肝穿刺活检术进行肝组织病理学检查,对肝纤维化分期情况进行判断,分析CHC肝纤维化与血清miR-1273g-3p的相关性,并比较2组治疗前后血清miR-1273g-3p相对表达量变化情况。结果研究组CHC肝纤维分期F 0期14例,F 1~2期21例,F 3~4期25例。与健康对照组比较,研究组CHC肝纤维化F 1~2期及F 3~4期患者miR-1273g-3p相对表达量均升高(P<0.05),F 0期患者与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),其中研究组患者血清miR-1273g-3p相对表达量随着肝纤维化分期严重程度的增加而明显升高(P<0.05),经Spearman秩相关性分析显示两者呈正相关(r=0.656,P<0.05)。与本组治疗前比较,研究组CHC肝纤维化F 1~2期及F 3~4期患者治疗后血清miR-1273g-3p相对表达量均降低(P<0.05),研究组CHC肝纤维化F 1~2期及F 3~4期患者治疗后血清miR-1273g-3p相对表达量均高于健康对照组(P<0.05);研究组CHC肝纤维化F 0期患者和健康对照组治疗前后血清miR-1273g-3p相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05),且2组组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论血清miR-1273g-3p可作为评估CHC肝纤维化程度的重要指标,对CHC肝纤维化的分期诊断及预后评估均有指导意义。 展开更多
关键词 肝纤维化 慢性丙型肝炎 循环微RNA miR-1273g-3p
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